‘扎西玛’与‘南粳46’籼粳杂交F_1花药培养及再生体系的建立

为探索籼粳杂交水稻花药培养再生体系,以籼稻‘扎西玛’和粳稻‘南粳46’籼粳杂交F1花药为外植体,分别从低温预处理时间、基本诱导培养基种类、蔗糖质量浓度及不同激素配比方面研究花药愈伤组织诱导,并将诱导出的愈伤组织进行分化成苗,以期构建籼粳地理远源杂交水稻花药培养再生体系。结果表明,4℃处理2~5d的花药,其愈伤组织诱导率较高,与未处理和低温处理6~10d相比达到显著水平;添加蔗糖质量浓度为60g·L-1,以N6或M8为基本培养基均可以获得较高的诱导率;以M8为基本培养基,添加2,4-D 2mg·L-1和KT 0.3mg·L-1诱导水稻愈伤组织出愈率可高达32.14%;以MS为基本培养基,激素组合为KT 2mg·L-1和ABA 3mg·L-1分化培养基,其愈伤组织成苗率可达50%,其中绿苗分化率达4.55%。     

籼稻高效再生体系建立及其影响因子的研究

以籼稻成熟胚为材料,研究了不同因子对水稻愈伤组织诱导和分化的影响,建立了籼稻高效再生体系。结果表明,2,4-D可诱导愈伤组织产生,但博B在仅含2,4-D的诱导培养基中,愈伤组织诱导率极低;6-BA和2,4-D共同作用显著提高出愈率,在2mg.L-12,4-D+0.5mg.L-16-BA的条件下,253的出愈率最高可达到92.9%,博B出愈率可达到84.8%,2,4-D的最适浓度是1.0-2.0=mg.L-1,6-BA的最适浓度0.5-1.0mg.L-1。不同比例的KT、6-BA、NAA和IAA配合使用有利愈伤组织分化,分化率均达到100%,成苗率最高达63.3%。在诱导培养基中添加6-BA不仅对愈伤组织形成和质量有较好促进作用,而且有利于愈伤组织的分化。     

冬小麦‘东农冬麦1号’成熟胚组织培养及再生体系建立

‘东农冬麦1号’是目前黑龙江省高寒地区首个可越冬冬小麦品种,建立高效稳定组织培养再生体系,对品种改良和功能基因组学研究具有重要意义。研究以‘东农冬麦1号’成熟胚为外植体,探讨培养基类型、接种方式、添加物组合浓度、2,4-D、6-BA和KT浓度等因素对愈伤组织诱导、分化及植株再生影响。结果表明,不同培养基类型对冬小麦成熟胚诱导率影响无显著差异。接种方式对成熟胚愈伤组织分化率影响极显著,胚切伤略带胚乳法成熟胚刮碎法完整胚法。诱导培养基附加适量添加物有利于愈伤组织分化,正交试验获得添加物最佳配比为100 mg·L-1谷氨酰胺+0.1 mg·L-1NAA+0.3 g·L-1肌醇+1 g·L-1脯氨酸+0.5 mg·L-1ABA。2,4-D浓度显著影响成熟胚愈伤组织分化率和成苗率,随2,4-D浓度升高,诱导率呈先升高后降低趋势,而分化率和成苗率均下降。分化培养基中6-BA对成苗率影响差异极显著,4 mg·L-1时达到最大;KT对愈伤组织分化要高于6-BA,但对成苗率影响明显低于6-BA。该体系所获冬小麦愈伤组织分化率和成苗率分别可达93.33%和66.64%。     

西北粳稻成熟胚高频再生体系研究

【目的】研究基因型、培养基、激素、碳源的种类和质量浓度对西北粳稻成熟胚培养特性的影响,建立西北粳稻成熟胚离体再生体系。【方法】以4个西北粳稻品种宁粳16、宁粳34、宁粳35和宁粳38的成熟胚为材料,利用组织培养法,对水稻成熟胚进行脱分化和再分化,获得再生植株,研究培养基、基因型及激素、碳源质量浓度和种类对西北粳稻成熟胚愈伤组织诱导和分化的影响。【结果】基因型对西北粳稻成熟胚培养的影响较大,参试材料中宁粳34的培养特性最好;N6和NB 2种培养基对西北粳稻培养效果的影响随粳稻品种基因型的不同而不同;诱导培养基中添加2,4-D的质量浓度以2 mg/L为好,添加0.2~0.5 mg/L的6-BA可提高西北粳稻成熟胚的愈伤组织诱导率和绿苗分化率。以麦芽糖和蔗糖为碳源时,西北粳稻愈伤组织诱导率和绿苗分化率均较高,蔗糖质量浓度为30~40g/L时培养效果最佳。【结论】基本明确了基因型、培养基、激素、碳源对西北粳稻成熟胚离体培养特性的影响效果,初步建立了西北粳稻成熟胚高频再生体系。     

