鸡传染性法氏囊病河北野毒株的分离研究

采用血清学方法、鸡胚培养、病理组织学检查方法,从河北省不同年份鸡ＩＢＤ免疫鸡群中分离和鉴定了ＨＥ９３,ＨＧ９６,ＸＮ９８和ＨＱ９９ ４个毒株,４个毒株回归鸡的死亡率分别为５０％,４０％,０％和１０％,从年份上看,ＩＢＤＶ毒力有逐渐减弱的趋势。接种鸡胚并传代,前２个毒株均在第一代时鸡胚全部死亡,且出现典型的鸡胚病变,而后２个毒株,初代培养鸡胚不死亡,当传至第４代才出现大部分死亡和鸡胚病变。ＨＥ９３、     

传染性法氏囊病病毒变异株弱毒的培育

传染性法氏囊病病毒３个变异野毒株ＪＤ１、ＪＤ２、ＨＢ）和２个经验血清型１毒株、ＳＣ）直接在鸡胚成纤维细胞上传代,均能不同程度地产生细胞病毒效应（ＣＰＥ）。将５个毒株２１代细胞毒连续回归鸡体５代,除ＪＤ１外,其余毒株均能不同程度导致法氏囊病谱。ＨＺ１４１、ＪＤ１３６、ＳＣ３８、ＪＤ２３７、ＮＢ３８代细胞毒在鸡体内回归５代,均未见法氏囊的眼观病变和组织学变化,囊指数保持稳定,说明ＨＺ１、ＳＣ、ＪＤ１、     

鸡传染性法氏囊病病毒山东地方野毒株的分离与鉴定

从山东省多个地区患传染性法氏囊病的鸡群中,分离到５个野毒株,经过琼脂双向双扩散试验、ＥＬＩＳＡ试验、血凝试验、病毒感染力测定、回归试验、电镜观察等６项鉴定,证明是鸡传染性法氏囊病病毒。并且,各毒株毒力差异较大,有的毒株感染力相当强,ＥＬＤ５０／０．２ｍＬ＝１０６．００。     

鸡对传染性法氏囊病病毒强毒株的易感性试验

无病传染性法氏囊病的病毒（ＨＢＤＶ）母源抗体不同日龄的鸡,经人工感染强主ＨＢＤＶ,按法氏囊肉眼眼病变判断,３周龄的鸡不易感,而４周龄￣１０周龄的鸡都易感,不管ＳＰＦ欢度呈是普通鸡,对强毒ＢＤＶ的易感性,主要取决于其日龄。     

河北省鸡传染性法氏囊病超强毒株的分离鉴定

鸡传染性法氏囊病(Infectious bursal disease，IBD)是由鸡传染性法氏囊病毒引起鸡的急性、高度接触性、杀淋巴细胞性疾病。其特征是突然发病、病程短、发病率高、病鸡严重委顿、白色下痢、法氏囊内B淋巴细胞损伤、鸡体免疫能力抑制。我国于1979年先后在广东、上海等地发现本病，现已遍及全国各     

鸡传染性法氏囊病病毒12个野毒株的毒力比较

对3－7周龄SPF鸡人工感染的致病性比较试验表明，从不同地区收集的12个鸡传染性法氏囊病病毒（IBDV）野毒株的毒力差异甚大，致病性最强的GX8／99株可引起易感年龄的SPF鸡70％－92％的死亡率，属超强毒，而人工接种YN2／99株的SPF鸡死亡率几乎为零。其余毒株对SPF鸡的致死率介于20％－60％，它们的毒力介于IBDV的标准毒与超强毒之间。     

三株鸡传染性法氏囊病毒弱毒株的分离与分子鉴定

本试验在江苏省鸡场分离获得3株鸡传染性法氏囊病病毒（IBDV）,采用RT—PCR法扩增VP2基因,将产物克隆入pMD18T载体,经测序,并与IBDV代表株VP2基因的高变区序列进行分析比较。结果显示,3个分离株与超强毒株、强毒株、突变株及弱毒株的核苷酸同源性在89．5％～98．9％之间,与弱毒株Cu-1和疫苗株PBG-98同源性最高,为98．9％;推导出的氨基酸序列与代表性毒株的同源性在98．2％～99．5％之间。其中,七肽区的第三个丝氨酸残基突变为精氨酸或苏氨酸,279和284位氨基酸残基突变为天冬氨酸和苏氨酸,222、294和299位氨基酸残基分别突变为脯氨酸、亮氨酸和天冬氨酸。上述试验表明3株分离株均为临床弱毒株。     

鸡传染性法氏囊病病毒X-28弱毒株的致病性试验

在Vero细胞上适应且连续传17代的传染性法氏囊病病毒X毒株IBDVX,再经鸡胚成纤维细胞CEF连续传代后,得到了适应CEF细胞生长且毒力相对稳定的的弱毒株(IBDVX-28)。IBDVX-28~IBDVX-43代毒均能在72h~96h内产生明显的细胞病变效应(CPE),半数细胞感染量(TCID50)在10-8.47/0.1mL~10-9.26/0.1mL之间,半数鸡胚感染量(EID50)在10-4.71/0.2mL~10-5.80/0.2mL之间。致病性试验表明,各代次毒能引起10日龄鸡胚40%~50%的感染或死亡,对30日龄SPF小鸡基本无致病性,所有试验鸡均未见法氏囊明显的眼观病变,囊指数(b/B)平均为0.35±0.040;IBDVX-28代毒在雏鸡体内回归6代,均未见法氏囊明显的眼观病变,囊指数保持稳定。     

