牛乳中细菌的检查

【目的】采用三种细菌学检查方法对牛乳中细菌进行卫生检查，比较得出最佳检测方法。【方法】采用显微镜计数法、美蓝还原酶实验法、标准平板计数法进行测定，确定不同来源的生牛乳的等级、巴氏消毒牛乳的卫生标准。【结果】微生物显微镜直接计数法随机性大，对菌体数量不能做出较为宏观，全面的反应．优点是计数快速：美蓝还原酶实验法是用于测定牛乳质量的一种定性检测法，操作简便，不需特别设备．它不能做为定量检查：平板菌落计数法速度慢，需要平板上长出菌落一段时后才能计数。【结论】由于平板菌落计数法通常问做梯度稀释，所以计数的线性范围大．由于是菌悬液涂布，所以比较均匀，能较好的反应菌落的疏密程度．重复性，平行性很好，是经典的计数方法。     

马铃薯晚疫病菌对甲霜灵的抗性及与霜脲氰和霜霉威交互抗药性的研究

【目的】测定中国马铃薯主产区晚疫病菌对甲霜灵药剂的抗性及频率,并测定霜脲氰和霜霉威与甲霜灵的是否存在交互抗药性;【方法】通过菌落直径法检测马铃薯晚疫病菌对甲霜灵的抗性,通过比较药剂的毒力确定霜脲氰和霜霉威与甲霜灵是否存在交互抗药性;【结果】在测定的4个马铃薯主产省中,除云南省以外,四川、河北和黑龙江等3省均存在马铃薯晚疫病菌对甲霜灵的抗性菌株,其抗性频率分别为16.7%,24.0%和100%。毒力测定表明霜脲氰对甲霜灵抗性菌株和敏感菌株毒力都很强,而霜霉威对这两种菌株的毒力都很差,这说明甲霜灵与霜脲氰和霜霉威不存在交互抗药性;【结论】在中国普遍存在对甲霜灵产生抗性马铃薯晚疫病菌菌株,霜脲氰与甲霜灵不存在交互抗药性且毒力强,可作为甲霜灵的替代药剂防治晚疫病。     

土壤中细菌菌落总数的测定条件优化

菌落计数法是土壤中可培养微生物总数测定的常用方法,但其重复性差。本文研究了试验过程中培养时间、接种方式、样品颗粒大小、玻璃珠数量及培养基种类等因素对菌落计数结果的影响。结果表明:培养时间到第4天后数量逐渐稳定;涂布法接种方式培养得到的菌落总数较高,是混菌法接种的3.11倍;土壤颗粒大小为50目时测定得到的菌落总数最多;用40颗玻璃珠制备土壤浸提液时可培养得到最大菌落总数;采用SOC培养基进行培养获得菌落总数为1.07×10 ⁷ CFU/g,分别是LB培养基、TB培养基和异氧细菌培养基的1.28、2.32、1.63倍。     

烟草感染青枯菌前后POD及同工酶的变化

【研究目的】对烟草感染青枯菌前后的根、茎、叶内过氧化物酶（POD）及同工酶进行比较研究,为抗病育种提供理论基础。【方法】采用比色法测POD酶活,用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）进行POD同工酶的比较。【结果】对烟草感染青枯菌前后,酶活性测定结果表明,烟草叶部POD活性显著高于根部和茎部。烟草接菌后,根、茎、叶内的POD活性均在第3天升至最高,而叶内比对照增高了29.67%。同工酶电泳分析表明,烟草接菌后的同工酶谱带,在条带的数目、种类和各条的相对活性上表现出差异。【结论】POD作为植物的保护酶类,随植物抵抗疾病的过程变化而变化,故与植物抗病性密切相关     

不同比例的嗜热链球菌与保加利亚乳杆菌对酸奶品质的影响

由于嗜热链球菌与保加利亚乳杆菌在发酵过程中的作用机理不同,因此这2个菌种的比例对酸乳的发酵会有较大的影响,可以导致酸乳发酵风味、货架期等不同程度的改变。对酸奶发酵过程中嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌的比例及其发酵结果进行了研究,利用平板菌落计数法计数,测定滴定酸度,找出发酵规律,从而得出嗜热链球菌与保加利亚乳杆菌的比例关系为3∶2时,酸奶的风味较理想、货架期较长,是这2个菌种最理想的比例。     

