广东省部分地区禽源弯曲杆菌流行病学调查及耐药性检测

为研究肉鸡生产链中弯曲杆菌的流行规律,从广东省广州市、佛山市的家禽养殖场、屠宰场和市场中采集了1 414份样本,通过分离细菌、检测耐药性及耐药基因等方法分析该病的流行规律。结果显示:共分离出201株弯曲杆菌,阳性率为14.21%,且养殖场(25.1%)到屠宰场(11.9%)到市场(7.1%)的弯曲杆菌污染率呈现递减趋势;弯曲杆菌分离株对喹诺酮类和磺胺类药物具有高耐药率且喹诺酮类药物耐药菌株的gyrA基因QRDR区域发生了C257T的突变,突变率为100%;大环内酯类药物耐药菌株的23 S rRNA基因均发生了A2075G点突变。此外,大环内酯类耐药株的甲基化酶耐药基因ermB的携带率为52.38%,四环素类药物耐药株的tet(O)基因的携带率为97.37%。研究表明广东省部分地区禽源弯曲杆菌对喹诺酮类耐药率高且多重耐药情况普遍,提示加强禽源弯曲杆菌耐药基因的监测。     

禽源空肠弯曲杆菌ERIC-PCR分型及毒力因子研究

[目的] 通过对禽源空肠弯曲杆菌分子分型和毒力研究,了解禽源空肠弯曲杆菌在禽肉产品生产过程中的主要传播途径和携带的主要致病因子。[方法] 对从家禽养殖场、屠宰场等采集的720份泄殖腔拭子和禽肉表面拭子样品分离的311株空肠弯曲杆菌进行ERIC-PCR分型和16种毒力因子检测。[结果] 禽源空肠弯曲杆菌的分离率为43.19%;肉鸡生产链中空肠弯曲杆菌沿生产链传播,且有优势菌株型;90%以上分离菌株携带11种毒力基因。[结论] 肉鸡生产链中空肠弯曲杆菌存在水平传播现象,且没有外源性污染;16种毒力基因中,14种毒力基因的携带率均在50%以上。加强禽源空肠弯曲菌的监测是控制空肠弯曲菌的前提,对公共卫生具有重要意义。     

动物源性空肠弯曲杆菌耐药性地域差异性分析

从上海家禽批发市场采集鸡盲肠内容物样品,分离到47株空肠弯曲杆菌,从上海屠宰场采集猪盲肠内容物样品,分离到99株空肠弯曲杆菌,分别测定分析了这些空肠弯曲杆菌耐药性; 通过对不同产地鸡源空肠弯曲杆菌耐药性状况比较结果显示,江苏南通、江苏海门和浙江金华分离到的鸡源空肠弯曲杆菌对9种抗生素(见表1)都有不同程度的耐药性,对万古霉素、红霉素和氨苄青霉素的耐药性达到100%。江苏海门、上海崇明和浙江温岭、金华等地的菌株分别对克林霉素和氨苄青霉素显示了高耐药性,分别达到90%、100%;通过对不同产地猪源空肠弯曲杆菌耐药性状况比较结果显示,山东莘县分离到的猪源空肠弯曲杆菌对9种抗生素都有不同程度的耐药性,对万古霉素、红霉素、克林霉素和氨苄青霉素的耐药性达到80%以上。河南孟津和安徽淮北分离到的猪源空肠弯曲杆菌对除头孢拉定之外的8种抗生素都有不同程度的耐药性,对氨苄青霉素的耐药性达到100%。结果显示动物源性空肠弯曲杆菌耐药性存在明显的地域差异性。     

