急性犬瘟热感染组织脏器的研究

临床中犬瘟热多分为急性和亚急性,3月龄犬多发本病,急性病例和亚急性病例的临床症状和病毒复制的脏器与慢性病例有很大区别。临床上急性病例的病变主要集中在肺脏和淋巴组织,组织病理学可观察到淋巴结炎和多核巨细胞性肺炎。根据免疫组织化学染色结果发现,在犬瘟热急性病例的淋巴结皮质中犬瘟热抗原呈强阳性,且密度很高。而病犬虽然表现出严重的肺炎症状,但在犬的肺脏中犬瘟热病毒抗原阳性反应弱,仅在支气管上皮和少量的巨噬细胞胞浆中观察到。犬瘟热病毒首先在犬的淋巴组织中进行复制、增殖,破坏被膜下淋巴窦和淋巴小节中的T淋巴细胞和B淋巴细胞,影响淋巴组织输出到外周血液循环中的淋巴细胞数量。本研究结果表明,犬瘟热虽然临床上以肺脏病变最严重,但在急性和亚急性病例,犬瘟热病毒主要在淋巴组织的T淋巴细胞、B淋巴细胞和巨噬细胞中增殖,故应以淋巴组织作为犬瘟热病毒的主要分离脏器。     

鸡结核的病理形态学和抗原定位的观察

本文报道了９８只海塞克商品蛋鸡，经禽结核菌素变态反应试验，细菌染片检查、分离培养、生化鉴定、诊断为禽型结核。对这９８只鸡全部进行了尸体剖检，取１８只做了组织学观察，证明鸡结核病灶出现最多的器官是肝（９２％）、脾（７３％）、肠（７３％）；鸡结核病很少形成钙化灶。     

犬瘟热病毒N蛋白的B细胞抗原表位预测

将1段犬瘟热病毒N蛋白氨基酸序列（GenBank编号为：AEV77096．1）与GenBank登录的其他氨基酸序列进行比对,分析其同源性;通过DNAStar生物信息学分析软件中的Protean模块及The PredictProteinserver在线蛋白分析工具预测犬瘟热病毒N蛋白的理化性质、二级结构、亲水性、表面可及性、柔韧性、抗原指数、跨膜螺旋、蛋白相互作用位点、蛋白功能位点等特性,并预测其B细胞优势抗原表位。结果显示,犬瘟热病毒N蛋白具有规则的二级结构、亲水性、柔韧性片段多,多处于表面可及性大,抗原指数高,蛋白质相互作用位点区域。潜在的B细胞优势抗原表位为12～18、61～66、243～246、410～415、421～429、434～447、452～456、480～487氨基酸序列。结果表明,本试验预测了犬瘟热病毒N蛋白的B细胞优势抗原表位,为进一步设计犬瘟热病毒的诊断抗原多肽、免疫用抗原多肽和研发血清学检测试剂盒奠定了理论基础。     

犬瘟热病毒N蛋白的B细胞抗原表位预测

将1段犬瘟热病毒N蛋白氨基酸序列(GenBank编号为:AEV77096.1)与Gen Bank登录的其他氨基酸序列进行比对,分析其同源性;通过DNAStar生物信息学分析软件中的Protean模块及The PredictProtein server在线蛋白分析工具预测犬瘟热病毒N蛋白的理化性质、二级结构、亲水性、表面可及性、柔韧性、抗原指数、跨膜螺旋、蛋白相互作用位点、蛋白功能位点等特性,并预测其B细胞优势抗原表位。结果显示,犬瘟热病毒N蛋白具有规则的二级结构、亲水性、柔韧性片段多,多处于表面可及性大,抗原指数高,蛋白质相互作用位点区域。潜在的B细胞优势抗原表位为12¹8、6118、61⁶6、24366、243²46、410246、410⁴15、421415、421⁴29、434429、434⁴47、452447、452⁴56、480456、480⁴87氨基酸序列。结果表明,本试验预测了犬瘟热病毒N蛋白的B细胞优势抗原表位,为进一步设计犬瘟热病毒的诊断抗原多肽、免疫用抗原多肽和研发血清学检测试剂盒奠定了理论基础。     

