省沽油组培过程中外植体灭菌技术的研究

[目的]寻求省沽油组织培养中适宜的外植体灭菌方法。[方法]研究了70%乙醇、0.1%HgCl2、0.1%HgCl2+70%乙醇组合在不同灭菌时间内对外植体生长的影响。[结果]适宜的外植体灭菌技术:茎尖用1%HgCl2+70%乙醇处理时间分别为5 min+50 s,成活率100%;茎段用1%HgCl2处理时间为15 m,成活率95%;幼叶用1%HgCl2处理时间为12 min,成活率85%。[结论]1%HgCl2+70%乙醇、1%HgCl2是省沽油外植体的有效灭菌剂。     

蔓性千斤拔组织培养中种子灭菌和芽增殖的研究

[目的]研究蔓性千斤拔组织培养中种子灭菌的方法,筛选适宜芽增殖的外植体及激素组合。[方法]用乙醇、次氯酸钠和升汞的不同组合对种子进行灭菌,然后比较顶芽和带腋芽的茎段作为外植体进行继代增殖的效果,探讨不同激素组合对芽增殖的影响。[结果]较好的种子灭菌方法为:75%乙醇30 s+10%NaClO10 min+0.1%HgCl25 min;带腋芽的茎段为较好的继代增殖外植体。6-BA对芽增殖有显著促进作用;KT对芽的增殖效果不如6-BA;芽增殖的最佳激素组合为6-BA2.0 mg/L+IAA0.1 mg/L,增殖倍数为6.74。[结论]获得了较好的种子灭菌方法,筛选出适合继代增殖培养的外植体和激素组合,为蔓性千斤拔组织培养的深入研究提供实验基础。     

油棕高效胚培养技术研究

分析不同灭菌时间和外植体的处理方式对油棕种子无菌苗获得效率的影响,为其高效的组织培养奠定基础。结果表明:以75%酒精处理1 min,再用0.1%升汞处理30～40 min对油棕种子的灭菌效果最好。灭菌后的种子去除胚乳后将胚接种于MS培养基上,其出苗率最高,可达100%;接种后15 d即可获得无菌苗,成苗率最高达88.9%。胚在光照及黑暗条件下均可萌发,但苗的生长需要光照条件。该方法适合油棕无菌苗的获得,也可为其它科属中种壳坚硬种子无菌苗的获得提供参考。     

木薯外植体表面灭菌与增殖培养的研究

[目的]筛选出适合木薯组织培养的灭菌体系,为加快木薯组织快繁提供科学依据。[方法]以木薯品种GR891的腋芽为外植体,研究经甲基托布津杀菌剂处理和无处理外植体分别采用不同组合、不同处理时间对其表面灭菌的效果,同时研究6-BA和6-BA与NAA组合对丛芽诱导培养效果的影响。[结果]经甲基托布津杀菌剂处理后用体积分数75%乙醇消毒10 s＋质量分数0.1%升汞处理8 min效果最好,外植体存活率为61.3%;以MS＋6-BA 1.5 mg/L＋糖30 g/L＋琼脂6.5 g/L培养基诱导培养芽效果最好,有的丛芽能达到7～9株,丛芽生长速度快,健壮。[结论]建立了木薯GR891组织培养外植体灭菌与增殖培养体系。     

东方白果种子无菌苗萌发的影响因素研究

[目的]研究影响东方白果（Solanum texanum）种子无菌苗萌发的因素,为其组织培养奠定基础。[方法]采取不同的预处理和消毒方法处理种子,观察其萌发情况。[结果]用70℃水浸种10 m in,经75%乙醇消毒5 m in和0.1%HgC l2消毒30 s,放置于灭菌的脱脂棉中培养,可在7 d内获得无菌苗,种子萌发率可达到75.0%。[结论]该方法适合东方白果种子无菌苗的萌发,也可为其他科属种皮坚硬种子的萌发提供依据。     

