伊维菌素脂质体的急性毒性试验

为了解伊维菌素脂质体的毒性，将伊维菌素脂质体给试验小鼠按一定浓度一次腹腔注射，连续观察7-14d，用改良寇氏法计算半数致死量（LD50）及95％的可信限，并在同一方法和条件下与伊维菌素注射剂相比较。结果表明，伊维菌素脂质体（脂质体组）的LD50（92．1516mg／kg．BW）显著高于伊维菌素注射剂（原药组）的LD50（24．2493mg／kg．BW），是原药组的3．80倍。证明伊维菌素脂质体的毒性更低，刺激性更小，安全范围更广。     

不同组份对猪生长激素脂质体化学稳定性的影响

本文通过逆相蒸发法制备猪生长激素（PST）脂质体，重点是探讨不同组份原料对PST脂质体化学稳定性的影响。经过试验论证，加入抗氧化剂后，包封率明显提高，而且加BHT的效果比加维生素E（VE）的效果要好。通过对大豆卵磷脂和蛋黄卵磷脂的对比实验，证明了蛋黄卵磷脂所制脂质体效果较好，通过测定酸价，丙二醛含量的变化也证明了这一点。为PST脂质体的临床应用做初步的研究。     

禽传染性支气管炎脂质体、壳聚糖/DNA疫苗免疫效果比较研究

将制备的禽传染性支气管炎脂质体／DNA疫苗和壳聚糖／DNA疫苗，分别以肌肉注射（i．m）和滴鼻、点眼（i．n）两种途径免疫健康雏鸡，以裸DNA疫苗为对照，采用流式细胞仪（FACS）及间接ELISA分别对免疫鸡外周血中CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞数及特异性IBV血清抗体IgG的动态变化进行检测，并于免疫后35d进行攻毒，结果显示：（1）CD4^＋T淋巴细胞数，所有试验组在免疫后1～3周左右均高于对照组（P〈0．01或P〈0．05），各试验组间，脂质体／DNA疫苗肌肉注射途径在免疫后10d后高于壳聚糖／DNA疫苗，但仅在第15天差异显著（P〈0．05），而滴鼻、点眼途径则相反；（2）所有试验组CD8^＋T淋巴细胞数仅在免疫后第15天与对照组差异显著（P〈0．05），各试验组间无显著差异；（3）所有组间特异性IBV血清抗体IgG动态变化差异不显著；攻毒后脂质体／DNA疫苗肌肉注射组无鸡只死亡，其他试验组有4％或8％死亡率，均显著低于对照组（12％）。由此可见，脂质体和壳聚糖均为DNA疫苗良好的佐剂或载体，且脂质体／DNA疫苗肌肉注射的免疫效果优于壳聚糖／DNA疫苗。     

阳离子脂质体包裹CaG对猪瘟猪肺疫猪丹毒三联疫苗免疫效应的影响

对3组分别注射猪瘟猪肺疫猪丹毒三联疫苗（简称三联疫苗），CpG十三联疫苗，阳离子脂质体包裹CpG十三联疫苗的小鼠细胞和体液免疫反应进行了比较分析。结果显示，阳离子脂质体包裹CpG十三联疫苗免疫小鼠脾细胞增殖反应明显增强，白细胞介素-2（IL-2）诱生活性和免疫细胞数量，血液IgG含量较仅注射三联疫苗的小鼠显著增加。说明阳离子脂质体包裹CpG能增强小鼠对三联疫苗的体液和细胞免疫应答反应。使疫苗的免疫原性增强。     

利福平脂质体在小鼠体内的组织分布

用微生物测定法对利福平脂质体在小鼠体内各组织中的药物浓度进行测定，研究了给药后组织中的药物浓度及分布情况，并将其与游离的利福平作比较。结果表明，小鼠单剂量静脉注射１０mg/kg体重游离的或脂质体利福平后，测定５min及０．５、１．０、１．５、２．０和６．０h各组织中药物浓度，以肾（游离型）和脾（脂质体型）浓度为最高。与游离的药物相比，利福平脂质体明显提高了在肝、脾、肺、血清中的药物分布，降低了在肾中的分布，表明利福平脂质体具有器官靶向作用。     

青霉素脂质体对耐药金黄色葡萄球菌的抑菌效果观察

本实验在国内首次观察了青霉素脂质体对耐药金黄色葡萄球菌的抑菌效果及其对外源性β－内酰胺酶的耐受性。结果：青霉素脂质体对耐药菌的最低抑菌浓度（ＭＩＣ）为２４０ＩＵ／ｍｌ，最低杀菌浓度（ＭＢＣ）为２６０ＩＵ／ｍｌ，游离青霉素的ＭＩＣ为１２００ＩＵ／ｍｌ，ＭＢＣ为１６００ＩＵ／ｍｌ；空白脂质体几乎无抑菌作用。青霉素脂质体对外源性β－内酰胺酶具有很强的耐受性。结果表明，青霉素制成脂质体制剂后可大大提高其对耐药菌株的抗菌能力，原因之一是它能保护青霉素免受β－内酰胺酶的水解破坏。     