弯曲杆菌中具有高抑菌活性乳酸菌的筛选

使用微生态制剂来替代抗生素用于动物疫病防制是未来的发展趋势,而乳酸菌是目前微生态制剂最主要的成分。试验旨在筛选弯曲杆菌中具有高抑菌活性并耐受动物胃肠道环境的乳酸菌。从广东不同地区采集家禽粪便样品,对分离的乳酸菌进行生化鉴定、PCR鉴定及16S rDNA测序。同时,对分离菌株进行鸡源空肠弯曲杆菌、鸭源空肠弯曲杆菌和鹅源结肠弯曲杆菌的抑菌试验,以及模拟胃肠道环境的耐酸、耐胆盐和耐胰蛋白酶试验。结果表明,唾液乳杆菌R3对不同禽源的弯曲杆菌都具有高抑菌活性和耐受能力。因此,唾液乳杆菌R3为开发防控家禽弯曲杆菌疾病的微生态制剂提供了候选株。     

肉鸡弯曲杆菌噬菌体的筛选及应用

试验旨在筛选肉鸡弯曲杆菌特异性裂解型噬菌体并对其在肉鸡生产中的合理应用进行探讨。从肉鸡屠宰场收集弯曲杆菌噬菌体筛选样本,通过与当地肉鸡弯曲杆菌流行株共孵育、增殖、纯化获得特异性弯曲杆菌噬菌体。对上述弯曲杆菌噬菌体生物学特性（宿主范围、致死曲线、形态学特征等）进行鉴定;将筛选得到的弯曲杆菌噬菌体作为饲料添加剂,以5×10⁷、1×10⁸、5×10⁸、1×10⁹和5×10⁹ PFU/d 5个添加量添加于38日龄雄性罗斯308肉鸡饲粮中,观察不同噬菌体添加量对肉鸡盲肠内容物中弯曲杆菌的清除效果;最后通过比较2种噬菌体不同配比条件对肉鸡弯曲杆菌清除率及对肉鸡生长性能的影响建立使用方案。结果显示,试验从当地肉鸡屠宰场以空肠弯曲杆菌标准株L26为宿主菌共分离到12株空肠弯曲杆菌噬菌体,与从肉鸡养殖场分离的7株空肠弯曲杆菌共孵育,并选择裂解谱广且噬菌斑大的噬菌体BP11和BP12进行纯化和增殖。经形态学鉴定,2株噬菌体均符合肌尾噬菌体科（Myoviridae）特征,并具有较宽的裂解谱,但二者对相同宿主菌的裂解能力表现差异性;BP11添加量为1×10⁹ PFU/d,BP12添加量为5×10⁸ PFU/d时均能达到显著裂解效果;BP11与BP12混合添加组在不影响屠宰指标的前提下可显著降低肉鸡泄殖腔弯曲杆菌携带量。本研究结果为肉鸡生产过程中弯曲杆菌污染的防控及噬菌体的合理利用奠定理论基础。     

禽源空肠弯曲杆菌的分离鉴定及其致病性的初步研究

本研究对广东部分地区不同品种家禽空肠弯曲杆菌的流行状况进行了调查。通过菌落和菌体形态、生化特征、培养特性等生物学特性和多重PCR方法对所分离菌株进行鉴定,结果表明广东地区鸡、鸭和鹅空肠弯曲杆菌的带菌率分别为7.93%、2.46%和4.16%。从分离株中选取10株进行了致病性试验,结果表明禽源空肠弯曲杆菌对雏鸡的主要病理变化是腹泻便血,肝脏出现白色坏死灶,盲肠充血、膨大充满气泡和红色内容物。     

牛细菌性腹泻病原的分离鉴定与耐药性分析

为了解新疆维吾尔自治区阿克苏地区新和县规模化养殖场及散养户中不同阶段的牛细菌性腹泻病原菌的分布情况及耐药性情况。对2020—2021年采集新疆维吾尔自治区阿克苏地区新和县规模化养殖场及散养户中不同阶段的患腹泻牛粪便、肛拭子及内脏病料358份,采用细菌分离鉴定、形态学观察、生化鉴定等方法对大肠杆菌、沙门菌、奇异变形杆菌、空肠弯曲杆菌等细菌性病原菌进行分离鉴定,采用K-B药敏纸片法检测临床分离菌株对临床中常用的药物耐药情况。结果显示：从358份病料样品中分离到大肠杆菌62株、沙门菌52株、空肠弯曲杆菌29株、奇异变形杆菌28株,检出率分别为17.3%、14.5%、8.1%、7.8%;分离的菌株对临床中常用的药物产生不同的耐药性,其中大肠杆菌、沙门菌、空肠弯曲杆菌及奇异变形杆菌均对头孢噻呋、头孢喹肟、氟苯尼考、恩诺沙星、环丙沙星、林可霉素、硫酸黏菌素等药物敏感,对其他药物耐药。为该牛细菌性腹泻病防治及合理指导临床用药提供参考。     

