牛冷冻精液的保存及使用

精液冷冻保存是将精液进行特殊处理，保存在超低温条件下以达到长期保存的目的。通常采用液氮（－１９６℃）和干冰（－７９℃）保存。其最大优点是可长期保存，使用不受时间、地域以及提高种用公牛的利用率。１稀释液配方１２％的蔗糖液７５mL、甘油５mL、卵黄液２０mL。２稀释方法将经过检查合格的精液（活力０．６以上、精子密度中等）按１∶２～５倍稀释液进行稀释，稀释后应保证每个颗粒精液中所含精子数不少于３０００～４０００万个，解冻后呈直线前进的精子数３冷冻在装有液氮的容器上置一铜纱网，距液氮面２cm左右，温度维持在－…     

猪精液冷冻保存技术研究

公猪精液浓稠部分按1:0.5～1比例稀释。精液稀释液主要由8％葡萄糖溶液77毫升、甘油3毫升、蛋黄20毫升组成。精液温度从室温20～30℃降至10～15℃,耗时3～4小时,然后从10～15℃降至7～9℃,耗时1～2分钟。降温平衡后,精液用铜筛网在液氮面上制成颗粒冷冻精液并放在液氮中保存。冷冻精液用“干解法”解冻,解冻温度50～60℃,解冻后精液与解冻液以1:0.5～1混合。解冻液主要由5％葡萄糖100毫升、10％胺钠加5毫升组成。每次输精输入已解冻的冷冻精液10～20毫升,内含活精子10～15亿。每发情期输精1次或2次,共配种682头母猪,产仔率73.75％。共有503头母猪产仔,平均每窝仔猪10.50头。其中7头母猪用保存了三年的冷冻精液配种,全部受胎。冷冻精液解冻后四小时内输精,受胎率差异不显著。     

公猪冷冻精液的制作方法

应用公猪浓稠部分精液按1:2～3倍稀释。稀释液由Ⅰ液,Ⅱ液按1:1.3(v/v)配合而成。Ⅰ液:每100毫升蒸馏水中加乳糖6克,二水柠檬酸三钠0.5克,氨基乙酸1克,三羟基甲基氨基甲烷0.12克。Ⅱ液:每100毫升蒸馏水中加葡萄糖6克,鸭蛋卵黄30毫升。供制冻精液室温中静置1小时后,以Ⅰ,Ⅱ混合液同温稀释。稀释后精液放入控温范围5～8℃的冰箱内,一次降温3小时。精液温度达5～10℃,取出放入盛有冰块的冷藏瓶中保存。制冻中精液温度保持在6～8℃,每次吸取精液20毫升左右,直接注入吊离液氮面的瓷盘内,浇冻成薄片状后,敲成黄豆粒大小,放入液氮中保存,冷冻精液以“干解法”解冻,解冻温度55℃,解冻后精液与解冻液以1:0.5混合,可供输精。解冻液由100毫升蒸馏水中加葡萄糖5克、乙二胺四醋酸0.37克、25％安钠加注射液2毫升所组成。每次输精量15～20毫升,内含有效精子6～8亿。一个情期输精1～2次。通过对306头母猪情期输精,26日不返情率75.06％,最高的输精点达88.64％,平均窝产仔10.39头,最高窝产仔22头。     

铜纱网漂浮法可稳定牛颗粒冻精质量

牛冷冻精液生产工艺流程中,在制作牛冻精颗粒时,一般采用把铜纱网固定在液氮容器上,使液氮面和铜纱网的距离为1—1.5厘米。在冻精生产中发现,由于在滴冻过程中液氮不断蒸发,铜纱网与液氮面的距离越来越大,导致同一种牛精液在开始滴冻与最后滴冻的冻精成品在活力、存活时间等诸项指标差异较大。为此,我们设计了使铜纱网在液氮面上漂浮的方法,并选择了铜纱网与液氮面八种不同     

