影响马氏珠母贝植核育珠绩效的关键技术研究

本研究在海水珍珠养殖核心区域流沙湾,通过设置不同术前处理方法、不同配液进行小片保养和不同模式育珠三个实验,比较其对马氏珠母贝植核育珠绩效的影响。术前处理方法分别为抑制性腺、温度差促排、盐度差促排和对照组(A_1、A_2、A_3、AD);小片保养分别为配液1号、配液2号、配液3号、和对照组(B_1、B_2、B_3、BD);育珠模式分别为海区休养与育珠、池塘休养与育珠和池塘休养与海区育珠(C_1、C_2、C_3)。经休养、育珠结束后,比较其育珠绩效相关指标值的差异。实验结果显示:实验Ⅰ中各术前处理组间育珠贝的育珠绩效值差异不具有统计学意义(P0.05),而各处理组(A_1、A_2、A_3)育珠贝的成活率、留核率、成珠率、优良珠率和育珠绩效值均显著高于对照组(AD)(P0.05),其中温度差促排组(A_2)具有最高的育珠绩效值;实验Ⅱ中各不同配液保养组间育珠贝的育珠绩效值差异不具有统计学意义(P0.05);而通过细胞小片保养各组(B_1、B_2、B_3)的育珠绩效值都显著高于对照组(BD)(P0.05)。其中配液1号组(B_1)具有最高的育珠绩效值;实验Ⅲ中各不同育珠模式组间育珠贝的成活率和留核率:(C_1)与(C_2)之间差异不具有统计学意义(P0.05),而和(C_3)之间存在统计学意义;育珠贝的成珠率、优良珠率和育珠绩效值:(C_1)与(C_3)之间差异不具有统计学意义(P0.05),而和(C_2)之间存在统计学意义(P0.05),;其中池塘休养与海区育珠组(C_3)具有最高的育珠绩效值。     

鱼呼肠孤病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定

采用杂交瘤技术,用浓缩的鱼呼肠孤病毒(Fish Reovirus FRV)免疫BALB/C小鼠,取脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/O细胞融合,经筛选克隆,共获得B_7、C_6.D_9.G_7、E_4、F_5,F_7七株分泌抗鱼呼肠孤病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株。这七株细胞经液氮反复冻存、复苏及连续培养,可稳定分泌抗FRV的单克隆抗体.这七株杂交瘤细胞的染色体数为90～98条,明显高于SP2/O细胞(71条).分泌的单克隆抗体经琼脂双扩散法证实分别属于小鼠r球蛋白中的IgG_1、IgG_(2a)和IgG_(26)亚类.ELISA测得腹水抗体滴度1:2万～1:40万,病毒中和试验显示C_6、G_7有中和作用,滴度达1:64.     

刺参幼参冬季陆上养殖试验

采用L_9(3~4)正交试验设计,探讨了温度、密度、饵料、药物浓度诸因子对冬季陆上养殖幼参生长的影响。结果表明:温度、密度、饵料各因子对幼参日增重有极显著影响,药物浓度无显著影响。极差和方差分析结果表明:温度为14℃,密度为100头/m~2、饵料为8802、药物浓度为2.5ppm最好,即A_2B_1C_2D_3可作为幼参养殖的最佳组合。     

渔业数据失真对两种非平衡剩余产量模型评估结果的影响比较

为了研究渔业数据失真对两种非平衡剩余产量模型评估结果的影响,以南大西洋长鳍金枪鱼渔业产量和单位捕捞努力量渔获量(CPUE)数据作为基础数据,加入5种不同程度[变异系数(CV)=1%、5%、10%、20%和30%]的随机误差,模拟了(1)无数据失真,(2)仅产量数据失真,(3)仅CPUE数据失真,(4)产量和CPUE数据均失真等4种情况。利用基于ASPIC的非平衡剩余产量模型(ASM)和基于贝叶斯状态空间建模方法的非平衡剩余产量模型(BSM)分别评估了最大可持续产量(MSY)、B_(MSY)、F_(MSY)、B_(2011)/B_(MSY)、F2011/F_(MSY)等5种生物学参考点和管理指标。结果显示,在无数据失真情况下,ASM和BSM评估的MSY分别为2.866×10~4 t和2.836×10~4 t,B_(2011)/B_(MSY)分别为1.366和1.324,F2011/F_(MSY)分别为0.627和0.667,均相差不大,表明该渔业目前状态良好,ASM得到了较大的B_(MSY)(31.48×10~4 t)和较小的F_(MSY)(0.091);数据失真对ASM评估的B_(MSY)和F_(MSY)分别产生了严重的过低估计和过高估计,且CPUE数据失真产生的影响要比产量数据失真大;随着随机误差的增大,BSM评估的生物学参考点和管理指标的绝对百分比偏差有增大趋势;与ASM相比,BSM能够更好地处理渔业数据中存在的随机误差,除了MSY以外,BSM评估的生物学参考点和管理指标绝对百分比偏差均要比ASM的评估结果低,尤其是B_(MSY)和F_(MSY)。因此,在使用存在较大随机误差的渔业数据进行资源评估时,BSM具有一定的优势。     