河南省鸡源结肠弯曲杆菌的分离鉴定及耐药性分析

[目的]掌握河南省鸡源结肠弯曲杆菌的分布和对抗菌药物的耐药情况。[方法]从养殖场抽取鸡泄殖腔拭子460份进行结肠弯曲杆菌分离培养,采用PCR、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱进行鉴定,并通过微量肉汤稀释法对分离菌株进行药物敏感性分析。[结果]共分离结肠弯曲杆菌42株,分离率为9.13%;分离的结肠弯曲杆菌对环丙沙星、萘啶酸、阿奇霉素耐药严重,耐药率分别为95.24%、90.48%、71.43%。[结论]河南省鸡源结肠弯曲杆菌耐药情况较为严重,应规范使用抗菌药物。     

从人和动物分离的弯曲杆菌药敏比较

1979年到1983对弯曲杆菌的检查曾从腹泻病人检出111株、牛29株、家禽46株和野鸟59株,均为空肠弯曲杆菌;另检出结肠弯曲杆菌人18株与猪54株。以这些菌株作了对9种抗菌物质的药敏试验结果:人的空肠弯曲杆菌对丁胺卡那霉素、卡那霉素、庆大霉素的最小抑制浓度(MIC)     

肉鸡空肠弯曲杆菌的监测与分析

本文对集约化肉鸡场空肠弯曲杆菌流行状况进行监测与分析。1 981份样品中,JM地区的肉鸡空肠弯曲杆菌阳性率为6.48%~7.48%,JZ地区的肉鸡空肠弯曲杆菌阳性率为9.45%~9.91%,JN地区的肉鸡空肠弯曲杆菌阳性率为14.6%~16.9%。17种抗菌药中,对36株肉鸡空肠弯曲菌分离株高度敏感的是:阿米卡星(86.1%)、链霉素(91.7%)、庆大霉素(94.4%)、卡那霉素(83.3%)、阿奇霉素(86.1%)、头孢噻肟(83.3%),另外有3种抗菌药对肉鸡空肠弯曲杆菌表现出较好的敏感性,分别是红霉素(61.1%)、氨苄西林(78.8%)、青霉素(69.4%),其它临床常用抗菌药对36株肉鸡空肠弯曲杆菌则表现出较强的耐药性。JM地区空肠弯曲杆菌分离株的耐药谱为7耐至10耐,JZ地区空肠弯曲杆菌分离株的耐药谱为8耐至12耐,JN地区空肠弯曲杆菌分离株的耐药谱为7耐至11耐。研究结果证明,不同地区肉鸡中空肠弯曲杆菌的流行和耐药状况呈现多样化。     

滩羊胎儿弯曲杆菌的分离鉴定

[目的 ]对一规模化养殖场滩羊流产的原因进行确诊,为流产羊的疫病诊断和防控提供建议。[方法 ]无菌采集流产胎儿血性腹水和流产母羊阴道分泌物进行细菌培养、分离和鉴定。[结果 ]分离到2株病原菌,经形态特性、培养特性及生理生化特性观察,鉴定为胎儿弯曲杆菌胎儿亚种;动物实验表明,其对小白鼠有很强的致病性。[结论 ]致病性胎儿弯曲杆菌胎儿亚种是造成该羊场发生大面积流产的主要病原。     