猪浓缩冷冻精液的受胎能力和一种新的解冻操作方法

采精后2小时,将每份含6×10~9个精子的精液离心分离10分钟(300_g)。去除精清,并用BF5稀释液把精子重新稀释成5毫升的混匀精液。精液在2小时内逐步冷却到5℃,再加入5毫升含2%甘油的BF5液。将精液混匀后,立即在干冰上冷冻成0.15到0.2毫升的颗粒,然后移入液氮保存。输精时,每次从液氮中取出10毫升的颗粒,倒入泡沫塑料制的槽形容器内,静置三分钟,随即把颗粒倾入250毫升的烧杯中,杯内装有25毫升50℃的BTS液,摇动烧杯直至颗粒融化为止。解冻的精液倒入输精瓶,再用15毫升的BTS液冲洗烧杯,洗下的液体加到输精瓶中。用一头公猪的单精或用二头公猪的混精的冷冻精液给26头小母猪输精。每头小母猪输精两次,每个剂量含6×10~9个精子。26头小母猪中有22头(85%)产生受精卵,22头的卵有87%受精并正常地发育。混精输精的受胎效果并不比单精输精优异。本研究中使用的冷冻和解冻法操作简易,贮存容量小,精液活力高;妊娠率和受精率接近新鲜精液的正常指标。     

精子平衡后活率变化对冷冻效果的影响

通过对7头公牛146次的采精冷冻,观察精子平衡后活率变化对冷冻效果的影响。稀释液配制12%蔗糖水75毫升,甘油5毫升,卵黄20毫升,青链霉素各10万单位。采精后即对原精液作1:3稀释,于5℃冰箱中平衡4小时,在聚四氟乙烯塑料板上冷冻颗粒,剂量为0.1毫升。用刚果红染色法计算原精液、平衡后、解冻后精子活率及计算冻后复苏率。根据精子     

波尔山羊冷冻精液稀释液及稀释倍数研究

通过研究波尔山羊冷冻精液稀释液和稀释倍数,以筛选最佳稀释液配方、确定适宜的稀释倍数、提高波尔山羊精液冷冻效果。结果表明,4号稀释液解冻后精子活率高于1号、2号、3号稀释液解冻后精子的活率,差异极显著( P<0 .0 1 ) ;4号稀释液解冻后精子存活时间为61 .2 6h,长于1号、2号稀释液精子存活时间( P<0 .0 1 ) ,短于3号稀释液精子存活时间,但差异不显著( P>0 .0 5 ) ,说明4号稀释液冷冻效果最好。精液稀释3倍、4倍、5倍解冻后精子活率分别为0 .5 0 2、0 .5 0 1、0 .495 ( P>0 .0 5 ) ,均高于稀释6倍、7倍、8倍的精子活率( P<0 .0 1 ) ,表明波尔山羊冷冻精液稀释倍数以3～5倍为宜。     

改进精液处理和输精方法提高种公山羊利用率的研究

对绒山羊公羊精液采用不同稀释液处理,以葡萄糖、柠檬酸钠稀释液效果最好,受胎率达93.55%;精液做1∶4～1∶39倍稀释后输精,1∶4～1∶19倍稀释效果较好,情期受胎率可达88.06%～89.74%;山羊精液经1∶9倍稀释后,输精量0.05～0.15 ml,输入有效精子1 000万～4 000万,对受胎效果影响不大.采用简易输精方法(仿照公羊本交的方式,用输精器将精液直接输入发情母羊的阴道底部),将精液直接输入阴道,与常规方法(用开膣器扩张阴道将输精器插入子宫颈口的输精方法)将精液输入子宫比较,对受胎影响不大,这种方法更适于农村牧区推广应用.     

