慢生花生根瘤菌的数值分类和DNA同源性研究

用数值分析法对５２株分离自四川，广东、江西的慢生花生根瘤菌和１２株参考菌株（５株为分类地位已知的慢生根瘤菌，７株为Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ ｓｐ。）进行了１３１项表型性状的测定，并随机选取了部分菌株同慢生型大豆根瘤菌两个种的标准菌株（ＡＴＣＣ１０３２４＾Ｔ和ＵＳＤＡ７６＾Ｔ）进行了ＤＮＡ同源性测定。数值分类除３个菌株外，其余菌株在８２％相似性水平处聚为６个亚群，表现出了明显的多样性。从６个亚群     

根瘤菌属4个新种群菌体红外光谱研究

记录并研究了来自中国黄土高原的４个根瘤菌新种群的中心菌株和代表菌株的菌体红外光谱，发现它们有羰基型和非羰基型两种光谱类型，二者可以根据有无１７２５ｃｍ＾－１带而区分。     

根瘤菌属4个新种群菌体红外光谱研究

记录并研究了来自中国黄土高原的４个根瘤菌新种群的中心菌株和代表菌株的菌体红外光谱，发现它们有羰基型和非羰基型两种光谱类型，二者可以根据有无１７２５ｃｍ￣（－１）带而区分。     

华癸根瘤菌的系统发育地位

１６ＳｒＲＮＡ序列测定是细菌分类学的基本方法之一，其序列差异是确定细菌属间及属上系统发育关系的主要标准。本文根据国际系统细菌学委员会根瘤菌分委员会的建议，采用聚合酶链的反应扩增了华癸根瘤菌模式菌株１０３的１６ＳｒＲＮＡ基因中约２６０个碱基的一个片段，并对其进行了序列测定。所得序列与其他已知根瘤菌种，属的相应片段进行了比较。结果表明，华癸根瘤菌与豌豆根瘤菌和苜蓿根瘤菌两种及与其他属的碱基差异在６．９     

链霉菌属各类群红外光谱的研究

测定了链霉菌属１３个类群的代表菌种菌体的红外光谱，结果表明，各类群菌体红外光谱具有高度特羿性和重现性，利用已知的标准光谱图与未知的实验光谱作对照比较，可以区分和鉴定出实验菌株的类群。     

华癸根瘤菌的系统发育地位

16S rRNA 序列测定是细菌分类学的基本方法之一,其序列差异是确定细菌属间及属上系统发育关系的主要标准。本文根据国际系统细菌学委员会根瘤菌分委员会的建议,采用聚合酶链反应扩增了华癸根瘤菌(Rhizobium huakuii)模式菌株103的16S rRNA 基因中约260个碱基的一个片段,并对其进行了序列测定。所得序列与其他已知根瘤菌种、属的相应片段进行了比较。结果表明,华癸根瘤菌与豌豆根瘤菌和苜蓿根瘤菌两种及与其他属的碱基差异在6.9%～14.1%(17～35个碱基),相当于根瘤菌科内已知属间的差异。结合表型特征,我们认为该种可能代表了根瘤科的一个新属。     

三个根瘤菌新群的DNA—DNA杂交分析

从数值分类获得苜蓿、草木樨和锦鸡儿根瘤菌的３个新群。本实验对这３个新群内菌株及部分已知种参比菌株进行了ＤＮＡ－ＤＮＡ杂交分析和Ｇ＋Ｃｍｏｌ％测定。结果表明：三群中心菌株ＸＪ９６０６０，ＸＪ９６４０８，ＮＭ０１９与其相应群内菌株的ＤＮＡ同源性分别为７１．７％￣９７．６％，８０．８％￣９８．７％，８２．７％￣８６．９％，均大于７０％；各群的△Ｔｍ值分别为３．２℃，２．８℃，２．６℃，均小于５℃；与各已     

利用付里叶转换—红外光谱（FT—IR）鉴别大豆根瘤菌初探

利用付里叶转换－红外分光光度计制作了标准大豆根瘤菌菌株２２－１０，２７－５０，ＵＳ－ＤＡ１１０及１５００６的ＦＴ－ＩＲ图谱。结果表明，所得图谱分辨率高、重复性好，并且不同菌株的图谱在指纹区（波数８００￣１０００）有明显差别，这说明各菌株的ＦＴ－ＩＲ图谱是高度特异的，这种特异性可用于菌株鉴别。     