点带石斑鱼不同组织同工酶的研究

运用聚丙烯酰胺垂直梯度凝胶电泳法对点带石斑鱼7种组织（眼睛、肌肉、心脏、肝脏、肾脏、尾鳍、脾脏）的4种同工酶（EST、SOD、LDH、MDH）进行了初步研究，并对4种同工酶的同工酶位点及其酶谱表型进行了分析。结果表明，点带石斑鱼的4种同工酶都具有不同程度的组织特异性：EST由4个基因位点编码，具有多态现象；肌肉SOD与其它组织SOD的差异最明显；眼睛LDH与其他组织LDH的差异最明显；MDH具有线粒体型（m-MDH）和上清液型（s-MDH）两种类型。     

正交实验优化鱼类保肝中药复方的提取工艺

研究影响鱼类保肝中药复方提取效果的各种因素,确定最佳提取工艺。运用单因素试验考察溶剂倍量(A)、浸泡时间(B)、煎煮时间(C)和煎煮次数(D)4个因素对中药复方中君药丹酚酸B含量的影响。采用正交实验法,对水煎煮工艺条件进行优选。在所考察的4个因素中,对中药复方提取效果的影响程度依次为:CADB,即煎煮时间溶剂倍量煎煮次数浸泡时间,确定最佳水煎煮工艺为A_2B_1C_1D_2,即10倍水量,浸泡0.5 h,煎煮时间为0.5 h,煎煮2次。本研究优选工艺设计合理,稳定可行,可为鱼类保肝药物的开发提供参考。     

冬季大别山不同生境的绿太阳鱼肌肉营养组成对比

为了解冬季绿太阳鱼(Lepomis cyanellus)肌肉营养成分的空间差异,分析并比较了2016年12月采集的大别山区三个样地的绿太阳鱼肌肉营养成分。利用相似性百分比(SIMPER)分析、非参数多变量排序(NMS)和聚类分析(Cluster analysis),结果显示:大别山区栖息环境(水库、溪流)对绿太阳鱼肌肉营养成分影响较大;随后t-test的结果显示同一样地溪流环境中的绿太阳鱼丰满度K,肌肉氨基酸组成中的脯氨酸Pro、甘氨酸Gly、蛋氨酸Met、组氨酸His、精氨酸Arg、总脂肪,以及脂肪酸酸组成中棕榈酸(C_(16∶0))、硬脂酸(C_(18∶0))、油酸(C_(18∶1))均高于水库中绿太阳鱼的含量;同时水库环境中绿太阳鱼肌肉中的花生一烯酸(C_(20∶1))、二十二碳二烯酸(C_(22∶2))、二十二碳六烯酸(C_(22∶6))、十七碳一烯酸(C_(22∶6))、花生二烯酸(C_(20∶2))、花生三烯酸(C_(20∶3))、花生四烯酸(C_(20∶4))、二十二碳四烯酸(C_(22∶4))、二十二碳五烯酸(C_(22∶5))等不饱和脂肪酸高于下游溪流绿太阳鱼肌肉中的水平。     

鄱阳湖南矶山自然保护区鲶、黄颡鱼和乌鳢的同工酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对鲶、黄颡鱼和乌鳢的肌肉、脑、心脏和肾4种组织的酯酶(EST)、乳酸脱氢酶(LDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)进行了比较分析.结果显示,鲶、黄颡鱼和乌鳢的4种组织中都存在EST、LDH和MDH同工酶,它们有明显的组织特异性:同种鱼的不同组织中存在不同的条带,不同组织的酶活性也不同.EST在鲶和黄颡鱼4种组织中都有很高活性,在乌鳢心脏中的活性最高.LDH和MDH在3种鱼肌肉和心脏的活性均明显高于脑和肾.     

