竹节虫的繁殖

<正>之前给大家介绍过竹节虫的相关知识,很多朋友都被这种奇特的虫子给吸引住了,都来咨询竹节虫的相关饲养问题,我也分享了不少若虫给喜欢的朋友。其实竹节虫非常好养,饲养和繁殖竹节虫可以观赏到它们传奇的一生,感受到物种进化的魅力。这里我想再聊聊竹节虫的繁殖注意事项,这样可以让它们在家庭饲养情况下开枝散叶,分享给更多的虫宠爱好者,让更多的朋友了解并喜好竹节虫。     

伪装高手变色龙

<正>谈到变色龙,相信大家都不会陌生。很多相机、电视机的广告都会选用变色龙担当画面的主角。如果变色龙身上那绚丽的色彩,以及那快速变色的能力被演绎得很好,则足以证明其产品质量的可靠性。《动物世界》以及很多其他科普类的电视栏目或书籍,也经常会介绍到这种神奇的生物,甚至把变色龙当成了大自然中伪装高手的典范。这一期就请跟随笔者走进上海大自然野     

拟态弧菌毒力因子的分子生物学研究进展

拟态弧菌可引起水产动物的弧菌病，已知的毒力因子有粘附素、内毒素和外毒素，其致病性并不是取决于某一毒力因子，而是在侵袭宿主导致宿主发病的过程中各种毒力因子在分子水平上协同作用的结果。从分子水平来研究各种毒力因子的基因表达和调控及它们之间的关系，可进一步探索其致病机理。     

且看高手养大虾

养虾能手潘老板,迄今为止,养虾7年,前3年在大家都能养好虾的时候,他努力学习,不断总结,赚钱自不必说.从2010年开始,他所在的地区就有很多人陆陆续续出现养虾时好时坏的情况,唯有潘老板,年年大丰收.他虽然虾塘面积只有10多亩,但每年基本可以赚钱20万元左右.走进他的小屋,入眼就可以看到厚厚的七八本笔记本,1年至少1本,每年的养殖情况、效益分析、个人对于养殖的理解和总结,全部记载得一清二楚.笔者的这篇文章,主要也是根据潘老板所述,结合其笔记记录情况,就其中的1号塘今年的养殖流程做出的总结,并提出一些小小的建议.     

蟹源拟态弧菌外毒素生物学特性研究

对蟹源拟态弧菌HX-4菌株外毒素的酶活性、溶血活性、细胞毒性和致死性等生物学特性进行了系统研究。采用固体硫酸铵盐析法和层析技术提取拟态弧菌HX-4菌株外毒素,所得外毒素具有酪蛋白酶、明胶蛋白酶、溶血素等多种毒性酶活性、细胞毒性(HEp-2)、肠毒性和致死性等生物学特性,TC ID50为0.025μg,对中华绒螯蟹的半数致死量(LD50)为1.40μg。     

蟹源拟态弧菌外毒素酶活性的分析

采用琼脂平板扩散法和指示凝胶技术对蟹源拟态弧菌HX-4菌株外毒素的酶活性及稳定性等特性进行了系统研究。结果显示:该菌外毒素具有酪蛋白酶、明胶蛋白酶、溶血素、卵磷脂酶和几丁质酶活性,不具有血浆凝固酶、脂酶和DNase酶活性。外毒素具有相对的稳定性,除热外,其它环境因素改变对其酶活性影响不大。指示凝胶技术试验结果表明:外毒素含有3种蛋白成份,相对分子量分别为154 KD、143 KD和117 KD,同时具有酪蛋白酶、明胶蛋白酶、溶血素活性。     

蟹源拟态弧菌最佳产毒条件的筛选

通过体外试验，探讨了培养条件的改变对蟹源拟态弧菌(HX-4)产毒量的影响。结果表明，培养基种类、氯化钠浓度、初始pH、溶解氧、培养温度和时间的不同均可影响细菌产毒量，HX-4菌株的最佳产毒条件为细菌接种于起始pH为8．0，含0．5％NaCl-BHI培养基，28℃振荡培养36h或静置培养48h。同时，通过动物实验测定了外毒素的致病性，结果显示，外毒素粗提液对小鼠及河蟹均有致病性。粗提液的溶血活性越高，对动物的致死率也越高。具有蛋白酶活性而无溶血素活性的粗提液，对动物只有致病性，而无致死性。     

