精子介导生产转hCD59基因猪

为研究精子介导法生产异种器官移植用转基因猪的效率,将人膜反应性溶解抑制物(hCD59)基因与脂质体混合制成基因/脂质体复合物,分别采用睾丸注射法和基因脂质体复合物/精子共孵育法制备转人hCD59基因猪,其中睾丸注射法处理公猪1头,44 d后配母猪8头,7头受孕(受孕率87.5%),产仔73头,PCR阳性猪3头(阳性率4.3%);外源基因/精子共孵育法处理公猪4头,处理母猪4头,1头受孕(受孕率25%),产仔11头,PCR阳性猪1头(阳性率9%)。从15头受孕母猪共获得84只仔猪,经PCR初步检测,其中4只仔猪为转基因阳性,阳性率4.8%。研究结果表明:通过精子介导法可以获得转基因猪。     

母猪防御攻击性对仔猪争斗行为及生长性能的影响

为研究母猪防御攻击性对仔猪争斗行为及生长发育的影响,以民猪、大白猪为研究对象,通过行为评定将母猪分为强防御攻击性组(HMDS)和弱防御攻击性组(LMDS),比较不同品种、不同组别仔猪哺乳期和保育期行为及生长性能差异。选取民猪泌乳母猪15头及其仔猪115头,大白猪泌乳母猪15头及其仔猪134头,断奶后将体重相近仔猪随机混群,每栏8头,其中HMDS组仔猪4头,LMDS组仔猪4头。采用全事件记录法,观察和记录仔猪哺乳期和保育期争斗行为及生产性能。结果表明,民猪母猪防御攻击性极显著高于大白母猪(P0.01),民猪仔猪争斗行为强度显著低于大白仔猪(P0.05);HMDS组仔猪争斗行为表现显著低于LMDS组仔猪(P0.05),HMDS组仔猪社会秩序形成所需时间及皮肤损伤程度低于LMDS组仔猪,HMDS组仔猪断奶混群后社会等级、日增重、相对生长速率显著高于LMDS组仔猪(P0.05)。由此可见,民猪母猪防御攻击性强,民猪仔猪争斗行为强度较弱;防御攻击性强的母猪对应仔猪在哺乳期和断奶后争斗行为强度较弱,社会秩序形成早,争斗激烈程度弱、皮肤损伤程度低,生长发育良好。     

流式细胞仪分离工作犬XY精子的研究

[目的]探索适用于犬性别控制的流式细胞仪分离精子的方法。[方法]采集昆明犬和德国牧羊犬的精液,采用不同浓度(6、8、10、12μl/ml)的Hoechst 33342对精液进行染色,探讨不同浓度的荧光染料Hoechst 33342及公犬个体对精子分离效果的影响。[结果]当Hoechst 33342浓度分别为6、8、10μl/ml时,X和Y精子的DNA差异不能被分辨成双峰,只有当Hoechst 33342为12μl/ml时,X/Y双峰能有效并稳定地分离。不同公犬的鲜精死精率与X/Y精子分离速度呈明显负相关性,而分离准确率则与鲜精死精率无明显相关性。[结论]当Hoechst 33342浓度为12μl/ml时,流式细胞仪能将警犬X、Y精子成功分离。选择适宜的种公犬对提高精子的分离效率和分离精液的品质都有重要意义。     

奶牛精子SRY基因原位杂交检测方法的建立

Sry基因是Y染色体性别决定基因,采用primer premier 6对SRY基因序列设计引物,以公牛基因组DNA为模板扩增,高效DNA地高辛标记和检测试剂盒制备探针,对X精子(Y精子纯度7％)、Y精子(Y精子纯度93％)和常规精子(Y精子纯度50％)DTT去凝集、蛋白酶K去除鱼精蛋白,杂交.结果表明:在荧光显微镜下可见标本背景清晰,精子头部成蓝色,边界清楚,X精子4.67％ (n =600)有荧光信号,Y精子86.33％(n=600)有荧光信号,常规精子46.17％有荧光信号.实验证明了所选取Sry基因序列为Y精子携带,建立了精子原位杂交方法.     

