牛病毒性腹泻/黏膜病RT-PCR 3种体系的试验研究

根据牛病毒性腹泻/黏膜病病毒5′端非结构蛋白基因序列,设计合成1对特异性引物,建立检测牛病毒性腹泻/黏膜病病毒244 bp片段的RT-PCR 3种体系。该3种体系对牛病毒性腹泻/黏膜病病毒NADL、Oregon C24V和长春184毒株各标准毒株的检测结果均为阳性。对标准毒株的细胞毒进行检测,其敏感度达0.1 TCID50;而对牛传染性鼻气管炎病毒、猪瘟病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒的细胞培养物进行检测,结果均为阴性。证明3种体系方法特异性强,敏感性高。初步结果表明所建立的RT-PCR技术3种体系可用于牛病毒性腹泻/黏膜病的检测及流行病学调查。     

牛病毒性腹泻/黏膜病病毒河北分离株的生物学特性

【目的】了解牛病毒性腹泻病毒河北分离株HB株的特性,阐明牛病毒性腹泻/黏膜病致病机理,更好的控制BVDV感染、流行提供理论依据特进行此项试验;【方法】用理化学及生物学方法对BVDV河北分离毒株HB的特性进行检测,与BVDV准毒株OregonC24V株进行比较,分析了其理化性及生物学特性。电镜负染检查可见直径为40￣60nm有突起的圆形或近圆形的病毒颗粒,病毒在蔗糖中的浮密度为1.13￣1.14g/cm3。与牛病毒性腹泻-粘膜病病毒颗粒相似。毒力测定TCID50为10-4.5。理化学研究表明,该病毒对氯仿、乙醚、胰酶敏感;不耐酸、对碱具有较强的耐受性。牛病毒性腹泻/黏膜病病毒对56℃30min较敏感,56℃70min可使其完全灭活。血凝试验表明,该病毒对鸡、兔、猪和绵羊的红细胞均无血凝性;5-碘脱氧尿核苷(5,-IUDR)不能抑制病毒的增殖,核酸分型试验表明该病毒株基因组为RNA;病毒纯化后经SDS—PAGE电泳出现了5条主要结构蛋白带,与BVDV国际标准毒株OregonC24V株结果一致;【结论】河北分离株HB株为牛病毒性腹泻病毒。     

犊牛病毒性腹泻--黏膜病

1 病因 黏膜病病毒是一种有荚膜,螺旋形,PNA病毒。病毒粒子呈球形。病毒对乙醚、胰蛋白酶、氯仿敏感。对酸敏感,-70～-60℃可保存多年。2 症状2.1 犊牛 以新生牛犊多见。2.1.1 早产型 犊牛提前一至二个半月产出,有生后即死,有生后1～2天死亡的,能存活者,发育不良。2.1.2 畸形 牛犊前肢腕关系,后肢跗关节屈曲,不能站立,     

新疆部分地区牛病毒性腹泻-黏膜病病毒的分离鉴定

[目的]了解新疆地区BVDV毒株的生物型和基因型.[方法]采集新疆石河子和伊犁地区疑似感染病毒性腹泻-黏膜病病毒牛的新鲜粪便174份,应用RT-PCR方法对其进行检测,将检测结果为阳性的样品接种于MDBK细胞上培养,电镜观察,测定毒价,使用RT-PCR方法对细胞培养物进行鉴定,并提取质粒进行测序,对结果分析.[结果]该毒株可使MDBK细胞发生病变,扩增出一条286 bp目的片段,经同源性和遗传进化分析,确定为BVDV-1型毒株.[结论]分离到一株BVDV-1型新疆毒株,可使MDBK细胞发生病变,病毒粒子直径约为20～ 40 nm,毒株TCID50 10-4.5/0.1 mL.     

