桃离体组织分化再生植株的研究

  以奉化‘玉露’桃叶片、幼茎、下胚轴、子房、胚珠、胚乳及花后45～50 d 和75 d 的未成熟胚、完全成熟的种胚为外植体, 进行离体培养再分化试验。结果表明只有花后45～50 d 和75 d 的未成熟胚产生白色致密节球状的愈伤组织, 并可诱导出不定芽, 不定芽分化率分别为73. 8 %和15. 5 %; 62BA 诱导愈伤组织不定芽的效果优于KT。不定梢转移生根成苗获得了完整的再生植株。探讨了不同激素和碳源等对不定芽诱导的影响。     

龙芽楤木体细胞胚状体发生及成苗的调控研究

利用龙芽楤木叶片、叶柄、嫩茎及根为试材,研究了2,4-D、6-BA、NAA、糖种类对胚性愈伤组织及胚状体的诱导、芽分化和成苗的影响。以2,4-D1.0 mg/L,确定诱导胚性愈伤组织及胚状体的最适外植体为嫩茎,诱导的胚性愈伤组织及胚状体质量、数量均高于叶片、叶柄和根;经直观分析、方差分析和多重比较,结合对比试验,结果表明:6-BA是龙芽楤木芽分化及成苗的主要因素。以蔗糖30 g/L作碳源,芽分化最适培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.02 mg/L;成苗最适培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.04 mg/L,芽分化率和成苗率达88.02%和79.62%。     

宁夏三个葡萄品种高效再生体系的建立

以宁夏葡萄产业中大量种植的3个葡萄品种为试材建立再生体系.采用花药、茎尖进行愈伤组织诱导,比较了3种葡萄用花药、茎尖培养诱导愈伤组织形成、分化、生根的必须培养条件,获得不定芽分化再生植株.结果表明:葡萄花药愈伤组织形成胚性愈伤组织的能力很低,几乎不能分化成苗;而茎尖愈伤组织形成胚性愈伤组织的能力很高,分化成苗率极高,达100％.B5培养基诱导宁夏葡萄茎尖愈伤组织和分化丛生效果最好;KT有利于愈伤组织分化;茎尖浓度以0.8～1.0 cm最好.     

法兰地草莓花药培养技术研究

以法兰地草莓为试材,研究了不同6-BA浓度、不同碳源、不同基本培养基对法兰地草莓花药愈伤组织诱导的影响,不同组合的细胞分裂素对愈伤组织诱导分化的影响.结果表明:6-BA浓度1 mg/L、麦芽糖作碳源、MS为基本培养基最适合法兰地草莓愈伤组织诱导.细胞分裂素以6-BA 2 mg/L+ZT 2mg/L组合最适合诱导不定芽分化.试验中观察到:法兰地草莓花药直接接种于MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.2 mg/L+麦芽糖30 g/L的培养基上,70 d后可直接诱导出不定芽,其分化率高达11%.     

菊苣子叶离体培养与植株再生的研究

以菊苣无菌苗的子叶为外植体,研究其在附加不同浓度NAA和6-BA的培养基上的分化情况.结果表明:在不同培养基上,菊苣子叶均能诱导出淡黄色的愈伤组织和分化形成不定芽,但不同基因型菊苣的出愈率和不定芽诱导存在明显差别.诱导Rossa di Verona tardiva selez prelude和Rossa di treviso菊苣愈伤组织形成和芽分化的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L;而诱导In miscuglio菊苣愈伤组织和芽分化的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 3 mg/L.     

圆叶椒草的组织培养与植株再生研究

以圆叶椒草茎段为试材,采用植物组织培养方法,研究了6-BA、NAA、IBA对圆叶椒草的愈伤组织诱导、不定芽分化以及试管苗生根培养的影响,以期筛选出愈伤组织和芽分化以及生根诱导的最佳培养基.结果表明:愈伤组织诱导、愈伤组织和不定芽分化最理想的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L;试管苗生根培养最佳培养基为1/2MS+NAA 0.5mg/L+0.5％活性炭.     