仔猪哺乳期的生长发育分析

为了研究哺乳期仔猪的生长发育规律,为猪的育种和仔猪培育提供科学依据,对西北农林科技大学教学实验农场种猪场1998-2002年生产的1871头长白种猪和140头大约克种猪的初生重、20日龄体重、60日龄体重(断奶重)的测定结果进行分析,利用累积生长、绝对生长、相对生长、生长系数等度量生长发育速度和强度的指标对长白猪和大约克猪两个品种的仔猪及同一品种内不同性别的仔猪在哺乳期的生长发育速度和强度进行了统计分析。用长白仔猪、大约克仔猪的测定结果对其初生重、生长系数、绝对生长采用单因子二水平组内重复数不等资料进行方差分析。结果表明,长白仔猪的平均初生重比大约克猪低1.6%,经方差分析差异不显著(P>0.05);仔猪在出生后20日龄、60日龄两个阶段长白猪的生长发育速度(绝对生长)、生长强度(相对生长)均高于大约克猪,经方差分析差异均显著(P<0.05);而同一品种内,公猪的平均初生重大于母猪,20日龄时公猪的生长发育速度高于母猪,而至60日龄(即断奶时)时母猪的生长发育速度超过公猪,在20日龄、60日龄时公猪的生长发育强度均小于母猪。     

不同品种母猪哺乳期防御性攻击行为研究

文章通过评价哺乳期母猪防御性攻击行为,比较哺乳期民猪、长白及大白母猪防御性攻击行为差异,分析母猪防御性攻击行为与母性行为关系。在"仔猪遇险"和"仔猪呼救"试验中,民猪母猪防御性攻击行为极显著强于长白和大白母猪(P0.01);在"接近圈栏"试验中,民猪母猪哺乳期前两周防御性攻击行为显著强于大白母猪(P0.05)。长白与大白母猪相比,除在哺乳期第2周防御性攻击有显著差异外(P0.05),其他时间两品种无差异。母猪防御性攻击行为与母猪在仔猪被压时反应存在极显著正相关(P0.01);与母猪姿势转换频率存在极显著负相关(P0.01)。由此可见,民猪母猪哺乳期具有较强防御性攻击行为,母猪姿势转换频率较低,对仔猪被压反应更强烈,减少仔猪被压风险。     

太湖母猪哺乳期需要的消化能

母猪哺乳期每带仔1头所需日粮消化能,不同饲养标准差距甚大.如《猪的营养需要量试行标准》(1978年)中每增减1头仔猪消化能增减1250大卡;《全国猪饲养标准修订草案》(1980年)中哺乳母猪每带仔1头日粮消化能为1095大卡;《太湖猪饲养标准草案》(1980年)中哺乳母猪的生产营养需要,每带仔1头日给1000大卡可消化能.     

精力莱公猪料对母猪繁殖性能的影响试验

为探讨精力莱公猪料对母猪哺乳期的影响,选择胎次相近的经产母猪60头,按每组30头,分试验组、对照组。经试验得出,窝产仔猪头数差异不显著(P0.05);窝产活仔猪数头数差异不显著(P0.05);窝平均出生仔猪头重(0.5kg)差异显著(P0.05);平均出生仔猪窝重(0.5kg)差异极显著(P0.01);窝平均出生仔猪头重(0.5kg)差异显著(P0.05);窝断奶仔猪头数差异极显著(P0.01);平均每窝断奶仔猪重(kg)差异不显著(P0.05);窝平均每头断奶仔猪重(kg)差异不显著(P0.05);试验组与对照组哺乳期仔猪发病数(次)差异显著(P0.05);哺乳仔猪发病死亡数差异不显著(P0.05);母猪哺乳期发病数差异不显著(P0.05);在哺乳期母猪治疗的药费:对照组49.9元比试验组44.2元高5.7元,在哺乳期仔猪治疗的药费:对照组85.6元比试验组73.8元多11.8元。     

猪精子注入输卵管的授精技术

将猪鲜精做体外获能处理,调整精子的浓度为每毫升5×107个精子,活力不低于0.5.受体母猪发情后注射HCG800IU,之后的24～30 h采用手术的方法按3种方式将精子注入生殖道内.缝合创口,常规饲养管理.结果表明:宫管接合部注入的受胎率为100%(5/5),平均产仔7.2头;输卵管伞部注入的受胎率为0(0/5);注入子宫角的受胎率为60%(3/5),平均产仔7.3头.该技术为充分挖掘优秀公猪个体的遗传资源和利用率、为精子介导法构建转基因猪提供了新的技术途径,同时为人类男性不孕症的治疗提供了可供参考的方法.     

母猪乳头直径对仔猪哺乳和生长的影响

本研究测定了25头经产长白母猪的平均乳头直径和仔猪在哺乳期的生长表现.结果表明,直径为1.4～1.5 cm的粗乳头母猪,其所带仔猪固定乳头的时间较长(2.41 d),吸双乳头的仔猪数也较多(2.60头/窝),并与其他两组仔猪(母猪乳头直径分别为1.00～1.20 cm和1.20～1.40 cm)出现了显著的差异(P＜0.05);同时,仔猪在哺乳期增重方面也表现出一定差异(P＞0.05),粗乳头母猪所带的仔猪在21日龄重和45日龄重等性状上普遍较低.相关分析表明,母猪平均乳头直径与21日龄、45日龄窝重两性状间存在较强的相关性(P＜0.05).     

