新疆阿魏种子无菌苗制备研究

为获得供新疆阿魏组织培养无菌苗制备的方法。研究了不同的消毒方法、激素、层积温度和相对湿度等条件下,对新疆阿魏无菌苗制作的影响。结果表明:新疆阿魏种子最佳消毒方法为70%酒精30 s+12%H2O215 min;层积温度4℃,相对湿度50%,新疆阿魏种子萌发最好;新疆阿魏种子经GA3处理可打破休眠,但发芽率低于低温层积处理。     

次氯酸钠对烟草无菌苗生理指标的影响

为探索不同浓度次氯酸钠对烟草无菌苗生长的影响,分别用25%、30%及40%NaClO处理烟草种子30min,然后,测定了无菌苗的生物量、根系活力、叶绿素含量、根冠比、根长和株高等生理指标。结果表明,在处理30min的情况下,25%NaClO处理较为适宜,无菌苗的各项生理指标均有较好的表现。     

杜仲无菌苗组织培养的快速繁殖技术

杜仲是中国特有的珍贵树种,具有重要的医药价值和经济价值。针对杜仲组织培养多存在易污染,不定芽、不定根诱导难等问题。本研究以杜仲无菌苗为材料,研究了最适外植体,不定芽诱导、增殖培养和促进生根的最适基本培养基、植物生长调节剂的种类和浓度。研究结果表明,以杜仲无菌苗茎尖为外植体,以MS为基本培养基,添加0.5 mg/L或1.0 mg/L 6-BA、同时添加0.5 mg/L NAA最适合愈伤组织诱导;单独使用0.5 mg/L的6-BA时虽然愈伤组织诱导率较低,但不定芽诱导率最高,为88.9%,适合进行后续不定芽的增殖试验。以WPM为基本培养基,添加IBA 1.0 mg/L时,生根数最多,生根率达88.9%,且根系较长。研究结果将为实现杜仲组织培养的工厂化生产、杜仲基因工程等提供技术参考。     

野生大白杜鹃无菌苗愈伤组织诱导研究

采用大白杜鹃无菌苗的嫩叶、上胚轴和下胚轴为外植体,进行愈伤组织的诱导与增殖.结果表明:接种到1/2 MS+ZT 1.0 mg/L+ NAA 2.0 mg/L+水解酪蛋白100 mg/L培养基上,愈伤组织的诱导率明显提高.不同部位愈伤诱导率:上胚轴>下胚轴>嫩叶,ZT对3种外植体的诱导均达到显著水平.     

银杏的药用价值及组织培养研究

从银杏的果实、叶、种皮、种仁及木材等方面论述了其药用价值,并概述了银杏茎段培养、配子体培养、胚培养、愈伤组织诱导以及银杏组织培养中抑制褐化问题等方面的进展。愈伤组织培养的基本培养基为SH基本培养基中加2,4-D2mg/L,6-BA1mg/L和NAA0.5mg/L以及苹果汁10%以及在1.0kV/cm强度的高压静电和Cu2+条件下有利于愈伤组织生长。改良MS培养基和多效唑可以促进腋芽萌动和分化;MS+BA2mg/L+NAA0.5mg/L的培养基、蜂王浆和椰子乳汁对诱导银杏胚状体有很大促进作用。0.1%植酸(肌醇六磷酸酯)、5.0mg/L抗坏血酸或2000mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP有明显抑制褐变的作用。     

银杏茎段组织培养试验

银杏(Ginkgo biloba L)又名白果,是现存种子植物中最古老的子遗植物,素有"活化石”之称,全身是宝.但由于银杏是雌雄异株,种子小,产量低,有后熟期,不耐贮藏[1],用种子进行繁殖非常困难.王伏雄、罗紫娟、吴元立等[2～4]等利用组织培养获得银杏的完整植物,为银杏的快速繁殖开辟了新途径.笔者以带芽的幼嫩枝条和新生的叶片为材料,在多种培养基上进行培养,为快速繁育银杏探讨新的途径.     

银杏种子的构造及催芽技术

银杏 (Ginkgo biloba L.)俗称白果 ,是集营养、医疗保健、用材和观赏于一身的多用途经济树种 ,具有十分重要的栽培价值。近几年 ,山东省郯城县大力挖掘当地品种资源 ,发展银杏生产 ,1997年被农业部评为“银杏之乡”,从而带动了全县的国民经济发展。本文主要研究分析了银杏种子的构造特点和催芽技术 ,以期更好地服务于生产。1　种子构造特点人们常常把带有外种皮的银杏种子称为果实 ,其实它是一粒完整的种子。银杏种子的完整概念应当是包括橙黄色肉质的外种皮、乳白色骨质的中种皮和浅褐色膜质的内种皮以及胚乳、胚等。银杏种子除掉外种皮以…     

