桉树外植体诱导褐变原因初探

桉树外植体诱导产生褐变的因子很多,在此只讨论不同无性系、不同木质化程度的茎段、不同的消毒处理、不同的光照对外植体褐变的影响。从试验结果得出:不同的无性系外植体产生褐变程度不同,采集半木质化或刚木质化的茎段,用0.1%HgCl2分两步消毒可以减轻褐变,在培养过程中采用全暗光的方法有效控制褐变,萌芽率也高。     

红锥优树外植体褐化抑制方法研究

植物组织培养技术是红锥(Castanopsis hystrix)优树无性化推广的重要途径,但外植体诱导培养过程中的褐化现象严重影响了其高效组织培养再生体系的建立。文章通过对红锥外植体取材季节、木质化程度、灭菌处理、光照等技术要素以及防褐化剂种类等进行生长对比试验,结果表明:外植体取材季节对褐化率无显著影响;外植体木质化程度对褐化率有极显著影响(P0.01);采用75%酒精进行外植体灭菌与未采用酒精的外植体相比,褐化率增加15.0个百分点,褐化程度加剧,其中采用2 min的新吉尔灭(1%)+2.5 min升汞(0.1%)两者结合进行灭菌效果较好;低温预处理外植体及暗培养均未达到抑制褐化的效果;添加防褐化剂PVP 80 mg·L~(-1)、V_C1.0 g·L~(-1)均能有效抑制褐化,褐化率分别为33.3%、12.2%,且腋芽长势好。     

青榨槭外植体消毒方法初步研究

以青榨槭带芽茎段为外植体,研究了取材时间、消毒剂种类以及处理时间对外植体灭菌效果的影响。结果表明,0.1%、0.2%升汞处理5 min或7 min的污染率显著低于1%次氯酸钠处理20 min或30 min;75%酒精浸60 s后,用0.1%的升汞消毒7 min和0.2%的升汞消毒5 min或7 min的处理间没有显著差异,其中75%酒精浸60 s后用0.1%的升汞消毒7 min的消毒效果最好,外植体污染率和存活率分别为1.9%和90.4%。4月中旬至7月中旬取材的外植体污染率均低于5%,而存活率均达90%以上,为青榨槭茎段外植体取材的最佳时期。     

云南樱桃Cerasus yunnanensis优株组培无菌材料获得方法的研究

以云南樱桃优良单株的嫩枝为外植体,研究了不同的预处理方式、取材时间、取材部位和消毒方法对其无菌材料获得的影响。结果表明:外植体宜随采随处理,且枝条带叶冷藏时间不宜超过5 d;外植体最佳采集时间为春季4月,最佳的取材部位为顶芽下第4～5个茎节;最佳表面消毒灭菌方法为1%新洁尔灭5 min+0.1%升汞溶液2～8 min。     

“红火球”紫薇组培快繁与抗褐化研究

以"红火球"紫薇茎段为外植体进行组培快繁试验,探讨抗褐化措施。结果表明:春季(4月)采集3 cm长腋芽茎段进行预处理后,用75%酒精灭菌10 s,再用0.1%升汞灭菌10 min,其褐化率和污染率最低,培养效果好;最佳抗褐化诱导培养基为1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+VC 2.0 g/L+L-半胱氨酸1.5 g/L;最佳抗褐化的"一步法"壮苗生根培养基为1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+VC 2.0 g/L+L-半胱氨酸1.5 g/L。     

核桃外植体消毒剂的对比试验

以核桃的新梢为外植体,分别用碘伏、5%的84消毒液、0.1%的升汞溶液对其进行消毒处理。结果表明:核桃新梢茎段的最佳消毒处理是先用碘伏溶液消毒20s再用5%的84消毒液处理20min,其无污染状况,腋芽的萌芽率达到81%,并无褐化现象。     

麻栎组织培养外植体选择与灭菌方法

麻栎组织培养外植体选择与灭菌方法试验表明：以麻栎播种苗幼苗茎段和大树嫩枝作为外植体进行组培效果较好;播种苗幼苗茎段的最佳灭菌方法是：70%酒精30 s→无菌水洗3次→0.1%升汞2 min→无菌水洗3次;大树嫩枝的最佳灭菌方法是：70%酒精30 s→无菌水洗3次→0.1%升汞5 min→无菌水洗3次;幼苗茎段外植体和大树嫩枝外植体的最佳取材时间是4月,接种后的外植体污染率和死亡率低于其他月份,而芽的萌发率高于其他月份。     