三叶草、猪屎豆和含羞草植物根瘤菌16S rDNA PCR-RFLP分析和数值分类研究

采用 16SrDNAPCR -RFLP分析和表型数值分类 ,对分离自三叶草 (Trifolium)、猪屎豆 (Crotalaria)和含羞草(Mimosa) 3属植物的根瘤菌进行了分类研究。 16SrDNAPCR -RFLP分析表明 ,在 80 %的相似性水平上 ,6 7株待测菌株和 18株参比菌株归属到慢生根瘤菌属 (Bradyrhizobium)、中慢生根瘤菌属 (Mesorhizobium)、土壤杆菌属 (Agrobac terium)和根瘤菌属 (Rhizobium)与中华根瘤菌属 (Sinorhizobium) 4个系统发育分支。进一步对其中 5 6株待测菌株和14株参比菌株进行表型性状数值分类研究 ,在 84 %的相似性水平上 ,得到 6个独立的类群 :群Ⅰ、Ⅳ和Ⅵ为新群 ,没有与参比菌株聚在一起 ;群Ⅱ包含慢生大豆根瘤菌 (Bradyrhizobiumjaponicum) ;群Ⅲ含根瘤菌属 (Rhizobium) 2个已知的代表菌株 ;群Ⅴ含土壤杆菌属 (Agrobacterium) 2个已知种的代表菌株。以上结果表明 ,分离自这 3属植物的根瘤菌菌株具有表型和遗传型多样性 ,同时新发现分离自三叶草的根瘤菌的慢生和中慢生菌株 ;分离自含羞草的根瘤菌的慢生菌株和分离自猪屎豆的根瘤菌的快生菌株 ,此项研究也进一步证实这两种研究方法在菌株归群上的一致性     

几类快生型根瘤菌质粒的研究

作者基本上按Hirsch等(1980)的方法,对国内的快生型紫云英根瘤菌SR72、S52,豌豆根瘤菌252、R30,三叶草根瘤菌62,大豆根瘤菌2048,2059以及根癌农杆菌702,共计42号菌株,进行了质粒分离,重复3次以上。用快生型大豆根瘤菌205菌株(已知其3个质粒的分子最分别为200、112、57Md)和根癌农杆菌C58菌株(已     

新疆豆科植物根瘤菌资源调查、分类与应用

 从1980-1985年对新疆全境进行根瘤菌资源调查、采集与分类研究。共采集根瘤标本220份，包括37属，120种豆科植物，其中50个种是新发现其结瘤情况的；分离出100多株抗逆性强的，与多种重要豆科植物共生固氮的根瘤菌，经数值分类，新疆的快生型根瘤菌分别属于已知属Rhizobium的各个种，不过其离散性较大；而新疆慢生型根瘤菌的很多特性完全不同于已知慢生根瘤菌属Bradyrhizobium，用多种方法聚类，确定为一新的分类单元，拟建议为Rhizobium中的一个新种。筛选出的大豆、苜蓿根瘤菌在新疆地区接种，大豆增产10%以上，苜蓿增产20%。     

中国北方地区甘草根瘤菌表型及遗传多样性研究

【目的】了解中国北方地区甘草根瘤菌的生物多样性。【方法】采用表型数值分类、16S rDNA PCR-RFLP分析和BOX-PCR指纹图谱分析的方法对北方地区的甘草根瘤菌进行表型、遗传多样性分析。【结果】供试菌株在数值分类聚类分析中约85％的相似水平上产生2个表观群，有11株菌未与已知参比菌株聚群。16S rDNA PCR-RFLP分析表明，供试的20株菌共产生14种遗传型，表现出丰富的遗传多样性。BOX-PCR指纹图谱分析进一步证明与甘草共生的根瘤菌的基因组也具有多样性。【结论】在中国北方地区与甘草共生的根瘤菌在Sinorhizobium、Rhizobium和Mesorhizobium属中均有分布。     

洪湖市土壤中快生型大豆根瘤菌的多样性

从湖北省洪湖市土壤中分离纯化了９２株快生型大豆根瘤菌。用来自８个取样地点的１２个快生型典型菌株和１个慢生型菌株的抗血清检测了该快生型大豆根瘤菌群体的抗原构成。其中６５株菌归入１５个血清型，２０．７％属于ＵＳＤＡ２０５型，１５．２％为Ａｄ３０１（１）型。有２７株不与已知抗血清反应，为未知的血清型。对供试菌株质粒进行的快速检测结果表明，各菌株均含有２～６个质粒，其中最大的质粒在５００Ｍｄ左右。含４个质     

非豆科作物和固氮微生物在协助菌影响下形成类根瘤

用果胶细菌处理禾本科，十字花科和葫芦科植物幼苗根系，根毛随着果胶细菌处理的时间而逐渐损伤，消除，然后，分别接种田菁根瘤菌，花生根瘤菌，扁豆根瘤菌，自生固氮菌和固氮螺菌；幼苗移栽２０－２５ｄ左右，根素即被感染而结瘤。白菜结瘤率可达９５％；黄瓜率为５０％左右。根瘤的石蜡包埋切片在光学显微镜下，可以明显地见到从根瘤的外皮层细胞至靠近中柱细胞，均有细菌分布。菌株ＯＲＳ５７１和１４７－３在白菜上形成的根瘤用     