人工感染弓形虫兔主要脏器病理形态学观察

将人工感染弓形虫兔于濒死期(3～46d不等)扑杀,取其心、肝、脾、肺和肾五种脏器组织,作了病理形态学观察。主要结果如下:肝、心、脾组织中有周边无炎性反应的凝固性坏死;肝组织中还有网状细胞增生形成的结节;肺脏表现为肺泡隔炎等,这些特征性病变与其他动物弓形虫病变基本相同。同时观察到在肝窦状隙、小叶间动、静脉、肺泡壁毛细血管、肺支气管动脉、心肌纤维间毛细血管和脾静脉窦内均有血栓形成,同时伴?坏死性血栓性血管炎;各脏器的动脉管壁呈现不同程度的玻璃样变,以及由血栓形成所致其周围组织的病变。另外,应用PAS、PTAH、Weigert-Gram等染色方法显示组织切片中的弓形虫,比H.E染色更易于观察。     

急性犬瘟热感染组织脏器的研究

摘要根据免疫组织化学染色结果发现在犬瘟热急性病例的淋巴结皮质犬瘟热抗原呈强阳性,且密度很高。而在犬的肺脏虽然表现出严重的肺炎症状,但是犬瘟热病毒抗原阳性反应弱,仅在支气管上皮和少量的巨噬细胞胞浆中观察到．     

鸭病毒性肝炎的病理形态学观察

通过对鸭病毒性肝炎自然病例的病理学研究,表明病鸭死亡后多呈角弓反张姿势。剖检以肝肿大、土黄色并有出血斑点为主要特征,且胆囊扩张,脾脏多呈灰白色;主要组织学病变为肝呈变质性肝炎,表现为肝弥漫性空泡变性,局灶性坏死和出血。脑水肿,包括脑小血管周围水肿,神经细胞水肿。脾脏发生坏死性脾炎。胰腺、心肌、骨骼肌等组织间质水肿及实质细胞水泡变性。胸腺、胰腺、法氏囊均有坏死灶。结果表明,鸭病毒性肝炎是雏鸭的一种急性败血症。     

犬瘟热病毒V蛋白的表达、鉴定及亚细胞定位

为研究犬瘟热病毒（canine distemper virus,CDV） V蛋白的功能,将CDV V基因片段与pGEX-6P-1载体连接,构建pGEX-6P-1-CDV-V重组表达质粒,通过原核表达系统表达了V蛋白,并将纯化的V蛋白免疫BALB/c小鼠,制备阳性血清。同时,将CDV V基因片段与pcDNA3.1载体连接,构建pcDNA3.1-CDV-V重组表达质粒,经转染Vero细胞后,用激光共聚焦技术确定V蛋白在真核细胞中的分布及亚细胞定位。结果显示,成功表达了V蛋白,并制备了阳性血清。重组质粒pcDNA3.1-CDV-V在外源真核细胞Vero中获得了表达,表达蛋白主要聚集于细胞质。本试验结果为进行CDV V蛋白的功能研究奠定了基础。     

狐源犬瘟热病毒F蛋白B细胞抗原表位基因的克隆表达

为了研究犬瘟热病毒的抗原表位区段,试验以犬瘟热病毒基因组序列为材料,根据预测的F蛋白N端含有抗原指数较高的区域,选择可能含有潜在的B淋巴细胞优势抗原表位的片段,将其连接到原核表达载体pGEX-6p-1上进行B淋巴细胞抗原表位基因的克隆表达。结果表明:该区段能够在原核载体上高效表达。     

J亚群白血病病理学观察及抗原定位

通过病理组织学和免疫组织化学技 术对1日龄感染鸡定期进行病理组织学观察 及gp85病毒糖蛋白检测,确定病理变化和J 亚群白血病的组织学嗜性及二者的关系。结 果在3周龄时出现第1只发病鸡,以后所有 鸡发病且病变随着日龄的增加而加重,主要 在骨髓、肝脏、脾脏、肾脏、卵巢、心肌等组织 中出现瘤细胞增生,并有炎性反应;免疫组在 3周龄时,肝脏、心脏、肺脏、小肠、肾脏、卵巢、 骨骼肌开始出现阳性反应,抗原主要在胞浆 中出现,呈深蓝色颗粒。在10周龄～14周龄 时,骨髓呈中度的阳性反应,而其它组织的阳 性信号出现的程度未见大的变化;在23周龄 时,肝内肿瘤呈较强阳性反应,信号主要集中 在细胞核;整个实验过程中,法氏囊、脑始终 呈阴性反应。研究发现,骨髓及肿瘤的抗原 性较强,并且肿瘤的抗原性要强于骨髓;另外 还发现,在阳性反应强的组织中,病变较明 显,肿瘤细胞增生明显,即阳性反应的组织器 官易形成肿瘤转移灶。     

