常见中草药的体外抑菌试验

本实验旨在研究和发掘具有抗菌作用的中草药.应用体外抑菌试验的平板打洞法、试管两倍稀释法和平板培养法对本地常见中草药一枝黄花、黑老虎、土甘草、花木通等进行了对肺炎链球菌、蜡状芽孢杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的药物敏感性测定.结果一枝黄花对鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌呈高度敏感,最小抑菌浓度分别为1/80和1/40,最小杀菌浓度分别为1/20和1/10;对肺炎链球菌、蜡状芽孢杆菌呈中度敏感,最小抑菌浓度均为1/20,未见最小杀菌浓度,黑老虎、土甘草均对肺炎链球菌呈高度敏感,最小抑菌浓度均为1/80,最小杀菌浓度分别为1/20和1/10,对鼠伤寒沙门氏菌、蜡状芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌无抑菌作用;花木通则对四种供试菌均未见抑菌作用.     

广东五种常见中草药的体外抑菌试验

为测定鸭脚木皮、木蝴蝶、火炭母、岗梅根、倒扣草（鲜）这5种广东常见中草药的体外抑菌活性,采用琼脂平板打孔法、试管倍比稀释法和平板培养法,分别测定其对金黄葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、链球菌、枯草芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌的抑制效果.结果表明：大肠杆菌、链球菌对火炭母呈高度敏感,最小抑菌浓度（MIC）分别为1/40、1/80,最小杀菌浓度（MBC）分别为1/40、1/80;链球菌对鸭脚木皮、木蝴蝶均呈高度敏感,最小抑菌浓度（MIC）分别为1/20、1/10,最小杀菌浓度（MBC）分别为1/20、1/10;岗梅根、倒扣草（鲜）对六种菌均无抑制作用.     

15种中药对猪大肠杆菌的体外抑菌试验

为了探讨黄连等15种中草药对猪大肠杆菌的体外抑菌作用,试验采用琼脂扩散法和微量二倍稀释法应用15种中草药水提取物对猪大肠杆菌进行体外抑菌试验,测定抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:黄连、大黄均对大肠杆菌O101呈高度敏感,抑菌圈直径分别为20.8,20.3 mm,其MIC值为7.813 mg/m L,抑菌效果最好;黄芩、黄柏、金银花呈中度敏感,其MIC值为31.25 mg/m L;而苦参、马齿苋、败酱草等不敏感,其MIC值为500 mg/m L,抑菌效果差。     

复方中草药对临床分离猪大肠杆菌的体外抑菌作用试验

为了比较8组复方中草药制剂体外抑菌作用效果,筛选对猪大肠杆菌抑菌作用较好的组方,试验选用21种单味中草药配伍组成8组复方(复方1:石菖蒲、五倍子、黄芩、菊花;复方2:石菖蒲、黄芩、大黄、金银花;复方3:大黄、黄芩、秦皮、艾叶;复方4:白头翁、黄连、黄柏、秦皮;复方5:马齿苋、白头翁、黄柏、五倍子、甘草;复方6:郁金、诃子、黄芩、大黄、黄连、栀子、黄柏、白芍;复方7:地榆、石榴皮、土茯苓;复方8:黄连、白头翁、木香、甘草),采用水煎法制备水提物,分别通过平板打孔法、2倍稀释法和平板接种法对从临床病例中分离的猪大肠杆菌进行药物敏感性及最小抑菌浓度体外测定。结果表明:中草药复方3、复方7对猪大肠杆菌为高度敏感,复方6为中度敏感,复方1为低敏,其他复方不敏感;复方3、复方7对猪大肠杆菌体外抑菌效果较好,最小抑菌浓度为250 mg/m L;复方1、复方6、复方8抑菌效果次之,最小抑菌浓度为500 mg/m L;复方5有抑菌效果,菌落数随药物浓度升高呈降低趋势;复方2、复方4无抑菌作用。     

