鸡树条荚蒾果多酚改善胰岛素抵抗HepG2细胞的糖代谢效应

目的探讨鸡树条荚蒾果多酚对HepG2细胞胰岛素抵抗（IR）模型的改善作用,以评价其降血糖活性。方法本研究采用高浓度胰岛素诱导,建立体外IR模型,并进行模型稳定性（细胞活性法）及可靠性（Z因子法）评估。试验设空白组、IR模型组、阳性对照（二甲双胍）组和荚蒾果多酚组,MTT法检测细胞活性;葡萄糖氧化酶法检测培养液葡萄糖含量,计算葡萄糖消 耗量;蒽酮法测定糖原含量;比色法检测细胞己糖激酶（HK）、丙酮酸激酶（PK）活性,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞磷酸烯醇式丙酮酸激酶（PEPCK）、葡萄糖六磷酸酶（G6PC）活性。结果10? 6 mol/L的胰岛素诱导处理HepG2细胞24 h是产生胰岛素抵抗模型的最适条件,且IR模型在12 ~ 36 h内有较高的稳定性和可靠性。0.10 ~ 1.00 mg/mL 荚蒾果多酚组的葡萄糖消耗量显著高于模型组（P < 0.05）,24 h、0.50 mg/mL组的糖消耗量最高,为（3.49 ± 0.11）mmol/L,消耗率可达88.81%（P < 0.01）。与模型组对比,荚蒾果多酚可提高糖原的含量33.65%（P < 0.01）,HK、PK活性可分别提高43.36%（P < 0.05）、48.41%（P < 0.01）,对G6PC、PEPCK活性抑制率为分别为22.86%（P < 0.01）、17.33%（P < 0.05）。结论鸡树条荚蒾果多酚可提高IR- HepG2细胞的HK、PK活性,加快糖酵解,增加糖原含量;抑制G6PC、PEPCK活性,从而减少细胞内源性葡萄糖的产生。所以鸡树条荚蒾果多酚对胰岛素抵抗细胞的治疗具有一定效果。      

蜂胶黄酮增强免疫作用的研究

以蜂胶黄酮(PF)为免疫增强剂,探讨其对免疫雏鸡血清抗体效价和外周血T淋巴细胞增殖以及对培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖的影响。结果表明:PF能显著提高雏鸡的血清抗体效价,促进外周血淋巴细胞增殖,且有一定的量效和时效关系;在体外,也能促进鸡脾脏T淋巴细胞增殖,以低浓度的效果较好。证明PF具有较强的增强免疫活性,是蜂胶中增强免疫作用的有效成分。     

构树黄酮诱导肝癌细胞凋亡的初步观察

[目的]研究构树黄酮对肿瘤细胞的抑制效果。[方法]将处于对数生长期的Hep G2细胞接种于含有0、25、50、100、200、300μg/ml构树黄酮的DMEM培养基中,在37℃、5%CO2条件下分别培养24、48和72 h,采用MTT法测定构树黄酮对Hep G2细胞增殖的影响、用碘化丙啶(PI)染色法观察细胞形态的变化,并计算Hep G2细胞凋亡率。[结果]构树黄酮能显著抑制Hep G2细胞增殖,并呈现剂量和时间依赖性;构树黄酮能诱导Hep G2细胞凋亡,其最低有效浓度为25μg/ml;且Hep G2细胞凋亡率呈随着构树黄酮浓度增加及作用时间延长而升高。[结论]构树黄酮能抑制Hep G2细胞增殖并诱导其凋亡。     

小鼠STEAP4对HepG2细胞自噬的调控机制

为研究机体内稳态调节机制,经筛选高脂小鼠转录组数据得到特异上调的Steap4基因,对其进行不同物种间基因多态性比较,并在HepG2细胞中异源超表达该基因24 h后检测自噬相关基因在转录和翻译水平的变化。结果显示,STEAP4基因在不同物种间较保守,其基因多态性主要在翻译水平产生变化,小鼠Steap4基因与人源STEAP4基因相似性最高。荧光定量PCR的结果表明mSTEAP4对HepG2自噬关键基因无显著性影响,但Western blot结果显示mSTEAP4能够下调自噬相关蛋白的表达量,即mSTEAP4从蛋白水平抑制HepG2细胞自噬水平。STEAP4在细胞处于内稳态时会抑制自噬,降低细胞中的物质能量代谢,使细胞处于静息状态。     