小麦成熟胚愈伤组织诱导及再生影响因素初探

以2个小麦品种成熟胚为外植体进行离体培养,研究了不同取胚方式、诱导培养基中不同2,4-D浓度、分化培养基中不同2,4-D浓度与KT浓度组合对愈伤组织的诱导率、直接成苗/根率及再生成苗率的影响。结果表明:刮胚法的再生苗率最高、直接成苗/根率最低;在2个基因型条件下,2,4-D浓度在2 mg·L-1条件下,愈伤组织出愈率均最高;在分化培养基中,MS+2,4-D 2 mg·L-1+KT 2 mg·L-1其再生率最高。     

不同基因型小麦成熟胚愈伤组织的诱导与分化

以小麦成熟胚为外植体,通过胚性愈伤组织诱导,建立一套有效的小麦诱导再生体系.以抗冻早-30、百麦4411和"06-4046"3个小麦基因型为材料,对影响小麦愈伤组织诱导和分化的因素进行了研究.结果表明,2,4-D浓度为2mg·L-1时更有利于诱导胚性愈伤组织;在抗冻早-30和百麦4411分化中加入KT 2 mg·L-1有助于提高分化率和再生率,在"06--4046"分化中加入KT 0.5 mg·L-1对小麦成熟胚的分化和再生苗生长是有利的:不同小麦品种加入400 mg·L-1水解酪蛋白更有利于诱导愈伤组织.因此,在MS基本培养基中附加2 mg·L-1 2,4-D、400 mg·L-1水解酪蛋白及一定量的KT,可促进小麦成熟胚愈伤组织的诱导和分化再生苗.     

不同基因型水稻再分化培养的比较研究

采用水稻Ac/Ds插入突变株系及野生水稻种子为外植体,从成熟胚盾片诱导愈伤组织.通过用不同培养基、不同植物生长调节物质浓度配比对愈伤组织进行诱导及再分化试验.结果表明:NMB培养基有利于愈伤组织的诱导;在诱导培养基中添加2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.2 mg/L能明显提高出愈率;再分化率最高的培养基配方为NMB+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,野生型和含Ac/Ds的突变体的种子表现一致.     

大麦成熟胚愈伤组织诱导、继代及分化研究

以大麦品种G1614成熟胚为研究对象,以MS培养基为基本培养基,探讨2,4-D质量浓度、碳源和成熟胚切割方式对大麦成熟胚愈伤组织诱导的影响,以及NAA/KT配比对大麦愈伤组织分化的影响。结果表明:2,4-D质量浓度为5 mg/L时,大麦成熟胚出愈率较高;30 g/L蔗糖作为碳源时,大麦成熟胚愈伤诱导率较高;纵切大麦成熟胚会促进大麦愈伤组织的诱导;在分化培养基中添加0.5 mg/L NAA和4.0 mg/L KT时,可使大麦愈伤组织获得较高的分化率。     

水稻武育粳3号成熟胚愈伤组织诱导及植株再生研究

以粳稻品种武育粳3号的成熟胚为外植体,研究不同基本培养基、蔗糖浓度、2,4-D浓度以及激素配比对愈伤组织诱导率的影响.研究表明,愈伤组织诱导培养基为:M_8+30 g/L蔗糖+10 g/L琼脂+5 g/L山梨醇+2 mg/L2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+2 mg/L ABA,最高出愈率为87.5%,多种激素配合使用比单一使用效果好;植株分化培养基为:MS+30g/L蔗糖+8 g/L琼脂+0.5 mg/L 2,4-D+1 mg/L 6-BA+1 g/L活性炭,植株分化率可以达到38%.     

