南方红豆杉叶绿体非编码序列PCR体系优化及引物筛选

PCR技术广泛用于分子标记、基因工程等领域,是植物系统发育及种群遗传结构等研究的基础。通过对影响PCR体系扩增的主要因子进行单因素试验,得出南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)叶绿体DNA(cpDNA)最优体系(30μL)为3μL 10×PCR buffer,1μLDNA模板(60 ng),4.2μL MgCl_2(3.5 m M),8.4μLdNTPs(0.7 m M),0.9μL引物(0.3μM),0.8μL Taq DNA聚合酶(2 U),10.8μL去离子水。利用该体系筛选出叶绿体DNA非编码区通用引物4对,分别为atp I-atp H、psb J-pet A、trn H-psb A和trn L-trn F。     

南方红豆杉ISSR-PCR反应体系的建立与优化

以南方红豆杉DNA为模板,采用正交试验设计对影响南方红豆杉ISSR-PCR扩增的参数进行了优化。结果表明较佳的南方红豆杉ISSR-PCR的反应体系(20μL)为模板DNA 60 ng,10×PCR buffer 2.0μL,25 mmol/L的MgCl21.0μL,2.5 mmol/L的dNTPs 1.0μL,10μmol/L的引物1.0μL和反应酶0.2 U。适宜的扩增条件为94℃预变性4 min,41个PCR循环(94℃变性30 s,54.5℃退火45 s),72℃延伸80 s,72℃延伸5 min,4℃保存。     

南方红豆杉细胞组织培养技术

介绍南方红豆杉细胞组织培养方法,包括外植体选择、诱导培养、继代培养和生根培养等技术环节。悬浮细胞培养可有效提高南方红豆杉紫杉醇产量。通过添加激素、前体物质和诱导子能很好的解决愈伤组织褐化问题并且是提高紫杉醇产量的关键。     

红豆杉及南方红豆杉体细胞胚胎发生的研究

利用江西的红豆杉（Ｔａｘｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）、福建的南方红豆杉（Ｔａｘｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓｖａｒ．ｍａｉｒｅｉ）以及四川的南方红豆杉（Ｔａｘｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓｖａｒｍａｉｒｅｉ）的成熟胚为试验材料,成功地诱导出大量的愈伤组织。这３种材料愈伤组织的最高诱导频率分别为９５７％、９８４％、９１７％。细胞学和形态学的观察结果表明：在适当的条件下经过一段时间的培养,这些愈伤组织能够产生处在不同发育阶段的体细胞胚。上述３种植物材料每１００块愈伤组织平均最多分别可产生１２７、９１和３３个体细胞胚。     

南方红豆杉SSR-PCR扩增体系的建立

为了建立适合于南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)种群遗传多样性分析的SSR-PCR扩增体系,在单因素试验确定各因素浓度范围的基础上,采用正交试验设计,对影响南方红豆杉SSR-PCR扩增的主要因素浓度进行了筛选。结果表明,南方红豆杉SSR-PCR最佳反应扩增体系为:20μL反应体系中含有1.50mmol/L Mg2++0.2 mmol/L d NTP+0.5U Taq DNA聚合酶+0.3μmol/L引物+75 ng DNA模板。     

印楝细胞悬浮培养系的建立及悬浮培养

研究了印楝细胞悬浮培养系的建立及印楝细胞悬浮培养的条件。结果表明,印楝细胞悬浮系的建立以B5培养基,NAA2 0～4 0mg·L-1,采用直接倾倒法作为接种方法为好;基于生物量、印楝素含量和印楝素产率综合分析认为,印楝细胞悬浮培养的最佳条件为B5培养基,NAA2～4mg·L-1,蔗糖30g·L-1,培养温度25℃,及根据培养容器的大小选择合适的转速和装液量。     

南方红豆杉育苗基质研究

通过圃地的育苗试验,研究了9种不同育苗基质对南方红豆杉小苗木(6月龄)生长的影响。结果表明:用草炭 蛭石(1?1)作育苗基质的南方红豆杉苗木的苗高、须根数、地上部分鲜重3个指标的生长表现较好;草炭 锯末 土 牛粪(2?2?2?1)混合基质较适合南方红豆杉苗木的地径、全株鲜重、地下部分鲜重3个指标的生长。这两种育苗基质配方可在南方红豆杉育苗生产中大量推广使用。     

南方红豆杉种子休眠的研究

通过对南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)种子休眠研究,认为其种皮坚硬透性差,以及胚需要生理后熟,是综合型休眠。     

南方红豆杉人工栽培技术研究

文章介绍了韶关市林科所南方红豆杉人工栽培主要技术措施。采用这种技术,可缩短南方红豆杉发芽时间2个月;一年生苗木平均苗高20 cm,平均成苗率86%,造林成活率达到95%;5年生人工林生长量调查结果表明:平均树高可达到3.2 m,平均地径达到6.4 cm,人工林每年的地上平均生物量(鲜重)达到20 t/hm2。     