牛病毒性腹泻/黏膜病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立一种检测牛病毒性腹泻、黏膜病病毒抗体的间接ELISA方法,利用昆虫细胞真核表达系统成功表达E2蛋白并纯化,使用纯化后的蛋白作为包被抗原。确定最佳抗原包被浓度为6μg·m L-1,最佳血清稀释度为1∶80,最佳包被液为碳酸缓冲液,最佳盐封闭液为5%脱脂乳,最佳血清作用时间为60 min,酶标抗体作用最佳浓度为1∶10 000;最佳底物作用时间为5 min,阳性临界值为D450 nm≥0.282。与IDEXX的BVDV间接ELISA试剂盒比较,总符合率为91.5%,板内和板间重复性试验变异系数均小于10%。该方法与牛副流感病毒Ⅲ型、牛传染性鼻气管炎病毒、牛呼吸道合胞体病毒和牛冠状病毒阳性血清无交叉反应。因此,该ELISA诊断方法可用于大批量样本抗体水平监测和流行病学调查。     

牛病毒性黏膜病流行特点及防控措施

<正>牛病毒性黏膜病一般会造成牛只产生腹泻的情况,又被称为牛病毒性腹泻性黏膜病,是一种全球范围内的急性传染病,犊牛发病率最高,全年均可发病,春秋两季发病率较高。本文对牛病毒性黏膜病的流行病学特征、临床诊断与具体防治措施进行介绍。1病原牛病毒性腹泻病毒为黄病毒科,瘟病毒属,有囊膜的单股正链RNA病毒,呈圆形。此病毒对氯仿、胰酶和乙醚敏感,     

牛病毒性腹泻-黏膜病病毒噬菌体单链抗体库的构建和筛选

为筛选牛病毒性腹泻-黏膜病病毒（Bovine viral diarrhea virus,BVDV）gP48蛋白的单链抗体,本研究利用噬菌体展示技术构建了gP48蛋白单链抗体克隆文库,通过微孔筛选法对抗体库进行3轮富集淘筛,利用ELISA技术测定单链抗体的亲和力,对亲和力较高的克隆进行基因测序分析和结合活性测定,旨在获得gP48蛋白的单链抗体。结果表明：1）成功构建了库容量为4.3×107的噬菌体单链抗体库,其重组率为83.3%,经三轮筛选对噬菌体抗体库进行富集,富集倍数为1.43×104;2）优化了间接ELISA方法,筛选到3株与BVDV gP48蛋白具有高亲和力的单链抗体以及其基因序列,通过IgBLAST分析显示,3株单链抗体均为鼠源IgG。综上,从gP48蛋白的单链抗体库中筛选获得3个具有高亲和力的单链抗体,可用于后续BVDV检测方法的建立。     

牛病毒性腹泻／粘膜病诊断技术研究进展

牛病毒性腹泻／粘膜病病毒（BovmeViralDiarrheaVirus／MucosalDiseaseVirus．BVDV／MDV）是引起牛病毒性腹泻一粘膜病的病原．该病呈世界性分布,在许多养牛业发达国家尤其严重．造成该病广泛流行的主要传染源是牛群中存在持续性感染牛,因此建立起特异、敏感、简便且快速的诊断方法来检疫、淘汰持续性感染牛是防治该病的关键。近年来．由于各种诊断技术的不断出现,在BVD／MD的病原检测上取得了显著的成就．本文对近年来在BVD／MD检测技术研究的一些进展进行综述。     

牛病毒性腹泻病—黏膜病诊断与防治技术

牛病毒性腹泻病—黏膜病是一种牛传染病,主要发病原因是牛体内携带有牛病毒性腹泻病毒,主要的发病特征是牛消化道系统受到损坏,部分黏膜出现坏死,甚至是引发肠胃炎和腹泻.该类病症的发病区域较广,发病牛的种类较多,目前全球多个养牛较发达国家均出现过该病症,其中美国、新西兰等国家的病毒较为严重.牛病毒性腹泻病—黏膜病不仅会严重影响...     

鹿源牛病毒性腹泻—黏膜病病毒E_2基因的克隆与序列分析

对已发表的牛病毒性腹泻-黏膜病毒E2基因的核苷酸序列进行比较分析并设计引物,应用套武RT-PCR获得鹿源BVDV E2基因.测序分析结果表明:鹿源BVDV E2基因由1 122个核苷酸组成,编码374个氨基酸.与Oregon CV24、NADL、ZM-95、SD1、Osloss、S10、SH9、Changchun184、Shitara、Deer-GB1核苷酸和推导氨基酸同源性分析表明:鹿源DVBV分离株与Changchun 184株及Osloss株的同源性较高,分别为99.2%和92.8%;与日本Shitara株的同源性为71.2%;与国际标准毒株CV24的同源性为74.6%.     