雪貂空肠弯曲杆菌的分离与鉴定

从试验用雪貂分离到一株弯曲杆菌,通过菌落、菌体形态、生化特征、培养特性等生物学特性和PCR方法对所分离菌株进行鉴定,分离株经空肠弯曲杆菌VS1基因特异性引物PCR扩增为阳性,测序结果显示与空肠弯曲杆菌序列同源性达100%,结合生物学特性和PCR结果确定所分离菌株为空肠弯曲杆菌,该菌的分离鉴定为雪貂微生物检测标准的建立提供了理论依据。     

FHIT基因和Fhit蛋白在犬淋巴瘤细胞系中的畸变

空肠弯曲菌是人类主要食源性病原菌之一，其主要的储存宿主是家禽。据研究空肠弯曲杆菌主要定植于肉仔鸡的盲肠。从7个鸡群采集20份样本来检测弯曲杆菌，结果表明，平均发病率为65％。本试验还研究了48株空肠弯曲菌对INT～407细胞的黏附力和入侵力。用检测庆大霉素抗性的INT-407细胞对从盲肠内容物分离的48株空肠弯曲菌进行分析，盲肠分离菌株呈现出广泛的黏附力和入侵力，且菌株间的黏附力和入侵力呈显著相关（P〈0．01）。用PCR方法检测到空肠弯曲杆菌的毒力相关基因dnaJ、cadF、pldA、ciaB，检出率分别为100％、76％、31％、41％，     

江苏地区鸡源弯曲杆菌分离鉴定及耐药性研究

为了解江苏地区鸡源弯曲杆菌的流行和耐药状况,采集养殖场及农贸市场鸡泄殖腔棉拭子样品和超市鸡肉样品进行空肠弯曲杆菌、结肠弯曲杆菌的分离与鉴定,对分离菌株采用纸片扩散法检测其耐药情况。结果显示:泄殖腔棉拭子样品弯曲杆菌总分离率为38.68%(205/530),其中空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌阳性率分别为27.36%(145/530)和11.32%(60/530);鸡肉样品中弯曲杆菌总分离率为45.33%(68/150),其中空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌阳性率分别为30.00%(45/150)和15.33%(23/150)。所有样品空肠弯曲杆菌分离率极显著高于结肠弯曲杆菌(P0.01),就泄殖腔棉拭子样品而言,养殖场样品弯曲杆菌总分离率显著高于农贸市场样品(P0.05),泄殖腔棉拭子样品与鸡肉样品弯曲杆菌分离率无显著性差异(P0.05)。耐药检测结果显示,弯曲杆菌对9大类27种抗生素耐药率在80%以上的有6种,分别为头孢噻肟、头孢曲松、诺氟沙星、环丙沙星、甲氧苄胺嘧啶和克林霉素,所有菌株表现出多重耐药现象,耐药谱主要集中在12耐、13耐和14耐。研究表明,江苏地区鸡源弯曲杆菌流行普遍,分离菌株存在耐药现象且多重耐药情况较严重。     

家禽弯曲杆菌的控制策略

弯曲杆菌是一种感染人和动物的重要食源性病原细菌.家禽是人弯曲杆菌病的主要污染来源,因而控制家禽弯曲杆菌对保障人类健康和食品安全具有重要意义.本文对近年来在家禽弯曲杆菌方面的一些最新控制措施进行了简要综述,特别是弯曲杆菌疫苗的研制及抑制弯曲杆菌药物方面的进展.     

一株家禽羽毛角蛋白降解菌的分离与鉴定

为了探寻降解家禽羽毛角蛋白的微生物资源,利用富集及驯化培养的方法,从家禽养殖场长期堆积废弃羽毛的土壤中,分离能够有效降解羽毛角蛋白的细菌,并对其降解效果进行初步研究,结果分离筛选出1株能以羽毛角蛋白为唯一碳氮源的菌株N01。经形态特征观察,生理生化特征鉴定和16SrDNA序列分析,初步鉴定其属于节杆菌属。系统发育树显示,该菌株与金黄色节杆菌(Arthrobacter aurescens)的相似性最高,达99%,因而确定其为金黄色节杆菌。该菌株经过72h发酵,对羽毛角蛋白的降解率达75%,表明该菌株对羽毛角蛋白有明显的降解作用。该菌株的分离鉴定为微生物降解利用家禽羽毛角蛋白提供了新的种质资源。     

