能量限制对黄曲霉毒素B_1处理大鼠微粒体细胞色素P—450的影响

大鼠分别按自由采食(AC组)、限饲能量(RC组)、自由采食+AFB_1(黄曲霉毒素B_1,AT组)和限饲能量+AFB_1(RT组)处理16周后,检测肝微粒体Cyt P-450.结果表明:各组Cyt P-450总量变化不大:Cyt P-450_bRC组和RT组分别高于AC组和AT组(P<0.01);Cyt P-450_cRc组比AC组增加30.6％(P>0.05),RT组比AT组增加45.0％(P<0.05);微粒体酶调节的体外3~H-AFB_1与DNA结合RC和RT组分别低于AC和AT组.表明能量限制对Cyt P-450_b和Cyt p-450_c有修饰作用。能量及AFB_1-DNA结合与Cyt P-450_b和Cyt P-450_c相关性检验提示,Cyt P-450_b和Cyt P-450_c活性的提高可能是能量限制引起微粒体酶调节的3~H-AFB_1-DNA结合下降的原因之一。     

黄曲霉毒素B_1对雄性肉仔鸡的毒害作用及对其肝脏谷胱甘肽硫转移酶活性的影响

以7日龄雄性鹿苑鸡为材料,分别在基础日粮中添加黄曲霉毒素B_1(AFB_1)1 mg/kg和2 mg/kg,饲养到28日龄,每隔7 d观察肉仔鸡生长情况,并测定肝脏谷胱甘肽硫转移酶(GST)催化底物CDNB(2,4-二硝基氯苯)、DCNB(1,2-二氯-4-硝基苯)、p-NBC(4-硝基氯化苄)的活性,研究AFB,对雄性肉仔鸡肝脏GST活性的影响。结果表明:两个处理组的28日龄肉仔鸡体重及平均日增重(ADG)显著降低,21-28日龄肉仔鸡平均日采食量显著降低,21-28日龄肉仔鸡料重比显著升高。1 mg/kg AFB_1组的21日龄肉仔鸡肝脏中GST催化DCNB活力显著降低。2mg/kg AFB_1组的21日龄肉仔鸡肝脏中GST催化CDNB及DCNB活力显著降低。两个处理组的28日龄肉仔鸡肝脏中GST催化CDNB、DCNB及p-NBC活力极显著降低。本试验表明:饲喂含1 mg/kg AFB_1或2 mg/kg AFB_1的日粮21 d,肉仔鸡的生长会受到抑制,肉仔鸡肝脏谷胱甘肽硫转移酶的活性会降低,且饲喂含AFB_1的日粮时间越长,肉仔鸡肝脏谷胱甘肽硫转移酶活性受到的抑制越明显。     

绿盲蝽和中黑盲蝽解毒代谢酶活性的检测

害虫解毒代谢增强是对杀虫剂产生抗性的重要机制。为此,本研究建立了Bt棉田重要害虫绿盲蝽和中黑盲蝽成虫多功能氧化酶、酯酶和谷胱甘肽S转移酶3种解毒酶活性的测定方法。研究结果表明:以DCNB(1,2二氯4硝基苯)为底物,不能检测到棉盲蝽谷胱甘肽S转移酶的活性;棉盲蝽多功能氧化酶活性也不宜选用动力学法进行测定。同时2种棉盲蝽成虫的日龄对解毒酶活性影响不明显。因此,对由不同日龄成虫组成的棉盲蝽田间种群可以直接进行解毒酶活性的检测。     

