Biolog细菌自动鉴定系统的应用

目前,用于细菌鉴定的方法或技术很多,除可通过细菌的形态、生理生化性状或致病性对细菌进行分类鉴定外,还可采用血清学、酶学或噬菌体技术以及核酸和蛋白质分析等技术鉴定细菌。     

自动化细菌鉴定系统

自动化细菌鉴定系统高崇省（天津动植物检疫局３００４５７）自动化细菌鉴定系统ＭｉｃｒｏＳｔａｔｉｏｎＴＭ是美国８０年代后期在大量试验基础上研制成功的一种专门用于细菌诊断、鉴定的新型专家系统，该系统将细菌生理、生化过程的检测与先进的计算机管理手段有机地结...     

Biolog系统和16SrDNA序列分析方法在植物病原细菌鉴定中的应用

应用Biolog细菌自动鉴定系统（4．20版）对8个属的16个已知菌种进行鉴定，鉴定结果属准确率为87．5％，种准确率为75％。应用16SrDNA序列分析方法对相同的菌株测定，结果同源性均在99％以上。本文在对两种鉴定方法进行比较的同时，客观分析了两种方法的优点和不足，并讨论了两者在植物检疫工作中的应用价值。     

利用BIOLOG鉴定系统快速鉴定菜豆萎蔫病菌的研究

 本研究利用美国Biolog公司生产的MicroStation^TM V3.5系统对我国一类危险性病害菜豆萎蔫病菌及其相关菌进行了快速鉴定研究。研究结果表明,来自不同国家和寄主的24株菜豆萎蔫病菌及其相关致病变种,23株准确鉴定至种水平,其中13株鉴定至致病变种水平,种水平的鉴定准确率为95.8%,另外1株至属水平。同时2株苜蓿萎蔫病菌和2株番茄溃疡病菌均鉴定至致病变种水平。经聚类分析研究,结果支持了对格兰氏阳性植病细菌在属、种水平的分类。本研究是首次使用该系统对格兰氏阳性植病细菌进行鉴定研究,试验证明Biolog鉴定系统用于快速鉴定菜豆萎蔫病菌是一个很有用的工具,且由于其标准化程度高、快速准确,符合我国口岸植物检疫的要求。     

几种检疫性细菌病害的识别和病原菌的鉴定技术

文章对西瓜果斑病、马铃薯环腐病、番茄细菌性叶斑病、水稻白叶枯病和水稻细菌性条斑病的生物学症状及病原菌的鉴定特征进行了介绍,并对血清学检测、分子生物学检测技术在上述检疫性细菌病害病原菌鉴定中的应用进行了综述.     

烟草上两种新的细菌病害鉴定初报

 笔者1991年在吉林省各地烟草病害调查中发现两种新的细菌病害-叶斑病和黑茎病。其中黑茎病在生产上造成一定损失,尤其是采种株,在个别地块一些品种由于此病影响几乎收不到种子。     

南昌地区蔬菜冰核活性细菌分离鉴定

本研究对南昌地区蔬菜作物上的冰核活性细菌的进行分离鉴定,得到高冰核活性细菌3株,其中活性较强的初步鉴定为欧文氏菌属(Erwinia spp.)2株,假单胞菌属(Pesudomonas spp.)1株.初步了解了南昌地区蔬菜上冰核活性细菌的主要种群为假单胞菌属和欧文氏菌属.     

芹菜上两种细菌病害的病原鉴定

 在南京市郊区菜田内发现两种芹菜细菌性病害,症状差别明显;经分离鉴定,分别由不同的荧光假单胞杆菌引起。     

三株拮抗细菌的鉴定及抑菌作用研究

为了充分发掘和利用有益微生物资源,本文以草莓根腐尖孢镰刀菌Fusariumoxysporum为靶标菌,从草莓根际土壤中分离筛选得到3株拮抗细菌,通过培养性状与形态特征、生理生化特征以及16SrDNA同源序列比对分析进行了鉴定,菌株1-9和9—4为多粘类芽孢杆菌Paenibacilluspolymyxa、菌株12—4为枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis。这3株细菌对草莓根腐尖孢镰刀菌的抑菌作用进行了初步的研究,结果表明,3株拮抗细菌对草莓根腐尖孢镰刀菌的生长有很好的抑制作用,镜下观察对菌丝有致畸作用,其培养滤液还能够抑制草莓根腐病尖孢镰刀菌分生孢子的产生与萌发。     

