马尾松抗松材线虫病的验证及黑松感病进程

对马尾松22个种源以及黑松和刚松4次接种松材线虫Barsaphelenchusxylophilus。马尾松、刚松无1株感病;黑松接种后40天感病率为20%,感病指数7.5,第257天感病株率100%,感病指数90.0,死亡率为33.3%。302天时极大部分频死状态,1年后全部死亡。     

马尾松对松材线虫病抗病性差异的研究进展

松材线虫病是松树的一种毁灭性病害,不同种源的马尾松的抗病性存在差异.就马尾松对松材线虫病的抗病性差异研究进展进行了综述.目前,马尾松抗病性的研究主要有以下5个方面:①不同树龄与抗病性之间的关系;②不同地理种源马尾松对松材线虫病抗病性的差异;③与种源抗病性有关的主要成分;④马尾松的诱导抗病性;⑤马尾松抗病育种.马尾松的抗病性与多种因素有关系,通常具有抗性的马尾松一般生长状况较好;马尾松的抗病物质很复杂,到目前为止,人们已经发现了马尾松的一些抗病物质的种类,并对这些物质的结构进行了研究,但对这些抗性物质的产生和马尾松抗病机理还有待于进一步的研究.     

马尾松抗松材线虫病候选无性系的抗病性测定

为筛选抗松材线虫病强的马尾松无性系,以前期筛选获得的抗松材线虫病强的马尾松实生苗为接穗,使用湿地松作为砧木培育嫁接苗,开展无性系2次接种松材线虫抗病性测定。结果表明:使用湿地松作为砧木培育马尾松抗性无性系苗木,经过对马尾松无性系嫁接苗2次接种松材线虫测定,获得健全率较火炬松高的无性系。抗病性第1次、第2次测定的健全率超过火炬松的合格无性系分别为77.7%、66.2%,平均健全率分别为81.4%、94.5%,对照树种火炬松平均健全率分别为61.3%和82.1%,获得的无性系抗病性显著提高。为了减小误差,应该选用嫁接成活苗数量相对多的无性系间进行抗病性强弱次序评价。采用了10株以上无性系间抗病性强弱次序评价进行对照,减少了抗性强弱无性系两极分化,抗性能力中等的无性系相应增多,在选拔植株营建抗性种子园过程中应给予重视,尽量选择接种测定数量较多的高抗无性系。     

马尾松对松材线虫病的抗性选择研究初报

通过2001～2003年连续人工接种试验，从10个马尾松优良种源中初选出种源1号、3号、5号、7号、8号、9号等6个未感病种源；从20个优良家系中初选出家系3号、5号、6号、9号、16号、18号等6个未感病家系，其它种源和家系均有感病死亡。将初选出的抗病材料拟继续接种试验，决选出抗性稳定的抗病材料，以此建立抗病马尾松种子园。     

基于Illumina高通量测序的泡桐转录组研究

利用新一代高通量测序技术平台Illumina Solexa对泡桐进行转录组测序和数据de novo组装,并对得到的unigene进行功能注释、分类及代谢通路分析.结果表明,N50值为2 278 bp、平均长度为1 410 bp的泡桐unigene共有188 019条,将其与NCBI的Nr和Swiss-Prot数据库比对后发现,分别有120 808条和85 880条unigene与其他物种的基因具有同源性.利用COG数据库可将有关的41 914条泡桐unigene分成25类,KEGG数据库分析发现共有43 553个unigene参与215种代谢通路.找到与木质素合成相关的泡桐unigene.     

马尾松没种源氨基酸含量与抗松材线虫病的关系

在选出和验证抗病马尾松种源的基础上，研究了马尾松不同抗病性种源的树全内氨基酸含量的差异。结果表明，抗病种源在接种松材线虫前后均比较感种源含有较少的组氨酸、苏氨酸、甘氨酸、异亮氨酸、胱氨酸、甲硫氨酸、亮氨酸、酪氨酸和精氨酸等９种游离氨基酸。它们与感病指数均呈正相比，这说明游离氨基酸含量低的马尾松种源抗松材线虫病。１１种固态氨基酸的含量与感病指数有负相关性。说明其含量较高的种源具有较强抗病性能。     

松材线虫病危害对马尾松营养物质的影响

在福建省闽侯县南通镇建南村坑柄山场,对30年生健康、感染松材线虫病初期和末期的马尾松树干样品的可溶性糖、总糖、蛋白质等营养物质含量进行测定和比较。结果表明:松材线虫病的侵染可导致马尾松树干可溶性糖、总糖、蛋白质含量下降。与健康植株相比,感病植株的可溶性糖、总糖、蛋白质含量均极显著下降;与感病初期的植株相比,感病末期植株的可溶性糖、总糖、蛋白质含量亦极显著下降。     

松材线虫病对安化县马尾松林的危险性及预防对策

从松材线虫病的分布情况、为害症状、发病特点等方面简述了其分布与危害特点;从松材线虫的寄主植物资源和病原传播媒介昆虫以及发生发展环境与传播方式等方面分析了安化县马尾松林松材线虫病发生与发展的可能性与危险性;并提出了监测与预防松材线虫病的对策.     