蟹源致病性拟态弧菌的粘附及侵袭特性

病原菌对机体的致病作用是由其产生的各种毒力因子共同作用的结果,其中病原菌对组织细胞或粘膜的表面粘附是造成机体感染的首要条件。病原菌的粘附因子主要包括菌毛粘附素和其它非菌毛粘附素(如鞭毛、外膜蛋白和血凝素等),其中以菌毛介导的病原菌对组织细胞的粘附是细菌在体内定居、增殖释放毒力因子发挥致病作用的关键。为了揭示拟态弧菌HX 4的致病机理,以经典粘附模式细胞HEp 2细胞作为体外细胞模型,探讨蟹源致病性拟态弧菌HX 4株的粘附特性以及受体物质和抗全菌抗体对细菌粘附作用的影响,同时采用庆大霉素清洗裂解培养法测定该菌对HEp 2细胞的侵袭力。结果显示,HX 4菌株能粘附HEp 2细胞,对HEp 2细胞具有侵袭力。细菌对HEp 2细胞的粘附方式为集聚性粘附,最佳粘附时间为1h,甘露糖和抗体能显著抑制该菌的粘附,表明HEp 2细胞上含有甘露糖样受体。该菌的粘附素除了主要是菌毛外,可能还含有鞭毛、外膜蛋白、血凝素等多种成分。     

高手在民间 清新土法疫苗专家梁绍榕

<正>在清远市清新区草鱼养殖界,提到梁绍榕,几乎是无人不识,绝大部门养草鱼的人都请过梁绍榕到自家鱼塘给草鱼注射疫苗。据了解,这位民间打针高手所用的疫苗都是自家研制的,而且在当地颇有口碑。自制疫苗被养殖户称赞近日,本刊记者慕名来到一栋竹林掩映的小洋楼,这就是梁绍榕的家。梁师傅制作的疫苗就是出自这栋楼里的一间工作室,疫苗保存于冷柜中,包装简易。据当地一些养殖户反映,梁氏疫苗虽土,但效果显著。据了解,梁绍榕是土长土长的农民,年轻的时候就开始养鱼。一个农民,他哪来如此高超的疫苗制作技艺呢?原来,早在1987年,年轻好学的梁绍榕就被推荐到     

致病性拟态弧菌的敏感药物和拮抗菌的筛选

采用纸片扩散法,系统测试了3株致病性拟态弧菌对8类23种抗菌药物的敏感性与联合用药的敏感性。结果显示:氨基糖甙类、头孢类、喹诺酮类和磺胺类等多种抗菌药物对病原弧菌均有抑制或杀死作用。庆大霉素与四环素类、头孢类、喹诺酮类、红霉素或氯霉素联用以及多粘菌素与头孢类、喹诺酮类、红霉素或氯霉素联用均表现出一定程度的累加或协同作用;同时,采用琼脂平板扩散法从9株非致病菌中筛选对致病性拟态弧菌具有拮抗作用的益生菌并对其抑菌活性进行测定。结果显示:HX-01和HX-05两株细菌的菌液和无细胞上清液对3株致病性拟态弧菌均具有拮抗作用。在拮抗菌—病原菌混合体系中,病原菌经24 h培养,菌数由原来的105CFU/mL增至2ⅹ108CFU/mL,但从第2天开始,随着拮抗菌产生的抗性产物浓度的增加,菌数快速下降,至第6天病原菌完全被杀死。而拮抗菌培养至第6天,菌数仍保持较高水平(2ⅹ107CFU/mL)。表明这两株拮抗菌对致病性拟态弧菌具有较强的拮抗作用。经数值鉴定法确定两株拮抗菌均为产碱杆菌。     

