甘蓝型油菜核不育基因的RAPD标记

用Ｏｐｅｒｏｎ公司ＯＰＡ－０１－ＯＰＪ－２０ ２００个１０碱基对随机序列引物对甘蓝型油菜隐性核不育株涪优Ａ和可育株涪优Ｂ、显性核不育株３７Ａ和可育株３７Ｂ、广恢系ＤＧＣＲ９８－３７５２、ＲＧＣＲ９７－１及Ｆ１材料基因组ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ扩增,共获得１３３４条扩增带,平均每引物扩增带约６．７条扩增带表明甘蓝型油菜存在遗传多样性,引物ＯＰＡ－０５、ＯＰＡ－０９、ＯＰＡ－１２、ＯＰＡ－１３、ＯＰＡ－２０     

栽培大豆品种间RAPD标记的多态性分析及聚类分析

应用从６０００多份大豆种质资源中筛选的２１个抗大豆花叶病毒病的品种或品系及７个感病的品种或品素,选用２０个随机引物,对总ＤＮＡ进行了随机扩增。有１８个引物扩增得得到了稳定的ＲＡＰＤ图谱。ＯＰＨ－０６和ＯＰＨ－１０未能扩增到ＲＡＰＤ产物。     

高粱遗传图谱初探

ＲＡＰＤ（随机扩增多态性ＤＮＡ）是一种新兴的分子标记技术，本实验利用这种技术对高粱（Ｂｔｘ６２３×Ｉｓ３６２０ｃ）Ｆ８重组自交系基因组进行了分析。在３００个随机引物中２８个引物在ＰＣＲ扩增产物的电泳谱带中有差异。其中４２条扩增的多态性位点落于ＲＦＬＰ高粱遗传图谱所需添补的间隔。由此可见，利用ＲＡＰＤ增加ＲＦＬＰ高粱遗传图谱某些区域ＤＮＡ标记的数目是有效的     

高梁遗传图谱初探

ＲＡＰＤ（随机扩增多态性ＤＮＡ）是一种新兴的分子标记技术，本实验利用这种技术对高梁（Ｂｔｘ６２３×Ｉｓ３６２０ｃ）Ｆ８重组自交系基因组进行了分析。在３００个随机引物中２８个引物在ＰＣＲ扩增产物的电泳谱带有差异。其中４２条扩增的多态性位点落于ＲＦＬ扩增产物的电泳带有差异。其中４２条扩增的多态性位点落于ＲＦＬＰ高梁遗传图谱所需添加补的间隔。由此可见，利用ＲＡＰＤ增加ＲＦＬＰ高梁遗传图谱某些区域ＤＮＡ标     

利用RPAD对中国热带地区疫霉菌分类的初步研究

以来自中国热带地区的２个疫霉种（柑桔褐腐疫霉Ｐ．ｃｉｔｒｏｐｈｔｈｏｒａ和芋疫霉Ｐ．ｃｏｌｏｃａｓｉａｅ）１６个菌株的菌丝体的总ＤＮＡ为模板,使用５种随机引物进行ＰＣＲ扩增,获得随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析与各菌株相对应的ＲＡＰＤ的相似性。结果表明,ＲＡＰＤ不但能辨别这２个疫霉种间的差异,而且可以辨别种内的分类单元,初步肯定了ＲＡＰＤ可以用于中国热带地区疫霉菌的分类鉴定。     

稻瘟病菌生理小种RAPD分析及其与马唐瘟的差异

氯化卞法微量提取稻瘟病菌７个生理小各和马唐瘟病菌基因组ＤＮＡ，用６０个随机引物进行ＰＣＲ扩增，其中２１个引物的特异性扩增条带，第一引物－菌系组合扩增到３－１９条，平均１０．３条；其中有多态性条速为１－１２条，平均６．１条，多态性为６１．１％。说明稻瘟病菌群体有丰富的ＲＡＰＤ多态性。引物ＯＰＨ１、ＯＰＨ２，ＯＰＨ４，ＯＰＨ１３，ＯＰＨ１４，ＯＰＫ１４等扩增的条带多，多态性丰富，而且可以有效地区分稻瘟     

随机扩增多态性DNA（RAPD）及其在茶叶科学领域的应用

随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）是用于作物种质资源鉴定及育种的分子标记。近年发展非常迅速，应用范围很广。本文就茶叶科学的几个方面论述了ＲＡＰＤ标记在茶叶科学研究的应用及前景：（１）茶树品种遗传连锁图谱的绘制，（２）茶叶种质资源鉴定及分类；（３）茶树目标性状基因的标记研究。     