黏虫谷胱甘肽S-转移酶基因对两种杀虫剂的响应

谷胱甘肽S-转移酶是昆虫体内重要解毒酶,对昆虫抗药性具有重要作用。通过转录组测序获得黏虫谷胱甘肽S-转移酶cDNA序列,命名为MsGSTe1(GenBank登录号:MH700949)。cDNA全长1 082 bp,包含一个651 bp开放阅读框,编码216个氨基酸,氨基酸等电点为4.75,分子质量为24.679 ku,具有一个GST N端结构域和一个GST C端结构域。经不同剂量氯虫苯甲酰胺处理不同时间后,MsGSTe1基因表达量均显著下调。处理24和48 h,谷胱甘肽S-转移酶活性显著提高。不同剂量高效氯氟氰菊酯处理不同时间后,MsGSTe1表达量和GST酶活性存在显著差异。处理24 h,各剂量处理MsGSTe1基因表达量均显著上调,且酶活性提高。处理48 h,与对照相比,各剂量处理酶活性显著提高,但基因表达量无显著差异,表明MsGSTe1参与黏虫对高效氯氟氰菊酯的解毒代谢。     

微囊藻毒素MC-LR对罗非鱼（Oreochromis niloticus）肝脏谷胱甘肽含量及其相关酶活性的影响

采用腹腔注射的方式研究了微囊藻毒素MC-LR(注射剂量为500 μg·kg-1BW)胁迫下罗非鱼(Oreochromis niloticus)肝脏谷胱甘肽(GSH)含量及其相关酶γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)、谷胱甘肽还原酶(GR)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性的动态变化.结果表明,MC-LR能够对罗非鱼肝脏GSH含量及其相关酶活性产生明显影响.在MC-LR胁迫下,与对照组相比,GSH含量呈现先下降后上升趋势,总体上被诱导;罗非鱼肝脏γ-GCS和GST在试验过程中出现两次显著升高现象,在GST作用下,GSH与MC-LR结合会造成GSH的消耗,γ-GCS和GR的活性增强能够使GSH含量升高,从而使罗非鱼肝脏GSH能够维持一定水平;GR和GPx的活性均表现为先上升后下降,它们能有效调节罗非鱼肝脏GSH-GSSG缓冲系统,从而在减轻或消除由MC-LR侵入而造成的肝细胞氧化胁迫中发挥重要作用.     

限饲和再投喂对不同日龄鸡消化酶促反应的影响

试验旨在评价限饲和再投喂对两个不同日龄(7和35 d)鸡酶活性和胃肠道器官重量的影响,在每种日龄下,鸡被限饲70%(30%自由采食)7 d,然后自由采食3 d。对照组自由采食10 d。对胰腺中糜蛋白酶、胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活性和小肠中蔗糖酶、麦芽糖酶的活性进行分析,并且测量了腺胃、肌胃、小肠和大肠的重量。在14 d,与对照组相比,限饲组的胰蛋白酶、淀粉酶活性均降低,但在42 d,与对照组相比,限饲组蔗糖酶活性降低,表明限饲对酶活性的影响与日龄有关。限饲可以降低完成期(42 d)各器官的重量。日龄35~42 d的鸡,在再投喂后,器官重量增加,并且达到与对照组一致。在起始期(14 d),腺胃和肌胃受限饲的影响很小,在完成期,肌胃也是受影响最小的器官,而小肠时受影响最严重。限饲的所有影响在恢复饲喂3d后被逆转,表明这种改变时快速且可逆的,并且限饲和再投喂与年龄有关。     

转双抗三倍体毛白杨对舞毒蛾幼虫中肠解毒酶的影响

[目的]为转基因植物的合理利用提供理论依据。[方法]以转Bt基因和慈姑蛋白酶抑制剂基因三倍体毛白杨叶片喂4～5龄舞毒蛾幼虫,对其中肠几种重要解毒酶的活性进行了测定。[结果]幼虫中肠酯酶的比活力变化是先升高后降低,24 h后达到高峰,而在48 h后,比活力明显下降;谷胱甘肽-S-转移酶的比活力是一直在升高。取食抗虫杨Pb1、Pb33和Pb47叶片48 h后的舞毒蛾幼虫中肠酯酶的比活力分别为取食CK幼虫酯酶比活力的62.9%、70.7%和74.5%;24 h后的幼虫中肠谷胱甘肽-S-转移酶的比活力分别比取食CK幼虫谷胱甘肽-S-转移酶比活力下降了25.7%、27.7%和17.9%。[结论]导致幼虫中肠解毒酶活性的改变可能是转基因叶片毒杀害虫的作用机制之一。     

