接种晚疫病菌对马铃薯茉莉酸合成关键酶基因表达的影响

以抗晚疫病马铃薯转基因株系DR1、DR3a和晚疫病敏感型野生株系DG为材料,通过半定量RT-PCR法研究了接种晚疫病原菌生理小种89148-9后0、12、24、48、72 h叶片中茉莉酸合成途径关键酶脂氧合酶(Lipoxygenase,LOX)和丙二烯氧合成酶(Allene oxide synthase,AOS)基因的表达情况。结果表明:接种晚疫病原菌后,DR1、DR3a和DG叶片中poaos基因和polox基因的表达量都有不同程度的提高,但转基因株系叶片内基因的表达量高于野生型,且表达量达到峰值的早晚也不同。说明poaos和polox基因参与了马铃薯的抗晚疫病反应,但不同基因在不同马铃薯株系的表达模式不同,这可能是不同马铃薯株系抗、感晚疫病的原因所在。     

4种杀菌剂防治马铃薯晚疫病效果研究

研究4种常用杀菌剂农药对马铃薯晚疫病的防治效果。结果表明:供试的4种杀菌剂对马铃薯晚疫病均有较好的防治效果,68.75%氟吡菌胺和霜霉威悬浮剂1 000倍液、64%噁霜·锰锌可湿性粉剂300倍液、50%烯酰吗啉可湿性粉剂1 500倍液和50%多菌灵可湿性粉剂500倍液施用2次后,平均防治效果分别为77.97%、72.29%、73.19%和63.38%。     

不同杀菌剂处理对马铃薯晚疫病的防治效果分析

为筛选防治马铃薯晚疫病效果好的杀菌剂组合和施药时机,以感病品种Favorita为试材,采用随机区组设计,用不同的杀菌剂组合防治马铃薯晚疫病。结果表明:中化药剂处理、每7d喷药处理和测报模型处理对马铃薯晚疫病均有防治效果,防治效果由高到低依次为测报模型处理,每7d喷药处理,中化药剂处理和对照。     

4种药剂对马铃薯晚疫病的防效研究

4种药剂对马铃薯晚疫病田间防效试验结果表明,4种药剂对马铃薯晚疫病防治均有不同程度的保叶增产效果,其中687.5 g/L银法利悬浮剂800倍液、25%瑞凡悬浮剂1 700倍液对马铃薯晚疫病防效最显著,马铃薯产量均比喷清水增产130%以上,53%金雷多米尔水分散粒剂500倍液、52.5%抑快净水分散颗粒剂1 000倍液效果次之。     

4种新型化学药剂拌种对马铃薯晚疫病的防治效果

选用50%烯酰吗啉可湿性粉剂、69%烯酰·锰锌可湿性粉剂、58%国光牌甲霜·锰锌可湿性粉剂和60%丙森·霜脲氰可湿性粉剂,对马铃薯薯块播前进行药剂拌种处理,观察对马铃薯晚疫病的田间防效。结果表明,4种药剂用量为1.5 kg/hm2时均能不同程度地防治马铃薯晚疫病,其中以69%烯酰·锰锌可湿性粉剂防效最好,折合产量最高;其次是58%国光牌甲霜·锰锌可湿性粉剂、60%丙森·霜脲氰可湿性粉剂,这3种药剂可在生产上推广应用。     

4种药剂对马铃薯晚疫病的田间防效

在庄浪县东北部高寒阴湿区试验观察了72%霜脲·锰锌可湿性粉剂、687.5 g/L银法利悬浮剂、69%烯酰·锰锌可湿性粉剂、50%锰锌·氟吗啉可湿性粉剂对马铃薯晚疫病的田间防效,结果表明,喷施687.5 g/L银法利悬浮剂600倍液平均防效最好,为90.62%,折合产量34 545.5 kg/hm~2,较对照增产18.17%;纯收益24 204.0元/hm~2,较对照增收4 223.0元/hm~2。其次是50%锰锌·氟吗啉可湿性粉剂600倍液,平均防效为89.58%,折合产量33 806.8 kg/hm~2,较对照增产15.65%;纯收益24 232.1元/hm~2,较对照增收4 251.2元/hm~2。而且2种药剂均能增加马铃薯的大中薯率,可在大田生产中推广应用。     