金钱龟养殖高手卢启良支招龟鳖安全越冬技巧

<正>龟鳖冬眠并不是让它睡就可以了,需要一些保护措施来使它们安全地越冬。香港中文大学医学系高级导师卢启良说。除了导师头衔,卢启良还是一名有着四十年金钱龟养殖经验的养龟发烧友。近日,龟鳖美食文化实物展在顺德开幕,卢启良专程赶来向龟友们传授经验。冬眠环境有要求龟鳖冬眠时新陈代谢很慢,但不是停止。如果停止则是死亡了。卢启良说,一般时至惊蛰,冬眠的动物就会重新出来活动。而龟鳖的正常习惯是,在冬眠的时候找一个洞穴或者掩体,比如沙坑或者泥层下。但是现在很多人养龟鳖,在它冬眠的时候是没有洞可钻的,用的地面是瓷砖或者水泥,你让龟鳖去哪     

金甲饲料，一个隐形高手的企业观

在甲鱼饲料行业,“金甲公司”（杭州金甲水产营养技术有限公司）几年前只是一个鲜为人知,默默无闻的饲料生产企业。但这几年,记者走访甲鱼养殖户时,发现他们对金甲饲料的评价相当高。究竟是一个什么样的企业,在没有很大的市场份额的情况下还能赢得这样的好口碑？8月,记者来到杭州,终于见到了这位”隐形高手”。     

拟态弧菌的致病性、耐药性及中草药防治弧菌病应用

拟态弧菌性腹水病是中华绒螯蟹、海水鱼类和淡水鱼类养殖过程中普遍流行、危害最大的细菌性疾病。在研究拟态弧菌的致病性和耐药性的基础上,研制开发既能有效防治弧菌病,又能解决药物残留和细菌耐药性问题的绿色生物渔药具有重要意义。重点概述了拟态弧菌的致病性、耐药性、中草药防治弧菌病的机理与应用现状,并对中草药的存在问题与对策进行了探讨。     

一位养蟹高手的“九字真经”

<正>季正德是江苏省张家港市塘桥镇青龙村的一位普通养蟹户,从事河蟹养殖已有近20年的历史,以其名字命名的张家港市正德河蟹养殖基地2004年即被评为张家港市级高效农业示范基地和农业科技示范基地;2010年荣获第四批国家农业部水产健康养殖示范场称号,2017年底又顺利通过上级复查;正德牌河蟹于2007年获评苏州市名牌产品,至今已连续11年通过无公害农产品的续展。因他养殖的河蟹质量好、规格大、产量高而稳,又乐于助人,赢得了良好的口碑,被     

拟态弧菌外膜蛋白OmpU 基因的原核表达及其免疫保护性研究

自行构建的pMD18T-OmpU重组克隆质粒经BamHI/EcoRI双酶切后,定向插入原核表达质粒pGEX-4T-1中构建重组表达质粒pGEx-4T-1-OmpU.将重组表达质粒转化至大肠杆菌E.coli BL21进行IPTG诱导表达.表达产物经SDS-PAGE电泳及Western-blot分析显示,以包涵体形式表达的GST-OmpU融合蛋白的分子量约为62.9 kD,可与鼠抗拟态弧菌外膜蛋白(Omps)免疫血清发生特异性反应,提示重组OmpU保留了天然Omps的抗原性.用纯化的融合蛋白免疫昆明系小鼠,以50LD50拟态弧菌(5×103CFU/mL)攻击,小鼠的免疫保护率为60%(9/15).表明OmpU是拟态.弧菌的保护性抗原之一,具有研发成为外膜蛋白基因工程亚单位苗的潜在价值.     

拟态弧菌OmpU蛋白的黏附功能及所介导的致病作用

为了探明拟态弧菌OmpU蛋白的黏附功能,利用同源重组技术敲除基因组中OmpU基因,并构建其互补株,再经组合PCR方法和序列测定,证实了OmpU基因的缺失和互补。对野生株、缺失株和互补株进行了遗传稳定性、生长特性、生化特性、细胞黏附性、致病性等方面比较研究。结果显示,缺失株具有遗传稳定性;在相同的培养条件下,与野生株相比,突变株的培养特性和生化特性没有明显变化,生长速率略减慢,对实验草鱼的毒力降低了4倍,对鲤上皮瘤细胞(EPC)的黏附能力显著降低,下降了66.6%,而互补株的黏附能力和毒力又得到恢复,与野生株无明显差异。研究首次确证了拟态弧菌OmpU蛋白具有黏附功能,OmpU蛋白通过黏附参与致病作用。     