SO2对谷子幼苗根系镉胁迫的缓解作用

以谷子幼苗为材料,采用SO_2衍生物(SO_3~(2-)∶HSO_3~-,3∶1,mmol·L~(-1)/mmol·L~(-1))预处理方式,研究外源SO_2对镉(Cd)致根系毒性的影响。研究发现:250、500μmol·L~(-1)Cd胁迫下,谷子幼苗根生长受到明显抑制,根组织中活性氧(ROS)大量产生,膜脂过氧化增加;与Cd单独处理组相比,用500μmol·L~(-1)SO_2衍生物预处理后,Cd对根系生长的抑制作用减弱,根组织中ROS水平降低,膜脂氧化损伤减轻,谷胱甘肽(GSH)含量提高,过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和谷胱甘肽硫转移酶(GST)等酶活性明显增加。结果表明:一定浓度的SO_2衍生物能够通过上调抗氧化酶系统POD和GPX的活性来有效缓解Cd胁迫造成的谷子根系氧化损伤,并很可能通过维持较高的GSH水平和提高GST活性来增强谷子根系的Cd解毒能力。     

抗性和敏感小菜蛾谷胱甘肽-S-转移酶和谷胱甘肽的比较

研究了抗性和敏感小菜蛾谷胱甘肽 - S-转移酶 ( GSTs)在不同发育期的变化及有机磷类杀虫剂对虫体谷胱甘肽 ( GSH)质量摩尔浓度的影响 .结果表明 :抗性和敏感小菜蛾 GSTs比活力在各发育期中变化不大 ,但虫体 GSTs总活力随虫体生长发育而显著增加 ,在 4龄和蛹期达到最大值 .抗性小菜蛾 GSTs活力明显高于敏感小菜蛾 .甲胺磷和水胺硫磷对敏感小菜蛾幼虫 GSH影响不明显 ,但可导致抗性小菜蛾 GSH质量摩尔浓度的显著降低 .因此可以认为 ,GSTs活力增高和 GSH的结合作用应是小菜蛾对有机磷类杀虫剂抗性的重要机制 .     

限饲对哈巴德肉鸡肠道结构的影响

为探讨限制饲养对肉鸡肠道结构的影响,于4周龄初将肉仔鸡随机分成3个处理组:即自由采食组、料量限制组和能量限制组,自由采食组鸡只自由采食,对料量限制组肉鸡进行70%的料量限制,对能量限制组肉鸡进行70%的能量限制,到达8周龄宰杀后测量它们的肠道长度,制作十二指肠、空肠、回肠的组织切片,测量其绒毛长度和隐窝深度,研究限饲对肉鸡十二指肠、空肠和回肠的长度、绒毛长度、隐窝深度的效应.结果表明:限饲后的肉鸡肠道长度有所减短,自由采食组肠道全长、空肠长度显著或极显著大于能量限制组;自由采食组十二指肠的绒毛长度显著大于能量限制组和料量限制组,而十二指肠、空肠、回肠的隐窝深度、绒毛长度//隐窝深度的比值在各组间差异都不显著,即限饲对肉鸡的肠道结构有一定影响.     

V_C及V_E对热应激蛋鸡生产性能及抗氧化功能的影响

试验选择 37周龄Hy line蛋鸡 12 0只 ,随机分为 3组 ,饲粮添加不同水平维生素C、E ,VC 添加水平分别为每公斤饲粮 :0 ,0及 10 0 0mg ;VE 添加水平分别为 2 0、4 5及 2 50mg ;试验期 4周 结果表明 ,热应激期饲粮添加维生素VC10 0 0mg/kg及VE　 2 50mg/kg可显著提高产蛋率 ,降低破软率 ;提高血清中超氧化物歧化酶 (SOD)及全血中谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH PX)的活性 而单独添加VE4 5mg/kg对蛋鸡产蛋率及破软蛋率 ,以及抗氧化酶活性无显著影响     