种薯处理对马铃薯晚疫病控病作用研究

本文根据晚疫病菌主要是以菌丝体在块茎中越冬，带菌种薯是病害侵染的初侵染源这一特点，通过对种薯进行药剂处理，明确不同药剂处理种薯对晚疫病的控病效果。     

种薯处理对马铃薯晚疫病的控制作用研究

通过不同药剂、不同处理方式对马铃薯晚疫病防治效力试验,结果表明:75%百菌清可湿性粉剂500倍液均匀喷雾薯块,喷湿后堆积用塑料薄膜覆盖闷2h,摊开晾干后当天播种;72%甲霜灵锰锌500倍液浸种15～20min,捞出晾干后当天播种;64%杀毒矾500倍液对薯块均匀喷雾,喷湿堆积用塑料薄膜覆盖闷2h,摊开晾干后播种,发病株率均较低,且可较大幅度提高马铃薯产量,可以在生产中推广应用。     

4种无公害药剂防治马铃薯晚疫病的效果试验初报

在定西市安定区采用4种无公害药剂进行单施和不同组合交替喷施防治马铃薯晚疫病的效果试验,结果表明,70%安泰生可湿性粉剂1 800 g/hm2、64%杀毒矾可湿性粉剂1 500 g/hm2、72%杜邦克露可湿性粉剂2 025 g/hm2交替喷施3次的防治效果最佳,相对防效达90.26%,比对照增产95.7%;其次为70%安泰生可湿性粉剂1 800 g/hm2、58%宝大森可湿性粉剂1 500 g/hm2、72%杜邦克露可湿性粉剂2 025 g/hm2交替喷施3次,70%安泰生可湿性粉剂1 800 g/hm2、58%宝大森可湿性粉剂1 500 g/hm2、64%杀毒矾可湿性粉剂1 500 g/hm2交替喷施3次,其相对防效分别为87.71%、88.23%,比对照分别增产93.9%、93.1%。     

不同药剂处理马铃薯种薯对晚疫病的影响

通过4种药剂处理马铃薯种薯对晚疫病的影响试验,结果表明:用75%百菌清可湿性粉剂500倍液浸种20min后播种的防效最好,为5.8%;64%杀毒矾可湿性粉剂500倍液处理种薯的防效次之,为3.0%;50%多菌灵可湿性粉剂500倍液浸种的防效最差,为1.1%。     

表达 HarpinEa基因的转基因马铃薯的晚疫病抗性分析

 通过根癌农杆菌介导,用Harpin_Ea基因转化马铃薯四倍体栽培种大西洋（Atlantic）,获得107个马铃薯转化株系。经过卡那霉素的抗性鉴定和PCR分子检测,有59株PCR检测成阳性,占所有转化植株的55.14%.实验对部分转基因植株进行室内抗病性评价,从24个PCR阳性株系中筛选到9个株系的抗病性与对照相比有显著差异(P<0.05),其中7株的抗病性与对照相比差异极显著(P<0.001)。结果初步表明Harpin_Ea基因已整合到马铃薯的基因组中并得到表达,提高了植株的晚疫病抗性。     

RT-PCR法检测GTL2基因在牛组织中的表达

[目的]检测GTL2基因在牛组织中的表达情况。[方法]应用RT-PCR技术对GTL2基因在牛的心、肝、脾、肺、肾和大脑组织中的表达状态进行分析。[结果]在牛被检测的6个组织中,GTL2基因均有表达,且在各个组织中的表达量没有明显差异。[结论]为研究GTL2基因在牛组织中的调控作用奠定了基础。     

马铃薯类糖基转移酶基因StKOB1的克隆与功能分析

糖基转移酶通过参与多种物质糖基化修饰在植物抗逆胁迫方面发挥重要作用。为了解糖基转移酶基因在马铃薯晚疫病抗性中的作用,从马铃薯栽培种‘合作88’中克隆类糖基转移酶基因StKOB1,分析了该基因的表达特性及功能。通过实时定量PCR技术,分析StKOB1受晚疫病菌(Phytophthora infestans)、水杨酸、茉莉酸甲酯及乙烯利诱导表达模式,利用基因瞬时表达和病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)技术在本氏烟草中超量表达和沉默该基因,然后进行晚疫病抗性鉴定。结果表明,StKOB1蛋白结构域包含1个跨膜结构域(27～47 aa),1个糖基转移酶功能域(115～381 aa)。StKOB1基因受晚疫病菌和茉莉酸甲酯诱导表达。瞬时超量表达StKOB1基因未能增强植物抗病性,但与对照植株相比,Nb KOB1沉默植株的抗病性显著降低。上述结果说明StKOB1参与晚疫病抗性调控。     

4种药剂对马铃薯晚疫病的防效研究简

4种药剂对马铃薯晚疫病田间防效试验结果表明,4种药剂对马铃薯晚疫病防治均有不同程度的保叶增产效果,其中687．5g/L银法利悬浮剂800倍液、25％瑞儿悬浮剂1700倍液对马铃薯晚疫病防效最显著,马铃薯产量均比喷清水增产130％以上,53％金雷多米尔水分散粒剂500倍液、52．5％抑快净水分散颗粒剂1000倍液效果次之。     

