球孢白僵菌优良菌株选育研究

通过对自然感染白僵病的松毛虫僵虫分离纯化,选育出39个原菌株,进行紫外诱变后,筛选出15个优势菌株。室内外毒力测定结果,普白(PB)3和普白(PB)9 2个菌株毒力显著,室内测试施药后15d的感病率分别为89.2%和88.7%;林间防后15 d普白3和普白9的致死率分别为84.1%和81.4%。     

我国高毒力白僵菌菌株选育的研究进展

综述了我国近15年来白僵菌菌株选育的研究进展,包括利用自然筛选法、人工诱变方法、遗传转化法及基因克隆法获得优良菌株等等,指出了高毒力白僵菌菌株选育过程中存在原生质体遗传转化存在转化率低、选育的菌株经过多次继代培养后会出现退化等问题,并提出相应的解决方法。     

分离自八角叶甲的白僵菌菌株鉴定及优良菌株筛选

为获得对八角叶甲（Oides duporti）具有高致病力的白僵菌（Beauveria spp.）菌株,为利用白僵菌防治八角叶甲提供理论依据,采用组织分离法从感病的八角叶甲幼虫体内分离获得5株白僵菌菌株,测定其菌落直径、产孢量和孢子萌发率,采用浸虫法测定5个菌株对八角叶甲的毒力,并结合形态学与分子生物学,对菌株进行鉴定。结果表明,菌落直径最大的为菌株YJ-43;菌株YJ-22的产孢量和孢子萌发率均最高,毒力最强。形态学及rDNA-ITS序列分析结果显示,5个菌株均为球孢白僵菌（B. bassiana）。     

白僵菌优良菌株筛选及其酯酶同工酶测定研究

球孢白僵菌孢子经二氧化碳激光器激光照射后,从其长出的31个单个菌落中筛选出11号强毒力菌株,经全省白僵菌厂生产应用证明,它具有提高产孢量25～33%,生产期短、林地杀虫效果比原株提高20%等优点。经测定11号强毒菌株的酯酶同工酶谱为9条酶带,其中强带、次强带、弱带各3条。激光照射菌株与出发菌株相比。其酯酶同工酶谱不同,有的酶带增多,酶活性增强,也有的酶带减少,酶活性减弱,或酶活性不变,而Rf值不同。     

白僵菌优良菌株的自然筛选

球孢白僵菌[Beauveria bassiana(Ball)]制剂是防治马尾松毛虫的主要药物之一,菌粉年产量达数万kg以上。为了选育毒力强、人工培养菌丝生长快、产孢量高、优良品质稳定的菌株,从建阳、连城、莆田等地收集白僵菌虫体进行组织分离、单孢纯化、比较室内毒力以及在人工培养基上的性状,得到三个优良的白僵菌菌株,进行生产性试验,效果显著。     

23株白僵菌菌株生物学特性的研究

在PDA与虫粉-蛋白胨2种培养基以及1%葡萄糖+7%麦皮滤液中,对23株白僵菌菌株的菌落形态、菌丝生长、产孢量以及在不同温度、湿度下的孢子萌发率、抗紫外线能力等方面进行了试验。结果表明:菌落形态可分为3种类型;在2种培养基上,同一菌株及不同菌株在不同培养基上的产孢量也有差异,菌丝徒长的产孢量低;不同温度、湿度下,不同菌株分生孢子萌发率有明显差异。与其它菌株相比,Bpp、Be2、Bd5、Bbt1、Bpx2、Bpr3菌株萌发率高,表现出较好的耐高温和抗旱性以及抗紫外线能力。     

筛选球孢白僵菌菌株的试验

为防治松褐天牛筛选致病性强的白僵菌菌株，把来自不同寄主的１４株球孢白僵菌分离，纯化后，分别接种在ＰＤＡ和松褐天牛虫体增减基上进行生长速度，产孢能力测定，从中选出８株培养性状好的进行致病性试验。再选出致病力较强的菌株Ｂ１和Ｂ２生产高孢粉，用于做室内松褐天牛致病力及防治方法的比较试验。     