高羊茅的组织培养与植株再生

以“猎狗5号”、“上农矮生高羊茅”和“98-19”3份高羊茅(FestucaarundinaceaSchreb.)品种为供试材料,成熟种子胚为外植体,在MS基本培养基上分别添加不同2,4-D浓度,并用2,4-D分别与BA、NAA不同配比进行愈伤组织诱导与分化试验。结果表明:2,4-D浓度对愈伤组织的诱导起决定性作用,9mg.L-1为较佳诱导浓度;BA对于愈伤组织诱导有负作用,与不添加BA的处理相比,愈伤组织诱导率降低了20%;NAA有利于减少根毛,改善愈伤质量。愈伤组织分化以MS+BA2.0mg.L-1较为合适。     

百合愈伤组织的诱导及植株再生

试验以东方百合(Oriental hybrids)"bernini"的花柱、花丝、花瓣为外植体,利用组织培养技术,探讨不同外植体愈伤组织的诱导、胚状体发生及植株的再生状况。结果表明,三种外植体均能诱导愈伤组织,花柱和花瓣诱导的愈伤组织为绿色致密的非胚性组织,而花丝诱导的愈伤组织为黄色疏松的胚性组织,将胚性愈伤组织继续培养一个月可发生胚状体。花丝愈伤组织诱导率、分化率以及分化速度均高于花柱和花瓣。诱导愈伤组织的最佳培养基为改良MS(盐酸硫胺素的浓度为4mg·L~(-1))+2,4-D2mg·L~(-1)+水解乳蛋白300mg·L~(-1);最佳分化培养基为MS+KT0.1mg·L~(-1)+BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 1mg·L~(-1);最佳生根培养基为MS+IBA 0.5mg·L~(-1)。     

不同类型水稻材料成熟胚组织培养力的比较

【目的】研制适应性广的不同类型水稻成熟胚再生技术。【方法】采用生产上应用价值高的不同类型水稻品种成熟胚为外植体材料,比较研究9个粳稻、9个籼稻和11个新近培育的超级杂交稻(两系或三系)或优势组合在不同培养基中的出愈、分化和再生等组织培养力表现。【结果】以M8为基本培养基,在添加30g·L-1蔗糖、8g·L-1琼脂和2mg·L-12,4-D(2,4-苯氧乙酸)相同成分的基础上,供试粳稻材料单独添加较低浓度的细胞分裂素,即0.3mg·L-16-BA(6-苄基嘌呤)可获得较高的出愈率,出愈率在89.2%-61.7%之间;而供试籼稻材料则需在添加2mg·L-16-BA和0.5mg·L-1KT(激动素)两种细胞分裂素的基础上,再添加1mg·L-1NAA(萘乙酸)生长素类激素,可明显提高出愈率,出愈率在100%-9.1%之间;而11个偏籼型超级杂交稻则表现在添加1mg·L-16-BA和1mg·L-1KT(激动素)两种细胞分裂素,即可获得较高的出愈率,出愈率在86.3%-40%之间。在此基础上,在添加了0.5mg·L-12,4-D和1mg·L-16-BA的MS分化培养基(粳稻)以及0.2mg·L-12,4-D和0.5mg·L-16-BA(籼稻和超级杂交稻)的分化培养基上,可分别获得59.5%-9.2%(粳稻)、87.5%-3.6%(籼稻)和43.2%-17.2%(杂交稻)的植株再生率。【结论】初步建立了适合相同水稻类型成熟胚高频再生技术。     

南方红豆杉愈伤组织诱导和继代培养体系的建立

以南方红豆杉为材料,建立了其愈伤组织诱导与保持的技术体系,主要为:(1)南方红豆杉侧芽是诱导愈伤组织的最佳外植体;(2)南方红豆杉愈伤组织诱导的最佳培养基为:B5+2.0 mg.L-12,4-D+1.0 mg.L-1NAA+0.2 mg.L-1IAA;(3)南方红豆杉愈伤组织增殖的培养基为:B5+4.0 mg.L-1NAA+0.5 mg.L-12,4-D+0.2 mg.L-1GA+500 mg.L-1AC+2000 mg.L-1LH.并在培养基中同时添加AC、LH和GA33种抗褐物质,取得较好的抗褐化效果.     

柚杂交胚离体培养再生植株的研究

以王官溪蜜柚和度尾文旦柚互交产生的杂交种幼胚为材料,研究离体胚再生植株的技术.结果表明:幼胚在MT培养基上直接成苗质量最好;子叶在MT附加0.25mg·L-16-BA+0.5mg·L-1ZT+0.01mg·L-1NAA固体培养基中产生不定芽;带子叶胚轴在MT附加1mg·L-16-BA+0.2mg·L-1IAA+1mg·L-1GA3的固体培养基中可提高其萌芽率,繁殖系数扩大了20倍以上;分化的丛生芽是试管微芽嫁接的良好接穗材料,将芽苗转移到1/2MS+0.5mg·L-1IBA+0.5mg·L-1NAA的固体培养基中诱导生根壮苗最好.     