早熟桃幼胚愈伤组织再生植株技术研究

自然授粉的早熟桃新端阳(Amsden june)幼胚愈伤组织再生植株子叶产生的圆球状愈伤组织可以分化不定梢。不定梢分化的适宜培养基为1/2MS大附加BA1.0mg/1和蔗糖3％,同时观察到胚状体的存在。愈伤组织继代培养6代以后,仍保持其分化能力。不定梢生根成功,生根率达83.3％。     

桂花子叶切块培养再生苗的研究

以桂花品种大花金桂(Osmanthus fragrans‘Dahuajingui’)的子叶切块为外植体,研究了不同激素水平对桂花子叶切块愈伤组织诱导、芽分化和试管苗生根的影响。结果表明:诱导出的愈伤组织在分化培养基(1/2MS+0.5mg/L TDZ+0.1mg/L NAA)上继代培养9次后分化不定芽,不定芽分化率为22.86%,平均再生苗数为3.22,继代培养10次后,不定芽分化率高达36%。进行生根试验,确定桂花最佳生根培养基为1/2MS+0.5mg/L IBA+2.0mg/L NAA,生根率达到70%。     

影响油桃叶片产生胚性愈伤组织的因素

以早熟油桃华光和曙光为试材,对影响早熟油桃叶片产生胚性愈伤的基本培养基、外源激素、碳源、环境(光照强度,温度,暗培养时间)等因素进行研究,结果表明:碳源对两种油桃叶片胚性愈伤的诱导影响不显著,其他影响因子对油桃叶片胚性愈伤的诱导均显著。其中华光和曙光在暗培养21d时,产生的有效愈伤较其他处理有极显著差异,有利于有效愈伤的产生;外源激素对诱导桃叶片产生胚性愈伤组织影响显著,NAA不是影响胚性愈伤产生的主效因子;基本培养基中,QL,1/2MS培养基有利于华光胚性愈伤的发育,QL,LP培养基有利于曙光胚性愈伤的发育;当温度在24￣27.5℃时,光照强度为2000lx,有利于胚性愈伤组织的诱导及生长;接种方式上,叶背横切,叶面贴于培养基表面的接种方法易产生胚性愈伤。实验中发现:叶背横切,叶面接于G+2.5mg/LBA+0.5mg/LIBA培养基上,暗培养21d,转入1/2MS+2.0mg/lTDZ+2.0mg/LBA+0.5mg/LNAA的培养基中,温度控制在24￣27.5℃,光照强度为2000lx时,愈伤组织发育良好,获得高频胚性愈伤,进一步分化产生8%的不定芽。     

红翅槭的组织培养及快繁技术

以红翅槭嫩茎和嫩叶为外植体,研究在培养基中添加不同种类、不同浓度的激素后对红翅槭组培快繁的影响。结果表明:嫩茎分化率高,嫩叶分化速率快;接种于不同培养基上的嫩茎、嫩叶在形成愈伤组织和不定芽的时间上有明显的差异,且其长出愈伤组织和芽体的数量也有明显的不同;激素浓度、种类及不同组合对外植体的诱导和分化起着重要的作用,MS+6-BA0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L是嫩茎和嫩叶颗粒状愈伤组织和不定芽分化培养的理想培养基;1/2MS+IAA 0.6 mg/L+NAA 0.1 mg/L是不定芽生根培养的理想培养基;蛭石+珍珠岩(1∶1)是红翅槭试管苗移栽的理想基质,平均成活率为95.3%,并且移栽成活苗生长旺盛。     