草鱼肠道拮抗性芽孢杆菌的冻干保护剂优化研究

自草鱼肠道内提取的病原拮抗性芽孢杆菌能有效提高草鱼免疫能力,从而促进草鱼的健康生长。为提高本试验病原拮抗性芽孢杆菌保存活力,采用L_9(3~4)正交试验法,以病原拮抗性芽孢杆菌冻干保护剂在冷冻干燥后菌体成活率为考察指标,对麦芽糊精、甘氨酸和海藻糖3个变量因素进行考察。结果表明,当以冻干后菌体成活率为考察指标时,各因素对菌体冻干粉的保存活性作用影响为麦芽糊精甘氨酸海藻糖,3种赋形剂对菌体保护最佳配方为A_1B_1C_3,即2%麦芽糊精,0.5%甘氨酸,6%海藻糖。通过该试验方案得到了病原拮抗性芽孢杆菌冻干保护剂的最优配方。     

崇明东滩南部大弹涂鱼食源的稳定同位素分析

利用稳定同位素技术,对崇明东滩南部湿地4、5月份采集到的大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)的食源进行初步研究。结果显示,大弹涂鱼δ13C和δ15N值分别为-19.28‰~-14.59‰,7.96‰~10.13‰。利用同位素混合模型(Iso Source)计算包括白茅(Imperata cylindrical)、芦苇(Phragmites australis)、互花米草(Spartina alterniflora)、糙叶苔草(Carex scabrifolia)、底栖微藻、颗粒有机物和沉积质在内的7种初级生产者对大弹涂鱼碳源食源贡献的可能范围及分布频率,结果表明白茅、芦苇、互花米草、糙叶苔草、底栖微藻、颗粒有机物和沉积质对大弹涂鱼食源的可能贡献范围分别为0%~69%、0%~30%、0%~72%、0%~30%、0%~76%、0%~44%和0%~47%。利用后整合方法计算得到C_3植物(芦苇和糙叶苔草)、藻类及有机质(底栖微藻、颗粒有机物和沉积质)和C4植物(白茅和互花米草)三大类生产者对大弹涂鱼食源的贡献情况,结果表明C_3植物、藻类及有机质和C_4植物对大弹涂鱼春季食物贡献范围分别为0%~30%、0%~76%和24%~72%,中值分别为15%、38%和48%,表明C_4植物是大弹涂鱼不可缺少的食源。同时,根据大弹涂鱼的δ15N值,得出大弹涂鱼属于2.07~2.65级营养级,为次级消费者。     

雅鲁藏布江中游6种裂腹鱼乳酸脱氢酶同工酶的比较研究

采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对雅鲁藏布江中游6种裂腹鱼(尖裸鲤Oxygymnocypris stewartii、拉萨裸裂尻鱼Schizopygopsis younghusbandi、巨须裂腹鱼Schizothorax macropogon、拉萨裂腹鱼S.waltoni、双须叶须鱼Ptychobarbus dipogon和异齿裂腹鱼S.o'connori)的心肌、肌肉、肝脏、肾脏和晶状体5种组织的LDH(乳酸脱氢酶)同工酶进行比较分析。结果表明LDH同工酶的表达具有明显的组织和种间差异性。尖裸鲤、拉萨裸裂尻鱼和双须叶须鱼由LDH-A、LDH-B和LDH-B1基因编码,5种组织中分别检测到16、13和9条酶带;拉萨裂腹鱼和巨须裂腹鱼由LDH-A、LDH-B和LDH-C基因编码,5种组织中分别检测到9和6条酶带;异齿裂腹鱼由LDH-A和LDH-B基因编码,5种组织中检测到6条酶带。根据酶谱特征对其生物演化进行了探讨,发现尖裸鲤和拉萨裸裂尻鱼特化程度最高,其次是双须叶须鱼,巨须裂腹鱼、拉萨裂腹鱼和异齿裂腹鱼特化程度最低,与形态学特征所划分的三个类群吻合。     

赣昌鲫(日本白鲫♀×兴国红鲤♂)及其双亲同工酶的研究

采用不连续聚丙酰胺凝胶电泳法,研究了赣昌鲫(Carassius cuvieri♀×Cyprinus carpio var. singuonensis ♂)及其双亲的肌肉、肝脏、肾脏、心脏、脑、晶状体6种组织在超氧化物歧化酶(SOD)、苹果酸脱氢酶同工酶(MDH)、乳酸脱氢酶同工酶(LDH)、酯酶(EST)四种同工酶酶谱表达上的遗传差异。结果显示:赣昌鲫的SOD酶谱表达在6种组织中与母本一致;心脏、肝脏、肾脏的MDH表达酶带数与母本相同,且具偏母遗传特性,肌肉的MDH表达谱带数与父本肌肉相同,具偏父遗传特性;LDH、EST在各组织中的酶带表达形式则多数特征偏向于父本,部分与母本相似;LDH同工酶的表达显示出新杂种酶带特异性,EST同工酶在肾脏中也表达了自身特有的杂种酶带。结果表明,属间杂交的后代遗传物质上也存在着变异,存在可选育的性状。     