植物土传病原菌拮抗细菌的筛选与鉴定

从作物根际土壤中分离到1056株细菌，筛选出7个具有较强拮抗活性的菌株。室内测定对水稻纹枯病菌、辣椒疫病菌、瓜果腐霉、油菜菌核病菌、棉花枯萎病菌、茄根腐病菌、棉花黄萎病菌、番茄青枯病菌、甘蓝黑腐病菌等重要土传病原菌有较强拮抗作用；温室盆栽试验对番茄青枯病表现出较好防效，其中以BOH2和OH11效果较为明显，防效分别为90．9％和86．4％。通过形态观察、生理生化试验和16SrDNA序列分析，确定OH11为产酶溶杆菌。BOH3为荧光假单胞菌，其余5个菌株为不同芽孢杆菌。     

小麦全蚀病生防细菌的筛选和鉴定

为获得对小麦全蚀病菌有良好拮抗效果的生防菌株,分别从河南省商丘市及驻马店市小麦全蚀病发生田块中采集小麦根际土样,采用稀释平板涂布法共分离到1051株细菌,通过与全蚀病菌G1037菌株进行平板对峙筛选,最终获得9株具有明显拮抗效果且生长状况良好的菌株。16S rDNA序列比对及生理生化性状分析结果表明：菌株P155、P154、P16及P147为荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescens,菌株P188和P97为恶臭假单胞菌Pseudomonas putida,菌株LY3为产酶溶杆菌Lysobacter enzymogenes,菌株S38为嗜根寡养单胞菌Stenotrophomonas rhizophila,菌株B20为洋葱伯克霍尔德Burkholderia cepacia。产抗生素相关基因的检测结果发现,菌株P147含吩嗪和硝吡咯菌素合成基因,菌株B20含硝吡咯菌素合成基因。除B20、LY3、S38和P147外,其余菌株均可产生嗜铁素。9株细菌都产蛋白酶。除P97、B20和S38外,其余菌株均可产脂肽类物质。盆栽试验结果表明,9株生防菌对小麦全蚀病都具有较好的防治效果,菌株P155和P154的防治效果最好,相对防效分别为67.11%和63.82%,略高于3%的苯醚甲环唑种衣剂的防治效果。研究结果表明这些细菌具有作为小麦全蚀病生防菌的潜力。     

肿节风炭疽病拮抗细菌的筛选与鉴定

为筛选出对肿节风炭疽病菌Colletotrichum dematium具有拮抗作用的细菌,开发新型生物制剂,本试验分别采用组织分离法和稀释平板法,从广西药用植物园科研基地健康肿节风植株的不同组织和根系土壤分离、纯化获得49株细菌。平板对峙试验结果表明,来自土壤的zjt-9、zjt-4,来自根系的zgs21及叶片的zyy13对肿节风炭疽病菌具有较强的拮抗作用,其中作用最强的是zjt-9。抗菌谱测定结果表明, zjt-9、zjt-4和zyy13对供试的18种病原真菌均有明显的拮抗效果,拮抗作用最强的是zjt-9,平均抑菌宽度最高达19.10 mm;经显微镜观察,拮抗细菌可造成肿节风炭疽病病原菌菌丝膨大、畸形、断裂。通过形态学特性和16S rDNA鉴定,zjt-9菌株为甲基营养型芽胞杆菌Bacillus methylotrophicus。     

油茶根腐病拮抗内生细菌的筛选及鉴定

为探讨防治油茶根腐病的高效拮抗菌的拮抗机制,采用研磨法从健康油茶根、茎、叶、果等组织中分离内生菌,通过平板对峙试验和抑菌谱检测试验筛选对油茶根腐病菌具有高效拮抗作用的内生菌,并进行形态观察、生理生化指标测定和16S rRNA序列分析.结果显示:从油茶中分离获得内生细菌75株,对油茶根腐病菌有拮抗作用的菌株18株,其中抑菌圈半径在5 mm以上的6株.这6株细菌的发酵液对油茶根腐病菌等6种供试病原真菌均有拮抗作用,其中菌株R6的抑菌效果最好,对各病原菌的抑菌圈半径均在10 mm以上.根据对R6的形态观察和生理生化指标测定,以及16S rRNA序列分析结果,初步鉴定其为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis.     

