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体外受精技术(IVF)是继人工授精(AI)技术、胚胎移植(ET)技术之后动物繁殖领域的第三次革命,是胚胎工程的重要研究内容之一。近几年来,一系列高新生物工程的发展,也极大地促进了体外受精技术体系的改进。本文就目前IVF技术的研究进展作一综述,并对现行IVF体系中存在的主要制约因素作了简要分析。 相似文献
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猪卵巢卵母细胞的体外成熟和体外受精 总被引:8,自引:0,他引:8
将从屠宰母猪卵巢采得的卵母细胞-卵丘细胞复合体(Oocyte-cumulus Cell Complex.OCC)在含PMSG的M199培养40~44小时,卵丘细胞大部分扩散(86.4%)。48.1%(142/295)的卵母细胞排出第一极体(PBI)。将体外成熟的卵母细胞与体外获能精子授精后30~70小时,80.5%(103/128)的卵母细胞受精并可在体外发育到2~8细胞甚至桑椹胚。本文还对裸卵母细胞的体外成熟和体外受精进行了研究,对体外受精卵的早期发育作了观察。实验结果表明:PMSG对诱导卵丘细胞扩散及卵母细胞的全面成熟有重要作用,在OCC中的卵母细胞成熟率高于裸卵母细胞体外授精后8~10小时将受精卵放入改良KRB液培养可使卵裂比例明显提高。 相似文献
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在体外受精过程中,绵羊卵巢卵母细胞体外成熟情况在很大程度上决定着卵母细胞的体外受精率和胚胎发育率.影响卵母细胞成熟的因素很多,主要包括卵泡大小、卵巢的发育阶段、培养基、激素生长因子等.试验从屠宰场采集屠宰后的绵羊卵巢,抽取卵巢表面卵泡中的卵母细胞,选择一级和二级卵母细胞进行体外成熟培养.试验证明,绵羊卵巢卵母细胞体外成熟培养时间以24h为佳,FCS浓度以20%最适宜.试验还发现无菌条件、温度、湿度以及在体外对卵母细胞的操作时间对试验的结果都有很大的影响.通过试验初步探明了适宜绵羊卵母细胞体外成熟的一些基本条件,为全面掌握绵羊卵母细胞体外成熟培养以至整个体外受精技术的完善和规范提供了有益的资料. 相似文献
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屠宰绵羊卵巢卵母细胞的体外培养 总被引:2,自引:0,他引:2
为了使屠宰绵羊卵巢卵母细胞能够用于体外受精,本文着重探索了使卵巢卵母细胞体外培养成熟的方法和条件。实验结果表明,以TCM-199加10%FCS作为基本培养基,培养24~25小时,可以使绵羊卵巢卵母细胞培养成熟,其成熟率可达55.5%(435/784)。如果在培养液内添加hCG(0.02mg/ml)或LH(0.01mg/ml),并且尽可能保持卵丘细胞的完整,则可以使成熟率提高到76.9%(140/182)~82.9%(112/135)。 相似文献
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日本利用屠宰场收集的卵巢进行牛的体外受精技术 总被引:1,自引:0,他引:1
牛的体外受精首先是由Brackett于1982年获得成功。他是利用手术法采取成熟卵子,进行体外受精后,将受精卵体外培养到4细胞期再利用手术法移植到受体牛的输卵管内,使其妊娠分娩。由于这种方法的成本非常高,所以虽然具有较高的学术价值,但在生产中只限于高价值种用牛的生产。日本农林水产省畜产试验场的花田先生利用屠宰场收集的卵巢吸引未成熟卵子,先进行成熟培养后再进行体外受精;然后在CO2培养器内(恒温器)培养到囊胚期,再利用非手术法移植到牛的子宫内。这一研究已获得成功,用这种方法生产的第1头犊牛于198… 相似文献
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以辽宁绒山羊母羔为研究对象,通过超排母羔、卵母细胞体外成熟、体外受精、胚胎移植技术等试验研究,建立了绒山羊母羔体外胚胎生产技术体系。结果表明:PMSG+FHS组与FSH+PMSG组超排方法获得的卵母细胞数无显著差异(P0.05),但PMSG+FHS组卵裂率和囊胚率均极显著高于FSH+PMSG组(P0.01)。成熟液添加EGF组PBⅠ率、卵裂率均显著高于对照组(P0.05);20 ng/m L EGF组PBⅠ率显著高于10 ng/m L组(P0.05),卵裂率差异不显著(P0.05)。卵母细胞成熟培养24~27 h组第一极体率与卵裂率均显著高于21~24 h组(P0.05);SOF受精体系卵裂率显著高于TALP(P0.05),囊胚率极显著高于TALP受精系(P0.01)。秋季胚胎移植受体母羊16只,产羔3只。 相似文献
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本试验对影响绵羊体外受精的因素进行了分析。结果表明:在相同条件下添加和不添加VEGF(血管内皮生长因子)的卵裂率分别为81.5%、84.9%(P>0.05),但囊胚发育率分别为31.5%和22.4%,差异显著(P<0.05)。受精时间8 h和12 h对卵裂率(80.8%、83.9%;P>0.05)和囊胚发育率(28.8%、23.5%;P>0.05)没有显著影响。卵巢采回后立即切割和在25~30℃的生理盐水中保存3 h的卵裂率分别为82.9%、86.5%,囊胚发育率分别为30.4%、29.7%,差异均不显著(P>0.05)。 相似文献
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牛胚胎的体外生产技术 总被引:1,自引:0,他引:1