单一中草药以及复方中草药体外抑菌效果研究

试验旨在探究单一中草药、多种中草药组方对猪肠道大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用,筛选效果较好的单一中草药以及中草药组方。试验选用黄芪、何首乌、黄连、金银花、大黄、白头翁、五倍子、葛根等八种中草药的提取液,采用双层琼脂扩散法和微量二倍稀释法,测定其对3种育肥猪常见的有害肠道菌株抑菌圈的大小和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:(1)猪大肠杆菌对黄连、金银花和五倍子呈高度敏感,抑菌圈直径分别为24.54、20.13、20.13 mm,其MIC值分别为31.25、125、125 mg/ml。(2)金黄色葡萄球菌对黄芪、黄连和大黄呈低度敏感,抑菌圈直径分别为14.07、12.57、14.4 mm,其MIC值分别为250、125、125 mg/ml。(3)沙门氏菌对黄芪呈低度敏感,MIC值为250 mg/ml,黄连和大黄对沙门氏菌呈中度敏感,MIC值均为62.5 mg/ml。(4)黄芪和何首乌提取液混合试验,以黄芪0.75 mg/ml,何首乌0.25 mg/ml组合效果最好,对大肠杆菌呈中度敏感,抑菌圈直径为16.1 mm;对金黄色葡萄球菌呈低度敏感,抑菌圈直径为11 mm;对沙门氏菌呈不敏感,抑菌圈直径为9.8 mm。(5)黄芪、黄连和大黄三种提取液混合试验,以黄芪0.25 mg/ml,黄连0.5 mg/ml,大黄0.25 mg/ml组合效果最好,对大肠杆菌呈低度敏感,抑菌圈直径为12.4 mm;对金黄色葡萄球菌呈低度敏感,抑菌圈直径为12.2 mm;对沙门氏菌呈低度敏感,抑菌圈直径为12.9 mm。综上所述,单一添加黄芪、黄连和大黄三种中草药对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌体外抑菌效果较好。以黄芪,黄连和大黄三种中草药复配的组方对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌体外抑菌效果最好。     

中药对猪源大肠杆菌O_8体外抑菌试验研究

为了探讨猪源大肠杆菌O8对黄连等10种中药的体外敏感性,采用琼脂扩散法和微量二倍稀释法对10种中药水提物进行体外抑菌试验,测定抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:黄连对大肠杆菌O8呈高度敏感,抑菌圈直径为21.3 mm,其MIC值为7.813mg/mL,抑菌效果最好;黄芩、五倍子呈中度敏感,其MIC值为31.25mg/mL;而苦参不敏感,其MIC值为500mg/mL,抑菌效果差。     

8种中草药对大肠杆菌的体外抑菌试验

为了寻找抗生素的替代品,试验采用琼脂平板打孔法、牛津杯法和试管两倍稀释法检测了黄芩、黄连、黄柏、鱼腥草、穿心莲、五味子、连翘、艾草8种中草药对大肠杆菌的抑制作用。结果表明:黄连、鱼腥草、五味子、艾草对大肠杆菌的抑菌效果为高度敏感,五味子和艾草的最小抑菌浓度(MIC)为62.5 mg/m L,黄连和鱼腥草的MIC为125 mg/m L,大肠杆菌对其他4种中草药均不敏感。说明部分中草药对大肠杆菌具有一定的抗菌作用。     

三种中草药复方提取物的体外抑菌试验

采用平皿稀释法研究三种中草药复方提取物对大肠杆菌及沙门氏菌的体外抑菌作用.试验结果表明,方Ⅰ、方Ⅱ、方Ⅲ对大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为0.02、0.02和0.01 g/mL,说明方Ⅲ对大肠杆菌的体外抑菌作用优于方Ⅰ、方Ⅱ;三种中草药方对沙门氏菌的最小抑菌浓度都为0.01 g/mL,说明三种方对沙门氏菌的抑菌效果相近;方Ⅰ、方Ⅱ对沙门氏菌的抑菌效果优于大肠杆菌,方Ⅲ对这两种菌抑菌效果相近;对大肠杆菌来说,中草药单方有效成分经定向提取后组方其抑菌效果比复方总提物好.     

酢浆草等11种中草药的体外抑菌试验

试验选用酢浆草、乌梅、桂枝、板蓝根、黄芩等11种中药,采用常规中药药敏试验打孔法和试管法对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、链球菌、肠炎沙门氏菌等7种细菌进行体外抑菌试验.结果显示乌梅、秦皮、桂枝、大黄对上述7种菌都有较强抑菌效果.酢浆草除对链球菌无抑菌效果外,对其它细菌均呈高度敏感.黄芩对肠炎沙门氏菌呈高度敏感.其它药物对上述7种菌抑菌效果较差或无抑制作用.     