遂溪养虾高手真了得 单造亩产过万斤

<正>今年南美白对虾养殖成功率依然不高,养殖户投苗积极性比往年有所下降,但是广东湛江市遂溪县乐民镇调神村部分养户却获得丰收,特别是吴意生、黄家发、黄发、黄招等四位养殖高手,近5年来从未失手,连年丰收,而且部分虾塘单造亩产商品虾在万斤以上。7月18日下午,记者一行来到吴意生的养殖场采访,工人正在投喂饲料。吴意生告诉《海洋与渔业》记者,塘里的虾是头造虾上市后投苗的,已经50天了,规格已经达70头/斤。今年头造虾于3月份投苗,养殖90天后,于6月18日收虾,平均规格是40头/斤,     

拟态弧菌感染黄颡鱼的动态病理损伤及病原分布研究

以1.0×106CFU·m L~(-1)拟态弧菌(Vibrio mimicus)浸浴感染黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco),于第0、第4、第8、第16、第24、第36、第48、第60、第72小时剖杀取样,研究病理损伤及病原菌的体内动态分布。结果显示,皮肤肌肉、鳃、肠道出现病变最早,其中皮肤肌肉损伤最严重。第16小时表皮变性、坏死,鳃上皮肿胀,肠绒毛水肿;第24~第48小时表皮坏死、脱落,真皮严重出血,肌纤维变性、坏死,鳃出血,上皮局部坏死,肠上皮变性与灶性坏死;第48~第72小时皮肤肌肉坏死更严重,形成溃疡灶,鳃灶性坏死。肾、肝、脾与心36 h后相继出现不同程度的淤血、出血,变性和灶性坏死。q PCR检测发现,第4小时即在鳃、肠、皮肤肌肉检出病菌,细菌含量分别为1.3×102CFU·mg~(-1)、2.6×102CFU·mg~(-1)、4.7×102CFU·mg~(-1);鳃与皮肤肌肉中菌量随时间延长而增加,第72小时皮肤肌肉中菌量达到4.5×107CFU·mg~(-1);第24小时后相继在肾、肝、脾、心检出病菌,菌量介于1.9×10~4.7×102CFU·mg~(-1)之间。结果表明皮肤、鳃和肠道是病菌的入侵位点,并在体内多组织、器官分布。     

蟹源拟态弧菌胞外产物的细胞毒性和致病性初步研究

本试验对蟹源拟态弧菌(Vibrio mimicus)HX-4菌株胞外产物(extracellular productions，ECP)的细胞毒性和致病性进行了系统研究。采用微量板法检测胞外产物的细胞毒性，结果表明该菌胞外产物对HEp-2细胞具有较强的细胞毒性，病变细胞变圆，脱落；除100℃处理外，经56℃和胰酶处理后，胞外产物仍具有细胞毒性。通过动物实验测定了胞外产物的致病性，结果显示胞外产物对小鼠与中华绒螯蟹均有致死性．致死率均为100％。     

草金鱼感染拟态弧菌后脾脏和肠黏膜组织的差异蛋白组学

为探讨鱼类感染拟态弧菌后脾脏和肠黏膜组织蛋白差异变化,本研究以拟态弧菌04-14分离株人工感染实验动物草金鱼,利用双向电泳(2-DE)结合质谱技术对感染前后脾脏和肠黏膜组织的差异蛋白组学进行研究。结果显示,感染后脾脏和肠黏膜组织中分别有11个和12个显著差异表达蛋白点,经MALDI-TOF-MS质谱鉴定出19种显著差异表达蛋白,其中上调表达蛋白10种,下调表达蛋白9种,α-淀粉酶、载脂蛋白A-I、β-肌动蛋白和过氧化物还原酶2为两种组织中共同存在的显著差异表达蛋白。GO注释分析表明,显著差异表达蛋白分别定位于细胞外区、细胞质、线粒体和内质网,具有结合、转运、催化、免疫、抗氧化和细胞骨架等分子功能,参与物质与能量代谢、细胞膜转运、补体活化、应激反应、细胞与膜骨架组建、蛋白质折叠、氧化还原及铁离子运输等8个生物学过程。研究结果为进一步研究拟态弧菌的致病机制及其与宿主互作机制奠定了基础。