刚竹毒蛾白僵菌优良菌株筛选及生产应用研究

本研究对天然刚竹毒蛾僵虫蛹分离纯化的 8个球孢白僵菌菌株 ,进行了菌落形态、菌落生长、产孢量和发芽率等培养性状测定 ,并与 4个马尾松毛虫球孢白僵菌菌株进行了室内外防治刚竹毒蛾试验比较 ,结果表明 :菌株间的培养性状和毒力有明显差异 ,各菌株存在较明显的寄主专化性 ,分离自刚竹毒蛾的菌株毒力较高。筛选出BP4和BP1 2个优良菌株 ,具有菌丝生长速度快 ,产孢时间短 ,产孢能力强 ,毒力高等优点 ,并将最优的BP4菌株应用于生产 ,菌粉平均含孢量达 2 3 8 7×1 0 8·g- 1 ,平均孢子发芽率达 96 2 % ,林间防治越冬代刚竹毒蛾平均效果达 92 3 % ,取得良好的防治效果。     

筛选球孢白僵菌菌株的试验

为防治松褐天牛筛选致病性强的白僵菌菌株，把来自不同寄主的１４株球孢白僵菌分离、纯化后，分别接种在ＰＤＡ和松褐天牛虫体培养基上进行生长速度，产孢能力测定，从中选出８株培养性状好的进行致病性试验。再选出致病力较强的菌株Ｂ１和Ｂ２生产高孢粉，用于做室内对松褐天牛致病力及防治方法的比较试验。结果显示，Ｂ１致病力优于Ｂ２，注射菌液法的防治效果优于撒菌粉法     

桔小实蝇高致病性球孢白僵菌菌株的筛选

为筛选对桔小实蝇Bactrocera dorsalis（Hendal）有高毒力的球孢白僵菌Beauveria bassiana菌株,本文选取了对双翅目蝇类有致病性的球孢白僵菌菌株12株（Bb1824、Bb1840、Bb1853、Bb1981、Bb1995、Bb2003、Bb268、Bb853、Bb886、Bb1035、Bb1205、Bb2264）,通过菌落生长形状观察、产孢量测定、孢子萌发率的测定的方法筛选出菌株营养生长速度快、产孢量大、孢子萌发率高的优势菌株6株（Bb886、Bb1035、Bb1824、Bb1981、Bb2003、Bb1840）;再通过生物测定的方法,在6株优势菌株中筛选出了对桔小实蝇幼虫感染率最高、死亡率最高、LT50最小的Bb886菌株,该菌株对桔小实蝇幼虫的感染率为86.7%,校正死亡率达89.2%,在孢子浓度为2×107个/mL时的LT50仅为5.18天。     

荔枝蝽白僵菌优良菌株的筛选及应用技术的研究

从林间采集的自然感染白僵菌的荔枝蝽僵虫,分离纯化菌株,进行不同菌株生长性状培养比较,以及在室内和果园中对荔枝蝽毒力生物测定,从中筛选出生长性状优良,对荔枝蝽毒力最强的菌株Bh1,应用该优良菌株的菌剂与农药混用防治,能有效地控制荔枝枝蝽的严重危害,适宜菌厂大规模生产和在闽中、南地区大面积防治推广。     

N+离子注入球孢白僵菌诱变育种的初步研究

不同剂量的N 注入球孢白僵菌后,存活率呈典型的“马鞍型”剂量—效应曲线,选择该曲线峰值区域所对应的注入剂量即(80×1.3×1014)ion/cm2作为诱变育种的最佳注入剂量。比较离子注入前与注入后不同菌株的产酶曲线的结果是:不同菌株之间的Pr1蛋白酶酶活存在着差异,但是其酶活曲线变化规律一致,说明离子注入没有改变白僵菌Pr1蛋白酶的产酶过程。选择诱导24 h作为最佳诱导时间。通过测定菌株产孢量与菌株Pr1蛋白酶酶活双重指标对菌株进行筛选,结果表明,Bb202IP50菌株在两个指标上表现均较好,产孢量达到(7.065±1.105 9)×108个孢子/cm2,A405达到了0.269 8±0.035 8,故将其确定为最佳突变菌株。     