生长激素（PST）脂质体的药物代谢动力学研究

本文研究了生长激素（PST）脂质体在仔猪体内的药物代谢动力学，分析了血浆中生长激素浓度时间的变化曲线，确定其释药模型为单室模型，求出了各项动力学参数，揭示PST脂质体的缓释效果显著，缓释时间长达7d以上。     

免疫用脂质体不同制备方法的比较研究

本研究对应用薄膜分散和反相蒸发二种不同方法制备的、包封有鸡新城疫（ＮＤ）抗原的脂质体进行了形态鉴定和包封率测定。结果表明，薄膜分散法制备的为复层脂质体，其对新城疫抗原的包封率为２０．８％；反相蒸发法制备的为大单层脂质体，其包封率为３３．８％。由于大单层脂质体的包封率高，再加上其体积和包封容积大，因此是一种比适合包封颗粒性大分子抗原物质的脂质体。     

3种介导猪NR2F2基因转染PK15细胞方法的比较研究

试验旨在研究3种转染方法对猪肾上皮细胞（PK15）的转染效率，为以PK15细胞为模型研究外源基因的功能提供参考。本研究以PK15细胞为研究对象，用脂质体、电穿孔、慢病毒3种转染方法转染后，在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达，采用实时荧光定量PCR检测EGFP和NR2F2基因的表达情况，采用CCK-8检测细胞存活率，进而比较3种方法的转染效果。结果显示，转染PK15细胞后，电穿孔和慢病毒方法转染效率极显著高于脂质体（P<0.01），但电穿孔方法和慢病毒方法之间差异不显著（P>0.05）；EGFP和NR2F2基因的实时荧光定量PCR结果显示慢病毒方法效果最好，脂质体方法较差，与细胞转染效率基本一致；CCK-8结果显示，电穿孔转染后细胞存活率最低，极显著低于对照组（P<0.01），脂质体方法显著低于对照组（P<0.05），慢病毒方法与对照组间差异不显著（P>0.05）。综合考虑转染效率及细胞活性，本研究认为慢病毒转染方法最适合转染PK15细胞，为今后高效转染PK15细胞提供了理想的方法。     

氧氟沙星脂质体的制备及其抑菌实验的研究

为了研究高度靶向性和严格选择性的新型抗感染药物，本文采用操作简单的二次乳化法实验制备了氧氟沙星（OFL）脂质体，紫外分光光度法检测了OFL含量及包裹率，并观察了OFL脂质体对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的体外抑菌实验和OFL脂质体对人工感染大肠杆菌小鼠的体内抑菌实验。结果表明，该法制得的脂质体包裹率平均为20.8%，粒径平均为3－5μm；脂质体和游离药物相比，对耐OFL大肠杆菌和敏感大鼠杆菌的MIC值均有所提高，是游离药物的2倍。OFL脂质体对实验感染小鼠的体内抑菌作用明显优于同等剂量的游离OFL。     

气雾剂在兽医临床中的应用

气雾剂在兽医临床中的应用罗延红（西北农业大学兽医系陕西相陵，７１２１００）近年来，随着国内兽医药事业的发展，兽药领域先后研制开发了多种新型药剂，如丙硫咪唑脂质体、三氮脒脂质体、丙硫苯咪唑瘤胃控释剂、埃维菌素、硫苯唑控释长效丸剂以及杀虫涂膜剂等，但有关...     

精氨酸霉形体和莱氏无（需）胆甾醇霉形体在鸡胚细胞内增殖的比较观察

将精氨酸霉形体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａａｒｇｉｎｉｎｉ，简称ＭＡ）和莱氏无（需）胆甾醇霉形体（Ａｃｈｏｌｅｐｌａｓｍａｌａｉｄｅａｗｉｉ，简称ＡＬ），分别接种于鸡胚细胞，电镜下观察结果如下：（１）此２种霉形体在形态、细胞内分布、增殖形式和吞噬功能以及对培养细胞的选择性等方面是相同的；（２）此２种霉形体引起培养细胞的病理学过程不同。接种ＭＡ的鸡胚细胞，早期即出现髓膜样结构和脂质体等退行性变化，晚期在细胞质内才能见到空泡出现；而接种ＡＬ的鸡胚细胞，早期即可出现细胞质内的空泡化现象，晚期细胞质内才可见到髓膜样结构和脂质体。     

生长激素（PST）脂质体对育肥猪生产性能的影响

选择18头体重20kg左右的太湖二元杂交小公猪，分成A、B、C3组，每组6头。A组为对照组；B组颈部肌肉注射生长激素（PST）4ml/头；C组颈部肌肉注射PST脂质体28mg/头；结果表明PST与PST脂质体对育猪的生产性能影响较为接近，与对照组相比，均可显著提高育肥猪的日增重，饲料报酬，改善猪的胴体品质，说明PST脂质体可代替PST用于生产实践。     

鸡白细胞介素18成熟蛋白基因真核表达质粒的构建及其在鸡胚成纤维细胞中的表达

通过PCR方法自含鸡白细胞介素18（Chicken interleukin-18，ChlL-18）成熟蛋白（mature ChIL-18，mChIL18）基因的克隆质粒中扩增mChlL-18基因，并将其克隆到真核表达载体pcDNA3．1／V5-His-TOPO中。阳性克隆鉴定后，在脂质体作用下转染鸡胚成纤维细胞（CEF），通过问接免疫荧光试验（IFA）检测到了mChIL-18在CEF中的表达。     