用基于PCR的分子标记分析甘蓝型油菜抗感菌核病品系间的遗传距离

用离体叶接种法鉴定了甘蓝型油菜选系对菌核病的抗感性，结果表明绝大多数抗性品系与感病品种间的差异达到显著或极显著水平。以两种基于ＰＣＲ的标记估计所选１０ 份材料间的遗传距离。１９ 个随机引物扩增出了２６ 条重复性很好的ＲＡＰＤ 标记，１ 对依据植物Ｒ基因的ＮＢＳ区段设计的简并引物扩增出了３ 条多态性的带。依据２９ 个标记进行聚类分析，结果表明抗、感性材料在遗传距离为０．１２０６ 处被明显地区分开。５份抗性材料中，宁ＲＳ—１ 与中油８２１、中Ｒ８８８ 等其它抗性品系的遗传距离较远     

应用RAPD技术分析花生品种遗传变异

应用随机扩增多态性ＤＮＡ 技术分析１２ 个花生品种的遗传多样性。从８０ 个随机引物中筛选出２０个进行扩增,共扩增出１８０ 条带,其中１３２ 条具有多态性,占７３．３３％ 。平均每个引物提供９ 个ＲＡＰＤ标记的信息量。计算了１２ 个花生品种的遗传相似系数和遗传距离。应用Ｕｎｗ ｅｉｇｈｔｅｄ ｐａｉｒ－ｇｒｏｕｐ ａｖｅｒａｇｅ方法进行聚类分析,结果金花３９—２—１９ 和金花３９—２—５１ 距离最近,并与它们父本泉花１０ 号聚为一类,金花１０１２、金花１０３ 和它们的父本汕油７１ 聚为一类,白皮１ 号与奥油２０２ 聚为一类,而鲁花１４ 和中花２ 号聚为一类,梧油６号,以及ＴＷ０４ 各为一类。表明在ＤＮＡ水平上可以分析花生品种之间的亲源关系     

外源DNA导入的大豆品种“黑生101”的RAPD初探

黑生１０１是利用花粉管通道技术育成的一第一个大豆品种,利用１３２个随机引物对黑生１０１及其供体,受体的ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ扩增,其中３个单引物和２个双引物组合起来,均能在后代黑生１０１中扩增出与供体相同而与受体不同的ＤＮＡ片段,证明黑生１０１中确有供体ＤＮＡ片段的导入。     

RAPD标记技术的实用性及稳定性探讨

ＲＡＰＤ（随机扩增多态ＤＮＡ，ＲａｎｄｏｍＡｍｐｌｉｆｉｅｄＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ）是建立于聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术之上的。它是以一系列人工合成的十聚体寡核苷酸单链为引物，对所研究的基因组ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增。扩增出的ＤＮＡ经琼脂糖等电泳分...     

国家冬油菜区试新品种ＳＳＲ指纹图谱构建与遗传关系分析

采用从２００对ＳＳＲ引物筛选中获得的１８对多态性好、带纹清晰的引物,对２００５～２００６年度国家区试 １０２份冬油菜新品种ＰＣＲ扩增,获得８８条谱带,平均每对引物４．９条,多态性比率平均达到８６．３６％,ＰＩＣ平均值为 ０．６４,构建了该年度国家区试１０２份冬油菜新品种ＤＮＡ指纹图谱。聚类分析表明,所有参试品种在相似系数０．７２５ 处被划分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ７个簇。其中Ａ簇包括８１份品种,其他２１份参试品种分布在余下的６簇。聚类分 析表明,Ａ簇内华中农业大学与湖南省品种有相近亲缘关系,聚成一组;而中国农业科学院油料作物所、贵州油料 作物研究所以及陕西地区部分品种相似系数高,聚成另一组,分别拥有３７和４２份材料。聚类分析同时显示,同一 单位的育成品种遗传背景相近。     

海南主栽芒果品种基因组DNA的RAPD分析

采用６个随机引物对海南岛主栽的１０个芒果品种进行ＲＡＰＤ研究,共扩增出３２５个ＤＮＡ片段,其中清晰可辨,重复的有２０１条,占６１％;检测出不同品种的ＲＡＰＤ标记,计算了各品种间的相似系数;初步确立了ＲＡＰＤ技术进行芒果ＤＮＡ指纹图谱构建的研究体系。     

油梨基因组DNA的提取及RAPD分析

用改进的ＳＤＳ法提取油梨基因组ＤＮＡ,即在细胞核被裂解之前,先去除细胞质中的酚类物质和蛋白质,然后用ＳＤＳ裂解细胞核,异丙醇和乙醇沉淀ＤＮＡ,成功地从油梨叶片中提取和纯化了ＤＮＡ。以１０个油梨品种的基因组ＤＮＡ为模板,４０个随机引物进行ＲＡＰＤ分析,结果表明,大部分引物可以在不同模板上扩增出条带,但仅有７个引物可以同时在１０个品种的油梨ＤＮＡ上扩增出条带;用ＲＡＰＤ结果对１０个油梨品种进行聚类分析,基本符合传统分类观点。     

