Colostral immunoglobulin-A: synthesis in vitro of T-chain by rabbit mammary gland

When minced mammary tissue from lactating rabbits was incubated in vitro with C(14)-labeled lysine and isoleucine, it incorporated radio-activity into colostral immunoglobulin A. The only portion of this colostral molecule with significant labeling was T-chain, with little or no labeling of light or heavy chains. It was thus demonstrated that T-chains are synthesized by mammary gland. Because the remainder of the molecule was derived from unlabeled material, in vivo it was probably derived from serum.     

Hormone-dependent differentiation of mammary gland: sequence of action of hormones in relation to cell cycle

Differentiation of mouse mammary gland in vitro requires insulin, hydrocortisone, and prolactin. The epithelial cells must first divide in order to synthesize casein in response to these hormones. Insulin is required for the initiation of DNA synthesis and is also necessary during G(1) phase (after mitosis). Prolactin can elicit the overt differentiative responses after mitosis. Activity of hydrocortisone precedes that of prolactin, that is, after mitosis it is not capable of eliciting the differentiative response.     

奶牛乳腺上皮细胞体外培养技术研究进展

奶牛乳腺上皮细胞具有合成和分泌乳汁的特殊功能,是制作乳腺生物反应器的靶细胞。以奶牛乳腺上皮细胞为试验模型,能够真实反应乳腺生长、发育及泌乳的细胞或分子生物学机制,验证乳腺组织特异性表达载体构建的合理性和有效性,对研究奶牛乳腺生物反应器、乳蛋白基因表达具有重要的意义。文章主要从培养方法、培养体系的建立、形态结构与细胞增殖分化方面阐述乳腺上皮细胞体外培养技术研究进展。     

奶山羊乳腺上皮细胞的体外培养及形态观察

【目的】建立奶山羊乳腺上皮细胞体外培养方法,并对原代和传代细胞进行形态观察。【方法】分别采用组织块法和胶原酶消化法培养奶山羊原代乳腺上皮细胞,然后通过胰酶消化法结合反复贴壁法纯化细胞,免疫组化法鉴定细胞,并利用倒置显微镜观察细胞形态。【结果】组织块法和胶原酶消化法均能培养奶山羊原代乳腺上皮细胞;纯化获得的细胞呈卵圆形或多角形,形成典型的鹅卵石或铺路石样,且细胞角蛋白检测呈阳性;多次传代后乳腺上皮细胞出现分化现象,形态多样,增殖仍然旺盛。【结论】成功建立了一种简单易行、经济而实用的奶山羊乳腺上皮细胞体外培养方法。     

Regulation of leptin in involution of mammary gland

Leptin,a protein hormone produced and secreted predominantly by white adipose tissue,has a critical role in the regulation and coordination of energy metabolism.Leptin is produced in the mammary gland by the fat tissue or by the mammary epithelium.In vitro study has shown that leptin triggers apoptosis in mammary epithelial cells.Mammary gland involution is characterized by extensive apoptosis of the epithelial cells.At the onset of involution,STAT3 is specifically activated.Various studies show that leptin act as a paracrine and autocrin factor to influence mammary epithelial cell proliferation and differentiation.This paper reviewed the function of leptin to the involution of mammary gland.     

动物乳腺生物反应器的研究进展

动物乳腺生物反应器(MammaryBioreactor)是一种利用动物转基因技术在乳腺细胞中表达多肽药物、工业酶、疫苗和抗体等蛋白的技术。该技术具有低投入高产出的特点,其效率是利用以大肠杆菌和动物细胞培养技术的100倍,是一种非常有潜力的高新技术。本文综述了乳腺生物反应器的优点、发展及其分类。     

串联启动子调控下的t-PAcDNA乳腺定位表达

由牛β-Casein启动子与大鼠WAP启动子串联构建了t-PAcDNA乳腺定位表达载体pSVL-WAPβ-PA，将3种表达载体pSVL-βb-PA,pSVL-WAP-PA及pSVL-WAPβ-PA分别注入怀孕家兔乳腺导管中，溶圈试验结果显示，3种表达载体均能在家兔乳腺中表达，且以分娩后第4d的乳汁中表达水平最高，分别为390，440，450ug.L^-1，本试验为进一步研究t-PA基因乳腺定位表达调控和建立t-PA乳腺生物反应器奠定了基础。     

融合启动子调控下的t-PA cDNA乳腺定位表达

由牛 β- Casein启动子与大鼠 WAP启动子融合构建了 t- PA c DNA乳腺定位表达载体 p SVL-β△ WAP- PA,以研究 t- PA乳腺定位表达的调控。结果表明 ,将表达载体 p SVL- βb- PA,p SVL- WAP- PA及 p SVL-β△ WAP- PA分别直接注入怀孕的家兔乳腺管中 ,溶圈试验显示 3种表达载体均能在家兔乳腺中表达 ,且以分娩后第 4天的乳汁中表达水平最高 ,分别为 390 ,430和 6 70 ng/ m L。证明 0 .6 kb的牛 β- Casein上游调控序列具有一定的定位表达调控能力。融合启动子较单纯的 β- Casein或 WAP启动子调控下的 t- PA c DNA表达水平高     