牦牛CCL14蛋白对HepG2细胞活性和凋亡的影响

旨在研究牦牛CCL14蛋白（Bos grunniens C-C motif chemokine 14 protein, BgCCL14）对HepG2细胞的影响和作用机制。将原核表达的BgCCL14蛋白与HepG2细胞共培养,利用CCK-8试剂盒检测细胞活性,平板克隆检测细胞克隆形成能力,细胞划痕检测细胞迁移以及荧光定量PCR检测相关基因的表达量。结果表明,1 μg/mL、10 μg/mL和20 μg/mL的BgCCL14蛋白均能显著降低HepG2细胞活性;20 μg/mL的BgCCL14蛋白对细胞增殖和迁移有极显著抑制作用;20 μg/mL的BgCCL14蛋白处理36 h极显著上调凋亡基因BAK和BAX 的mRNA水平,极显著降低 HIF1A、 PI3K和 CDK1基因的mRNA水平,显著降低mTOR基因 的mRNA水平。这表明BgCCL14蛋白可能通过促进细胞凋亡抑制肝癌细胞活性。     

蜂胶黄酮超声提取工艺的正交优化及不同地域蜂胶黄酮含量的比较

[目的]研究超声波对蜂胶黄酮提取率的影响,优化蜂胶黄酮提取工艺,并对不同产地蜂胶原胶中总黄酮的含量进行比较,为进一步研究和开发蜂胶资源提供依据。[方法]选取料液比、超声频率、提取时间、乙醇浓度、提取次数5个因素,以蜂胶黄酮的提取率为参数,分别进行单因素试验和正交试验优化,得到黄酮提取最佳参数。最佳提取条件提取并测定不同产地蜂胶中的总黄酮,采用spss18．0单因素方差分析不同产地蜂胶的总黄酮含量。[结果]经单因素和正交试验优化,最佳提取工艺是：超声频率59kHz,提取4次,提取时间18min,乙醇浓度为65％,料液比1：28g/ml。在最优提取条件下,对不同产地蜂胶黄酮提取率采用spss18．0系统进行显著性分析,经分析不同产地的蜂胶黄酮含量差异显著（P〈0．05）。[结论]蜂胶黄酮提取率经正交优化后得到最佳提取工艺,不同产地的蜂胶黄酮含量差异较大,该研究对进一步研究和开发蜂胶资源有理论指导意义。     

高良姜不同成分对人肝癌HepG2细胞的抗氧化损伤活性

目的探讨高良姜二苯基庚烷类、黄酮类、挥发油类及高良姜醇提物（组分Ⅰ-Ⅳ）对人肝癌HepG2细胞过氧化损伤的保护作用。方法采用减压硅胶柱层析（VLC）法对高良姜提取物进行分离;采用薄层色谱法（TLC）结合高效液相-质谱联用（HPLC-MS）法对各组分进行归属与鉴定;建立H2O2诱导HepG2细胞氧化损伤模型,采用MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡。结果组分Ⅰ和模型组的细胞存活率分别为71.9%、50.3%,两组的差异具有显著性（P〈0.05）;与模型组比较,组分Ⅰ和Ⅱ均可降低细胞凋亡率（P〈0.05）,其中组分Ⅰ更明显。结论高良姜组分Ⅰ和组分Ⅱ均有一定的抗氧化活性,其中组分Ⅰ更明显。     

胰康胶囊对2型糖尿病患者胰岛素抵抗的影响

目的观察胰康胶囊对2型糖尿病患者胰岛素敏感性的作用。方法选择2型糖尿病患者92例,随机分为对照组和治疗组(每组各46例),两组均常规应用二甲双胍,治疗组同时加用胰康胶囊。测定两组治疗前后空腹血糖、胰岛素、C-肽水平。结果治疗组和对照组降低血糖的总有效率分别为91.3%、71.7%,两组之间有效率比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗后空腹血糖、胰岛素及C-肽水平均比治疗前明显下降(P<0.01);而对照组只是治疗后的空腹血糖比治疗前下降明显(P<0.01),胰岛素、C-肽水平则无明显变化。结论胰康胶囊可通过改善胰岛素抵抗来提高疗效。     