松材线虫病的诊断方法探讨

控制松材线虫病的关键是及时诊断疑似疫木、疫点,既能采用有效、简单、易行的方法进行诊断,且能有的放矢地进行诊断。文章根据广东省松材线虫病疫区的特点,对林间枯死松树外观症状诊断法、林间枯死松树体内线虫的分离鉴定法和松褐天牛引诱剂辅助诊断法等3种松材线虫病的诊断方法及其适应范固进行探讨。     

马尾松钙调素基因的克隆及响应松材线虫侵染的表达特征

松材线虫病是由松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)侵染引起的严重病害,引起重大的经济和生态损失。钙调素(CaM)是真核生物中Ca2+主要传导蛋白,本研究采用RT-PCR方法,首次从马尾松中克隆获得CaM,命名为pmCaM,并检测了其响应松材线虫侵染的表达特征。序列分析表明:pmCaM完整的开放阅读框核苷酸序列为450bp,编码149个氨基酸的蛋白质;该蛋白含有4个EF-hand结构域,具有钙调素的典型特征,与其它植物的CaM蛋白均有较高同源性。实时荧光定量PCR分析显示:接种松材线虫后30 180 min时间段,马尾松苗根、茎、叶器官中的pmCaM均下调表达,但不同器官间显著下调表达的时间点存在差异;同时,不同器官pmCaM表达量变化均存在特异的随时间发展的波动特征,其中发现,根茎pmCaM在松材线虫接种45 min时均处于表达量高峰。本研究结果显示pmCaM表达响应了松材线虫侵染,揭示pmCaM可能参与了调控松材线虫-马尾松互作早期的钙信号响应。     

开展松材线虫病抗性选育 保护我国松林资源

松材线虫病是我国松林毁灭性病害,已造成数千万松株死亡,发生区经济损失巨大,目前此病害正威胁着南方重点林区及重要风景名胜区松林的安全。我国松属资源丰富,科技人员队伍组织体系完备,抗性选育研究已有较好基础。因此尽快开展抗性选育有利于发生区森林恢复、非发生区林分改造和结构调整,有利于保护我国森林资源。本文对开展抗性选育提出了具体建议。     

激素、钙、水杨酸和铵诱导马尾松、黑松抗松材线虫病的研究

诱抗试验结果表明：（１）ＩＢＡ、乙烯、ＩＢＡ＋乙烯对马尾松的诱抗效果达６０％，而ＩＢＡ＋乙烯对黑松苗的诱抗效果为１２５％。（２）Ｃａ２＋＋ＩＢＡ对黑松苗的诱抗效果为３６６７％。（３）除Ｓａ＋ＩＢＡ对黑松苗的诱抗效果为１６７％外，其余Ｓａ的各处理效果均不明显。（４）铵的单用、混用或与Ｃａ２＋混用对马尾松诱抗效果均可达６６８％～１００％。     

松材线虫病抗性马尾松苗木的选育

营建现地测定林在松材线虫抗性育种过程中是一项非常重要的部分,分析测定林的生长特性及受害情况能够指导抗性种子园的改良.阐述了采种母树、播种育苗、人工接种测定、测定苗木选拔以及营建测定林.经二次测定后的苗木抗性水平均超过火炬松,4 a生树高年生长量为56 cm,根径、胸高直径等均优于普通马尾松,目前没有出现枯死个体.     

松材线虫病树早期诊断的研究 Ⅰ.马尾松、黑松松材线虫病树的早期诊断

树脂分泌停止是松树受松材线虫危害的主要症状之一。对南京地区黑松、马尾松接种树调查表明,２０～３０ａ黑松春季接种１４ｄ后以异常树为标准作早期诊断可使准确率达１００％,夏季接种２５ｄ诊断准确率为９３％,３０ｄ准确率１００％;秋季３０ｄ准确率１００％。１０～１５ａ黑松不论接种季节２０ｄ后准确率即达１００％。马尾松接种线虫后随不同树龄、不同接种时间流胶情况差别较大,使准确率达１００％的接种天数普遍比黑松迟１０ｄ左右。溴酚蓝、二甲基黄染色剂用于病树早期诊断反应不明显。据流胶试验,在松材线虫病新发现区可用流胶法作早期诊断,以尽早清理病树并达彻底清除的目的。     

福建省松材线虫病的预防控制与马尾松人工林经营策略探讨

松材线虫病是松树的毁灭性病害。福建省已处在松材线虫病的包围之中,该病害传入福建省只是时间的迟早问题。为了延缓该病的传入或一旦传入能及时采取有效的控制办法,笔者分析了该病害的发生规律特点,针对性地提出了病害的预防控制措施和马尾松人工林的经营策略。     