费氏中华根瘤菌菌株HH103研究概述

大豆既可以与快生型根瘤菌又可以与慢生型根瘤菌共生固氮。在以往的研究中,已有很多从不同地区的大豆根部分离出来的快生型根瘤菌,这些快生型根瘤菌大多数属于费氏中华根瘤菌属。模式菌株费氏中华根瘤菌菌株HH103现被用于基因序列的研究。该研究从根瘤和根瘤菌的分类依据和主要类型入手,介绍了HH103的主要研究现状,并且讨论其研究方向。     

肠型点状产气单胞菌和鱼害粘球菌原生质体融合的耐药性遗传标记的选择

为了对肠型点状产气单胞菌58－20－9菌株和鱼害粘球菌G4菌株的融合子进行选择鉴定，应用定性和定量药物敏感性试验，对两种蓖原生质体融合的遗传标记进行了筛选，结果表明，这两种细菌对红霉素和庆大霉素交叉耐药，在此基础上，测定了红霉素和庆大霉素在选择培养基中的适用浓度，筛选出肠型点状气单胞菌58－20－9菌株的遗传标记为Em^r（红霉素抗性），鱼害粘球菌G4菌株的遗传标记Gm^r（庆大霉素抗性）。     

高固氮基因工程大豆根瘤菌的研制及其增氮效应

通过构建快生型大豆根瘤菌Ｂ５２的基因文库和三亲本杂交，将增效因子ＤＮＡ片段导入优良的慢生型大豆根瘤菌２２－１０中，获得携带来自快生菌增效因子ＤＮＡ片段的工程菌株ＨＮ３２，经盆栽和小区试验，证明基因工程菌株ＨＮ３２比出发菌株２２－１０平均增产６％，比对照平均增产１３．２％￣１６．９％，相当于每公顷施７５￣１５０ｋｇ尿素。１９９２￣１９９５年，在广西推广应用基因工程大豆根瘤菌ＨＮ３２２．１６万ｈｍ＾２     

三个根瘤菌新群的DNA-DNA杂交分析

从数值分类获得苜蓿、草木樨和锦鸡儿根瘤菌的 3个新群。本实验对这 3个新群内菌株及部分已知种参比菌株进行了 DNA- DNA杂交分析和 G Cmol%测定。结果表明 :三群中心菌株 XJ96 0 6 0 ,XJ96 4 0 8,NM0 19与其相应群内菌株的 DNA同源性分别为 71.7%～ 97.6 % ,80 .8%～ 98.7% ,82 .7%～ 86 .9% ,均大于 70 % ;各群的 ΔTm 值分别为 3.2℃ ,2 .8℃ ,2 .6℃ ,均小于 5℃ ;与各已知种的 DNA同源性分别为 0～4 1.7% ,0～ 39.3% ,4 .0 %～ 4 4 .7% ,均低于 70 % ;确证这 3个新群为 3个不同于已知种的、独立 DNA同源群 .此 3群的 G Cmol%分别为 6 0 .3%～ 6 2 .9% ,59.7%～ 6 2 .4 % ,6 0 .2 %～ 6 2 .6 % ,属于快生型根瘤菌     

A DNA Hybridization Taxonomic Study of Enterococi from the Intestine of Silkworm

对健康桑蚕幼虫消化道内的部分分离细菌的ＤＮＡ碱基组成测定和ＤＮＡ－ＤＮＡ染色体杂交研究表明：这些分离细菌属于肠球菌属，并证实在健康桑蚕幼虫消化道内Ｅ．ｆａｅｃａｌｉｓ和Ｅ．ｃａｓ－ｓｅｌｉｆｌａｖｕｓ以及非乳糖发酵型Ｅ．ｆａｅｃａｌｉｓ菌菌株的存在     

导入外源DNA片段的花生根瘤菌高效基因工程菌株的构建

以柯斯质粒ｐＬＡＦＲ１为载体先构建快生型花生根瘤菌８５－７菌株总ＤＮＡ的基因文库。在协助质粒ｐＲＫ２０１３帮助下用此基因文库分别同菌株８５－７和另一株慢生型花生根瘤菌菌株Ｃ０２－５作三亲本杂交。转移接合子接种沙培条件下生长的花生，通过结瘤试验初筛选和复筛选，共筛选出３株工程菌ＨＮ１１，ＨＮ１２（以８５－７为受体）和ＨＮ１３（以Ｃ０２－５为受体）。其每植株根瘤的固氮酶活分别比出发菌株的提高３０２％（