宁波樱花根癌病病原细菌鉴定

从浙江宁波14个樱花（Cerasus Mill.）病株样本上分离到多株土壤农杆菌菌株,其中10个菌株可致指示寄主番茄形成肿瘤,对菌株Czx-3的16S rDNA序列比对,确定樱花根癌病是由根癌土壤杆菌（Agrobacterium tumefaciens）侵染所致。进一步开展的标准生化和生理反应测试、碳源利用和选择性培养基等试验,鉴定出7个根癌病菌株为土壤农杆菌（A. tumefaciens）生物型2型,占70%,为优势种群,其余3个菌株为生物型1型。对樱花根癌病菌分类地位的确定,樱花种苗的检疫和病害控制奠定了理论基础。     

人参病原菌拮抗细菌的分离筛选与鉴定

为明确土壤拮抗细菌对人参常见病原菌的生防价值,从吉林省抚松县人参根际土壤中分离、纯化获得113株细菌,采用平板对峙法测定菌株的拮抗能力,通过温室盆栽试验研究其在土壤及人参根部的定殖规律,并通过形态、培养特征及16S r DNA序列分析进行分类鉴定。对峙试验结果表明,2株细菌对供试人参病原菌具有良好的拮抗广谱性,且多次验证其抑菌效果稳定。定殖研究结果表明,活性菌株SZ-56与SZ-60的定殖能力均达到显著水平,在土壤中的最大定殖菌量分别为每克土7.51×106CFU和7.28×106CFU,30 d后定殖菌量仍保持在105CFU;21 d后在人参根部的定殖菌量仍保持在每克根105CFU水平。根据形态、培养特征、生理生化指标和16S r DNA序列分析,确定SZ-56为内生芽胞杆菌Bacillus endophyticus,SZ-60为解淀粉芽胞杆菌B.amyloliquefaciens。     

禾本科作物的细菌病害及其检疫重要性

对于植物检疫来说,充分掌握危险性病虫杂草的分布发生规律,是制定检疫对象的基础。作为主要粮食作物和饲料的禾本科作物,所发生的细菌病害位于各科植物之首,其中种传占80%左右,造成的损失也最严重,如水稻白叶枯病、玉米枯萎病等。由于我国缺乏许多病害检疫重要性的资料,因此对目前国内外的资料进行综     

应用计算机鉴定检疫性害虫

随着计算机技术的发展和普及,从70年代开始,国内外就有关于应用计算机鉴定某类生物如植物子实、鱼和病毒等的报道。在昆虫鉴定方面,由于昆虫的种类繁多、鉴定特征复杂,以及昆虫分类学本身还存在许多问题等因素的影响,计算机的应用受到限制,开发的一些计算机系统也     

秦岭山区无机磷细菌筛选及其Biolog和分子生物学鉴定

为获得具有高解磷活性,可用于微生物肥料研制和生产的无机磷细菌菌株资源,采用平板溶磷圈法,从秦岭山区植物根际土壤样品中筛选获得3株高效无机磷细菌,命名为NO.9、NO.15、NO.17,根据钼锑抗比色法,培养5 d后,检测菌株发酵液,确定3株细菌的可溶性磷含量分别为98.12、80.37 mg/L和104.91 mg/L,微生物量磷含量分别为62.85、53.61、36.59 mg/L。生理生化特征、Biolog和16S rDNA鉴定结果表明,3株细菌均属于革兰氏阴性非肠道菌,NO.9菌株为Inquilinus ginsengisoli,NO.15菌株为醋酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus),NO.17菌株为荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)。     

鸭粪中1株水稻纹枯病菌拮抗细菌的鉴定

为探索稻鸭复合生态系统抑制水稻纹枯病发生的作用机理,以从鸭粪中分离到的1株拮抗细菌A168对水稻纹枯病菌的拮抗效果进行了研究。测定了其对水稻纹枯病菌的拮抗作用及其抑菌谱;根据培养性状、形态特征、生理生化测定、扫描电镜观察及16S rDNA序列分析对其进行了鉴定;构建了包括其在内的13株相关种属菌株的系统发育树。A168菌株对水稻纹枯病有明显的拮抗作用,且对小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)、稻曲病菌(Ustilaginoidea virens)和油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)有抑制作用,抑菌谱广;A168菌体杆状,革兰氏染色阳性、芽孢中生、周生鞭毛、16S rDNA分析与其亲缘关系较近菌株Bacillus cereus(AJ577288.1)的同源性达99%,结合形态和生理生化特征,鉴定A168菌株为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus),其16S rDNA序列已在GenBank中注册,登录号为GQ118339。A168为开发防治水稻纹枯病生防制剂提供了依据。     

杂草检疫鉴定方法

如何做好口岸杂草检疫,并做到检疫及时,鉴定准确,以适应植检形势的需要。本人通过几年来实验室的摸索和积累的经验,总结如下(以进口小麦为例)。1 实验室检验与鉴定1.1 取样与挑检对现场抽回的样品,根据仓号及标