F小体检测奶牛XY精子纯度

为了建立F小体检测奶牛精子纯度的方法,试验采用正交设计检测精子F小体不同的胰酶消化时间（40min,60min,80min）、喹吖因染色浓度（0．4％,0．5％,0．6％）和染色时间（10min,20min,30min）的优化方案,并且对分选X、Y精子及常规精液的F小体进行染色检测,评价分选X、Y精子的纯度。结果显示分选x、Y精子及常规精液在0．25％胰酶消化20min后0．5％喹吖因染色10min的条件下,纯度分别为92．7％、92．5％、48．3％与对应精子的理论纯度（93．3％,93．7％,50％）差异均不显著（P〉0．05）。因此本实验建立的F小体检测法可用于XY精子纯度的检测。     

The possibility of sex control by artificial insemination with centrifuged spermatozoa

The results of experiments carried out at the Wisconsin Agricultural Experiment Station to test the possibility of controlling sex by artificial insemination with centrifuged spermatozoa in rabbits and swine are presented. Microscopic studies of spermatozoa showed dimorphism in the head lengths but separation by centrifuging was not complete. According to the chromosome theory, if the ovum is fertilized by an X-bearing spermatozoon, the resulting individual will contain 2 X chromosomes in its cells and will be female. If the ovumn is fertilized by a Y-bearing chromoxome spermatozoon, the resulting individual will contain and X and a Y chromosome in its cells and be a male. The Y-containing spermatozoa are thought to have smaller heads than the X-containing ones. Centrifugal separation of male- and female-producing spermatozoa was attempted with liquid recovered by means of a catheter from the vagina and uterus of rabbits. Other rabbits were then artificially inseminated with portions of this liquid and sex of young produced was recorded. Many young were produced from centrifuged spermatozoa and many from spermatozoa exposed to low temperatures for periods up to 24 hours. Modification of sex ratios was not significant. This investigation failed to show a practical method of controlling sex ratios among the offspring of higher animals.     

杂交猪繁殖性能的相关与回归分析

为合理调整猪群生产结构,最大限度地利用杂种母猪的生产力,利用SPSS 10.0软件中的相关模块,对510头杂交母猪繁殖性状间的相关关系及繁殖性状对胎次的回归关系进行了分析。结果表明:产活仔数(Y2)与总产仔数(Y1)、断奶仔数(Y3)、窝重(Y4)表现强相关,相关系数分别为0.883、0.893和0.845,并且都达到极显著水平(P<0.01),而总产仔数与断奶仔数和窝重也表现较强相关,相关系数分别为0.783和0.796,并且达到极显著水平(P<0.01)。繁殖性状对胎次(X)的回归方程如下:Y1=9.416+1.473 X-0.306 X2,Y2=9.416+1.636 X-0.333 X2,Y3=9.416+1.811 X-0.355 X2,Y4=9.416+4.865 X-0.834 X2。研究为合理利用二元或三元杂交母猪,提高商品猪生产效益提供了科学依据。     

性别对商品猪体尺性状、胴体性能及肉品质的影响

选择体重100 kg左右的商品猪120头,公猪去势,母猪不去势,研究了性别对猪体尺性状、胴体性能及肉品质的影响。结果表明:母猪组的腹围、倒数3~4腰椎膘厚和倒数3~4胸椎膘厚均显著低于公猪组(P<0.05);母猪组的平均膘厚和皮脂率均极显著低于公猪组(P<0.01);母猪组的倒数3~4胸椎肌肉厚度、活体瘦肉率、瘦肉率分别比公猪组提高11.52%(P<0.05)、2.80个百分点(P<0.01)、2.97个百分点(P<0.01);肉质性状母猪组与公猪组间差异不显著。     

抗菌肽对母猪生产性能及仔猪生长性能的影响

为观察抗菌肽对母猪生产性能及仔猪生长性能的影响。试验于母猪预产期前30天开始在饲料中添加0.3%抗菌肽,观察母猪产仔及仔猪的健康状况。结果表明：试验组与对照组相比：死胎率降低了33.3%、木乃伊率降低100%、初生成活率提高6.0 %、初生平均头重提高1.3%、窝平均存活数提高32.1%、断奶成活率提高3.3%、断奶平均头重提高25.1%、平均净增重提高32.8%。说明抗菌肽饲料添加剂可有效提高母猪的生产性能和哺乳仔猪的生长性能。     

乳牛精子细胞核可被精确地分成类似于X,Y精子的两个群体

由于哺乳动物雄性配子(精子)有性染色体的差异,使哺乳动物X、Y精子在质量或密度上存在着微小的差别。因此,长期以来人们试图将两性精子分开,以人的意志控制动物性别,按人类的需要进行畜牧业生产。但是由于精于之间发育上的差异所引起的质量差掩盖了染色质的微弱差异,从而难以达到理想的分离效果。本实验先将两性精子共有的顶体和尾部去掉,以突出X、Y染色质的质量差异,再将精子细胞核在氯化铯密度梯度离心下分成两个核群区带。该实验为X、Y精于分离效果的鉴定提供了一种有效的方法。     