不同发育期大鼠乳腺组织中雌激素受体α的表达

为了探讨不同发育时期大鼠乳腺中雌激素受体α(Estrogen receptor,ERα)的表达情况,采用RT-PCR方法对不同发育时期大鼠乳腺组织中的ERα进行了半定量研究。结果表明,妊娠和泌乳期大鼠乳腺组织中的ERα表达水平均低于处女期,且差异显著(P<0.05);整个妊娠过程中,以妊娠12 d最高;随着泌乳期的进行,ERα的表达水平增高,但差异不显著(P>0.05)。表明ERα可能参与了乳腺细胞的发育和凋亡。     

奶牛乳腺长链脂肪酸转运的研究进展

奶牛乳脂中的长链脂肪酸（LCFA）JL乎全部来源于从消化道吸收并转运人血液的食物外源性LCFA,然后跨膜进入乳腺上皮细胞参与乳脂合成,而参与LCFA跨膜运输的脂肪酸转运蛋白有：脂肪酸转运蛋白家族（Fattyacid transport proteins,FAPTs）、脂肪酸转位酶（Fatty acid translocase,FAT／CD36）、脂肪酸结合蛋白家族（Fattyacid binding proteins,FABPs）和小窝蛋白（Caveolinproteins）。文章在综述LCFA跨膜运输研究的基础上,重点介绍4种LCFA转运蛋白的研究进展,发现在奶牛乳腺中表达的只有FAT／CD36和FABPs,而FATPs和小窝蛋白在奶牛乳腺中是否表达并参与LCFA的转运仍有待进一步研究确定。因此,应利用营养学、分子生物学和细胞生物学等方法,在体内和体外对FAT／CD36、FABPs、FATPs和小窝蛋白在泌乳期奶牛乳腺中的表达规律、作用机理进行深入研究,以探明其在乳腺LCFA转运中的作用及调控机制．并为优化乳脂组成实施的营养调控提供科学依据。     

激光共聚焦显微技术在乳腺细胞凋亡研究中的应用

激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)是普通荧光显微镜、激光和计算机及相应软件组合的产物,它实现了连续光学切片,并广泛应用于活细胞三维重构及动态分析。乳腺细胞凋亡是乳腺生物学的重要研究内容,是乳腺发育、泌乳及退化过程的一个关键特征。近年来有关乳腺细胞凋亡的研究已经有了长足进展,文章综述了激光扫描共聚焦显微镜技术在乳腺细胞凋亡研究中的应用。     

免疫小鼠乳腺乳铁蛋白基因表达变化研究

研究小鼠不同生理阶段以及免疫条件下,乳腺内乳铁蛋白基因mRNA表达量的变化.选择120只健康昆明小白鼠,于分娩后4 d进行如下制剂处理:脂肪酶蛋白(Lipase)、空免疫刺激复合物(ISCOM)和Lipase.于分娩后8和12 d(即注射后4和8 d)用间接ELISA法测定乳中和血清中的特异性IgG含量,用Real Time PCR检测小鼠乳腺中乳铁蛋白基因的相对表达量.另外,正常生理状态乳腺内乳铁蛋白基因mRNA表达量的变化分别是在分娩后1、4、8和12 d进行检测.结果表明,正常状态下,小鼠分娩后1 d时,乳腺内乳铁蛋白基因mRNA表达量相对较高,而在分娩后4、8和12 d时较低;免疫条件下,乳腺内乳铁蛋白显著上升.免疫刺激可以引起小鼠乳腺乳铁蛋白基因表达上调.     

奶山羊乳腺发育过程中肥大细胞的分布

肥大细胞是乳腺内重要的免疫细胞,参与乳腺的免疫防御、发育与重建.对不同发育时期山羊乳腺内肥大细胞的分布特点进行研究,用卡诺氏液固定乳腺组织,甲苯胺蓝染色,肥大细胞呈蓝紫色.结果表明,肥大细胞在乳腺发育的青春期和退化期数量较多,妊娠期数量明显少于青春期(P<0.05).泌乳期内乳腺肥大细胞数量最少,与其他时期差异显著(P<0.05).     

