多杀性巴氏杆菌鉴定与特性研究的分子生物学方法

多杀性巴氏杆菌是一种常见病原菌，其血清型众多（16种血清型），在毒力及流行病学等方面的生物学特性差异很大。分子生物学鉴定和特性分析方法能直接揭示其基因型上的差异，具有高灵敏度和可靠性。本文综述了多杀性巴氏杆菌的PCR、菌落杂交和16S rRNA基因测序等鉴定方法以及限制性酶切分析、核糖体分型、脉冲场凝胶电泳、PCR指纹等特性分析方法。     

羔羊多杀性巴氏杆菌的分离鉴定

应用实验室细菌学分离技术，从以咳嗽、呼吸等临床症状为主要特征的，死亡羔羊的肺、肝、脾、肾等组织中分离到一株病原菌。经细菌形态和培养特性观察，染色镜检，生化实验，结合临床症状及流行病学特点，确定该病原分离株为多杀性巴氏杆菌。     

猪多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定

多杀性巴氏杆菌是引起多种畜禽巴氏杆菌（亦称出血性败血症）的病原体,是引起畜禽共患的一种急性传染病,主要引起动物发生出血性败血病和传染性肺炎。本菌广泛分布于世界各地,正常存在于多种健康动物的口腔和咽部黏膜,当动物处于应激状态,机体抵抗力下降时,细菌侵入机体,大量繁殖并致病,发生内源性传染。在同种或不同的动物间可相互传染,蜱和蚤被认为是自然传播的媒介昆虫。     

猪多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定

从黑龙江省某猪场发生的以呼吸道症状为特征的病死猪脏器中分离到3株细菌,通过触片镜检、细菌分离培养、常规生化试验和小鼠致病性试验等对该菌进行了初步鉴定,并进行了药敏试验检测。结果表明,分离菌为多杀性巴氏杆菌,对氟哌酸、丁胺卡那霉素、庆大霉素、红霉素、氯霉素敏感。     

鸡多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定

根据发病情况和病理变化,结合病原分离、动物试验、毒素试验、生化试验、药敏试验等,证实广西某鸡场鸡群急性死亡是由鸡多杀性巴氏杆菌引起的禽霍乱。     

健康马鹿鼻道多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定

对１０头马鹿鼻内容物经改良马丁琼脂平板培养、生化反应试验、英膜分型鉴定，分离出二株多杀性巴氏杆菌。该菌英膜抗原属Ｂ型。对小白鼠有较强致病性。     

肉牛多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及药敏分析

为调查多杀性巴氏杆菌在河北省部分地区肉牛群中的流行情况,本课题组从规模化肉牛养殖场中采集患有呼吸道综合征的病牛鼻腔拭子进行细菌分离鉴定、荚膜血清分型、毒力基因检测、动物攻毒试验及药物敏感性分析。结果显示,从105份鼻腔拭子中共分离了25株多杀性巴氏杆菌;菌株荚膜分型均为A型,携带ptfA、exbB和nanH等多种毒力基因,LD_(50)显示多数菌株毒力较强;分离菌株对大多数药物敏感性较高,但对复方新诺明、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶和林可霉素药物耐药性较高,耐药率达到80%以上。     

禽A型多杀性巴氏杆菌的分离和鉴定

2007年9月,某鸡场5000只70多日龄土杂肉用鸡群爆发一急性死亡病例,根据发病情况和病理变化,结合病原分离、动物试验、生化试验及PCR技术证实该鸡群爆发疾病为荚膜A型多杀性巴氏杆菌引起的禽霍乱.     

多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及药敏试验

今年10月，某猪场饲养的中猪突发死亡，当地兽医部门初诊为猪肺疫或因中毒导致猪的死亡。为进一步查明原因，送病料至本实验室作病原学检查。我们对病料进行了细菌学检验，分离并鉴定了分离菌株，现将实验结果报告如下：     

猪多杀性巴氏杆菌病病原的分离与鉴定

无菌采取病死猪的心、肝、脾、肺、肾等8份病料,进行细菌的常规分离培养与鉴定。结果:分离出多杀性巴氏杆菌,结合流行病学资料分析、临床症状、病理变化和实验室诊断,确诊为猪巴氏杆菌病。     

多杀性巴氏杆菌和沙门氏菌的分离与鉴定

某鸡场发生一种以雏鸡急性死亡、严重下痢为主的传染病。通过采集发病死亡雏鸡的肝脏等作病原分离培养、形态学观察，得到两种不同的菌。暂命名为001菌和002菌。001菌为革兰氏阴性小杆菌，该菌在血琼脂平板上不溶血，三糖铁琼脂斜面上菌落为红色，穿刺线呈黄色，底部变黑，有气泡。发酵麦芽糖、葡萄糖、果糖。硫化氢试验为阳性。001菌与沙门氏因子A-F多价O血清发生凝集，与鸡白痢沙门氏因子血清O9、O122、O123的玻片凝集试验为阳性。故确定该菌为D群鸡白痢沙门氏菌。002菌为革兰氏阴性卵圆形短小杆菌。在血平板培养基上不溶血，为露珠样小菌落，在麦康凯琼脂平板培养基上不生长，该菌与沙门氏因子A-F多价O血清和大肠艾希氏OK多价诊断血清不发生凝集。故确认002菌为多杀性巴氏杆菌。     