CTAB脂质体介导鸡新城疫病毒核酸免疫研究

用CTAB／DOPE脂质体包裹新城疫病毒血凝素神经氨酸酶（HN）基因的真核表达质粒pcHNM免疫5周龄仔鸡，1周后免疫鸡血清中的特异性HI抗体开始升高，至第6周空白对照组抗体2．06，裸DNA免疫鸡4．09，脂质体DNA免疫组为5．20；此时用新城疫强毒F48E9攻击，未免疫组鸡的存活率为27．28％，裸DNA免疫组81．82％，CTAB脂质体DNA免疫组100．00％，表明该质粒DNA被脂质体包裹后，不仅增加了动物的特异性抗体产生能力，而且增加了动物对新城疫强毒的抵抗力。     

中药治疗疾病的机制：脂质体与基因治疗

中药治疗疾病的机制——脂质体与基因治疗杨瑾薛飞群（甘肃省医药集团公司兰州７３００３０）（中国农业科学院中兽医研究所）到目前为止，中医对疾病的治疗仍以中药汤剂为主。大多数方剂是以动、植物成分为主。不同中药方剂中的动植物经相应的不同方法体外干燥后，一般可...     

禽流感HA基因疫苗脂质体的制备及其理化性质

用改良的逆相蒸发法制备了Ｈ７亚型禽流感保护性抗原血凝素（ＨＡ）基因重组质粒ｐＳＶＨ７脂质体。电镜观察表明,该脂质体多呈球形的单层或多层结构,脂质体粒径分布均匀,粒径范围２０～７００ｎｍ,平均粒径１６３ｎｍ,主要粒径分布位于５０～２００ｎｍ（８４．８０％）。重组质粒ＤＮＡ在脂质体的制备过程中保持了稳定性,并能抵抗ＤＮＡ酶的水解破坏作用。吸收光谱表明,在２４８ｎｍ及２６８ｎｍ处脂质体有２个特征吸收峰,ＤＮＡ的存在不改变吸收峰的位置,但能增加吸收峰的强度。     

脂质体的作用机理及在兽医上的应用

脂质体是磷脂分散在水中形成的具有类似生物膜结构的双分子小囊。近年来，随着生物技术的迅猛发展以及脂质体制备工艺的逐步完善，脂质体的研究方兴未艾。我国兽医上，脂质体技术的应用主要表现在以下几方面：１）作为抗寄生虫药物的载体：文献报道有吡喹酮、碘醚柳铵、左旋咪唑、丙硫苯咪唑等脂质体的制备、药代动力学、药效学等的研究犤１～３犦。２）作为免疫佐剂：张春杰等报道了免疫用脂质体的不同制备方法以及作为新城疫疫苗的佐剂的研究；刘湘涛等则报道脂质体对禽多杀性巴氏杆菌亚单位抗原的免疫增强作用。３）其它：查红波报道了肿…     

2002年相关刊物兽药与饲料添加剂重要论文题录

贝尼尔脂质体和贝尼尔注射剂的急性毒性比较试验／李万坤，史万贵，潘永红等（甘肃省动物防疫总站）／／中国兽医寄生虫病．－２００２，１０（１）．－９～２２犬用复合麻醉剂QFM合剂组方的研究／刘焕奇，王洪斌，刘云等（东北农业大学动物医学院外科教研室）／／黑龙江畜牧兽医．－２００２，（１）．－７～９霍乱毒素B亚单位免疫佐剂的研究进展／蒋玉文（中国兽医药品监察所），朱平（解放军军需大学），郑明（中国兽医药品监察所）／／中国兽药杂志．－２００２，３６（１）．－２２～２６单诺沙星对大肠杆菌和金葡球菌的体外抗菌后效…     

鸡胚精原细胞体外转染EGFP方法的比较

以增强型绿色荧光蛋白（Enhanced green fluorescent protein,EGFP）为报告基因体外转染鸡胚胎精原细胞（Chicken embryonic spermatogonial cells,CESCs）,比较磷酸钙、脂质体（梭华-Sofast）、电穿孔3种方法转染EGFP的效率,以获得高效的体外转染方法。本研究分离孵化16d的鸡胚睾丸,获取CESCs,体外培养和传代扩增,传至第2代后进行碱性磷酸酶（AKP）活性和阶段特异性表面抗原-1（Stage specific embryonic antigen-1,SSEA-1）免疫荧光鉴定。运用磷酸钙、脂质体（梭华-Sofast）、电穿孔3种方法体外转染第2代CESCs,荧光细胞计数法分析转染效率。结果表明：与磷酸钙法、脂质体法相比,电穿孔法可获得更高的细胞成活率和转染率（68％ vs 39％、65％,19．70％ vs 2．92％、9．73％）,差异显著（P〈0．05）。因此得出,电穿孔法是将外源基因导入鸡胚精原细胞的适宜方法。