球孢白僵菌防治松褐天牛的研究

经致病力测定，比较出８株球孢白僵菌菌株对松褐天牛幼虫毒力的差异，并结合菌株的发芽率，优选出僵死率达９６％的Ｂ１、Ｂ２菌株作为林间应用菌种。由皖东微生物制剂厂生产出高孢粉。采用纱布袋撒菌粉和侵入孔注射菌液两种方法秋季野外布菌，翌年松褐天牛羽化期过后，劈样调查，结果显示：撒菌粉的僵死率为１８．３％（Ｂ１）、１３．４％（Ｂ２），占死亡百分比为４１．３％（Ｂ１）、３２．７％（Ｂ２）；注射菌液的僵死率为１０．５％（Ｂ１）、１０．７％（Ｂ２），占死亡百分比为２９．４％（Ｂ１）、２５．４％（Ｂ２），都比对照高，但持效不明显     

提高白僵菌培养基透气性的试验

本文从影响白僵菌生长发育的环境条件着手，开展此项试验研究。通过改善和提高培养基透气性来促进菌丝、孢子的生长发育和增殖，并在此基础上调整培养基的原料添加比例，从而达到增加孢子数量、降低生产成本、提高生产效益的目的。经３年来的试验和探讨，该方法在生产上进行大小批量投产均获得成功。     

桑天牛幼虫高毒力白僵菌菌株筛选

为利用白僵菌防治桑天牛,从野外感病死亡昆虫体上进行分离,同时利用黄粉虫对河北省土壤中的白僵菌进行诱集.诱集结果表明:白僵菌较多存在于自然的或人为活动较少的土壤中.利用获得的菌株对桑天牛幼虫进行生物测定,初步筛选出Bi05和Bs04 2个致病力较强的菌株,其接种10 d后的死亡率分别为96.47% 和92.93%,致死中时分别为4.53 d和4.83 d,而其他菌株的死亡率在28.59%和 82.12%之间,致死中时从5.84 d到16.4 d.利用不同孢子浓度的悬浮液对桑天牛幼虫进行接种,进一步测定了Bi05和Bs04菌株的致死中浓度分别为6.76×105 和1.39×106 conidia·mL-1.Bi05和Bs04菌株具有生物防治桑天牛的潜力.     

白僵菌防治草坪害虫研究

2002年6月，分别在玉溪市北山林场和玉溪市东风广场应用白僵菌微生物真菌杀虫剂，对草坪害虫草螟进行了室内感染和草坪感染两种实验研究，结果为室内感染的草螟平均致死率为98.3%，草坪感染的草螟平均致死率为86.4%。     

苏云金杆菌和白僵菌对云南松毛虫的生物活性测定

将不同的苏云金杆菌菌株Ｂｔ１．Ｂｔ２、Ｂｔ３及白僵菌菌株５ＳＯ３、ＬＳ、ＧＤ，配制成不同浓度的悬浮液，饲喂感染３龄云南松毛虫幼虫。实验结果表明：生物活性较强的菌株有Ｂｔ２及５ＳＯ３，其感染浓度与死亡率值回归方程式为Ｙ（Ｂｔ２）＝－３．８１６２＋１．１６６５ｘ；Ｙ（５ＳＯ３）＝－２．３２７４＋１．００６２ｘ。致死中浓度ＬＯ＿（５０）为３．６１４×１０￣７细菌／ｍｌ和１．９１７×１０￣７孢子／ｍｌ；致死中时间ＬＴ＿（５０）分别为２．６４１天和７．６１９天。