云南10种中草药水煎剂对猪源大肠杆菌体外抑菌实验

为了研究云南省10种中草药水煎剂对猪源大肠杆菌的体外抑菌作用,用两次煎煮法将黄芩、黄连、黄柏、当归、板蓝根、灯盏花、马蹄香、茯苓、白头翁、岩坨等10种云南主产中药材制成生药浓度为1g/ml的水煎液,用牛津杯法测定抑菌圈,试管法测定最小抑菌浓度(MIC)。结果显示当归、黄连、黄芩、白头翁水煎剂体外抑菌效果较好,抑菌圈分别为18、17、16、12cm;MIC分别为250mg/ml、62.5mg/ml、125mg/ml、500mg/ml。该实验所选10种中药材除茯苓和马蹄香外,其余中药材水煎液对猪源大肠杆菌皆有不同程度的体外抑菌效果。该研究对临床应用中草药防治猪大肠杆菌病及筛选效果良好的抑菌中草药物进行抗菌兽药研发有一定的指导意义。     

Clavulanate-potentiated amoxycillin: in vitro antibacterial activity and oral bioavailability in calves

The minimal inhibitory concentrations (MIC) of amoxycillin and clavulanate-potentiated amoxycillin (amoxycillin:clavulanic acid, 4:1 by weight) were compared for 171 Salmonella, 170 Escherichia coli, and 32 Pasteurella isolates recovered from infected neonatal calves. In the presence of clavulanic acid, the MIC of amoxycillin was reduced to levels less than or equal to 12.5 micrograms/ml for all the Salmonella group B, all the Pasteurella, and for 12 out of the 44 E. coli isolates which were resistant to amoxycillin (MIC greater than or equal to 100.0 micrograms/ml). For isolates sensitive to amoxycillin (MIC less than or equal to 1.56 microgram/ml) there was no change in MIC values in the presence of clavulanic acid. A small proportion of Salmonella and E. coli isolates were resistant to clavulanate-potentiated amoxycillin. In a cross-over trial involving 10 preruminant (2 weeks old) calves, amoxycillin trihydrate and clavulanate-potentiated amoxycillin were administered orally at 10 mg/kg. An analysis of serum amoxycillin level data showed that the pharmacokinetic parameters t1/2ab, Cmax, t1/2 beta, AUC, Cp degree, and f' (estimated drug absorption ratio) were the same after treatment with amoxydrate and clavulanate-potentiated amoxycillin. Administration of clavulanate-potentiated amoxycillin and probenecid resulted in elevation and prolongation of serum amoxycillin levels. Computations showed that in preruminant calves serum amoxycillin concentrations sufficient to inhibit sensitive pathogens can be maintained by oral clavulanate-potentiated amoxycillin treatment at 10 mg/kg TID. At two times that dose rate serum drug concentrations capable of inhibiting 50% of all types of pathogens examined can be maintained.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

辣椒碱体外抑菌及抗氧化能力评价

文章旨在研究体外条件下辣椒碱对鸭源性大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌抑菌效果和抗氧化能力。试验采用平板涂布法测定辣椒碱对3种致病菌的MIC,采用比浊法测定不同时间点菌液的光密度(OD值),绘制生长曲线。采用体外法测定辣椒碱对1,1-二苯基-二苦基肼(DPPH)、超氧阴离子和羟自由基的清除率评价辣椒碱的抗氧化能力。结果显示,辣椒碱对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)分别1、2、2 g/L,对DPPH、超氧阴离子和羟自由基均有一定的清除能力。试验表明,辣椒碱对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果明显,是一种良好的抑菌剂和抗氧化剂。     

苗药对3种常见致病菌体外抑菌效果研究

为研究板蓝根、五倍子、黄芪等20味苗药及其组方对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和大肠杆菌的体外抑菌效果，本试验通过水煎法、超声水提法、超声醇取法提取苗药及其组方的有效成分，采用二倍稀释法分别测定提取物对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌及大肠杆菌的最小抑菌浓度（MIC）。结果显示，苗药不同提取方法对其抑菌效果影响不同，单味药效果：超声醇提法 > 超声水提法 > 水煎法。五倍子和仙鹤草超声醇提物对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌及大肠杆菌的MIC分别为0.18、0.71和1.43 mg/mL（五倍子）及1.56、3.13和3.13 mg/mL（仙鹤草）；南五味子、乌梅、刺梨、金银花、绵马贯众、杜仲的MIC值高于五倍子和仙鹤草，低于其他12种药，这6种单味苗药超声醇提物对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌及大肠杆菌的MIC分别为3.69~50.00、3.13~50.00及3.31~66.25 mg/mL。组方药效果结果显示，超声水提法 > 超声醇提法 > 水煎法。组方5超声水提物对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌及大肠杆菌的MIC最低，分别为0.34、2.75和2.75 mg/mL；组方1超声水提物对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌及大肠杆菌的MIC比组方2、3、4低，分别为2.88、5.75和5.75 mg/mL。结果表明，五倍子、仙鹤草及组方5对3种常见致病菌抑菌效果较强，南五味子、乌梅、刺梨、金银花、绵马贯众、杜仲和组方1有一定的抑菌作用，其他苗药的抑菌效果相对较弱。     