外植体和培养因子对哈密瓜不定芽诱导的影响

用S-24和网纹香两个哈密瓜品种为材料,研究不同外植体和基本培养基、激素、蔗糖等因子对不定芽诱导率的影响,结果表明:1)两品种不同外植体的不定芽诱导率为子叶柄>子叶>茎尖>真叶;胚轴和根不能诱导不定芽,其中子叶柄是最适外植体,5～8日龄效果较好。2)在6-BA、zT、KT、2ip和2,4-D五种激素中,6-BA的诱导效果最好,其最适浓度为0.5mg/L。3)LS培养基能显著提高两个品种的诱导率和生活力。4)培养基中附加ABA 1.0mg/L可显著提高S-24的诱导率,而附加ABA 2.0mg/L和马铃薯提取液10g/L可显著促进网纹香不定芽的诱导效果。     

陇东马牙枣幼胚培养

以陇东马牙枣盛花后50～60d的幼胚为试材,采用L9(3)4正交设计,筛选适宜的幼胚萌发培养基。结果表明,基本培养基、激素配比、蔗糖的含量对幼胚萌发都有显著的影响;其中MS-H培养基的萌发率最高为47.62%;ZT最适宜含量为0.5mg/L,IAA最适宜含量为0.6mg/L;较高的蔗糖含量(50g/L)有利于胚的萌发。幼胚萌发的适宜培养基为MS-H+ZT0.5mg/L+IAA0.6mg/L+LH0.5g/L+蔗糖50g/L+琼脂4.0g/L,剥去种皮,幼胚萌发效果较好。当胚萌发后,将胚从胚乳中或愈伤组织中剥离继续诱导愈伤组织,再经诱导不定芽,生根获得正常植株。     

欧洲甜樱桃幼胚子叶离体培养再生植株研究

 以欧洲甜樱桃（Prunus avium L.）幼胚子叶为试材,研究了子叶不同发育时期、BA和NAA配比、品种基因型和培养条件等对幼胚子叶离体再生不定芽的影响。结果表明,以MS为基本培养基,附加BA 2.0 mg·L^-1＋NAA 0.2 mg·L^-1,用PF（子叶的长度/胚的长度×100）﹦50～80发育阶段的子叶,那翁幼胚子叶再生不定芽效果最好,再生率最高可达79.2﹪。暗培养2周后再转入光照下培养,对欧洲甜樱桃子叶再生不定芽具有一定的促进作用。欧洲甜樱桃其他品种的子叶再生率,雷尼尔为72.2﹪,先锋为61.1﹪,拉宾斯为33.3﹪。子叶再生不定芽全部发生于子叶的正面近胚芽端切口处,表现出明显的极性效应。     

杏胚珠培养及幼胚子叶不定芽诱导研究

以盛花后25、35、50、55、60d的凯特杏胚珠为外植体,研究胚珠培养的适宜条件;选择发育一致的幼胚子叶,研究不定芽的发生条件。结果表明,SH培养基是凯特杏胚珠培养的适宜培养基;盛花后25d的凯特杏胚珠(PF=0),仅采用生长培养不足以发育成可见胚,试验采用诱导方式获得了可见胚,诱导出胚率为80%;以MS为基本培养基,BA与NAA结合诱导能力强;但这种胚小且瘦弱,继续生长培养,利用幼胚子叶诱导不定芽。在幼胚子叶诱导不定芽方面,盛花后25、35d取样的凯特杏胚珠,培养后获得幼胚子叶,诱导不定芽的适宜TDZ质量浓度为1.25mg/L,诱导出芽率分别为85.00%、80.00%;盛花后50、55d取样的材料,适宜TDZ质量浓度为2.50mg/L,出芽率分别为65.00%、60.00%,而盛花后60d取样的材料,适宜TDZ质量浓度为5.0mg/L,出芽率为61.11%,不定芽主要发生在子叶的近轴面、胚轴连接处及子叶近轴端两侧;在相同培养基中,25℃进行21d暗培养,盛花后35、50、55、60d材料出芽率分别为72.22%、65.00%、60.00%、55.56%;4℃下28d暗培养,35、50、55、60d依次为59.09%,71.42%、77.78%、86.36%;对不定芽进行伸长、生根与快繁培养,获得了健康正常的植株。通过以上研究,建立了凯特杏幼胚4级培养体系,即(1)胚珠培养,获得可见胚(1级培养);(2)幼胚生长培养(胚培养),获得了健壮幼胚(2级培养);(3)幼胚子叶再生,获得不定芽(3级培养);(4)不定芽组培苗快繁(4级培养)。     