悬铃木组培快繁技术研究

选用悬铃木带腋芽(裸露)的半木质化茎段为外植体,进行组织培养技术研究。结果表明:6月中旬接种外植体较好,适宜消毒处理为75%酒精表面消毒10s后用0.1%HgCl2灭菌3、6min;最佳增殖培养基为MS+6-BA0.1+IBA0.5;20～25d增殖系数为5.92;试管苗根诱导以1/2MS+IBA0.5为宜,生根率为80%。     

阳丰甜柿组织培养外植体的选择与灭菌

为给阳丰甜柿的无性繁殖提供参考,采用不同灭菌方法处理完全甜柿阳丰的不同外植体,对外植体类型、树龄、取材时间及灭菌处理等对灭菌效果的影响进行研究。结果表明:以1年生阳丰甜柿当年生枝条的带皮腋芽作为外植体进行组织培养效果最好,生长速度快,而休眠芽在剥去5片鳞片后组培效果也较好,但后期生长速度较慢。当年生枝条的带皮腋芽的最佳灭菌方法是:75%酒精处理30 s,0.1%升汞处理15 min;剥掉5片鳞片后的休眠芽茎尖最佳灭菌方法:75%酒精处理1 min,5%次氯酸钠处理15 min,0.1%升汞处理20 min。带皮腋芽最佳取材时间是6月,接种后外植体的污染率和死亡率显著低于它取材时间,而芽的萌发率显著高于其它月份。阳丰组织培养的最佳外植体为6月份的带皮腋芽,最佳灭菌方法为先用75%的酒精处理30 s,再用0.1%的升汞处理15 min。     

食用玫瑰组培中外植体褐化的控制

在食用玫瑰组织培养过程中发现其外植体褐化现象十分严重,直接影响组培苗的成活率,决定着食用玫瑰组培工作的成功与否。为了控制外植体的褐化,分别进行了取材时间的不同选取、同一品种不同部位的选取、不同抗氧化剂的处理、消毒处理时间的不同等相关试验,结果表明:10月中旬取材能大大地降低污染率,且褐化程度低;选取茎尖及腋芽带茎段的外植体,其褐变率低;食用玫瑰外植体消毒前,使用2.0%的聚乙烯吡咯烷酮处理,在一定程度上能有效降低其褐化;深消毒中用0.1%的氯化贡溶液处理消毒效果佳,但处理时间的长短也很关键的,应根据材料的木质化程度选择适宜的处理时间。     

慈竹组织培养消毒方法筛选及丛芽诱导研究

选择慈竹当年生生长健壮半木质化尚未萌芽的枝条作为外植体,对慈竹组织培养中的消毒方法进行筛选和激素处理及培养基对其丛芽诱导的影响实验。结果表明,将外植体首先用自来水冲洗2 h,然后用70%酒精擦拭1遍,最后用0.1%的升汞消毒2次,每次12 min消毒效果最好,污染率较低,褐化率也较低。不同浓度激素组合下6-BA浓度为3.0 mg/L时,丛芽诱导率最高,达73.11±3.42%。MS培养基丛芽诱导率显著高于3/4 MS培养基和1/2 MS培养基。     

桤叶唐棣外植体灭菌试验研究

为确定桤叶唐棣组织培养的外植体最佳灭菌方案,以桤叶唐棣当年生、带腋芽茎段为外植体,采用0.1%HgCl、5%NaCl对外植体进行不同时长消毒处理试验,结果表明:0.1%HgCl灭菌在12 min内,5%NaClO灭菌在30 min内,都是随着消毒时间的增加污染率降低、褐化率升高;0.1%HgCl灭菌≤10 min,5%NaClO灭菌≤25 min,成活率随消毒时间延长而升高,之后都又下降;0.1%HgCl灭菌10 min是最佳灭菌方法,成活率达38%。     

红醋栗外植体的选择及消毒方法研究

以红醋栗不同组织部位为外植体,采用不同的消毒药剂、消毒方式及消毒时间对其进行试验研究,结果表明:红醋栗离体初代培养以半木质化茎段为外植体,消毒药剂为0.1％升汞(HgCL2)+2滴吐温溶液,通过手摇容器晃动的方式消毒8 min的试验效果最佳.     

红锥优树外植体褐化抑制方法研究

植物组织培养技术是红锥（Castanopsis hystrix）优树无性化推广的重要途径,但外植体诱导培养过程中的褐化现象严重影响了其高效组织培养再生体系的建立。文章通过对红锥外植体取材季节、木质化程度、灭菌处理、光照等技术要素以及防褐化剂种类等进行生长对比试验,结果表明：外植体取材季节对褐化率无显著影响;外植体木质化程度对褐化率有极显著影响（P ＜0．01）;采用75％酒精进行外植体灭菌与未采用酒精的外植体相比,褐化率增加15．0个百分点,褐化程度加剧,其中采用2 min 的新吉尔灭（1％）＋2．5 min 升汞（0．1％）两者结合进行灭菌效果较好;低温预处理外植体及暗培养均未达到抑制褐化的效果;添加防褐化剂 PVP 80 mg·L －1、VC 1．0 g·L －1均能有效抑制褐化,褐化率分别为33．3％、12．2％,且腋芽长势好。     