葛仙米提取物诱导肝癌细胞HepG2凋亡的活性研究

[目的]研究葛仙米提取物诱导肝癌细胞HepG2凋亡的活性。[方法]采用二甲基四氮唑蓝（MTT）法测定细胞存活率,形态学法观察凋亡的特征性变化,AnnexinV/PI双染及PI单染流式细胞术法检测凋亡率。[结果]经不同浓度提取物作用后,HepG2细胞的生长受到显著抑制,并呈现时间-浓度依赖关系趋势。观察细胞形态,发现有凋亡特征性变化。AnnexinV/PI双染结果显示,癌细胞早期凋亡率随提取物浓度的升高而显著增高,最高可达79.2%。PI法同样显示凋亡的发生,其凋亡峰最大比率为9.6%,显著高于对照组。[结论]葛仙米甲醇提取物能够诱导肝癌细胞HepG2的凋亡。     

实验性肝硬化大鼠胰岛素抵抗的研究

临床研究发现肝硬化患者可出现胰岛素抵抗。针对这一发现,利用四氯化碳毒性肝硬变模型,进一步研究其葡萄糖耐量及血胰岛素水平。研究发现：肝硬变大鼠出现胰岛素抵抗,但肝硬化程度与血糖水平及血中胰岛素水平无明显相关。     

猪成熟脂肪细胞产生的胰岛素抵抗与应激

 猪脂肪细胞内环境的稳定在脂类代谢过程中起着重要作用。在肥胖等疾病发生过程中,成熟脂肪细胞面临由于能量过剩、炎性反应等造成的内质网应激,导致由于脂肪细胞负荷过重而致内环境稳定的破坏,从而产生胰岛素抵抗。本文就近年来关于猪脂肪细胞应激导致胰岛素抵抗的最新研究进展进行综述,为了解成熟脂肪细胞应激与胰岛素抵抗产生的机制提供参考。     

蜂胶类黄酮对糖尿病合并肺结核患者外周血WBC与T淋巴细胞亚群的影响

目的 探讨蜂胶类黄酮对糖尿病合并肺结核（diabetes mellitus complicated with pulmonary tuberculosis,DM-PTB）患者外周血中WBC与T淋巴细胞亚群的影响。方法 以DM-PTB患者120人为对象,利用随机数字表采用完全随机法分成A（蜂胶黄酮1 000 mg/d）、B（蜂胶黄酮2 000 mg/d）、C（条件对照）三组,每组40人,观察6个月,比较综合治疗前后白细胞计数（WBC）及分类（淋巴细胞L和中性粒细胞N）、T淋巴细胞亚群CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺数量及CD4⁺/CD8⁺比值的变化,并比较组内前后差异和组间差异。结果 三组7项观测指标自身前后配对差值（治疗后-治疗前）的均数比较Hotelling T²=515.359,P=0.000;治疗7项观测指标差别Wilks λ=0.017,P=0.000,其中多重比较结果为WBC的B组大于A与C组,L的B组> A组> C组,N的B组大于A与C组,CD3⁺的B 与A组大于C组,CD4⁺的B组>A组>C组,CD4⁺/CD8⁺比值多重比较结果为B 与A组大于C组。结论 蜂胶类黄酮能提高DM-PTB患者的细胞免疫水平。     

间歇低氧运动对胰岛素抵抗大鼠体成分及血脂指标的影响

目的：探讨间歇低氧运动对胰岛素抵抗大鼠体成分及血脂指标的影响。方法：将高糖高脂膳食建模成功的48只胰岛素抵 抗大鼠随机均分为常氧安静组、低氧安静组、常氧运动组和间歇低氧运动组，每组12只。每天进行1h跑速为25m/min的跑台运动 ，间歇低氧暴露为4h/d（14.5% O2）,7d/w。干预4周末测量各组大鼠体成分及血清TG、TC、HDL-C、LDL-C浓度。结果：与常氧 安静组比较，间歇低氧安静组、常氧运动组和间歇低氧运动组大鼠体重、肾周脂肪及附睾脂肪重量均出现显著性或极显著性下 降(P < 0.05，P < 0.01)，并以间歇低氧运动组下降最多，而股四头肌及腓肠肌虽有下降，但无统计学意义（P <0.05），同时 ，血清脂代谢指标TG、TC和LDL-C均出现显著或极显著性低于常氧安静组（P<0.05，P<0.01），而HDL-C则极显著性高于常氧安 静组（P<0.01），且以间歇低氧运动组大鼠的效果最佳。结论：间歇低氧运动可以改善胰岛素抵抗大鼠体成分和血脂代谢。     