桃幼胚下胚轴高频植株离体再生

以桃品种京艳和晚蜜不同发育阶段合子胚下胚轴为外植体进行离体培养,用6-BA、CPPU和TDZ等细胞分裂素诱导下胚轴直接再生不定芽试验。结果表明,花后70d下胚轴为诱导的最佳材料,供试细胞分裂素中,诱导活性为TDZ>CPPU>6-BA,苯脲类细胞分裂素TDZ5mg/L与NAA0.01mg/L配合对下胚轴再生具有极强的诱导作用,京艳诱导再生率高达95.2%,平均不定芽数达每外植体25.3个。京艳的诱导率显著高于晚蜜。IBA 0.5mg/L适于诱导再生幼茎的生根,生根率和移栽成活率分别达到92.6%和65.5%。组织学观察表明不定芽起源于皮层薄壁细胞,属直接再生方式。     

桃幼胚离体培养再生植株的研究

 以中晚熟桃品种‘京艳’、‘绿化9 号’、‘ 晚蜜’和‘大久保’为试材, 初步建立了桃体细胞胚发生和增殖的三阶段程序, 即胚性愈伤组织诱导、体细胞胚发生和发育、体胚萌发成株以及次级体细胞胚的增殖。各品种体细胞胚的萌发成株率分别为73. 5 %、38. 6 %、5. 4 %和58. 2 %。用苯脲类细胞分裂素TDZ有效诱导‘京艳’的幼胚子叶直接再生植株, 再生率70 % , 平均每外植体不定芽数13. 8 个, 再生不定芽生根后获得完整植株。     

河套蜜瓜子叶诱导形成体细胞胚的研究

 以河套蜜瓜成熟种子子叶为外植体, 研究体细胞胚途径再生培养的主要影响因子, 并对体胚发生过程进行了观察。结果表明; 体细胞胚发生对培养基糖源浓度要求较高, MS附加60 g/L的糖源效果最好; 最佳植物生长调节剂组合为2,4-D 2.0 mg/L + 6-BA 1.0 mg/L; 1日苗龄子叶为最佳外植体源; 在诱导培养基上经暗培养1周、光培养1周, 再转入胚发育培养基, 有利于成熟胚的产生; 体细胞胚可产生在愈伤组织内部或表面、外植体表面、不定根上及外植体维管束的束中分生组织等部位。     

山东宁阳大枣快繁体系的建立

为探讨山东宁阳大枣组培快繁技术,以宁阳大枣新生枝条为外植体,通过诱导愈伤组织形成及不定芽分化,对建立高效的快繁体系进行研究。试验结果表明:同一基因型的不同取材部位其培养效果间差异不大;枣树新生枝条是建立无菌外植体的合适的外植体材料,适宜枣树分化愈伤组织的培养基是MS+BA1.0mg/L+KT1.0mg/L+NAA0.01mg/L+琼脂0.75%+蔗糖3%。适宜不定芽诱导的适宜培养基是MS+BA1.0mg/L+KT1.0mg/L+NAA0.05mg/L+琼脂0.75%+蔗糖3%。     

‘艾西丝’南瓜子叶的离体培养

用‘艾西丝’南瓜子叶作外植体离体培养,成功地建立了一套子叶高频率诱导再生芽的程序。在ＭＳ＋ＢＡ ４．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．４ｍｇ／Ｌ的培养基上,以４ｄ苗龄子叶基部切块为外植体,其不定芽的诱导率最高,达５０％,在ＭＳ＋ＢＡ０．２５－０．５ｍｇ／Ｌ的培养基上继代,增殖培养效果较好,在无激素的１／２ＭＳ培养基上最易生根。