红叶榆叶梅组织培养初步研究

本试验以红叶榆叶梅(Amygdalus triloba(Lindl.)Ricker)带芽茎段为外植体,分别采用75%酒精(15~60s),0.1%升汞(6~12min)进行消毒。对不同取材部位(顶芽以下1~9茎节),不同激素(6-BA,NAA,ZT)和浓度的培养基进行研究。结果表明:在0.1%升汞处理时间8min时,最适宜的75%酒精灭菌时间为45s;而在0.1%升汞处理10min时,污染率最低且存活率最高。茎段选择稍硬枝茎段(顶芽以下4~6茎节),具有较高的存活率和萌发率。6-BA1.0mg/L+NAA 0.15mg/L+ZT0.15mg/L的培养基中,萌发率达到35.83%,萌芽苗生长状况较优。建议使用稍硬枝茎段(顶芽以下4~6茎节)作为红叶榆叶梅组织培养的外植体,使用75%酒精45s+0.1%升汞10min作为红叶榆叶梅茎段的灭菌处理方式,选择6-BA1.0mg/L+NAA0.15mg/L+ZT0.15mg/L作为诱导培养的激素浓度。     

崖柏组织培养初探

以崖柏茎段为外植体,MS为基本培养基,探讨0.1%升汞不同消毒时间对外植体消毒效果;不同盐浓度的培养基对外植体生长的影响。结果表明:0.1%升汞消毒12 min污染率最低,杀伤率低,表面灭菌效果最好;1/2MS培养基上培养愈伤组织长势效果最好。     

朱樱花组培快繁技术研究

研究对朱樱花籽苗、幼苗茎段和叶片,成年植株茎段和嫩叶等不同外植体和不同生长调节剂对朱樱花愈伤组织诱导的影响,结果表明:不同外植体诱导愈伤组织的能力是:籽苗茎段带节茎段叶片,籽苗茎段和带节茎段是愈伤组织诱导的最佳外植体。用种子播种一个月后的籽苗作为外植体,愈伤组织诱导率高且不会褐化,其诱导最佳培养基配方为BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L,诱导率为100%;多年生嫩茎产生的愈伤组织丛生芽诱导率为0%,以幼苗产生的愈伤组织进行丛生芽诱导,最佳培养基配方为BA2.0mg/L+NAA1.5mg/L,诱导率为100%。通过对1%升汞对外植体消毒时间的不同实验,得出1%升汞消毒外植体6min褐化率、污染率明显减少。     

黄枝润楠组培快繁技术

为了解决外植体易污染、易褐化、诱导分化难等问题,对黄枝润楠组培技术进行了探讨。试验结果表明:用75%酒精处理黄枝润楠的茎段15 s后,再用0.1%的升汞消毒10 min,能大大降低外植体污染率,外植体的存活率达60.0%。黄枝润楠的最佳诱导培养基为MS(改良)+6-BA 0.5 m/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+抗坏血酸1.0 g/L。     

台湾桤木茎段外植体消毒及启动培养

以台湾桤木(Alnus formosana)优良单株的茎段为外植体,以MS为基本培养基探讨外植体消毒方式及启动培养的影响因素。通过完全随机试验设计和正交试验设计优化出外植体消毒的最佳方式和茎段启动培养的最佳培养基组合。结果表明:台湾桤木半木质化茎段消毒以75%的酒精消毒30 s,2%NaClO 5 min,0.1%HgCl_26 min,效果最佳,污染率为18.33%,成活率63.67%。台湾桤木茎段启动培养的最优培养基组合为:MS+6-BA 3 mg/L+TDZ 0.1 mg/L+IBA 0.1mg/L。     

梁山慈竹及其体细胞突变体组织快繁技术研究

以梁山慈竹实生植株和体细胞突变体植株(NO.29、NO.66-2)为研究对象,选择其当年生半木质化且未萌芽的枝条作为外植体。研究了不同采集时间、不同消毒方法和不同激素配比对外植体丛生芽诱导的影响。结果表明:外植体最佳采集时间为3—5月;外植体用75%酒精消毒30s,用0.1%的升汞于摇床振荡消毒15min,其污染率较低;在丛生芽诱导方面,NO.66-2与NO.29诱导率明显高于梁山慈竹实生植株;较高浓度的6-BA和KT对NO.29植株丛生芽诱导具有一定促进作用,当6-BA浓度为3.0mg/L,KT为0.1mg/L时NO.29的增殖系数较高。