蛇足石杉茎尖灭菌方法与组织培养的研究

[目的]研究蛇足石杉组织培养的灭菌方法和培养条件。[方法]以野生孢子体茎尖为外植体,先用不同灭菌液单独或配合使用对外植体进行表面灭菌,将表面无菌外植体转到添加多种抗生素和孔雀石绿的培养基上杀灭内生菌,然后将外植体分别接种到不同的培养基上,筛选茎尖培养的最佳灭菌方法和培养条件。[结果]最佳表面灭菌方法为70%乙醇灭菌40 s,0.1%升汞溶液灭菌8 min,70%双氧水溶液灭菌10 min,培养2周,表面无菌率为63%。适宜的杀灭内生菌方法为表面无菌的外植体在附加0.5 mg/L孔雀石绿和100 mg/L抗生素AAS的培养基上培养4~6周,无菌率达52%。适宜的培养基为1/4MS矿质元素+1/2MS有机元素+2%蔗糖+4.5 g/L琼脂,pH5.8。在此培养基上茎尖外植体可生长出新枝,并可再生根。[结论]建立了蛇足石杉茎尖组织培养的灭菌方法且筛选出适合其生长的适宜培养基,为蛇足石杉组织培养的深入研究提供实验基础。     

尖萼耧斗菜外植体消毒及愈伤组织诱导的研究（摘要）

[目的]研究尖萼耧斗菜外植体消毒及愈伤组织的诱导。[方法]采用不同消毒剂种类和浓度,对尖萼耧斗菜种子进行消毒处理,研究其污染率和污染速率,寻找建立无菌苗培养系最适宜的方法;以尖萼耧斗菜种子获得的无菌苗的根、茎、叶片为外植体,通过在MS基本培养基中附加不同激素配比,筛选最佳外植体和最佳培养基配方。[结果]外植体材料最适宜的灭菌处理方法为：先将外植体在75%酒精中浸30s,用无菌水冲洗5遍,再将其用0.2%升汞液浸泡2min,再用无菌水冲洗5遍。该消毒方法使污染率最低、发芽率最高,并且获得的无菌苗长势最好;诱导尖萼耧斗菜胚性愈伤组织的最佳外植体为幼根;诱导胚性愈伤组织的最佳培养基为MS0.6mg/L2,4-D＋0.5mg/L6-BA。[结论]该研究为尖萼耧斗菜的大规模生产提供了技术支持,并为其药用和观赏价值的最大发挥作出了贡献。     

尖萼耧斗菜外植体消毒及愈伤组织诱导的研究(摘要)(英文)

[目的]研究尖萼耧斗菜外植体消毒及愈伤组织的诱导。[方法]采用不同消毒剂种类和浓度,对尖萼耧斗菜种子进行消毒处理,研究其污染率和污染速率,寻找建立无菌苗培养系最适宜的方法;以尖萼耧斗菜种子获得的无菌苗的根、茎、叶片为外植体,通过在MS基本培养基中附加不同激素配比,筛选最佳外植体和最佳培养基配方。[结果]外植体材料最适宜的灭菌处理方法为:先将外植体在75%酒精中浸30s,用无菌水冲洗5遍,再将其用0.2%升汞液浸泡2min,再用无菌水冲洗5遍。该消毒方法使污染率最低、发芽率最高,并且获得的无菌苗长势最好;诱导尖萼耧斗菜胚性愈伤组织的最佳外植体为幼根;诱导胚性愈伤组织的最佳培养基为MS0.6mg/L2,4-D+0.5mg/L6-BA。[结论]该研究为尖萼耧斗菜的大规模生产提供了技术支持,并为其药用和观赏价值的最大发挥作出了贡献。     

尖萼耧斗菜外植体消毒及愈伤组织诱导的研究

[目的]研究尖萼耧斗菜外植体消毒及愈伤组织的诱导。[方法]采用不同消毒剂种类和浓度,对尖萼耧斗菜种子进行消毒处理,研究其污染率和污染速率,寻找建立无菌苗培养系的最佳方法;以尖萼耧斗菜种子获得的无菌苗的根、茎、叶片为外植体,通过在MS基本培养基中附加不同激素配比,筛选最佳外植体和最佳培养基配方。[结果]外植体材料最适宜的灭菌处理方法为：先将外植体在75%酒精中浸30 s,用无菌水冲洗5遍,再将其用0.2%升汞液浸泡2 min,再用无菌水冲洗5遍。该消毒方法使污染率最低、发芽率最高,且获得的无菌苗长势最好;诱导尖萼耧斗菜胚性愈伤组织的最佳外植体为幼根;诱导胚性愈伤组织的最佳培养基为MS＋0.6 mg/L2,4-D＋0.5 mg/L6-BA。[结论]为尖萼耧斗菜的大规模生产提供了技术支持,并为其药用和观赏价值的最大发挥作出了贡献。     