2种稀释液对公猪精液冷冻保存效果的影响

试验为探究2种不同冷冻稀释液对公猪精液稀释冷冻效果的影响。试验采用手握法采集同一头公猪精液,将采集的精液分为2组,进行液氮熏蒸制作细管冻精,分别使用Ⅰ号冷冻稀释液和Ⅱ号冷冻稀释液对猪精液进行冷冻保存,24 h后检测2种冷冻稀释液细管冻精的活力。结果显示,Ⅰ号冷冻稀释液冷冻解冻后的精子活力显著高于Ⅱ号冷冻稀释液(P0.05),同一种稀释液距液氮面5 cm进行熏蒸冷冻的效果较距液氮面4 cm冷冻效果好,但差异不显著(P0.05)。研究表明,利用Ⅰ号冷冻稀释液在距液氮面5 cm处进行液氮熏蒸冷冻可获得较好的公猪冷冻精液。     

公猪精液冷冻解冻试验

全部试验在全苏畜牧所的试验基地和一繁殖场进行。用假阴道收集精液,每周采精一次。采精后用葡萄糖-蔗糖-柠檬酸钾液稀释,离心浓缩使每毫升含精子15亿,按1:1与第二液(含卵黄的上述溶液)稀释,冷却到+5℃,并在-85°～-95℃的液氮蒸汽上冷冻成颗粒。     

利用猪皮浸出液保存解冻后牛颗粒冷冻精液的研究

将猪皮浸出液（俗称猪皮胨）按一定的比值与一般的精液稀释液混合均匀，然后将牛的颗粒冷冻精液按一定稀释倍数稀释于此液中。利用猪皮胨的固态特性迫使精子停止运动，进而降低解冻后精子的代谢活动、达到延长精子存活时间而不丧失受精能力的目的。其中五号保护剂保存精液60h活力基本不变，六昼夜时活力下降到0．1。     

稀释液中添加番茄红素对鸡精子保护作用的研究

为了研发新的鸡精液稀释液,试验在YHFB鸡精液稀释液(分别为B1液、B2液、B3液、B4液)中添加浓度分别为0,0.1,0.2,0.05 mg/mL抗氧化剂番茄红素,按1∶1的比例对鸡混合鲜精进行稀释,稀释后置于长时间保存的低温条件(5℃左右)下,定期检查精子活力,当小于或等于0.3时停止检查;置于高温恶劣环境(41℃水浴)下,每30 min检查1次精子活力,直到精子全部死亡。结果表明:低温条件下不同时间精子活力B1、B4液,B2、B3液均差异不显著(P0.05),添加0.1 mg/mL番茄红素的B2液在48小时前精子活力稍大于B3液,48小时后B3液精子活力稍大于B2液;高温条件下不同时间精子活力各组之间无显著差异(P0.05)。说明在低温条件下鸡精液稀释液中添加0.1 mg/mL番茄红素,能显著延长精子活力,但在41℃的高温条件下对精子的保护作用不明显。     

火鸡精液液态低温保存

本文研究了3种稀释液在0～5℃下保存火鸡精液的效果及稀释液pH值、稀释比例和卵黄浓度对精子存活力的影响。原精及稀释精液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ不保存时,受精率分别为71.7％,64.03％,63.29％和63.77％(P<0.05);在0～5℃下保存48h后,原精完全丧失受精率(0％),而稀释精液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的受精率分别为52.40％,45.30％和20.33％(P<0.01)。火鸡精液在0～5℃保存过程中,pH值降低,原精比稀释精液降低程度大。在本研究条件下,pH6.5和1:3稀释最适合于火鸡精子的存活,稀释液中添加5％或10％卵黄可提高火鸡精子的存活力。     

不同稀释液对半番鸭生产中人工授精效果的影响

以笼养的公番鸭和圈养的樱桃谷母鸭为材料,以0.9%生理盐水、蛋黄葡萄糖液、磷酸缓冲液、Lake′s液为稀释液,研究稀释液对番鸭人工授精效果的影响。试验结果表明,番鸭精子在不同稀释液中的存活时间有差异,以磷酸缓冲液和Lake′s液组的精子存活时间较长;随着温度的下降,番鸭精子在稀释液中的存活时间有逐渐延长的趋势。不同稀释液按1∶2稀释番鸭精液与原精液输精比较,以磷酸缓冲液组和Lake′s液组受精率(分别为75.24%、75.16%)较高,但与原精液组受精率(74.10%)差异不显著;用磷酸缓冲液和Lake′s液以1∶2稀释后在2~5℃保存24h输精,受精率分别为23.76%和34.33%。     