百脉根组织培养的研究

以UM和MS为基本培养基,通过调整激素种类与浓度等培养条件,按正交实验设计的原则,摸索出建立百脉根组织培养体系的最佳条件:愈伤诱导最佳培养基为UM+2,4-D 2 mg.L-1+KT3 mg.L-1;最佳分化培养基为MS+NAA0.1 mg.L-1+6-BA 1 mg.L-1;最佳生根培养基为MS+NAA0.05 mg.L-1。     

杂种黄秋葵茎尖及试管苗培养的研究

采用茎尖和试管苗培养的方法,以黄秋葵生长点为材料,进行了生长点的生长、分化芽的生根和试管苗的生根继代增殖培养,以及试管苗的移栽与定植的研究。结果表明:1/2MS+ZT0.2mg·L-1+NAA0.3mg·L-1是生长点伸长生长的理想培养基;MS+6-BA0.7mg·L-1+AgNO30.8mg·L-1+NAA0.1mg·L-1是生长芽分化培养的理想培养基;1/3MS+ABT0.6mg·L-1+蔗糖10g·L-1+IAA0.4mg·L-1是分化芽生根培养和生根继代增殖培养的理想培养基。试管苗移栽成活率为94.7%;定植成活率为97.4%;定植的试管苗保持了杂种黄秋葵的杂种优势。     

大岩桐的组织培养

以大岩桐的叶片为外植体进行组织培养。结果表明:叶片可诱导形成愈伤组织。经实验筛选出各培养阶段最适宜的培养基:(1)诱导、继代培养基为Ms+BA2mg·L-1+NAA0.2mg·L-1;(2)生根培养基为1/2Ms+IBA0.2mg·L-1+AC1g·L-1。     

籼型谷秆两用稻201高频再生系统的初步研究

以籼型谷秆两用稻 2 0 1 (稻草粗蛋白含量比一般品种高 1倍左右 ,稻谷产量、品质与一般推广品种相当的新型水稻 )的幼胚作为试验材料 ,研究了基本培养基、琼脂质量浓度、激素、继代次数、培养基有机成分的处理方法等对其愈伤组织分化频率的影响 ,探索了谷秆两用稻高频再生体系 .此外还比较了 2 0 1与其它籼稻品种相同发育时期的幼胚在相同培养基上诱导愈伤组织的差异 .结果表明 ,NB是较合适的基本培养基 ,NB+0 .0 5 mg· L- 1 NAA +2 mg· L- 1 6-BA是较合适的分化培养基 ;适当提高分化培养基琼脂质量浓度 ,减少继代培养次数 ,对培养基有机成分进行超过滤处理等均有利于愈伤组织的分化和植株再生     

矮牵牛花药植株再生体系的建立

为了提高矮牵牛花药愈伤组织诱导率,推动矮牵牛花药培养的应用研究。对白色、紫色、粉红色、大红色四种基因型矮牵牛花药进行培养,研究了不同浓度激素配比及不同浓度蔗糖、麦芽糖和白砂糖对花药诱导的影响。结果表明,四种基因型采用6-BA和IBA组合诱导效果较好。获得较高诱导率的激素配比依次为:白色MS+6-BA1.0 mg.L-1+IBA 1.5 mg.L-1,紫色MS+6-BA 1.0 mg.L-1+IBA 1.0 mg.L-1,粉红色MS+6-BA 1.5 mg.L-1+IBA 1.5 mg.L-1,大红色MS+6-BA 1.5 mg.L-1+IBA 1.0 mg.L-1。麦芽糖诱导效果好于蔗糖,白砂糖诱导效果明显差于前两者。     

裸燕麦胚性愈伤组织调控及悬浮细胞系的建立

对裸燕麦成熟胚进行离体培养,结果表明,基因型和不同激素组合对成熟胚愈伤组织诱导具有重要作用;晋燕８号愈伤组织诱导率高达８５．７％;２,４—Ｄ对愈伤组织诱导必不可少。采用循环培养法对愈伤组织进行调控,获得了易分散、颗粒状的胚性愈伤组织,缓减了愈伤组织生活力衰退的速度。将松脆愈伤组织置于液体培养基中进行悬浮培养,得到分散性好、生长快的悬浮细胞系。悬浮系经分化培养,获得了成活率在９５％以上的健壮再生植株。