叶用甜菜随机扩增多态DNA(RAPD)分析

利用ＲＡＰＤ技术,对３０（１份糖甜菜,对照）份Ｂｅｔａ属叶用甜菜种质资源材料的总ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ分析,并利用ＵＰＧＭＡ法绘制聚类分析图谱。结果表明：１）２９份叶用甜菜样品和１份糖甜菜样品护增多态性高,１２个引物共扩增出１１０条带,公共带９条,多态性频率高达９１．８１％,平均每个引物扩弱９．１７条带,特有带６条;２）３０个材料间遗传距离变异范围为０．１５００～０．６７１２,亲缘关系最近的是ＢＣ００４和ＢＣ００５（０．１５００）,最远的是ＢＣ０２７和甜研７号（０．６７１２）;３）来源于希腊、土耳其的叶用甜菜与中国叶用甜菜种质间存在一定的种内遗传变异,一部分与中国叶用甜菜亲缘关系更近一些。本研究首次建立了以叶用甜菜聚类在一起,尤其是与中国叶用甜菜亲缘关系更近一些。本研究首次建立了以叶用甜菜嫩花蕾为试材,采用略有改进     

吉林省大豆骨干亲本及主推品种DNA指纹图谱的构建

以６４份吉林省大豆骨干亲本及主推品种为试材,利用ＲＡＰＤ分子标记技术,经过１４０个引物的重复筛选,构建了一套完整的ＤＮＡ指纹图谱,其中ＯＰＡ－０４能区分４０份材料,结合引物ＯＰＧ－０７、ＯＰＯ－１１、ＯＰＦ－１４的扩增结果即可完全区分供试６４份材料。聚类分析表明,具有相同骨干亲本的育成品种遗传距离较近,这与以往的农艺性状研究及生理生化研究结论相符。     

RAPD分子标记在玉米自交系种群关系研究中的应用

通过１７个随机引物的ＰＣＲ扩增结果,得到２４个玉米自交系的ＲＡＰＤ指纹图谱。根据扩增带建立０、１型数据,采用离差平方和法聚类,建立它们的亲缘关系图,根据ＲＡＰＤ标记建立的亲缘关系图与已知系谱的亲缘关系基本一致。     

福建余甘子遗传资源的RAPD分析

以福建省34份余甘子遗传资源为材料,采用20个具特异扩增的多态性引物对福建省34份余甘子基因型进行扩增,20个引物,在34份供试材料中总共扩增出259个位点,且均是多态的,多态性程度达100%,平均每个引物扩增12.95个位点。同时,获得了19个引物对23份材料扩增的RAPD特征标记47个,17个引物在36对材料上共扩增出36个共享特征RAPD标记;采用ED(欧氏距离)法进行RAPD标记的聚类分析则可将福建34份余甘子遗传资源明显划分为惠安余甘和莆田余甘两大类。各供试材料之间的遗传距离范围为0.00～1.00,其中栽培品种与野生资源之间遗传距离在0.43～1.00之间;莆田余甘资源与惠安余甘资源之间遗传距离为0.27～0.99。     

茶树优质资源的同工酶遗传稳定性研究

用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法 ,研究了蓝标 1号、日铸茶、举岩茶、汝城早芽、云桂大叶等 5份优质资源及其扦插后代的酯酶、多酚氧化酶和过氧化物酶同工酶的酶带特征。结果表明 :举岩茶和其扦插后代的酯酶同工酶缺少了在其它四对材料中均出现的Rf =0 42的谱带。而汝城早芽和其扦插后代的多酚氧化酶同工酶Rf =0 39的谱带明显强于其它组的材料。而每一份优质资源和它们的扦插后代间在三种同工酶谱带类型和谱带的强弱上均未发现不一致的现象 ,从而在蛋白质水平上证明了扦插繁殖的遗传稳定性     

花生体胚诱导和植株再生研究

在含２０ｍ ｇ／Ｌ２，４－ Ｄ ＭＳ诱导培养基上，未成熟种胚和成熟种子种胚为外植体，光照培养下体胚诱导率分别为９２％ 和７８％ ，单个外植体平均产胚４８ 和４１ 个；而成熟种子胚小叶和未成熟种子子叶体胚诱导率均较低。以成熟种子种胚为外植体，２０ｍ ｇ／Ｌ２，４－ Ｄ和５ｍ ｇ／ＬＰｉｃｌｏｒａｍ 暗培养体胚诱导率分别为５５％ 和５８％ ，单个外植体平均产胚分别为４４和４２ 个。在含５ｍ ｇ／ＬＰｉｃｌｏｒａｍ 培养基上，１３个花生品种（系）体胚诱导率６％ ～８３３％ ，产胚量１２～４５个，差异显著，珍珠豆型花生品种体胚诱导率、产胚量普遍高于普通型花生品种。８ 个品种（系）体胚在含１０ｍ ｇ／ＬＢＡ 的ＭＳ培养基上枝条再生率３６３％ ～７７８％ 。再生枝条在含０３ｍ ｇ／ＬＮＡＡ ＭＳ培养基上生根后，植株移到温室已正常开花、结荚。