复旦“培养”南方红豆杉的报告

南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei),又名美丽红豆杉,为国家一级保护植物,主要产于我国长江流域、南岭山脉地区和河南、陕西、甘肃及台湾等地,多分布在海拔1000～1200米以下。南方红豆杉为常绿树种,叶片浓绿、树冠塔形,种子假种皮肉质、红绿相间,具有很高的观赏价值,是园林和城市绿化的优良树种。更为重要的是,该植物体内含有一种抗肿瘤特效药成分——紫杉醇(pacli-taxe),具有独特的微管稳定作用而被广泛用于乳腺癌、前     

南方红豆杉生态特性及栽培技术

南方红豆杉 (TaxusMairei)属红豆杉科常绿大乔木 ,其枝叶、树皮、假种皮、种子等含有治疗癌症的特效药紫杉醇 (Taxol) ,由于红豆杉资源紧缺 ,人工栽培有很高的经济价值。文章介绍了南方红豆杉的生态特性与栽培技术     

南方红豆杉育苗及造林技术

红豆杉始载于《东北药植志》,别名赤柏松、紫杉、紫柏松,为红豆杉科红豆杉属植物。其枝、叶、皮、根可提取昂贵抗癌药物——紫杉醇,属国家一级保护植物,珍稀常绿乔木。红豆杉为常绿乔木,高20米左右,胸径60～100厘米。小枝互生,叶螺旋状着生,排成二列,条形,微弯,长1～4.5厘米,宽2～5毫米。果实球形坚果,假种皮,种子     

人心果细胞悬浮培养的初步研究

对人心果愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养结果表明,人心果愈伤组织诱导培养基为MS 6-BA0．2mg／L NAA0．1mg／L 2.4-D1．0mg／L PVP3．0g／L;继代培养基为MS 6-BA0．5mg／L NAA0．1mg／Lt 2.4-D1．0mg／L PVP3．0g／L。最佳的细胞悬浮培养基为MS 6-BA0．2～0．5mg／L NAA0．1mg／L 2．4-D0．5～1.00mg／L 蔗糖30g／L。培养液体积为40mL时,以4～6mL的接种量为宜。悬浮细胞在生长前期,pH下降较明显,而在细胞对数生长期,pH变化不明显。此项研究为进一步选育高产人心果胶细胞株打下了良好的基础。     

南方红豆杉苗木病害防治研究

针对南方红豆杉苗木病害，通过大田育苗对比试验，研究探索有效的防治方法，以减轻其危害程度，达到提高苗木保存率的目的。     

绯寒樱细胞悬浮培养技术研究

探索了影响樱花细胞悬浮培养的因素,优化了其液体培养基不同激素配比、培养物密度、培养时间、摇床转速等培养条件,以建立樱花细胞悬浮培养体系。结果表明:细胞悬浮培养的最佳条件是MS+1.0mg/L6-BA+2.0mg/LNAA+1.0mg/L2、4-D液体培养基中,于26℃、120r/min的摇床上,细胞悬浮培养细胞最佳起始密度为2.5×104个·mL-1时,培养14d,可得到稳定的悬浮细胞系。     

南方红豆杉扦插繁殖技术研究

2003~2004年应用2年生南方红豆杉幼苗进行扦插试验研究,结果表明:不同时间扦插的插穗生根时间最多相差2个月,2月中旬至3月中旬为最适宜扦插季节,扦插后3~5个月的生根率高于其它月份。用河沙与红泥作基质扦插,在不同季节扦插中以河沙作基质的生根效果比红泥的好。用生根剂处理有利于插穗提早生根及增加生根数量,以冬季及早春应用的效果较为明显,应用生根剂的插穗在扦插3~5个月后的生根率和生根数量与对照比有显著差异。不同类型插穗的扦插生根率在不同月份扦插的结果不同,但其差异不显著。     

南方红豆杉扦插繁殖技术研究

指出了南方红豆杉生长缓慢,种子繁殖系数低,对其无性繁殖的研究比较多,分析了其生物学特性,就扦插繁殖技术的研究进行了探讨。     

南方红豆杉扦插试验研究初报

南方红豆杉是国家一级保护树种，具有观赏，用材，药用等多种用途，由于种源少，种子繁殖困难，我们进行了不同时间，不同基质，不同激素及不同激素浓度处理的扦插试验。试验结果表明，南方红豆杉扦插繁殖应选择在秋季进行，其扦插其质，激素及浓度的最佳组合为珍珠岩，采用５００ｐｐｍ浓度的吲哚丁酸通过１２小时的浸泡，其成活率可达到９５％。     

南方红豆杉营林技术的研究

南方红豆杉是集用材,药用,绿化于一体的珍贵树种,由于天然林资源奇缺,现已达供不应求状态。为扩大南方红豆杉的人工种植面积,自１９９０年以来,为南方红豆的生物学特性和营林技术,如种子处理,扦插育苗,造林技术等进行了研究,为加速培育南方红豆杉提供了技术保证。     

南方红豆杉扦插育苗试验研究

南方红豆杉(Taxus Chinese Var.mairei),为红豆杉变种,属红豆杉科红豆杉属植物,主要分布于甘肃、陕西、河南、安徽等省南部及其以南各省区.为了保护野生天然资源和扩大药源,我们对南方红豆杉进行了扦插育苗试验研究,取得了较好的效果.