羊冷冻精液的制作技术研究

通过对羊精液冷冻稀释液组成成分的研究,筛选合适的稀释液配方,研究精子平衡时间、解冻温度、稀释倍数和稀释方法等对精子活力的影响。结果如下:①解冻后的精子活率以加入Tris的一组稀释液活率最高,与其他组相比差异极显著(P<0.01)。②精液的平衡时间以平衡4～5h解冻后活率最高。③在45℃～60℃的水温条件下,取得了精子复苏率74.5%的解冻效果。④选用5种稀释比例(精液:稀释液),分别为1∶4、1∶5、1∶6、1∶6、1∶8,结果1∶8的稀释比例精液解冻后活率最高,达到了70%以上。     

稀释液渗透压与pH值对黑凤鸡精液低温保存活力的影响

为推广鸡精液稀释技术,对黑凤鸡精液稀释液pH值与渗透压进行优化。YHFB液的渗透压调整为340、294、261mOsm/kg,按1:2对原精稀释;pH值调整为7.38、7.29、7.11,按1:1对原精稀释;先添加精液与先添加稀释液,2种稀释顺序按1:2对原精稀释。稀释后的精液,置于6℃左右,定期检查精子活力。结果表明:用不同渗透压的稀释液稀释精液后立即测定的活力差异显著(P0.05),以261mOsm/kg组的活力最高,但24h及以后不同渗透压组的活力差异不显著;稀释后冷藏,3种不同pH值稀释液之间、稀释液与精液不同添加次序之间精子活力差异均不显著。因此,用YHFB稀释液对黑凤鸡精液进行稀释与冷藏,低渗透压(261mOsm/kg)较好,而pH值在7.1~7.4、精液与稀释液添加次序之间没有显著差异,能获得较好效果。     

鸵鸟精液品质及精液低温保存条件的研究

测定鸵鸟精液生理指标 ,结果表明 ,鸵鸟的射精量为 0 1 7～ 2 0 3mL ,精液 pH6 7～7 3,精子密度为 1 5 7～ 48 0亿 /mL ,原精液精子畸形率 3 0 9%～ 1 3 3% ,精子活率范围0 78～ 0 92。对鸵鸟精液用不同稀释液稀释后低温保存效果比较研究 ,初步获得在 0～ 5℃时用改进MEM液作稀释液以 1∶2比例稀释后 ,精子在设计的条件下存活时间平均约 72h ,而相应原精液或 0 85 %NaCl液作 1∶2稀释的精液在同样条件下精子仅能存活约 2 4h     

冷冻精液的保存及使用

精液冷冻保存是将精液进行特殊处理,保存在超低温下,以达到长期保存精液的目的。通常采用液氮(—196℃)和于冰(-79℃)保存,其最大优点是可长期保存,使用不受时间、地域以及种用雄性动物寿命的限制,可充分提高公牛的利用率。引进异地种牛多以冻精颗粒的形式供应,现就冷冻精液的保存和解冻应用介绍如下: 1、稀释液的配方:12％蔗糖液7S毫升,甘油5毫升,卵黄20毫升。     

鸡新鲜精液长途运输试验

用《-6》配套杂交鸡的8系作为父系,建立具有高受精率和肉用性能好的AC 新母本。用按摩法采集8系公鸡(11～12月龄)的精液,测定射精量、精子浓度(在微型离心机上)和精子活力。精液用液稀释。此稀释液的配方为:肌醇1克、棉子糖2.4克、谷氨酸钠1.4克、柠檬酸二钾0.14克、磷酸氢二钠0.98克、磷酸二氢钠0.21克、蒸馏水(pH6.9)100毫升。稀释后的精液分装到     

猪人工授精的方法及其注意事项

1操作方法先配制精液稀释液,称取1 000毫升蒸馏水,配1袋精子营养粉,用玻璃棒搅拌15～30分钟,待充分溶解后,放置4小时后再用。精液稀释室的温度控制在20～25℃,同时打开恒温水槽,升温至37℃,放入配制好的稀释液,加热至37℃;准备好干净的采精