奶山羊乳腺上皮细胞系的建立

乳腺上皮细胞系的建立为乳蛋白基因表达调控机制的研究及乳腺表达载体的检测提供有利条件。本研究建立了正常培养的奶山羊乳腺上皮细胞系。利用胶原酶和透明质酸消化法从奶山羊乳腺组织中分离并获得了纯化的乳腺上皮细胞,利用细胞角蛋白18的免疫荧光染色对乳腺上皮细胞进行了鉴定。通过细胞生长曲线、群体倍增时间、细胞接种存活率、细胞活力检测等生物学性状的检测建立并鉴定了奶山羊乳腺上皮细胞系。结果表明,奶山羊乳腺上皮细胞在添加表皮生长因子、胰岛素样生长因子-1、转铁蛋白-硒钠、10%胎牛血清的DF12培养液中生长状态良好,细胞传至30代时仍保持旺盛的增殖活力。通过细胞传代及反复冻存和复苏实现了细胞系的长期保存,建立了乳腺上皮细胞系,获得了大量的乳腺上皮细胞。从而为开展奶山羊、奶牛等产奶动物乳腺生物反应器及泌乳机制的研究提供了便利条件。     

藏猪妊娠期乳腺形态和乳腺发育的标志蛋白表达、相关激素及信号通路的变化

目的 研究藏猪妊娠期乳腺形态和乳腺发育标志蛋白、相关激素及信号通路的变化。方法 选取妊娠33、50、75和90 d的藏猪,屠宰后采集血清和第3、4对乳腺。利用HE染色观察乳腺形态变化;使用ELISA试剂盒检测血清中雌二醇(E2)、孕酮(P)和催乳素(PRL)等乳腺发育相关激素的水平;利用Western blot方法检测乳腺发育标志蛋白[包括ETS相关的转录因子5 (Elf-5)和脂滴包被蛋白2 (PLIN2)],以及激素受体[包括雌激素受体(ERα)、催乳素受体(PRLR)和孕酮受体(PR)]的表达,并检测乳腺发育相关信号通路PI3K/AKT和Jak2/STAT5的激活情况。结果 从乳腺形态观察可知,妊娠33 d时乳腺中主要是导管结构,50 d时出现少量腺泡结构,75 d时腺泡快速发育、腺泡增多,90 d时乳腺中主要是腺泡结构;乳腺发育标志蛋白Elf-5和PLIN2在妊娠50 d蛋白表达开始升高,75和90 d时均具有很高的表达量;血清中E2、P和PRL质量浓度随着妊娠的进行而升高,90 d时E2达到42.82 ng/L,P达到36.76 μg/L,PRL达到66.53 μg/L;ERα和PRLR在妊娠50 d时表达量升高,PR在75 d时表达量升高。此外,Jak2/STAT5和PI3K/AKT信号通路在妊娠75和90 d时被显著激活。结论 藏猪妊娠过程中,乳腺在50 d时开始腺泡发育、75 d时乳腺进入腺泡快速发育期、90 d时发育程度更高,同时,伴随着血清中乳腺发育相关激素和乳腺中激素受体表达的显著升高,以及乳腺发育相关通路PI3K/AKT和Jak2/STAT5的激活。     

小鼠乳腺中瘦素的信号转导通路

为研究小鼠乳腺发育、泌乳和退化过程中瘦素的信号转导通路,分别取妊娠12d、泌乳12d以及退化12d小鼠乳腺组织进行体外培养,对照组培养基为无血清培养基,处理组培养基中则只添加瘦素。培养48 h后取出分别提取乳腺上皮细胞总蛋白,并用免疫印迹的方法检测对照组和处理组乳腺上皮细胞中信号分子MAPK、STAT3和STAT5的磷酸化情况。结果表明,虽然在妊娠期、泌乳期和退化期乳腺上皮细胞中均有MAPK、STAT3和STAT5信号分子存在,但是在妊娠期瘦素只能专一性的诱导MAPK磷酸化,泌乳期瘦素可以激活STAT3和STAT5,而在退化期瘦素则特异性地激活STAT3,启动乳腺上皮细胞的凋亡过程。     

瘦素与乳腺发育和泌乳

瘦素是一个可由乳腺脂肪垫和腺泡上皮细胞产生的自分泌和旁分泌因子。近年来,越来越多的研究发现它对乳腺的发育、泌乳和退化都有一定的影响。文章就瘦素在乳腺中的研究进展作一综述。     

Reversible inhibition of mammary gland growth by transforming growth factor-beta

Transforming growth factor-beta (TGF-beta) can stimulate or inhibit growth of cells in vitro, as well as induce the transformed phenotype. Although widely distributed in animal tissue, the effects of TGF-beta in vivo are largely unknown, and a physiological role for the peptide hormone has not been demonstrated. The effect of TGF-beta on developing epithelial tissue in situ was studied by using slow-release plastic pellets containing TGF-beta to treat developing mouse mammary gland. Powerful inhibition of mammary growth and morphogenesis was observed. This growth-inhibited mammary tissue was histologically normal, and the inhibitory effect was fully reversible. Under the conditions of these experiments, TGF-beta displayed many of the characteristics expected of a physiologically active growth-regulatory molecule.