牛病毒性腹泻的防治

本病又名牛黏膜病.是由牛病毒性腹泻-黏膜病毒引起牛的急性型口腔、消化道黏膜发炎、糜烂、溃疡、腹泻的一种传染病.反刍兽与猪感染,一般呈隐性、多发生于冬春季节,幼年的牛易感性高.     

牛病毒性腹泻的防治

牛属反刍动物,从消化能力来说,不如马属和其它动物的消化功能强,粪便多,表现稀、软,遇上冷、热气候和饲料改变时,常因病毒引起腹泻,特别是犊牛,一经感染,呈急性、发热、粘膜性病毒传染病,造成死亡。本病在殴美各国广泛传播。 症状。牛一旦感染病毒后,分泌物,排泄物、血液     

牛病毒性腹泻的防治

牛病毒性腹泻是由牛病毒性腹泻病毒感染引起，常以亚急性或慢性感染为主，且多感染小母牛，病牛口腔糜烂明显，尸检时胃肠道呈典型的粘膜病变，发热、失重、腹泻，故又称粘膜病。     

牛病毒性腹泻的诊治

<正>牛病毒性腹泻—粘膜病是由粘膜病毒(BVDV)所致的一种世界广为传播的传染病,以消化道粘膜发炎、糜烂、坏死和腹泻为特征。大部分感染粘膜病毒的牛多呈隐性感染,常不表现独特的临床症状和病理变化,诊断比较困难,从而增加了防治难度。一、发病情况伊犁州察县某奶牛场饲养1000多头黑白花奶牛,2009年1月中旬以来,该牛场出生的100余头4月龄牛相继发病,至1月22日发病犊牛共70只,发     

牛病毒性腹泻病毒研究进展

牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhoea virus,BVDV)是一个影响养牛业经济发展的重要病原,它能够引发牛病毒性腹泻病(Bovine viral diarrhoea,BVD)。BVD是急性和繁殖障碍型传染病,使牛发生病毒性腹泻、发热、黏膜溃疡和白细胞数量减少等症状。文章重点对病毒的分型、E2蛋白结构功能、临床感染类型和防控措施等进行了综述,为该病的深入研究提供参考。     

牛病毒性腹泻治疗分析

本文通过对牛病毒性腹泻疾病的分析及治疗提出一些方法,希望可以为养殖户提供帮助。     

牛病毒性腹泻的预防

牛病毒性腹泻（简称粘膜病）是牛腹泻病毒引起的一种接触性传染病。主要特征是消化道粘膜糜烂、坏死,胃肠炎和腹泻;传染源主要是来自病畜的分泌物、排泄物、血液和脾脏等。1病因本病的主要传染源来自病畜的分泌物和排泄物。病畜可发生持续性的病毒血症。本病主要通过消化道、呼吸道接触感染,也可通过胎盘发生垂直感染,交配、人工授精亦能感染。本病呈地方性流行,一年四季均可发生,冬、春二季多发。     

牛病毒性腹泻的防治

一、病因 牛病毒性腹泻又称BVD,是由牛病毒性腹泻病毒（BVDV）感染引起,常以亚急性或慢性感染为主,且多感染小母牛,病牛口腔糜烂明显,尸检时胃肠道典型的黏膜病变,发热、失重、腹泻,故该病又称“黏膜病”。     

牛病毒性腹泻活疫苗田间试验

在完成牛病毒性腹泻活疫苗实验室研究的基础上,于2011年试制了3批活疫苗,经检验合格后,分别在3个牛场、总计180头牛进行了田间试验。结果,在试验观察期内,未发生牛病毒性腹泻病感染,且无任何不良反应,3个牛场的试验组在生产性方面与非试验牛群均无显著差异;抗体检测结果表明,试验组每头牛均出现了较高水平的抗体应答,log2SN50在7.4以上。由此说明,研制出的牛病毒性腹泻活疫苗不但使用安全,而且免疫效果可靠。