雷公藤总生物碱对摇蚊幼虫杀灭活性和谷胱甘肽硫转移酶的影响

【目的】研究雷公藤总生物碱对摇蚊4龄幼虫的杀灭活性、谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性以及GST相关基因表达的影响。【方法】以摇蚊4龄幼虫为试虫,分别用5,10,15μg/L雷公藤总生物碱进行处理,以用丙酮处理为对照,24~72 h后观察幼虫反应,测定雷公藤总生物碱对摇蚊幼虫的致死中浓度(LC50)及谷胱甘肽硫转移酶活性,并用RT-PCR方法,检测了摇蚊11个GST基因的表达情况。【结果】雷公藤总生物碱对摇蚊4龄幼虫具有杀灭活性,24,48,72 h的致死中浓度(LC50)分别为33.019,19.092和16.760μg/L。在亚致死质量浓度(5,10,15μg/L)下,雷公藤总生物碱对摇蚊4龄幼虫谷胱甘肽硫转移酶活性具有显著的抑制作用,与同期对照相比,酶活性最大下降幅度分别为73.49%(以1-氯-2,4-二硝基苯(CDNB)为底物)和73.20%(以3,4-二氯硝基苯(DCNB)为底物)。RT-PCR检测结果显示,在摇蚊11个谷胱甘肽硫转移酶基因中,有2个基因(CtGSTu3和CtGSTu4)在mRNA水平上被诱导上调表达,且mRNA表达量随着雷公藤总生物碱质量浓度的增加而升高,存在着剂量依赖关系。【结论】雷公藤总生物碱对摇蚊幼虫具有较高的杀灭活性,有被开发为摇蚊控制剂的潜能。在亚致死质量浓度(5~15μg/L)处理下,雷公藤总生物碱能显著抑制摇蚊谷胱甘肽硫转移酶活性,并诱导CtGSTu3和CtGSTu4 mRNA上调表达。     

增效磷对昆虫体内还原型谷胱甘肽及谷胱甘肽转移酶的影响

增效磷(SV_1)对敌百虫在棉铃虫、粘虫、二化螟及小白鼠4种测试动物上均表现增效作用,增效比值为2～3.本试验用增效磷进行昆虫体壁或小白鼠口投处理,体内谷胱甘肽(GSH)含量在5小时后明显下降。离体状态下,二化螟6龄幼虫中肠谷胱甘肽转移酶(GST)被增效磷抑制,当增效磷浓度为5.1×10~(-8)molL~(-1)时,抑制率可达68.3%。体内抑制试验表明,用 SV_1预处理5小时后,GST活性首先增大,以后慢慢降低,24小时后,又被抑制43.0%。初步认为,SV_1影响参与降解敌百虫的 GSH—GST 体系的作用,也是对敌百虫产生增效作用的一个机制。     

藏药喜马拉雅紫茉莉谷胱甘肽-S-转移酶基因的克隆及表达分析

谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-transferase,GST)是参与谷胱甘肽催化反应的关键酶,在生物解毒、应激耐受和次级代谢等多个方面发挥生物学功能.本研究以藏药喜马拉雅紫茉莉为材料,基于前期转录组数据,从cDNA中克隆出谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因MhGSTL3,该基因开放阅读框(ORF)全...     

用亲和层析法提取大片吸虫谷胱甘肽转移酶

为了探明大片吸虫谷胱甘肽转移酶(GST)的多肽组分和酶活力以供今后进行 GST 的免疫原性和各种蠕虫 GST 的交叉免疫原性的研究,本试验首次用亲和层析法对大片吸虫谷胱甘肽转移酶(GST)进行提取,用 SDS-PAGE 分析了大片吸虫谷胱甘肽转移酶(GST)的多肽组分,用1-氯-2,4-二硝基苯(CDNB)为底物测定了 GST 酶活力.电泳染色结果表明,大片吸虫谷胱甘肽转移酶(GST)至少有2条带,其分子量为29.9～24.5kD,其中主带2条,分别为28.3和26.2kD。酶活力测定结果表明,提取的 GST 可获得10.44μmol·min~(-1)·mg~(-1)以上的酶比活性.     