葫芦种子无菌苗组培体系建立

【目的】建立葫芦种子无菌苗组培体系,为葫芦高频再生体系提供外植体。【方法】以葫芦种子为材料,研究了(A)完整种子、(B)切半种子、(C)萌发种子和(D)剥壳种仁四种种子处理方式和升汞灭菌时间对无菌苗获得的影响。【结果】葫芦种子种皮坚硬,直接作为外植体灭菌困难。接种葫芦完整种子和切半种子,均表现为污染率高(4.4%和51.1%)而萌发率低(0%和4.4%);接种萌发种子虽然萌发率最高(100%)但污染率也最高(66.7%);种子经过剥壳处理和0.1%升汞消毒5min,污染率低(0%)、萌发率高(84.4%)。【结论】剥壳种仁是获得葫芦无菌苗的最佳外植体,经0.1%升汞灭菌5min,接入MS培养基可高效获得无菌苗,而(A)完整种子、(B)切半种子和(C)萌发种子均不宜作为获取葫芦无菌苗的外植体。     

意大利生菜组织培养体系的建立

[目的]建立意大利生菜组织培养体系。[方法]以意大利生菜(Lactuca sativa L.var.ramosa Hort.)种子为试验材料,用不同有效氯含量(0、0.5%、1.0%、2.0%、4.0%)的漂白水灭菌,于MS培养基上培养无菌苗。取4~5 d苗龄的无菌幼苗子叶,在添加不同浓度激素的MS培养基上诱导愈伤组织,并进一步诱导生芽、生根,筛选最佳诱导激素配比及激素浓度。[结果]意大利生菜种子经有效氯含量1.0%的漂白水处理,于MS培养基上培养可获得意大利生菜无菌苗。无菌幼苗子叶在MS+0.5 mg/L 6-BA+0.20 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂的培养基上,可以得到理想的意大利生菜愈伤组织;在MS+0.25 mg/L 6-BA+0.20 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂的培养基上,最有利于意大利生菜愈伤组织不定芽的发生且对后期生根有良好的诱导作用。[结论]配合使用一定浓度的6-BA和NAA可有效建立意大利生菜组织培养再生体系,为进一步建立意大利生菜遗传转化体系奠定基础。     

月见草种子的无菌萌发条件

[目的]为月见草的组织培养提供无菌外植体。[方法]以月见草种子为材料,经过不同的表面除菌方法处理后,接种于不同的培养基上,培养10 d后统计种苗的污染率、发芽率。[结果]经70℃热处理48 h后,用70%乙醇（40 s）＋0.1%HgCl2（10 min）＋吐温80进行表面除菌效果最好,污染率最低;在VW＋1.0 mg/L6-BA＋0.5 mg/LNAA＋0.05%AC培养基中培养,月见草种子的萌发率最高,达到93%,萌发后幼苗的生长状况最优。[结论]该试验建立了优质、高效的月见草种子无菌萌发体系,为月见草资源的持续利用奠定了基础。     

大花萱草‘盛夏红酒’组织培养技术研究

[目的]研究大花萱草‘盛夏红酒’的组织培养技术。[方法]以‘盛夏红酒’的健壮花梗为外植体,研究不同激素配比及浓度对外植体愈伤组织诱导和生根的影响。[结果]0.1%升汞消毒10 min为最佳外植体消毒时间,成活率达82.22%;愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA;最佳增殖培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA,繁殖系数达4.9;最佳生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA,生根率达92.5%;最适移栽基质为蛭石∶草炭(V/V)=1∶1,苗成活率可达95%。[结论]该研究为‘盛夏红酒’的工厂化育苗提供了理论依据。     