多种杀菌剂可有效防治芒果细菌性角斑病

正细菌性角斑病是芒果生产上的重要病害,为筛选有效的防治药剂,科研究人员采用浑浊度法对22种杀菌剂进行室内抑菌活性初筛,对抑菌活性较好的药剂采用平板菌落计数法进行了室内毒力及田间药效试验。     

苦荬菜种子携带真菌与种子活力关系分析

摘要：【目的】明确苦荬菜种子携带真菌种类,探讨携带真菌与种子活力的相关性。【方法】采用洗涤检测法和PDA平板法对来源不同的3批苦荬菜种子贮藏前后携带真菌的种类和数量进行检测,同时对种子活力进行测定。【结果】来源不同的供试苦荬菜种子外部带菌和内部带菌量和种类差异显著。供试苦荬菜种子外部携带携带主要菌群为曲霉属（Aspergillus sp.）、青霉属（Penicillium sp.）、镰刀菌属（Fusarium sp. ）、枝孢属（Cladosporium sp.）;内部寄藏真菌的主要种类有曲霉属（Aspergillus sp.）、青霉属（Penicillium sp.）、镰刀菌属（Fusarium sp. ）、侧茁霉属（Pullularia sp.）。种子贮藏12个月后其带菌量均低于贮藏前,3批种子带菌量之间没有差异显著性,活力却有明显的差异（P〈0.05〉;【结论】种子携带真菌与种子活力的相关性分析表明,种子所携带的真菌是影响苦荬菜种子生活力的重要因素之一。     

棉花黄萎病菌鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白基因VdOAZ的功能分析

【目的】明确棉花黄萎病菌中鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白(OAZ)基因(VdOAZ)的功能。【方法】以大丽轮枝菌野生型菌株V592的基因组DNA和cDNA为模板,对VdOAZ基因全长进行克隆并测序。构建针对VdOAZ基因的敲除载体和互补载体,通过农杆菌介导的遗传转化筛选VdOAZ基因敲除菌株和和互补菌株。以野生型菌株V592为对照,对VdOAZ基因敲除突变体和互补菌株的菌落生长速率、产孢量、微菌核产量及对棉花的致病力进行测定;通过实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应测定致病相关的其他基因在VdOAZ基因敲除突变体中的表达量,及亚精胺诱导条件下,V592菌株中VdOAZ基因及致病相关的其他基因的相对表达量。【结果】从棉花黄萎病菌中克隆到VdOAZ基因的全长为1 006 bp,具有2个开放阅读框(Open reading frame,ORF),ORF2编码的蛋白具有OAZ所特有的ODC-AZ保守结构域。与野生型菌株V592和互补菌株相比,VdOAZ基因敲除突变体的菌落生长速率降低、微菌核产量及产孢量明显减少,对棉花的致病力下降,表明VdOAZ基因与大丽轮枝菌分生孢子和微菌核的产生有关,并参与大丽轮枝菌致病。在VdOAZ基因敲除突变体中,VdPKAC1、VMK1、VdNLP1、VdNLP2和VdSge1基因表达量显著上调;V592菌株经亚精胺诱导培养后,VdOAZ基因的表达量显著上调,而上述5个致病相关基因的表达量均明显下调,表明VdOAZ基因对其表达具有负调控作用。【结论】VdOAZ基因响应多胺水平改变,通过调控VdPKAC1、VMK1、VdNLP1、VdNLP2、VdSge1的表达影响大丽轮枝菌孢子产生、微菌核形成和致病过程。     