AFB1对犬肝细胞的毒性作用及NAC的保护效应

【目的】以犬原代肝细胞为模型,研究黄曲霉毒素B_1(AFB_1)对肝细胞的毒性作用以及N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)对细胞损伤的保护效应。【方法】选取1～2月龄幼犬,取肝细胞培养至对数生长期,分别用0(对照),0.05,0.25,1.25,6.25,31.25μg/mL AFB_1和6.25μg/mL AFB_1+64 mmol/L NAC处理36 h后,观察细胞形态结构,检测肝功能相关指标、氧化与抗氧化功能指标及细胞凋亡相关基因cleaved-caspase-3和cleaved-caspase-9 mRNA表达量。【结果】显微观察发现,与对照组相比,0.05～6.25μg/mL AFB_1处理组的细胞数量减少,细胞失去饱满性,细胞凋亡、坏死情况明显;6.25μg/mL AFB_1+64 mmol/L NAC处理组的细胞饱满且活性良好,细胞数目增加,结构完整。与对照组相比,1.25～31.25μg/mL AFB_1处理组的谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性均显著上升(P0.05);0.05～31.25μg/mL AFB_1处理组的碱性磷酸酶(ALP)活性显著升高(P0.05);1.25～31.25μg/mL AFB_1处理组的γ-谷氨酰转移酶(γ-GGT)活性显著降低(P0.05),0.05～0.25μg/mL AFB_1处理组的γ-GGT活性显著增加(P0.05); 31.25μg/mL AFB_1处理组的白蛋白(ALB)质量浓度显著降低(P0.05)。与对照组相比,0.05～0.25μg/mL AFB_1处理组的8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)和丙二醇(MDA)含量显著增加(P0.05);1.25～31.25μg/mL AFB_1处理组的H_2O_2质量浓度显著增加(P0.05)。与对照组相比,0.05～31.25μg/mL AFB_1处理组的超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性无显著变化;0.25～31.25μg/mL AFB_1处理组的过氧化氢酶(CAT)活性显著降低(P0.05)。与6.25μg/mL AFB_1处理组相比,6.25μg/mL AFB_1+64 mmol/L NAC处理组的AST、ALP、r-GGT活性以及ALB、8-OHdG、MDA、H_2O_2水平显著降低(P0.05),CAT和GSH-Px活性显著升高(P0.05)。6.25μg/mL AFB_1处理细胞的凋亡率为12%,极显著高于对照组和6.25μg/mL AFB_1+64 mmol/L NAC处理组。与对照组相比,0.05～6.25μg/mL AFB_1处理组的cleaved-caspase-3和cleaved-caspase-9 mRNA的表达量极显著增加(P0.01);与6.25μg/mL AFB_1组相比,6.25μg/mL AFB_1+64 mmol/L NAC处理组的cleaved-caspase-3和cleaved-caspase-9 mRNA表达量均极显著降低(P0.01)。【结论】AFB_1能够抑制犬原代肝细胞活性,引起细胞形态、肝功能指标及细胞氧化与抗氧化功能异常,加快细胞凋亡;NAC能够显著提高抗氧化酶活性,降低AFB_1所致肝细胞的损伤和凋亡水平,对肝细胞具有一定的保护性。     