荧光抗体技术诊断犬瘟热的研究

本研究建立了用于检测犬瘟热病毒的间接荧光抗体染色法。试验确定了1:80稀释的抗犬瘟热单克隆抗体和1:32倍稀释的荧光素标记羊抗鼠IgG为适宜的工作浓度。采用该方法检测21只犬瘟热自然感染犬的血液样品，CDV检出率为76％。对3只犬细小病毒自然感染犬，6只健康犬进行检测，各有一例为CDV抗原阳性。此外，用该方法检测了此21只犬瘟热病犬的眼分泌物、鼻汁、粪便和血涂片，其检出率分别为21％、14％、15％和76％。该方法与临床诊断的符合率为77％。另外，对稀释荧光素标记抗体冷冻保存，测定其保存期至少为7个月，染色后荧光稳定性为2周。该方法是一种简便、快速、特异的检测犬瘟热的方法，适于推广使用。     

实验性急性猪丹毒抗原定位和病理学研究

用猪丹毒强毒株人工接种试验猪,采取其心、肺、肾、肝等器官制成样品,光镜和电镜观察结果,靶器官为心、肾、脑、脾、淋巴结,猪丹毒杆菌定位在器官的微血管。     

新城疫血凝抑制浓缩抗原的研制与应用

采用甲醛对新城疫LaSota株病毒进行灭活,利用蔗糖透析法进行浓缩,抗原效价由浓缩前的log26上升至浓缩后的log210,在浓缩液中加入25％的丙三醇制成了新城疫血凝抑制抗原.同时对加入稳定剂——丙三醇的自制抗原进行了定质研究.结果表明：加丙三醇自制抗原,温度越低时稳定性越好、保存期最长.将自制抗原、标准抗原与标准血清、待检血清进行血凝抑制试验对比,表明自制抗原准确性、重复性较好,可用于临床监测.     

Expression,Identification and Subcellular Localization of V Protein of Canine Distemper Virus

In order to study the function of canine distemper virus (CDV) V protein,V gene fragment was inserted into the pGEX-6p-1 vector,and then pGEX-6p-1-CDV-V recombinant expression plasmid was obtained.Purified V protein immunized BALB/c mice to prepare the positive serum.Meanwhile,to confirm the distribution of V protein and subcellular localization with confocal laser technology,a eukaryotic expression recombinant plasmid pcDNA3.1-CDV-V was built,then transfected into Vero cells.The results showed that V protein was successfully expressed and the positive serum was prepared.The recombinant plasmid pcDNA3.1-CDV-V was expressed in Vero cells and mainly expressed in cytoplasm.The results laid a function for functional studies of CDV V protein.     

藏獒和松狮犬犬瘟热的病理学观察

对藏獒和松狮犬的犬瘟热自然感染病例进行了临床观察、尸体剖检以及病理组织学检查.结果显示,病毒主要侵害犬的呼吸、消化、神经、心血管和免疫系统.肺脏呈严重的间质性肺炎和支气管肺炎的变化,肺泡壁结构消失,肺泡腔内有大量巨噬细胞;胃、肠黏膜充血、水肿,上皮细胞坏死、脱落;脑膜和实质充血、水肿,可见微血栓形成;心脏明显扩张,右心肥大,心室腔内有鸡脂样凝血块;免疫器官受损严重,脾脏和淋巴结均呈明显退行性病变.在胃腺上皮细胞、肝细胞、肺泡上皮细胞和细支气管上皮细胞内发现嗜酸性的核内或胞浆包涵体.     

兰州地区犬瘟热流行病学调查及其治疗

为了解兰州地区犬瘟热发病率、死亡率与犬年龄、品种、免疫接种、季节之间的关系,并总结出一套治疗犬瘟热最有效的方法,收集108例临床犬瘟热病例,从流行病学、临床鉴别诊断、病理剖检、治疗等方面进行深入、全面的研究。结果表明,犬瘟热发病率及死亡率与犬的年龄、品种、免疫接种、季节有很大的关系;通过应用被动免疫（犬瘟热血清、犬瘟热单克隆抗体）联合主动免疫（弱毒疫苗）的治疗方法取得了良好的治疗效果。     

貉犬瘟热的诊断与防治

犬瘟热是由犬瘟热病毒(Canina Distemper virus，CDV)引起的犬科、鼬科及部分浣熊科动物的急性、热性、高度接触性传染病。临床症状早期表现双相体温热型，症状类似感冒，随后以支气管炎、卡他性肺炎、胃肠炎为特征。病后期可见痉挛、抽搐等神经症状。部分病例可出现鼻部和角垫高度角化，即硬脚垫病。本病广泛存在于世界各地毛皮