蛋白质螯合铜对母猪繁殖力、仔猪生长性能及血清微量元素水平的影响

试验选用产前4周的长白×大约克母猪72头,随机分成3组。试验共设3个日粮处理：添加100% CuSO₄·5H₂O(对照组)、30%蛋白质螯合铜+70% CuSO₄·5H₂O(30%百乐铜组)和100%蛋白质螯合铜(100%百乐铜组),各日粮处理的Cu含量一致,研究有机微量元素蛋白质螯合铜对母猪繁殖力及其仔猪生长性能的影响。试验分妊娠期(1～28 d)和哺乳期(29～50 d)两阶段。结果表明：(1)日粮添加百乐铜可明显地减少母猪哺乳失重,有利于改善仔猪初生重(P>0.05);30%百乐铜组仔猪断奶重显著高于对照组和100%百乐铜组(P<0.01);(2)百乐铜可提高母猪日粮微量元素的消化率(P>0.05),改善日粮干物质的消化率(P<0.01);(3)100%百乐铜组母猪所产仔猪在14日龄(P>0.05)和21日龄(P>0.05)阶段均呈现血清Zn,Fe,Mn和Cu微量元素水平明显提高,证明母猪日粮添加百乐铜后Cu及其他微量元素的生物利用率得到提高和改善。结果表明：母猪日粮添加有机形式的蛋白质螯合铜——百乐铜可明显地提高仔猪血清微量元素水平,并随仔猪的生长发育,微量元素体况和贮备维持在一个较高的水平上。     

二花脸公猪不同耐冻性精子的蛋白质组学分析

【目的】二花脸猪是我国优良的地方猪种之一,冷冻精液可提高二花脸公猪的利用率,并加强其种质资源保护,但目前生产的二花脸猪冷冻精液基本不能满足生产需要。研究通过分析二花脸公猪不同耐冻性精子的蛋白质组学,以促进二花脸公猪精子耐冻性蛋白质标志物的筛选,从遗传水平分析精子耐冻性的影响因素,为提高精子耐冻性提供参考依据。【方法】通过冻存14头二花脸种公猪的精液,再对冷冻精液的冻后质量进行分析,根据精子冻后活率和冻后活力的高低筛选出耐冻性好和差（good freezability ejaculates, GFE和poor freezability ejaculates, PFE）的公猪各3头,利用串联质谱标记(tandem mass tag, TMT)技术对GFE组和PFE组的精子蛋白进行定量蛋白质组学分析,鉴定出GFE组和PFE组精子中的差异蛋白(differentially abundant proteins, DAPs)。利用GO富集分析对差异蛋白的功能进行注释,利用KEGG富集分析对差异蛋白的生物通路进行注释,通过STRING蛋白质互作数据库进行差异蛋白的互作网络分析并利用Cytoscape...     

添加剂在猪精液冷冻保存中的应用

猪精液的冷冻保存显著影响猪精子的运动学参数,损伤精子质膜、顶体和DNA完整性,降低解冻后精子活率和受精能力.近年来,在以甘油和蛋黄作为冷冻保护剂的基础上,为了有效降低冷冻-解冻对精子的损伤,提高解冻精液的受精能力,研究人员将OEP、抗氧化剂(甲基黄嘌呤、丁羟基甲苯、谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、褪黑素和维生素E等)、2-羟丙基β环糊精以及透明质酸等物质作为添加剂应用于猪精液的冷冻保存,结果表明这些物质在保护精子质膜和顶体完整性,提高解冻后精子活力、活率和受精能力等方面均有显著作用.     

宗地花猪1世代的生长发育研究

[目的]研究宗地花猪1世代在初配前不同性别生长发育的规律性以及性成熟对宗地花猪生长发育的影响。[方法]选择宗地花猪公猪9头、母猪10头,在原生态的饲养条件下进行饲养。从双月开始,以月为阶段,对宗地花猪不同性别的生长发育进行测定,并观察、记录公、母猪性行为的外部表现。[结果]公猪初情期为（94.5±5.2）d,母猪初情为（104.0±4.8）d;在3月龄以前公猪和母猪的累积生长、绝对生长及体尺指标差异较小,3月以后上述指标母猪高于公猪,到6月龄母猪显著高于公猪（P〈0.05）。[结论]宗地花猪1世代属性早熟地方品猪;6月龄母猪的生长发育比公猪强烈,物质积累旺盛,体格较大;性成熟对公猪体重的影响明显高于母猪。