蒲包花种子组织培养的研究

[目的]摸索蒲包花种子组织培养技术,解决蒲包花种子播种繁殖率低的问题。[方法]以蒲包花种子为外植体,采用不同的消毒方式、培养基和基质,研究了蒲包花的组织培养。[结果]经浓度70%酒精消毒30 s,蒲包花种子污染率较低,为18.7%,萌发率高,达62.5%。蒲包花不定芽的最佳培养基为MS+BA1.0 ml/L+IAA0.1 ml/L,增殖系数达5.0,丛生芽多,且生长健壮;蛭石+珍珠岩基质对植株的扦插最好,成活率达到63.0%;不经生根培养的试管苗的扦插成活率较高,可达60.0%,经生根培养的试管苗的扦插成活率为48.0%。[结论]IAA对蒲包花不定芽增殖的作用很明显,蒲包花试管苗可不经生根培养直接扦插。     

垂枝樱花外植体灭菌及不定芽的诱导研究

[目的]探讨垂枝樱花外植体灭菌及不定芽诱导的相关技术.[方法]以垂枝樱花当年生带腋芽茎段为外植体,对其组织培养繁殖技术中外植体选择、灭菌方法与程序、不定芽的诱导等环节进行了初步研究.[结果]适宜外植体采集时间为晴天中午,采集部位为当年生枝条的中上部,适宜的表面灭菌程序为：洗衣粉中浸泡15 min,流水冲洗lh,70％乙醇浸泡30 s,0.1％ HgCl2浸泡10 min,最后无菌水冲洗5遍,成活率达68.3％.适宜垂枝樱花不定芽诱导的培养基为1/2MS ＋6-BA 0.5 mg/L＋ NAA 0.10 mg/L,分化率达68.3％.[结论]为垂枝樱花的组织培养提供相关技术支持.     

党参无菌苗培养前种子消毒技术研究

[目的]研究不同消毒方法下党参种子的消毒效果。[方法]以党参种子为试验材料,通过10%H_2O_2、0.1%HgCl_2和2%NaClO这3种消毒剂,75%乙醇预处理,无菌水预浸泡,对党参种子的消毒效果进行比较。[结果]在10%H_2O_2、0.1%HgCl_2和2%NaClO这3种消毒剂中,2%NaClO浸种20 min的消毒效果最好;用75%乙醇预处理20 s可降低种子带菌率;在党参种子消毒之前,无菌水预浸泡24 h可提高发芽率。[结论]该研究结果为培育党参无菌苗等研究提供了重要依据。     

不同粗度灵武长枣休眠枝水培发芽情况及其无菌外植体的建立研究

[目的]研究不同粗度对灵武长枣(Ziziphus jujuba Mill.)休眠枝水培发芽的影响,并对水培芽无菌外植体的建立进行研究。[方法]试验以灵武长枣1年生休眠枝为材料,采用水培催芽的方法在冬季获得外植体。[结果]灵武长枣1年生休眠枝茎段基部粗度大于3.5 cm时水培效果较好,抽生枣头较多,生长健壮;以这样的枣头作外植体成活率高达90%以上。外植体消毒灭菌以75%乙醇消毒20 s+0.1%氯化汞消毒15 min+2滴吐温效果良好,污染率为10.0%。[结论]该研究获得了灵武长枣休眠枝水培催芽和水培芽消毒处理的最佳方案,可为延长初代培养的取材时限,提高水培芽的消毒处理效果提供科学依据,并为其下一步的试管繁殖、生根等研究提供技术参考。     

降低软枣猕猴桃初代培养污染率的研究

[目的]筛选降低软枣猕猴桃外植体初代培养污染率和提升外植体诱导率的处理方法。[方法]采用半木质化的软枣猕猴桃新梢作为外植体,根据外植体灭菌时间和氨苄青霉素培养基浓度差异组合,分析降低软枣猕猴桃外植体初代培养污染率和提升外植体诱导率的因素,筛选出最适宜的处理方法。[结果]增加外植体75%乙醇灭菌时间至10 s可降低软枣猕猴桃初代培养污染率,培养基中氨苄青霉素浓度为100~150 mg/L时,软枣猕猴桃初代培养污染率随培养基中氨苄青霉素浓度的增加而降低。增加外植体灭菌时间和培养基中氨苄青霉素浓度均能增加软枣猕猴桃外植体诱导率。[结论]污染率低且诱导率高的处理方法为1/2MS+100 mg/L氨苄青霉素、1/2MS+150 mg/L氨苄青霉素、外植体75%乙醇灭菌10 s+0.1%升汞灭菌8 min和外植体75%乙醇灭菌10 s+0.1%升汞灭菌10 min。