蜂花粉蜂胶对小鼠生长的影响

试验以蜂花粉蜂胶作为饲料添加剂,探讨其对昆明小鼠生长的影响。试验结果表明:蜂花粉对仔鼠、育成鼠有明显的促进生长作用,蜂胶对小鼠的哺乳期、离乳期均无影响。     

蜂胶提取液对鸡蛋保鲜的效果

采用水、95%乙醇及其分别与超声波的综合作用从原蜂胶中提取蜂胶液,将得到的蜂胶提取液稀释成8、4、2、1mL/L,并分别对蜡样芽胞杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌进行抑菌圈直径和最小抑制浓度(MIC)的测定,选取提取效果最好方法中的两个浓度进行鸡蛋保鲜效果试验。结果表明,超声波作用于95%的乙醇蜂胶液的方法提取效果最好;不同提取方法得到的蜂胶提取液的抑菌作用存在差异,以超声波和乙醇提取的蜂胶液对受试菌作用最强;蜂胶提取液对大肠杆菌的抑制作用最强,其次是沙门氏菌和蜡样芽胞杆菌;在鲜蛋保鲜试验中发现,两种浓度、两种方法均有不同程度的保鲜效果。     

蜂胶CO2超临界萃取研究

以正交试验方法,取得了蜂胶CO2超临界萃取最佳提取条件:即萃取温度为46℃、萃取压力为25 MPa、分离1温度为50℃、分离1压力为7 MPa、萃取时间为3 h;发现加入5%~10%乙醇作为萃取的携带剂,有利于提高蜂胶超临界萃取率;同时发现CO2超临界萃取是一种去除蜂胶原料中铅的有效方法,但不能富集蜂胶中黄酮类化合物。     

紫外-可见分光光度法测定蜂胶胶囊中总黄酮含量的探讨

采用UV-1700紫外-可见分光光度计对蜂胶胶囊中总黄酮的含量进行测定。结果表明：蜂胶胶囊中总黄酮含量的平均值为198mg.g-1,同一样品重复进样6次,其相对标准偏差（RSD）的平均值为1.83%,三个浓度加样回收率的平均值为99.64%。从实验结果可以看出,分光光度法是检测蜂胶中总黄酮含量的一种有效、可行、简便的方法。     

CO2超临界和乙醇提取蜂胶对大鼠降血脂效果

试验用健康雄性SD大鼠,给予高脂颗粒饲料喂饲后第9 d,大鼠眶静脉取血,测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白(HDL-C)值。高脂血症动物模型成功后,随机分为对照组1(给予聚乙二醇400)、超临界蜂胶高剂量组(600 mg/kg BW)、超临界蜂胶中剂量组(300 mg/kg BW)、超临界蜂胶低剂量组(150 mg/kg BW);对照组2(给予食用油)、乙醇提取蜂胶高剂量组(600 mg/kg BW)、乙醇提取蜂胶中剂量组(300 mg/kg BW)、乙醇提取蜂胶低剂量组(150 mg/kg BW)8个组。分组后连续4周蜂胶灌胃,同时各组大鼠继续给予高脂颗粒饲料喂饲,之后各组大鼠取血测定TC、TG和HDL-C。结果表明:喂蜂胶28 d后,只有超临界蜂胶高剂量组(600 mg/kg BW)的TG值和乙醇提取蜂胶高剂量组(600 mg/kg BW)的TC值分别与相对照组差异显著,其它指标都差异不显著。     

不同体积分数的乙醇对蜂胶有效成分提取率的影响

采用不同体积分数的乙醇水溶液提取蜂胶有效成分．结果表明，蜂胶提取率随乙醇体积分数的提高而提高．当乙醇体积分数≥０．７时，蜂胶提取率随乙醇体积分数提高而提高的变化值极小，差异不显著；当乙醇体积分数≤０．７时，蜂胶提取率随乙醇体积分数的下降而下降，差异极显著