呼和浩特地区马铃薯晚疫病的预测

作者经过20多年的试验确定了呼和浩特地区马铃薯晚疫病短期和长期预测方法。短期预测试验中在吸收了前人工作成果的同时,定期定时地观察了信号地、宅旁院地和育种试验地,长期预测的方程为y=31.4E-71.2。采用以上方法准确地预测了呼和浩特地区马铃薯晚疫病的发生。     

Cloning of Proteinase Inhibitor Gene StPl in Diploid Potato and Its Expression Analysis

A full-length cDNA of proteinase inhibitor gene with completed open reading frame of 116 amino acids was cloned from Ralstonia solanacearum （Rs） resistant potato leaves using the rapid amplification of cDNA ends （RACE） method and designated as StPI. BLAST search against NCBI showed that the StPI gene shared 89% identity with potato proteinase inhibitor I precursor in nucleotide and 74% in amino acid. Analysis of semi-quantitative RT-PCR indicated that this gene was induced by Rs as well as up-regulated by jasmonic acid （JA）. The StPI gene expression reached the highest level during 6-12 h post Rs-inoculation or JA-treatment, and then leveled off. Moreover, this gene was strongly induced by JA and its mRNA accumulation increased more quickly than that of Rs-inoculation. The StPI gene may play a role in potato resistance against Rs. The induction of StPI by Rs invasion may have a similar signal transduction pathway with JA treatment.     

Cloning of Proteinase Inhibitor Gene StPI in Diploid Potato and Its Expression Analysis

A full-length cDNA of proteinase inhibitor gene with completed open reading frame of 116 amino acids was cloned from Ralstonia solanacearum (Rs) resistant potato leaves using the rapid amplification of cDNA ends (RACE) method and designated as StPI. BLAST search against NCBI showed that the StPI gene shared 89% identity with potato proteinase inhibitor Ⅰ precursor in nucleotide and 74% in amino acid. Analysis of semi-quantitative RT-PCR indicated that this gene was induced by Rs as well as up-regulated by jasmonic acid (JA). The StPI gene expression reached the highest level during 6-12 h post Rs-inoculation or JA-treatment, and then leveled off. Moreover, this gene was strongly induced by JA and its mRNA accumulation increased more quickly than that of Rs-inoculation. The StPI gene may play a role in potato resistance against Rs. The induction of StPI by Rs invasion may have a similar signal transduction pathway with JA treatment.     

马铃薯蛋白激酶基因StPK1启动子的克隆及活性分析

 【目的】研究马铃薯蛋白激酶基因StPK1,为在马铃薯抗病反应中的功能提供证据。【方法】利用 TAIL-PCR技术,从马铃薯晚疫病水平抗性、垂直抗性和感病等3种材料中,分别克隆了该基因的启动子区域。此外,将从水平抗性材料中克隆得到的启动子与GUS连接构建植物表达载体,通过农杆菌介导的遗传转化法转化本氏烟(Nicotiana benthamiana),将得到的转基因烟草分别用水、晚疫病原菌或水杨酸(SA)溶液处理,并进行表达活性分析。【结果】3个启动子长度分别为922、929和922 bp,均具有TATA-box和CAAT-box以及多种与抗病反应和基因时空表达有关的元件,而三者的主要差异是个别碱基的不同。GUS组织化学染色表明,用晚疫病原菌或SA处理的转基因烟草被染成蓝色。【结论】StPK1启动子为有活性的启动子,且为病原和SA诱导型启动子。     

人肥胖基因大肠杆菌表达载体的构建及其诱导表达

通过设计1对PCR引物（上游引物,5-′GCCATATGGTGCCGATCCAAAAAG-3′,下游引物,5-′GAGAATTCCCTTCAAGGCCTCAG-3′）,采用PCR方法扩增出人肥胖基因编码成熟肽的核苷酸序列,将扩增产物从琼脂糖凝胶上回收后插入测序载体pMD-18-T后进行了核苷酸序列测定。将经EcoRⅠ和NdeⅠ双酶切后的扩增产物插入经EcoRⅠ和NdeⅠ双酶切后的大肠杆菌表达载体pET-28a（＋）,构建了可在大肠杆菌中高效表达人瘦蛋白的表达载体。将表达载体转化入大肠杆菌菌株BL21,经IPTG诱导后进行SDS-PAGE检测,结果表明构建的人肥胖基因表达载体得到高效表达,重组蛋白占到菌体总蛋白的31.2%。