卵形鲳鲹不同组织同工酶表达的差异

运用聚丙烯酰胺垂直梯度凝胶电泳法对卵形鲳鲹（Trachinotusovatus）6组织（肌肉、心脏、肝脏、肾脏、脑、脾脏）的5种同工酶（EST、LDH、MDH、ME和AST）进行了初步研究,并对5种同工酶的同工酶位点及其酶谱表型进行了分析。结果表明,卵形鲳够的5种同工酶系统具有不同程度的组织特异性。EST由2个基因位点编码,Est-1在这6种组织中都存在,Est-2只存在于肝脏和。肾脏中;LDH由3个基因位点编码,共检测到3条谱带,Ldh-2只存在于肾脏中;MDH由2个基因位点编码,Mdh-1表达为MDH1和MDH22条酶带,Mdh-2表达为MDH31条酶带,在肝脏中的活性最强;ME由1个基因位点编码,只检测到1条酶带,肝脏的含量丰富;AST由2个基因位点编码,只在肝脏和肾脏中检测到,共检测到3条谱带。     

紫红笛鲷与红鳍笛鲷5种同工酶的比较研究

采用聚丙烯酰胺垂直平板梯度凝胶电泳的方法,对紫红笛鲷和红鳍笛鲷8种组织中的5种同工酶(EST,LDH,MDH,ME,POD)进行比较研究,对所研究的5种同工酶在两种鱼的组织分布、位点表达及活性作了分析和总结。试验结果表明:两种鱼的ME、MDH同工酶谱非常相似,只在活性上略有差异;EST、LDH、POD等的酶谱表达带型和活性不同,这些酶可作为紫红笛鲷和红鳍笛鲷的遗传鉴定标记,能够将亲缘关系很近的这两种鱼区分开来,从而为形态分类学提供生化依据。     

Are cell redox or lactate dehydrogenase kinetics responsible for the absence of gluconeogenesis from lactate in sea raven,hepatocytes?

Previous studies have reported very low rates of gluconeogenesis from lactate in sea raven (Hemitripterus americanus) hepatocytes compared to other teleosts studied. This study examines whether hepatic cell redox or lactate dehydrogenase (LDH) characteristics may explain this observation. Sea raven hepatic optimal LDH activities (pyruvate reductase direction) were more than 40 times less compared with rainbow trout liver values (40 vs 1914 μmol·min⁻¹·g⁻¹ protein). The Km(lactate) was 9.24 and 0.86 mM for sea raven and trout hepatic LDH, but the Km(pyruvate) was similar between the two species (0.11 and 0.21 mM, respectively). These results suggested that sea raven liver LDH did not favour lactate use and was more indicative of the mammalian M-isozyme. Gel electrophoresis showed a predominant intermediate isozyme, with a small amount of the M-type LDH. Phosphoenolpyruvate carboxykinase (PEPCK) was localized to the mitochondrial compartment, while there was no apparent mitochondrial glutamate-oxaloacetate transaminase (GOT) activity. No in vitro lactate flux to glucose was found in untreated, 10 mM ethanol-treated, or 3 mM NH₄Cl-treated sea raven hepatocytes, although CO₂ production from lactate was decreased by ethanol and increased by NH₄Cl. These results provide evidence that cell redox does not limit gluconeogenesis from lactate, while low activities and the kinetic characteristics of LDH may partially explain the low lactate gluconeogenesis reported in sea raven hepatocytes. To whom correspondence should be addressed at University of Ottawa.     