火石花多毛外植体初代培养成活率的分析

前期研究发现,火石花整株多毛,各类外植体的初代培养成活率均在5%左右,不利于火石花的离体快繁。为此,本研究采用2.0 mg/L的6-BA浇灌盆栽火石花,15 d后将获得的无毛嫩芽作为外植体进行初代培养,其成活率超过了61.11%。此后,无菌苗在含有6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.1 mg/L的MS培养基中增殖(增殖系数高达10.37),在含有NAA 0.1 mg/L的MS培养基中生根(生根率100%),生根苗的叶背纤维发育良好。经炼苗后,实现了火石花组培苗的成功移栽(成活率98.65%以上),移栽苗开花正常。本研究显著提升了火石花多毛外植体初代培养的成活率,建立了火石花优质种苗的离体快繁体系,为其他多毛植物的初代培养提供了新的参考。     

大白菜无菌苗子叶组织培养再生植株

选用8个大白菜亲本材料进行离体培养试验,探讨了植物激素、品种、苗龄、取材部位及外植体放置方式对大白菜子叶不定芽再生的影响。研究结果表明,大白菜子叶再生培养基为MS附加6-BA 2mg／L,NAA 0.5mg／L和AgNO3 5mg／L;生根培养基为1／2MS附加NAA 0．2mg／L。再生植株移栽时,最好在春季,成活率可达90％以上。     

银杏经济果园营建和经营管理技术

通过种子繁殖、分蘖繁殖和采用皮下技接法嫁接（嫁接成活率９５％）,建立银杏经济果园,出一产用技术,对我省银杏的发遽具有深远的经济意义。     

银杏叶片RNA提取方法的研究

为了获得一种银杏（Ginkgo biloba L.）叶片总RNA提取的理想方法,为后续的分子生物学研究打下基础,笔者以不同生长期的叶片为材料,利用生物分光光度计和凝胶电泳法比较了改良CTAB法、乙二醇丁醚法以及改良Trizol法提取的银杏总RNA的产率和纯度。结果表明：改良Trizol法所提取RNA的OD260/OD280比值介于1.8~2.0之间,并且OD260/OD230在1.9~2.1之间,具有较高的纯度。凝胶电泳结果表明,改良Trizol法有28S rRNA和18S rRNA 2条清晰的条带,且很少有降解;CTAB法获得的RNA品质也较好,但存在降解和弥散现象,乙二醇丁醚法提取效果较差。这表明改良Trizol法提取的总RNA具有很高的纯度,可以满足进一步分子生物学研究的要求。     

银杏花粉生活力测定及贮藏方法的优化

以银杏花粉为试验材料,研究了花粉在离体培养条件下,培养基中蔗糖、硼、钙对其萌发率的影响,优化了培养基配方;并比较了3种不同的染色法对银杏花粉生活力的测定效果。结果表明：培养5d是进行花粉萌发率测定的最佳时期,蔗糖对银杏花粉萌发至关重要,在培养基中添加3%蔗糖可有效提高花粉萌发率,达到50%左右;硼和钙对银杏花粉萌发有一定的促进作用,最佳培养基配方为蔗糖3%＋硼60mg/L＋钙100mg/L。TTC染色法测定的银杏花粉生活力与离体萌发法测定的结果可以相互代替和印证,是一种较为准确的测定银杏花粉生活力的染色法。4℃冰箱干燥保存利于保持银杏花粉生活力。     

基于FTIR的银杏木材鉴别研究

本文以毛白杨、侧柏为对照,采用红外光谱技术研究了银杏木材的红外指纹图谱,采用共有峰率和变异峰率双指标序列法对6个银杏无性系红外指纹图谱进行了分析鉴别,结果表明：毛白杨、侧柏与银杏3树种木材的红外指纹图谱明显不同,银杏木材的红外指纹图谱兼有阔叶和针叶树的特征,相对更接近于针叶树;6个银杏无性系木材的红外指纹图谱差别明显,能够用共有峰率和变异峰率双指标序列法鉴别银杏不同无性系木材。     

根外追肥对银杏光合作用的影响

为解决银杏育苗中土壤养分供应不足导致光合作用差,幼苗生长较弱的问题,试验拟采取根外追肥方式供给银杏养分,提高其光合效率促进生长。以3年生银杏幼苗为试材,设置T1(CK)、T2(0.50%尿素和0.50%过磷酸钙)、T3(0.50%尿素和0.50%磷酸二氢钾)、T4(0.50%尿素、0.50%磷酸二氢钾、0.10%微量元素)4个处理,田间小区试验设计,3次重复。结果表明：银杏不同月份净光合效率不同,追肥种类不同对净光合速率的影响不同,整个试验期间T4处理净光合速率均显著高于对照;根外追肥可以提高银杏叶片的蒸腾速率,T3、T4与对照相比差异显著,T3、T4之间无显著差异;除7月份之外,其余月份T4处理气孔导度始终处于最高值,与对照相比差异显著,其次为T3处理,T2处理对提高银杏气孔导度效果不显著;胞间CO2浓度除7月份之外T4处理均处于最低值,与对照相比差异显著;根外追肥可以影响银杏叶片水分利用效率。综合分析认为,T4处理对提高银杏叶片光合效率效果最佳。     