猪多杀性巴氏杆菌PCR检测方法的建立及其应用

设计了1对用以检测猪多杀性巴氏杆菌的引物。对临床送检的有肺炎症状或萎缩性鼻炎症状的发病猪的病料进行细菌培养．然后挑菌做PCR，同时对可疑菌落纯化培养后做生化鉴定。结果，从不同省(市)的送检病料中分离鉴定出66株多杀性巴氏杆菌，PCR检测结果与生化鉴定结果完全符合；该引物对其他6种猪的常见呼吸道病原菌的扩增结果均为阴性；该PCR检测方法能检出CFU为10^3／mL的巴氏杆菌模板。     

禽霍乱多杀性巴氏杆菌的分离鉴定

确定某鸭场疑似禽霍乱病的病原种类,为其临床用药提供参考。采用细菌分离技术对病原菌进行实验室分离培养,对分离到的病原菌进行了鉴定、动物攻毒试验、药敏试验和基因分型。结果显示,分离菌20170549具有多杀性巴氏杆菌典型培养特征,菌落形态和菌体染色特征、生理生化特性,基因测序结果均与多杀性巴氏杆菌相符;该菌株对小鼠有强致病性;分离株对头孢噻呋、甲砜霉素、硫酸黏菌素、阿米卡星、恩诺沙星、卡那霉素、庆大霉素、多西环素、氟苯尼考高敏;采用5对分型引物对分离菌进行基因分型,结果仅扩增到大小为1 050bp的目的基因片段,与A型结果相符。研究结果可为禽霍乱的防控提供参考。     

西藏牦牛多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及药敏分析

为了对西藏牦牛多杀性巴氏杆菌进行分离鉴定和药敏分析,为多杀性巴氏杆菌病的诊断、治疗以及防控提供一定理论依据,本试验对病死牦牛的内脏组织进行了细菌分离,再通过涂片镜检、生化鉴定、荧光定量PCR法对分离细菌株进行了鉴定,并利用17种抗菌药物对该细菌株进行了药敏分析.结果 显示:该细菌株镜检为革兰氏阴性短杆菌,在血清琼脂平皿...     

牛多杀性巴氏杆菌病病原的分离与鉴定

牛多杀性巴氏杆菌病,又称"牛出败",全称"牛出血性败血病",是由多杀性巴氏杆菌引起的一种以高热和败血症为特征的急性传染病[1].2003年10月初,湟源县某牛场的牦牛、犏牛等突然发病、死亡,前后共发病7头,发病率为0.87%(7801);死亡7头,致死率为100%(77).其临床症状:病初体温高达41～42 ℃,精神沉郁,口吐白沫,饮食欲减退或废绝,呼吸加快,有痛苦性干咳,流涎,肌肉震颤,腹痛,下痢,粪便初为粥状,后为液状,间或杂有黏液、黏膜碎片及血液,气味恶臭;随着病情的发展在颈部、咽喉部及胸前的皮下结缔组织出现弥漫性炎性水肿,可视黏膜发绀;肺部听诊有支气管音及水泡音,有的听到胸腹摩擦音.病理变化:脾有小点出血;肝肿胀,质脆,个别牛肝表面有坏死灶;肾稍肿;淋巴结明显水肿;肺脏表面有肝变区,呈大理石样花纹,有纤维素性胸膜炎变化;心冠脂肪、心内外膜出血明显,心包积水;咽喉、颈、四肢等部皮下有浆液性浸润,切开流出深黄色透明的液体,间或杂有血液,咽周围组织和会咽软骨韧带呈黄色胶样浸润,上呼吸道黏膜卡他性潮红.笔者于2003年10月初对其进行实验室检查,确诊为牛多杀性巴氏杆菌病,并采取了相应的预防措施,再无新病例发生,现将结果报告如下.     

鸽源多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定

从天门市某养鸽场采集发病鸽的心血、肝、肺等组织病料进行细菌的分离培养,并对分离的菌株进行生化鉴定、人工感染动物和药敏试验。结果显示,分离的病原体为多杀性巴氏杆菌,该菌株对蒽诺沙星、环丙沙星高度敏感,对氨苄青霉素、庆大霉素中度敏感,对氯霉素、青霉素、四环素和磺胺二甲嘧啶不敏感。     

猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及毒素检测

多杀性巴氏杆菌(pasteurella multocida，Pm)在世界各地分布非常广泛，在畜禽中带菌率较高，有资料指出，猪的鼻道深处和喉头内，带菌率为30．9％。多杀性巴氏杆菌按荚膜的不同可分为A、B、C、D和E5个血清型，其中A、B和D型已在猪中发现；多杀性巴氏杆菌还有16个体细胞血清型，在猪中检测到的有血清3型与5型，     

兔多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及药敏试验

兔巴氏杆菌病是由多杀性巴氏杆菌引起的急性传染病,又称兔出血性败血症,多见于9周龄～6月龄的兔.我国许多地区都有对该病的报道.本病发生后多呈散发,因此难以净化兔群,如不及时采取有效措施常引起家兔生长缓慢、饲料报酬降低或大批死亡及药物防治费用增加,给养兔业造成了严重的经济损失.研究通过对细菌进行分离培养和鉴定、生化试验、动物试验并进行药敏试验,现报道如下.     

鹅感染多杀性巴氏杆菌和大肠杆菌的分离鉴定

某地一鹅群发生一种以败血、高死亡率为特征的急性传染病．其临床表现为沉郁、不食、下痢等。病变特征以内脏器官充血、出血和坏死为主。本文从鹅体内分离到16株细菌．经鉴定为多杀性巴氏杆菌和大肠杆菌混合感染；并进行了毒力试验和药敏试验，结果表明多杀性巴氏杆菌致病性较强．大肠杆菌致病性稍弱．两菌混合感染致病性最强。恩诺沙星、单诺沙星和头孢氨苄西林对两种菌均为高敏。其余药物为中敏或不敏感。