花鲈冷冻精液受精鱼苗与鲜精受精鱼苗的同工酶比较分析

采用水平凝胶电泳技术对花鲈(Lateolabrax maculatus)冷冻精液受精鱼苗与鲜精受精鱼苗进行了同工酶分析。本实验选取肌肉和肝脏两种组织,检测了IDHP、PGM、LDH、GPI、MDH、G3PDH、ME、HK、SOD、G6PD和SDH等11种酶,得到13个位点:IDHP*、PGM-1*、PGM-2*、LDH*、GPI-1*、GPI-2*、MDH*、G3PDH*、ME*、HK*、SOD*、G6PD*和SDH*。结果显示在0.99水平,SDH*和PGM-2*位点在两种受精鱼苗中均表现为多态,多态位点比例均为0.1538;平均预期杂合度分别为0.0460和0.0407,但未观测到杂合子,观测杂合度均为0,遗传偏离指数均为-1;有效等位基因数分别为1.0720和1.0850,花鲈冷冻精液受精鱼苗与鲜精受精鱼苗的遗传相似度为0.9991,遗传距离为0.0010。由此可见,花鲈的冷冻精液受精鱼苗和鲜精受精鱼苗间未出现同工酶水平上的遗传差异,冷冻保存精液完全适用于花鲈育苗生产。     

彭泽鲫的分子遗传分析及其与方正银鲫A系的比较

Genetic homogeneity between Pengze crucian carp and strain A of silver crucian carp was studied by using transferrin,isozyme and RAPD markers.The studied individuals of Pengze crucian carp showed transferring patterns were the same of silver crucian carp A strain while distinct from those of other crucian carp populations.As far as isozyme is concerned,the MDH,LDH and EST are all of the same with only slight differences in SOD between them.The RPAD patterns clearly indicated high homogeneity among 16 individuals (6 sampled from individuals of two years old and the others aged one) from crucian carp of Pengze and 5 individuals from strain A of silver crucain carp.Nearly indentical banding patterns were observed among all individuals.Average genetic distance within all the individuals is only 0.011,suggesting crucian carp of Pengze might possess indentical genetic background with strain A of silver crucian carp.     

甘子河裸鲤肌肉营养成分和乳酸脱氢酶同工酶的分析

用常规法测定和分析了体质量280g的甘子河裸鲤肌肉的营养成分。鱼体粗蛋白含量为61.77%(干质量百分率),必需氨基酸含量为31.88mg,占氨基酸总量的49.67%;采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析了甘子河裸鲤的肝胰脏、肾脏、心、脑和肌肉中的乳酸脱氢酶同工酶。结果显示,不同组织间乳酸脱氢酶存在特异性,在脑中的活性最强。     

Lactate dehydrogenase isozymes in the trunk and cardiac muscles of an antarctic teleost fish,Notothenia neglecta Nybelin

The distribution and kinetics of lactate dehydrogenase (LDH) isozymes in the red and white trunk muscles, and cardiac muscle of an antarctic teleost fish (Notothenia neglecta Nybelin) have been studied. Pyruvate inhibition of LDH in all three muscle types is very low, being less than 50% even at a concentration of 60mM pyruvate. Activity versus pyruvate concentration profiles are not significantly different for LDH in all three muscle types. The Michaelis constant (Km) for pyruvate was not significantly different for all three LDH's. Raising the assay temperature caused an increase in Km of similar form in all three muscle types, while Km was lowest at the lowest assay temperature (–1°C). When samples were run on a polyacrylamide gel, the bands stained specifically for LDH activity appeared at identical positions as those of the H2M2 band of the standards.It would appear therefore that the LDH isozyme found in the red and white trunk muscle ofN. neglecta is identical to that in cardiac muscle. This fact is discussed in relation to the physiological ecology of antaretic fishes, and the metabolic constraints imposed by their habitat, including their apparent low capacity for utilising glycolytic fuels.     

红鳍东方鲀6种同工酶的组织特异性及基因位点分析

采用水平淀粉凝胶和聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳法,对2龄野生红鳍东方鲀的肌肉、肝脏、肾脏、心脏、眼、鳃6种组织中的苹果酸酶(ME),乳酸脱氢酶(LDH),异柠檬酸脱氢酶(IDH),葡萄糖脱氢酶(GLCDH),磷酸葡萄糖变位酶(PGM)和酯酶(EST)共6种同工酶进行了研究。结果表明,以上6种同工酶存在明显的组织特异性。LDH在除肝脏外的5种组织中活性很强,GLCDH只在肝脏中表达,鳃组织中的GLCDH和肌肉组织中的EST表达活性都很弱。6种同工酶共检测到12个基因位点,其中ME和PGM有两个基因位点编码,EST有5个基因位点编码。本试验还检测到Ldh-1、Est-1、Est-2、Est-3和Est-4共5个基因位点具有多态现象(P0·99),多态位点比例为41·67%,在12个基因位点共观察到17个等位基因表达,平均每个位点表达的等位基因数为1·417个。同时在红鳍东方鲀眼组织中发现,AB3型和B4型LDH间有一条酶带弱表达。