油茶优良无性系花粉形态和生活力研究初报

【研究目的】了解油茶优良无性系花粉形态及花粉生活力,探讨花粉生活力的测定方法,并对花粉生活力进行分级。【方法】以新鲜花粉为试验材料,观察花粉形态,采用人工直接授粉法、TTC染色法和过氧化物酶法测定其花粉生活力。花粉生活力分级采用聚类分析和实践经验相结合的方法。【结果】在光学显微镜下油茶花粉颜色呈黄色或淡黄色,形状从平面角度观察呈椭圆形、三裂圆形、圆形等,花粉大小为44.1μm×29.2μm;不同品系的油茶花粉生活力差别很大。【结论】油茶花粉形状绝大部分为椭圆形,花粉大小属于中等。花粉生活力可分为5级,其测定必须结合多种方法,而TTC法是较为理想的快速测定法。     

尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum Schl.）的生长特性

【研究目的】研究尖孢镰刀菌的生长特性，寻找培养过程的异质性指标。【方法】供试菌株为黄瓜尖孢镰刀菌F-H.6.5-030318-J2和花生尖孢镰刀菌F-P.5.0-030710，培养基采用PSA培养基，装液量为100ml/250ml，接菌量从培养7d的平板上打取3个6mm的菌片，培养温度为25±1℃，摇床转速为110r/min，培养10d，观察测定发酵液颜色、OD值、pH值、菌丝干重变化，并利用聚类分析方法划分生长阶段。【结果】在培养过程中，尖孢镰刀菌发酵液的颜色、OD值、pH值和菌丝干重都会随着培养时间而变化。在相同的培养条件下，来源于不同寄主的尖孢镰刀菌菌株之间在颜色和OD值变化存在着显著性差异，而pH值和菌丝干重变化未表现出显著性差异。来自黄瓜和花生的尖孢镰刀菌菌株的生长分为3个阶段：1~2d为适应阶段，3~5d为对数生长阶段，6~10d为稳定阶段。【结论】尖孢镰刀菌在培养过程的色素变异和OD值的变化可作为菌株培养的表征性特征     

一种改进型麦克马斯特虫卵计数板的应用效果研究

为了评价一种改进型麦克马斯特虫卵计数板的性能,利用改进型麦克马斯特虫卵计数板和经典麦克马斯特虫卵计数板对兔粪便样品和球虫卵囊悬液样品进行计数和比较分析。结果显示,用饱和氯化钠溶液作为漂浮液,改进型麦克马斯特虫卵计数板能对卵囊悬液样品和2~5 g固体粪便样品中球虫卵囊进行准确计数,与麦克马斯特虫卵计数板计数结果的符合率为95.59%~99.49%;用自来水作为悬浮液,改进型麦克马斯特虫卵计数板能对卵囊悬液样品和0.3~0.5 g固体粪便样品中球虫卵囊进行准确计数。本研究发现,改进型麦克马斯特虫卵计数板对临床和实验室样品中虫卵能进行准确计数,而且比经典麦克马斯特虫卵计数板具有更强大的检测功能。     

不同浓度的食盐 蒜对泡菜发酵中各种微生物的影响

以白菜为原料发酵制作泡菜,通过稀释涂平板法培养菌落,利用统计计数法得到在盐水(质量浓度分别为18.67g/L,28.00g/L,37.33g/L)、蒜(加蒜量分别为23.33g/L,37.33g/L)发酵过程中的细菌总数、乳酸菌、肠杆菌数量变化,并测定溶液pH值及亚硝酸盐含量等相关指标。结果表明,随着食盐浓度的升高,各种微生物数目均减少;加入蒜试样的微生物数目也减少,适量的蒜对乳酸菌的抑制作用不大,其中加入23.33g/L蒜的泡菜水中乳酸菌含量较多,肠杆菌含量少,亚硝酸盐含量较少,故添加23.33g/L蒜的泡菜适合发酵。     

高产胞外多糖乳酸菌的筛选与初步鉴定

乳酸菌胞外多糖具有良好的功能特性。利用菌落拉丝法,从自然发酵的酸菜和鲜奶中筛选出1株高产胞外多糖的乳酸菌L3,经苯酚—硫酸法进一步鉴定,得出其产胞外多糖能力与菌落拉丝长度成正比。通过生理生化和糖发酵试验,初步鉴定该菌株为植物乳杆菌。     