猪、鸡间空肠弯曲杆菌感染分布状况的调查研究

目的:对入沪28个产地(河南开封、山东青岛、江苏南通、浙江金华、上海奉贤等地)的鸡、猪进行了空肠弯曲杆菌流行分布调查,了解空肠弯曲杆菌在不同动物种间的分布状况。方法:以空肠弯曲杆菌特异性的VS1基因为扩增目标片段,对2005～2007年间在上海市三家家禽市场和五家生猪屠宰场采集的2234(鸡1015份、猪1219份)盲肠内容物样品进行PCR检测。结果:鸡盲肠内容物检出空肠弯曲杆菌阳性的样品288份,平均阳性率为28.4%,猪盲肠内容物检出空肠弯曲杆菌阳性的样品420份,平均阳性率为34.4%。结论:28个产地的鸡、猪均有空肠弯曲杆菌感染,不同产地、种属其感染率和发病情况不同,经统计学分析显示,猪的感染阳性率显著高于鸡,上海市内(奉贤等地)来源的畜禽感染阳性率显著低于浙江金华、江苏海门、江苏张家港和江苏大丰等外省市地区。     

肉鸡屠宰环节沙门菌和弯曲杆菌的流行性调查及耐药性分析

为了解肉鸡屠宰过程中沙门菌和弯曲杆菌的污染情况,在4个不同地区采集肉鸡样品中沙门菌的总检出率为10.8%;385份样品中弯曲杆菌的总检出率为18.2%;沙门菌流行的血清型有肠炎、汤卜逊、拉古什、菲尔摩雷、山道,其中肠炎是优势血清型;沙门菌耐药率为74%,主要对氨苄西林和磺胺异恶唑耐药;65株弯曲杆菌主要对环丙沙星、四环素和萘啶酸耐药。研究表明,肉鸡屠宰过程中沙门菌和弯曲杆菌污染较为严重,分割包装是交叉污染的关键环节,加强肉鸡屠宰场的净化工作及严格的消毒措施是降低沙门菌和弯曲杆菌污染率的关键所在。     

2010~2014年阿克苏市禽流感抗体检测与分析

为调查阿克苏市周边高致病性禽流感病毒防疫情况,本研究于2010~2014年对辖区内家禽养殖场、屠宰场、交易市场以及散养户活禽开展抗体水平检测。结果显示:规模养殖场、屠宰场、交易市场以及散养家禽抗体合格率分别为94%、92%、82%、71%,整体达到国家规定的70%,规模场免疫合格率最高,散养家禽免疫工作有待加强。     

江苏部分地区鸡源与猪源弯曲菌耐药性分析与毒力基因检测

旨在了解江苏省部分地区鸡源与猪源弯曲菌的耐药及毒力基因携带情况。从江苏省25个规模养殖场采集250份粪便样品进行弯曲菌的分离鉴定,采用琼脂平板稀释法测定9种抗菌药物的最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentrations,MICs）,PCR方法扩增弯曲菌8种与致病力相关的毒力基因。结果显示：共分离得到93株弯曲菌,包括空肠弯曲菌45株,结肠弯曲菌48株;空肠弯曲菌对萘啶酸（80.0%）、四环素（71.1%）和环丙沙星（66.7%）的耐药率较高,而结肠弯曲菌对红霉素（87.5%）、萘啶酸（79.2%）和阿奇霉素（72.9%）产生较强的耐药性,分离株多重耐药现象严重,多重耐药率达67.7%;8个毒力基因在弯曲菌分离株中的携带率不同,cdtB和cadF携带率为100%,htrB为97.8%,clpP为76.3%,csrA为18.3%,wlaN为5.4%,cstⅡ为2.2%,cgtB为0%。结果提示,江苏省畜禽养殖场弯曲菌分离株多重耐药情况严重,毒力相关基因在弯曲菌中分布广泛。