火绒草的抗菌活性研究

采用试管稀释法，分别测定了火绒草水煎液、水提醇沉液、醇提物、醇提石油醚部分、醇提乙酸乙酯部分、醇提正丁醇部分、醇提水溶部分等7种提取物时大肠杆菌C83882、大肠杆菌C83803、大肠杆菌C83814、沙门氏菌C79-20、金黄色葡萄球菌Newbould S-305、金黄色葡萄球菌临床分离株等6株病原菌的最低抑菌浓度（M1C）和最低杀菌浓度（MBC）。试验结果表明，火绒草醇提物及其石油醚部分和乙酸乙酯部分时两种金黄色葡萄球菌具有较强的抑制作用，其M1C为0．14mg／ml生药浓度，MBC为0．27mg／ml生药浓度，而其它部分时金黄色葡萄球菌的抑制作用较弱。火绒草醇提正丁醇部分和水溶部分时3株大肠杆菌和1株沙门氏菌具有较强的抑制作用，其MIC为2．70mg／ml生药浓度，MBC为2．70mg／ml生药浓度．显示了较强的抗菌活性。     

苦参碱和氧化苦参碱对奶牛子宫内膜炎致病菌体外抑制试验

为了确定苦参碱和氧化苦参碱对奶牛子宫内膜炎致病菌的体外抑菌活性,选取奶牛子宫内膜炎致病菌大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌为供试菌株,采用纸片扩散法、牛津杯法对2种生物碱进行了药敏试验,采用液体倍比稀释法测定了其最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,苦参碱和氧化苦参碱对奶牛子宫中分离的耐药性大肠埃希菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)均有一定的抑制作用。苦参碱对耐药性大肠埃希菌和MRSA的MIC分别为12.5 mg/mL和25 mg/mL,氧化苦参碱对耐药性大肠埃希菌和MRSA的MIC分别为25mg/mL和50mg/mL。     

四种植物提取物对大肠杆菌的抑菌效果研究

 为充分利用当地资源和进一步开发植物药进行畜禽大肠杆菌病防治提供科学依据,采摘了本地生长的马鞭草、马齿苋、忍冬藤、蒲公英等四种植物,应用水提醇沉法制备提取液,用纸片扩散法和试管两倍稀释法对猪源、鸽源、牛源大肠杆菌进行体外抑菌效果试验,同时以小鼠为试验动物,检测四种植物提取液体内的抗菌作用。结果显示,四种植物对猪源大肠杆菌的抑菌圈在10～14 mm之间,均为中敏;对鸽源大肠杆菌在10～22 mm之间,马鞭草极敏,蒲公英高敏;对牛源大肠杆菌在7～14 mm之间,马鞭草高敏,蒲公英、忍冬藤中敏,马齿苋低敏。马鞭草对猪源、鸽源大肠杆菌的MIC和MBC是31.25 mg/mL,对牛源是62.5 mg/mL;蒲公英对猪源、鸽源的大肠杆菌MIC和MBC是62.5 mg/mL,对牛源是125 mg/mL;马齿苋对猪源的MIC和MBC是62.5 mg/mL和125 mg/mL,对鸽源、牛源的MIC和MBC分别是125 mg/mL和250 mg/mL;忍冬藤对猪源、牛源的MIC和MBC分别是125 mg/mL和250 mg/mL,对鸽源MIC和MBC是62.5 mg/mL和125 mg/mL。小鼠体内抗菌作用提示,用蒲公英和马鞭草1.88 g/kg、马齿苋和忍冬藤3.75 g/kg进行预防,可使感染大肠杆菌的小鼠成活率为达100%。四种植物提取液对大肠杆菌体外抑菌和体内抗菌均有较好的效果,马鞭草效果最好     