银杏愈伤组织细胞中总黄酮提取工艺的比较

为探索从药用植物细胞中提取黄酮类活性物质,用简单、易工业实现的低成本工艺获得较大的总黄酮提取率,为工业生产提供理论依据和实践指导,以银杏愈伤组织为材料提取总黄酮并测定含量。利用乙醇提取、超声波提取和水提取3种方法对银杏愈伤组织中黄酮类化合物进行提取,以络合分光光度法测定的黄酮得率为衡量指标,得到各自最佳的提取条件。结果表明：利用乙醇法提取愈伤组织中总黄酮提取最佳条件是：80%的乙醇作为提取剂,料液比为1∶7（m∶v）,于60℃提取3次,总黄酮得率为3.67%;超声波法提取最佳条件为60%的乙醇作为提取剂,料液比为1∶34（m∶v）,提取65 min总黄酮,得率为4.57%;水提法的最佳条件是：水温90℃,料液比为1∶30（m∶v）,提取3.5 h,总黄酮得率为2.95%。3种优化后的提取方法黄酮得率依次为：超声法＞乙醇法＞水提法。     

高质量提取银杏种仁总RNA的改良方法

提取高质量的RNA是获取银杏(Ginkgo biloba L.)种仁药用蛋白基因以及从基因表达水平研究林木良种银杏种子发育和后熟的必要条件。现有提取方法难以获得高纯度的银杏种仁总RNA。本研究旨在改良现有提取方法,以满足抽提富含蛋白质、多糖、多酚等特殊材料高质量RNA的需要。文中将改进的CTAB法和Trizol一步法相结合,优化了试剂组合并改进实验细节,从银杏种仁中获得了高质量的总RNA。通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计检测,提取的总RNA具有清晰的28SrRNA、18SrRNA条带,亮度满足2：1比例关系。OD260/OD280比值在1.85~2.00之间。将提取的总RNA用于Northern杂交分析可检测到清晰的信号,而用于RT-PCR和5'-RACE也可获得清晰的目的条带。说明这种方法获得的总RNA完整度和纯度很高,完全可以满足下游分子生物学实验要求。     

珠芽蓼无菌苗培养前的种子消毒方法研究

珠芽蓼是一种分布于高海拔地区的高寒蓼科植物。为获得珠芽蓼无菌苗,以珠芽蓼种子为材料,探讨了不同消毒剂组合及处理时间对种子消毒效果的影响。结果表明,用于珠芽蓼种子消毒的最佳方法为:75%酒精、1∶14新洁而灭溶液分别预处理1min,再用0.1%Hg Cl2浸种5min。处理后的种子染菌率为0,发芽率为68.3%。本研究结果为珠芽蓼组培苗快速繁育等研究提供了重要依据。     

截干对银杏类黄酮代谢及其抗氧化性的影响

为了探究截干措施对银杏(Ginkgo biloba L.)叶类黄酮代谢及其抗氧化特性影响,本研究通过对银杏嫁接苗进行截干处理,分析了截干处理对一个年生长周期内的银杏叶类黄酮代谢相关酶结构基因表达量、总黄酮醇苷含量及抗氧化活性的变化影响.结果表明,截干处理后,在一个年生长周期内银杏类黄酮代谢途径上、中游的酶基因表达量与对...     

不同单株叶籽银杏DNA甲基化MSAP分析

利用MSAP(甲基化敏感扩增多态性)技术对11株叶籽银杏的胞嘧啶甲基化水平和模式进行评估。结果表明,叶籽银杏基因组的CCGG序列中检测到36.86%～46.43%的DNA发生甲基化。本研究从36对选扩增引物中筛选出14对引物组合,共得到2879条清晰可辨的带,叶籽银杏总体平均DNA基甲基化水平为42.14%,甲基化模式以内侧胞嘧啶为主,其中,外侧胞嘧啶甲基化水平为11.90%～23.90%,内侧胞嘧啶甲基化水平为17.03%～28.37%。UPGMA聚类分析和主成分分析结果一致,不同单株的叶籽银杏可分为3大类。推断叶籽银杏的变异机制可能与DNA甲基化有关。