鸡传染性法氏囊病(IBD)地方毒株的分离与鉴定

鸡传染性法氏囊病(IBD)是一种以侵害免疫器官为主的免疫抑制性疾病,主要危害雏鸡和青年鸡的急性接触性传染病,病死率为10%～70%.多年来,该病在全国广泛流行,接种疫苗是预防本病的主要措施,但仍有部分免疫鸡群发病,给养鸡业带来了巨大的经济损失.现就一地方株IBDV的分离与鉴定报告如下.     

鸡传染性法氏囊病毒超强毒株的分离及生物学特性鉴定

用SPF鸡及鸡胚，从吉林某鸡场病死鸡的法氏囊组织到一株超强毒株（J20株）。此病毒不能凝集鸡的红细胞，可以被IBDV标准阳性血清检出IBDV抗原。通过对J2001分离毒株进行回归实验，测定病毒效价EID50达10^6/0.2ml，发病率为100％，死亡达70％；病毒理化特性试验，电镜观察等证实J20株为鸡传染性法氏囊病超强毒株。     

鸡传染性法氏囊病毒强毒株的分离鉴定

从广州市郊区某鸡群送检的６周龄曾经ＩＢＤＶ免疫的病鸡法氏囊中分离到１株ＩＢＤＶ强毒。该毒株能使鸡胚于接种后３６～７２小时内死亡，易感鸡１００％发病，５０％死亡。电镜观察，该病毒颗粒直径６０ｎｍ左右，无囊膜。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测，病毒核酸有二条ＲＮＡ带。     

抗传染性法氏囊病病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定

应用杂交瘤技术获得了１３株抗传染性法氏囊病病毒的单克隆抗体,其中有９株ＭｃＡｂｓ为ＩｇＧ类,４株为ＩｇＭ类,这些ＭｃＡｂｓ与新城疫病毒,传染性支气管炎病毒和马立克氏病病均无交驻反应病毒中和试验表明,有５株ＭｃＡｂｓ具有中和活性,Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｉｏｔｔｉｎｇ试验表明,这５株有中和性的ＭｃＡｂｓ识别的抗原位在ＶＰ２上。     

鸡传染性腺胃病病原T95株的分离与鉴定

自某疫区的鸡腺胃病鸡群中分离到Ｔ９５毒株,在ＳＰＦ鸡胚稳定传代至８代,具有规律性死亡和典型胚胎病变特征,Ｔ９５株感染鸡胚尿囊液提纯的病毒液经负染后电镜观察：病毒粒子大小为８０￣１６０ｎｍ,有囊膜,表面具纤突,呈典型冠状病毒形态。病毒对热和氯仿敏感,耐酸,能抵抗１％胰酶,无直接血凝性,但经卵磷脂酶Ｃ处理后能凝结鸡红细胞。经单抗介导的ＥＬＩＳＡ检测,Ｔ９５株与ＩＢＶ有密切的血清学关系。     

鸡新城疫病毒强毒株的分离及生物学特性鉴定

用SPF鸡胚及鸡胚成纤维细胞，从病死鸡的脑组织中分离到一株病毒。此病毒能凝集鸡的红细胞，而且这种凝集可以被特异性抗血清所抑制。通过对分离株进行回归实验，MDT、ICPI、IVPI及其他生物学特性实验、空斑实验、中和试验、电镜观察等，证实该分离株为新城疫病毒强毒株。     

甘草酸二钾抗鸡传染性法氏囊病毒机制初步研究

建立体外CEF培养模型,分为空白细胞对照组、甘草酸二钾（DG）组（药物组）、IBDV组（阴性对照组）和利巴韦林组（阳性药物对照组）,利用间接免疫荧光技术和荧光定量PCR技术以及蛋白质免疫印迹技术检测DG对IBDV VP1基因和蛋白表达的影响.结果表明,在IBDV复制过程的分子机制中,DG对IBDV VP1基因、蛋白表达有显的抑制作用,是DG发挥抗IBDV功效的主要机制之一.     

IBDV不同分离株VP2高变区的基因序列分析

对9个IBDV(传染性法氏囊病毒)分离株的、VP2高变区进行RT-PCR扩增、测序，得到约560bp长的片段分析比较9个IBDV分离株与参考毒株的VP2高变区（Aeel-Spell)的氨基酸序列，并构建进化树、结果表明，9个IBDV分离株是超强毒株，并且得出亚洲目前流行的、rvIBDVs与欧洲国家的vvIBDVs的进化关系很近。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒分离及鉴定

青岛地区暴发主要以侵害鸡肾脏的疾病,引起肾脏肿大、苍白,肾小管和输尿管有白色尿酸盐沉积,伴有下痢。产蛋鸡产蛋下降,雏鸡的死亡率达25%-90%。从感染鸡分离到1株疑为鸡肾型传染性支气管炎病毒,接种鸡胚,鸡胚出现侏儒化、蜷曲等特征性病变,暂定名为NIBV-AH111