应用体外受精技术,可以有效地利用淘汰的高产奶牛和屠宰的青年母牛卵巢中的未成熟卵,大量,廉价地实验室生产胚胎,这对加速我国高产奶牛群和良种肉牛群的繁殖,是一项行之有效的胚胎工程技术,借鉴国外实验室生产牛胚胎的经验和根据我们实验室的实践,本文比较详细地叙述了体外受精牛胚胎(试管牛)的生产过程,包括卵母细胞的获得,培养,精子获能,体外受精以及受精后的胚胎培养,超低温冷冻保存与解冻后的胚胎移植等。 相似文献
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为了对在春季屠宰场所采绵羊卵母细胞的分布及不同分布的成熟率有明确的认识.2003年3月至4月共进行15次试验,收集卵母细胞1485枚。按卵母细胞外层所含卵丘细胞及完整程度分戍A、B、C、D、E5个级别。A级:卵丘细胞层完整且紧密,一般为4层以上;B级:卵丘细胞层完整,一般为1~3层;C级:有卵丘细胞包被,但不完全;D级:裸卵,但细胞质均匀,细胞形态完好;E级:退化裸卵,胞质不均匀,细胞形态消失。选择A,B,C,D级卵母细胞单独进行体外成熟培养,培养液为TCM-199 5%FCS 5μg/mL LH 5μg/mL FSH 1μg/mL β-estradiol 2%penstrep,培养奈件为5%CO2,38.5℃,饱和湿度。结果显示:A,B,C,D级的分布分别为19.8%、28.1%、19.6%和32.4%.成熟率分别为81.3%、65.3%、61.5%和17.0%。总体成熟率为52.1%,卵丘一卵母细胞复合体(COCs)的成熟率为68.9%。 相似文献
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不同采卵方式对绵羊卵母细胞质量、体外成熟及体外受精的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
随着胚胎工程及胚胎相关技术的发展,绵羊卵母细胞和绵羊胚胎的需求量日益增加.获得尽可能多的结合型卵母细胞是体外受精的关键环节.本试验通过剖切法和抽吸法两种不同采卵方式获取卵母细胞并进行体外成熟培养.剖切法获得的卵母细胞数量高于抽吸法,所用时间相差不大.A、B级卵母细胞的比例在剖切法中显著高于抽吸法(P<0.05),抽吸法所采集的C级卵母细胞显著高于剖切法(P<0.05);剖切法中卵丘扩散率和第一极体排出率要显著高于抽吸法(P<0.05),受精后不同时期胚胎的发育率差异不显著(P>0.05).表明剖切法是采集绵羊卵母细胞的理想方法. 相似文献
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提高绵羊卵母细胞发育能力的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
近年来,研究者对羊卵巢在培养前的保存温度与时间,采卵方法等因素进行了研究,取得一些重要成果。在绵羊的体外受精研究中也发现,从不同温度保存的卵巢中采取的卵母细胞色泽变化明显。此次试验就绵羊卵巢的不同保存温度以及不同的采卵方法对卵母细胞发育能力的影响进行了研究,以期为提高绵羊胚胎体外生产效率提供有用的参考依据。 相似文献
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本实验采集的屠宰绵羊卵母细胞分两批。一批分别以10~15℃,20~25℃,30~35℃运输;另一批分别采用16~18h,20~22h,24~26h,28~30h的体外成熟时间进行实验。卵母细胞由长距离运输运回实验室,经体外受精观察其体外培养发育情况,从而为确立长途运输卵巢体外培养的条件提供必要的实验依据。实验结果显示:在不同运输温度的卵母细胞中,温度为20~25℃时卵母细胞能够进行较好的发育,卵母细胞的成熟率为64.86%,囊胚率为34.58%;在不同体外成熟时间的卵母细胞中,时间为20~22h时卵母细胞能够较好的发育,卵母细胞的成熟率为62.79%,囊胚率为31.70%。 相似文献
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白细胞介素和干扰素γ对绵羊体外受精胚胎体外发育影响的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
《内蒙古畜牧科学》2003,24(6):11-14
利用SOFM 0.8%BSA 1mM谷氨酰胺作为绵羊胚胎的培养液,分别添加LIF、IL—1β、IL—2、IL—6及IFN—γ,以研究LIF、IL—1β、IL—2、IL—6及IFN—γ对绵羊早期胚胎发育的影响。结果说明,LIF促进2—8细胞胚胎发育至桑椹胚,同时也能够促进桑椹胚向扩大囊胚和孵化囊胚发育。但IL—1β、IL—2、IL—6及IFN—γ对绵羊早期胚胎的发育无显著影响。 相似文献
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山羊睾丸附睾卵巢和子宫的淋巴流向 总被引:1,自引:0,他引:1
杨春林、王云祥、Fabian等对胎儿、婴儿和鼠等生殖器官的淋巴流向进行了较为细致的研究。而有关山羊内脏器官的淋巴系的研究国内外报道较少。张玉龙、肖传斌等对山羊心脏和胃的淋巴系作了较系统研究。关于山羊睾丸、附睾和卵巢、子宫淋巴系的研究,至今未见报道。鉴于生殖器官肿瘤的 相似文献
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为了探讨绵羊卵母细胞体外成熟过程中促卵泡素(FSH)的适宜添加量,试验将FSH分为0.01,0.02,0.03 IU/mL 3个浓度梯度,用于绵羊卵母细胞的体外成熟与体外受精,统计第一极体排出率、卵裂率和囊胚率。结果表明:不同浓度FSH对第一极体排出率影响差异不显著(P>0.05),体外受精后以0.02 IU/mL组效果最好,卵裂率显著高于0.03 IU/mL组(P<0.05),但与0.01 IU/mL组相比差异不显著(P>0.05);0.02 IU/mL组囊胚率与其他2组相比显著升高(P<0.05)。 相似文献