中药精液消毒剂的消杀效果及安全性评价研究

为了解新研制的中药精液消毒剂的消毒效果和安全性,本研究开展了体外抑菌杀毒和安全性综合评价实验。体外药效学实验显示:该消毒剂对大肠杆菌高敏,对门氏菌、禽巴氏杆菌和金黄色葡萄球菌均中敏,4种菌的体外MIC值分别为31.3、62.5、62.5和31.3 mg/mL;消毒剂按1∶400及以上浓度与新城疫病毒互作,可在5 min内对该病毒有100%杀灭率。安全性评价实验显示:该消毒剂的小鼠急性毒性LD50值>5000 mg/Kg,无毒性;对兔子的皮肤和眼睛染毒,无刺激;消毒剂按1∶10浓度及以下,对常温稀释保存的种公鸡精液中精子生存指数影响不大。临床应用实验显示:在冻融条件下,该消毒剂1∶10浓度组的种公鸡精液中精子存活率要显著高于其它试验组(P<0.01);消毒剂按1∶10浓度对种公鸡精液稀释消毒,种蛋受精率和孵化率都有明显提高,但差异不显著(P>0.05)。结果表明:该消毒剂不仅对种公鸡精液中常见病原微生物具有较好的杀灭效果,而且安全无刺激、无毒,对种鸡繁育无不良影响。     

二重PCR检测猪、鸡源致病性大肠杆菌、沙门氏菌磺胺类耐药基因(Sul1、Sul2、Sul3)的研究

利用二重PCR对临床分离的猪、鸡源致病性大肠杆菌103株和沙门氏菌33株的3个磺胺类药主要耐药基因Sul1、Sul2、Sul3进行了检测。结果表明,在19株耐SD的沙门氏菌中有17株检测出Sul1或Sul2基因,检出率为89.47%,与药敏试验的结果相比,符合率为89.47%;在56株耐SD的大肠杆菌中有53株检出耐药基因,与药敏试验的符合率为94.64%。二重PCR方法与常规PCR的结果符合率为98.5%,具有很高的一致性;与药敏试验也有很好的符合率,具有较高的特异性。整个试验过程只需7 h,比常规PCR节约7 h,检测速度有了较大的提高。     

中药对鸡致病性大肠埃希菌的体外抑菌试验

为研究25种中药对秦皇岛地区鸡致病性大肠埃希菌(Escherichia coli)地方流行株QH1(O78)、QH2(O89)、QH4(O1)的体外抑菌效果,以E.coli标准株ATCC25922作为质控菌株。利用水提法制备中药药液,使终浓度为1g/mL;用平板琼脂打孔法和改良微量二倍稀释-平板法分别测定25种中药的抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,金银花、黄连、乌梅、五味子4种中药对鸡致病性E.coli地方株极度敏感,抑菌圈直径在20.3mm~22.7mm之间,其MIC在15.65mg/mL~31.25mg/mL之间;其他药物对鸡致病性E.coli地方株有不同程度的敏感性,为鸡致病性E.coli地方株中药防治提供理论基础。     

抗菌肽BSN-37的抑菌活性及其稳定性分析

试验旨在研究抗菌肽BSN-37的抑菌活性和稳定性。采用微量倍比稀释法测定抗菌肽BSN-37的最小抑菌浓度(MIC),菌落计数法分析抗菌肽BSN-37对大肠杆菌CVCC1568的杀菌动力学特征,扩散法测定抗菌肽BSN-37的盐离子稳定性、酸碱稳定性、血清稳定性、胰酶稳定性、热稳定性、反复冻融稳定性、室温保持稳定性、药效保持时间稳定性。结果显示,抗菌肽BSN-37对革兰氏阴性菌(大肠杆菌和沙门氏菌)的MIC为1.5625～25μg/mL,对革兰氏阳性菌(枯草芽孢杆菌和短小芽孢杆菌)的MIC为1.5625～12.5μg/mL,对真菌(白色念珠菌)没有活性;抗菌肽BSN-37可在90min内完全杀灭大肠杆菌CVCC1568;除了Fe2+和胰酶会影响抗菌肽BSN-37的抑菌活性外,在75～100℃的高温、150～250mmol/L高浓度盐离子(Na+、K+、Ca2+和Mg2+)、20%～25%饱和浓度的Cu2+、pH 4～10、20%～25%的血清、10～12次的反复冻融、10～12d室温保存等条件下仍能保持较好的抑菌活性,药效保持时间可达7.5d。本试验结果表明,抗菌肽BSN-37具有替代抗生素成为新抗菌药物的潜力,为抗菌肽BSN-37的临床应用提供了理论依据。