肉种鸡产蛋中期能量限饲对子代肉鸡生长性能、血液生化指标及肌节长度的影响

试验对产蛋中期AA肉种鸡进行能量限饲,探讨其对子代生长性能、血液生化指标及肌节长度的影响。选用产蛋中期肉种母鸡288羽,分为4个处理组,每组6个重复,每个重复12只。对照组饲喂基础饲粮,试验组日粮能量水平分别为基础饲粮能量的80%、70%、50%,对照组和实验组均限饲且饲喂量相同,于产蛋中期(40~42周龄)进行人工授精、孵化得到子代。每组选用90只肉仔鸡公雏,每组设6个重复,每个重复15只,自由采食同种日粮,试验期为49 d。结果表明,①生产性能:与对照组相比,50%、70%能量组仔鸡初生重显著降低(P<0.05),80%能量组仔鸡49日龄体重显著升高(P<0.05)。②血液生化指标:母体能量限饲显著降低了28日龄各组仔鸡血清中ALB的含量(P<0.05),显著提高了50%能量组IGF-1的水平(P<0.05)。③肌节长度:与对照组相比,50%、70%能量组1日龄肉鸡腿肌肌节长度显著降低(P<0.05),70%、80%能量组28日龄肉鸡腿肌肌节长度显著升高(P<0.05),50%能量组49日龄肉鸡腿肌肌节长度显著增大(P<0.05)。结果表明,肉种鸡产蛋中期能量限饲对子代生长发育有显著影响,并且子代在生长过程中表现出补偿生长作用。     

采食高营养水平饲粮早期断奶羔羊禁饲状态下消化道pH及消化酶活性的研究

研究了采食高营养水平饲粮早期断奶羔羊禁饲状态下其皱胃、胰腺和小肠pH及消化酶活性.按同质原则将24只1月龄断奶杂交羔羊(无角陶塞特♂×寒滩♀)分为3组,接受3种高营养饲粮,3种饲粮精粗比分别为97.64∶2.36、91.88∶8.12、86.14∶13.86,能量水平分别为14.54、13.97、13.36 MJ/kg,粗蛋白水平分别为25.30%、23.03%2、0.73%.饲喂65 d后,禁食24 h屠宰,测定羔羊皱胃、胰腺和小肠pH及消化酶活性.结果表明:高营养水平饲粮对羔羊胰腺、皱胃和小肠各段黏膜和内容物pH影响不大,对消化道各段分泌的主要消化酶活性无显著影响(P>0.05).十二指肠、空肠各段、回肠黏膜pH在6.55~6.86,十二指肠、空肠前段和空肠中段内容物pH为6.30~6.69,空肠后段、回肠内容物pH在7.22~7.73.胰蛋白酶活性在回肠最高,糜蛋白酶活性在各肠段无显著差异,α-淀粉酶活性在空肠中段和回肠最高,脂肪酶活性在空肠中段最高.     

转Bt基因杨树对美国白蛾幼虫中肠解毒酶及乙酰胆碱酯酶的影响

以转Bt基因欧洲黑杨叶片饲喂4-5龄美国白蛾幼虫，对其中肠几种重要解毒酶及乙酰胆碱酯酶的活性进行了测定。结果表明，中肠多功能氧化酶受到强烈抑制，饲喂4h后，多功能氧化酶的活性比对照降低50.89%，48h后，该酶活性仅为对照的1/6，酯酶及羟酸酯酶的活性也受到明显抑制，饲喂48h后，上述两种酶的活性分别比对照降低73.58%和56.55%，谷胱甘肽S-转移酶变化比较复杂，饲喂24h后其活性出现峰值；48h后与对照持平，中肠乙酰胆碱酯酶活性无明显变化，转基因叶片对幼虫中肠解毒酶活性的抑制可能是其毒杀害虫的作用机制之一。     

外源脯氨酸对番茄体内残留百菌清降解的调控作用

为探索外源脯氨酸(Pro)对番茄残留农药降解代谢的调控作用,以番茄浙杂205为供试植物,以杀菌剂百菌清为供试农药,研究外源Pro对番茄体内喷施百菌清后的农药残留量、活性氧含量、抗氧化酶和解毒酶的影响。研究表明,外源3 mmol·L^-1的Pro预处理显著降低了百菌清处理7 d后番茄体内的农药残留量。与对照相比,外源Pro预处理可显著提高百菌清处理后番茄过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、单脱氢抗坏血酸还原酶(MDAR)的活性,进一步提高农药处理后12~96 h的GSH/GSSG比值,及谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性和非蛋白结合态巯基化合物(NPT)含量。因此,外源喷施Pro可提高SOD、MDAR、CAT、POD等抗氧化酶活性,促进GSH的再生,提高GST等解毒酶活性,从而加速番茄体内百菌清的降解代谢,为促进蔬菜残留农药的降解提供一条新途径。