油茶花发育转录组测序及相关基因表达分析

通过对油茶成花过程的转录组测序及其成花相关基因的表达分析,结果表明：转录组测序总共获得28448847个 reads,5742023480 bp 数据量,GC 含量为46.52%;拼接成大于200 bp 以上的 Unigenes 有94476条,N50长度为806 bp,其中1 kbp以上的Unigenes 共12643条,占Unigene总数的13.38%; Unigenes 在各数据库中功能注释数目,在 COG中有9095条,在 GO中有27201条,在 KEGG中有6431条,在 Swissprot中有24534条,在TrEMBL中有36393条,在Nr中有36400条,在Nt中有30858条;茎尖中FLC,FCA和FT基因表达量较 AP1,AP2和 PI 基因低,FT基因( ID：Unigene60063)是油茶成花的关键基因,PI 基因( ID：Unigene56059)与雄蕊发育关系紧密。     

基于转录组测序的云南紫叶子花苞片颜色相关基因表达模式研究

为给叶子花苞片颜色形成的分子机理研究提供参考,以云南紫叶子花（Bougainvillea spectabilis’Senjakala’）为研究对象,采用转录组测序技术对其始花期、转色期、盛花期和末花期的苞片进行测序,并进行荧光定量PCR验证,通过KEGG富集分析苞片颜色的代谢途径,比较每两个时期间的差异基因及表达模式,探究其苞片不同时期的代谢途径及相关基因表达模式。结果表明,甜菜碱代谢途径、类黄酮代谢途径、苯丙烷代谢途径和类胡萝卜素代谢途径参与云南紫叶子花苞片发育过程,共有145个与苞片颜色相关的单基因簇参与53种酶的合成,并对应53个相应的基因。DOD基因在甜菜碱代谢途径中大量表达,是甜菜碱代谢途径的关键基因;类黄酮代谢途径中,基因CHS、CCoAOMT、SAM-MSPI1、TC4H、CYP98A2、F3H和KCS11起正向调控作用,F3’H起负向调控作用,FLS、CHI和NAR既有正向又有负向调控作用;苯丙烷代谢途径中,基因POD、β-GC、COMT、PAL和CAD1均表达显著,是该途径的主要调节基因;基因CCD4、ZEP和AAO是类胡萝卜素代谢途径的关键基因。这些基因在苞片整个发...     

松材线虫病发生林地松树枯死规律研究

对马尾松-黑松混交林松材线虫病疫木构成及特点进行了研究,结果表明:黑松死亡率高于马尾松,两者比例为1:0.39;7月15日至8月15日是死亡高峰期,早期:中期:近期=1:0.22:0.10;枯死树径阶构成与林相自然径阶一致,平均为17.5cm;枯死木的质量明显低于健康木,健康木重量:胸径=7.857kg/cm,而枯死木重量:胸径=2.647kg/cm,后者只及前者的33.7%。     

马尾松转录组密码子使用偏好性及其影响因素

【目的】异源表达是植物蛋白功能验证和分子育种的重要手段,而密码子是异源基因高效表达的重要因素,对马尾松转录组基因编码区密码子偏好性分析可以为马尾松分子育种提供一定的理论支持。【方法】利用CodonW、EMBOSS密码子分析软件对马尾松转录组进行密码子参数分析和密码子偏好性分析,根据中性绘图、ENc-GC3s、偏倚性分析推测马尾松密码子偏好性的主要形成原因。通过比较高低表达基因样本同义密码子相对使用度(RSCU)筛选马尾松最优密码子,通过密码子使用频率比值分析马尾松与拟南芥、烟草、欧洲山杨、大肠杆菌、酿酒酵母的密码子偏好性差异。【结果】马尾松转录组编码序列(CDS)密码子平均GC含量为44. 95%,密码子第3位GC含量为38. 95%,尤为偏好A/T。高、低表达基因样本统计分析表明,马尾松转录组RSCU差异较小,筛选出TTA、CAA、TGT、GGT等27个密码子可作为马尾松的最优密码子。中性绘图、ENc-GC3s关联分析以及偏倚分析表明,马尾松密码子偏好性的形成可能主要受突变影响,其次受自然选择等多重因素共同影响。密码子使用频率分析表明马尾松密码子偏好性与烟草、拟南芥和欧洲山杨相比差异较小,与大肠杆菌差异最大,与酿酒酵母差异小于大肠杆菌。【结论】马尾松偏好第3位为A/T的密码子,筛选出27个最优密码子,其中25个密码子第3位为A/T。马尾松密码子使用偏好性形成主要受突变影响,其次受自然选择等多重因素共同影响。烟草可以作为马尾松基因异源表达的优选植物生物体,而微生物中酿酒酵母可能优于大肠杆菌。