菌肥微生物在不同pH茶园土壤中存活模式的研究

为了明确微生物肥料施入不同pH土壤对土壤肥力的贡献,以灭菌土接种菌肥微生物,经培养采用平板菌落计数法,探究菌肥移居微生物在土壤中存活性、变化规律及对土壤养分的贡献。结果表明：菌肥微生物在接入灭菌土壤前2周呈快速上升趋势,随后进入一个较长的稳定期;中性土壤各类菌肥微生物丰度为：氨化细菌为最多,达108 cfu/g干土;固N微生物、芽孢细菌、放线菌数量均达到107 cfu/g干土以上,而霉菌最多只达到105 cfu/g干土左右;在pH≈4.5酸性土壤,各类细菌、放线菌数量比中性土壤少2个数量级,但霉菌最大丰度可达107 cfu/g干土;酵母菌数量只有霉菌的1/10左右。菌肥各类微生物的迅速生长和繁殖,通过其分解作用、固氮作用、解P、解K作用等对土壤主要营养元素及活性增加有一定的贡献。     

一种检测荷载pGMCSF-SS质粒的减毒沙门氏菌数的方法学研究

以荷载pGMCSF-SS质粒的减毒沙门氏菌为参考菌,连续培养13h,间隔1h连续采样,用紫外分光光度计检测OD600值,同时用平板计数计算活菌数。根据所测数据,建立细菌对数与细菌浊度之间的直线回归数学模型,即Y=1.5568x 7.0944,R2=0.9543,并对相关关系进行了显著性检测r>r0.01,表明此回归方程可信度很高。为进一步检测该模型的可靠性,在培养时间内随机取样,检测OD600值,比较利用平板计数与回归方程所得细菌对数Y,二者差异不显著(p>0.05)。通过探讨细菌浊度与细菌计数之间的相关性建立的回归方程,可以有效地克服传统计数方法的不足,便于应用。     

牛乳蛋白过敏及其改性研究

介绍了牛乳中主要过敏原酪蛋白、β-乳球蛋白及α-乳白蛋白的结构、性质及其过敏原表位,阐述了牛乳过敏(CMA)的主要发病机理,重点对牛乳蛋白改性的研究现状作了详细介绍,以期对开发无过敏或低过敏的乳制品起到一定指导作用。     

酸乳中乳酸菌计数方法改进和研究

根据GB 4789.35—2010乳酸菌检验的方法对酸乳样品进行计数时,得出的数据容易出现偏差。经过一系列的试验、分析和研究,结果表明,在MRS培养基上由于乳杆菌生长形态不同于其他乳酸菌,可单独对乳杆菌进行计数;而嗜热链球菌和乳杆菌在MC培养基上难以辨别,两者可共同计数;双歧杆菌在TOS培养基的生长状态优于其他培养基,所以TOS培养基可作为双歧杆菌的计数培养基。MC和TOS培养基数据之和,即可得出乳酸菌总数。     

葡甘聚糖等碳源对魔芋软腐病病原菌生长的影响

魔芋软腐病主要由胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜软腐亚种( Erwinia carotovora subsp. carotovora,E.c.c.)和菊欧文氏杆菌( Erwinia chrysanthemi, E.ch.)引起,本研究通过稀释平板计数法,明确了葡萄糖、淀粉、甘油、甘露醇、蔗糖、葡甘聚糖、麦芽糖这7种碳源对魔芋软腐病病菌两个亚种生长的影响。结果表明,这两个亚种都能很好的利用蔗糖,且在清水生长情况与在含魔芋粉、淀粉的培养液中生长情况之间没有显著差异,但在葡萄糖培养液中生长情况还没有清水的好。     

牛羊乳乳酸发酵过程中流变性变化比较

探讨牛羊乳乳酸发酵过程中流变特性。对牛羊乳分别发酵6 h,测定其乳酸发酵0、1、3和6 h的剪切粘度、酸度和蛋白质含量。结果表明：牛乳发酵0、1、3和6 h的剪切粘度和蛋白质含量均高于羊乳,而羊乳发酵酸度均高于牛乳。蛋白质是影响牛、羊乳乳酸发酵乳流变性的重要因素。