苦参对辣椒枯萎病的抑菌活性

[目的]探讨苦参对辣椒枯萎病的抑菌活性。[方法]采用生长速率法和悬滴法测试不同溶剂、浓度苦参提取物对辣椒枯萎病菌的抑制作用。[结果]乙酸乙酯与丙酮提取苦参所得粗提物的抑菌率显著高于乙醇。随着苦参乙酸乙酯粗提液浓度的增大,其对枯萎病病菌菌丝生长及孢子萌发抑制作用均显著增强;在质量浓度为40 g/L时,其对辣椒枯萎菌菌丝生长、孢子萌发抑制率分别达到94.48%、89.01%。[结论]苦参根中所含活性物质对辣椒枯萎病的抑菌活性较强,具有进一步研究开发的价值。     

苦参内生真菌的分离鉴定及抑菌活性的初步研究

采用组织分离法从新鲜苦参种子中分离纯化内生真菌,对分离到的内生真菌进行形态学和16SrDNA分子生物学鉴定,以确定菌株名称;并通过测定该菌株对常见植物致病菌的作用,确定其抑菌特性。结果表明:1株内生真菌从新鲜苦参种子中分离纯化出来,其菌落呈浅黄色,短绒毛状,有少量放射状沟纹;营养菌丝为树根状,有隔,分生孢子梗较长;分生孢子梗顶端短棒状,孢子椭圆;16S rDNA分子鉴定后,确认其为土曲霉(Aspergillus terreu Thom),命名该菌株为BS001。抑菌试验结果表明:该菌株对多种植物致病真菌和细菌有显著的抑制作用,其中对产气肠细菌和黄瓜枯萎病菌抑制效果最佳。     

百里香酚抑菌活性初探

本研究采用抑制菌丝生长速率法、抑制孢子萌发法、组织测定法和盆栽试验法系统测定了百里香酚对植物病原真菌的抑制作用。结果表明,在离体条件下百里香酚对供试的10种植物病原真菌菌丝生长均有一定的抑制作用,其中,对番茄灰霉病菌的抑制作用最强,EC50为0.012 g?L-1;对番茄灰霉病菌、烟草赤星病菌和玉米大斑病菌孢子萌发有较强的抑制作用,EC50分别为0.028、0.032和0.064 g?L-1;盆栽试验结果表明百里香酚对番茄灰霉病菌具有很好的保护和治疗作用,在供试浓度为0.75 g?L-1时,对番茄灰霉病的保护和治疗作用分别为72.01%和60.28%,与对照药剂速克灵无显著性差异。     

苦参提取物抑制番茄灰霉病菌活性的研究

以苦参提取物做为抑菌剂,采用生长速率法和悬滴法,室内测试不同浓度(1,5,10,20g·L-1)苦参提取物对番茄灰霉病菌的抑菌活性。结果表明:不同苦参提取物浓度对番茄灰霉病菌菌丝均具有抑制作用,且作用强度随浓度增加而增强。接菌后4d,20g·L-1苦参提取物处理的菌丝抑制率达92.14%;苦参提取物对病菌孢子萌发抑制作用较强,且随着提取物浓度的增大,萌发抑制作用增强。20g·L-1苦参提取物处理的孢子萌发抑制率为97.46%,且均与对照差异达显著水平。不同温度、pH值、保存时间对苦参提取物抑菌的影响结果表明:在-20~100℃,随着处理温度升高,其抑菌活性下降显著,100℃处理时抑菌率降至62.43%;pH值5～9抑菌活性最高且变化较小,pH值为11时,抑菌率下降到71.07%;在4℃下保存5d与0d的抑菌率无差异,随着保存时间的延长,抑菌率逐渐降低,超过21d抑菌率显著下降。     

丁香与苦参复配剂对人参锈腐病菌的抑菌活性

以丁香和苦参复配液作为供试药液,研究其对人参锈腐病菌的抑菌活性.结果表明:丁香与苦参提取液复配的增效比值为1.96;对人参锈腐病菌的孢子萌发具有很强的抑制作用;对病原菌菌丝生长有抑制作用,菌丝干重随药液浓度的增大而减小;对病原菌的最低抑茵浓度和最低杀菌浓度均为4 mg/mL.     

茶多酚的抑菌活性研究

采用平板计数法和滤纸片法研究了茶多酚对细菌、酵母和霉菌的抑菌活性及茶多酚质量浓度、pH值、温度和食盐质量浓度对抑菌活性的影响.结果表明:茶多酚对细菌有较强的抑菌活性,而对供试的酵母和霉菌抑制作用不明显;茶多酚对供试菌种的最低抑菌质量浓度不超过1.0 g·L-1,最佳抑菌质量浓度为4.0 g·L-1;在自然pH值和中性偏碱性环境中的抑菌活性比强碱性环境的抑菌活性强;一定温度内处理不影响茶多酚的抑菌活性;食盐可增强茶多酚的抑菌活性.表6参18     

2株内生拮抗细菌对灰霉病菌的抑菌活性研究

采用对峙培养法检测了2株内生拮抗细菌对灰霉病菌菌丝生长的影响,并观察了其发酵液对灰霉病菌孢子萌发及病菌生长的影响,同时测定了其发酵液、细菌悬浮液以及高温处理的发酵液在离体黄瓜上对灰霉病菌生长的抑制作用。结果表明：2菌株能强烈抑制灰霉病菌生长,其发酵液也能明显抑制病菌孢子的萌发和生长,且发酵液高温处理后仍具有较高的抑菌活性。在离体黄瓜片上检测菌株对灰霉病菌的抑制效果,结果表明,2菌株发酵液及其细菌悬浮液均能较好地抑制灰霉病菌生长。     

苦参碱金属配合物的合成及抑菌活性研究

为了明确苦参碱金属配合物的抑菌活性,于无水乙醇中合成2种配合物,采用元素分析、红外光谱分析、差热热重同步分析、单晶衍射分析对配合物的结构进行表征,确定组成及结构。采用菌丝生长速率法测定配体及配合物对番茄灰霉病菌、小麦赤霉病菌、马铃薯晚疫病菌的抑菌活性。结果表明,合成的配合物经结构表征后,确定其结构为1分子苦参碱与1分子金属离子配位。药剂质量浓度为800mg/L时,苦参碱金属配合物的抑菌活性均高于配体,尤其锌配合物对番茄灰霉病菌的抑制率提高近7.1倍,铁配合物对小麦赤霉病菌以及锌配合物对马铃薯晚疫病菌的抑菌活性最强,其抑制率分别为79.8%、95.2%。苦参碱能与铁、锌金属离子形成金属配合物,且配合物的抑菌活性相对于配体有不同程度的提高。     

凤眼莲活性提取物的抑菌活性研究

以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、青霉、黑曲霉为试验菌种,对凤眼莲活性提取物进行了抑菌活性试验,结果表明:(1)凤眼莲活性提取物具有抑菌活性,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑制效果较好,MIC值分别为0.625%和5.000%;(2)凤眼莲活性提取物的抑菌活性具有较宽的pH值适用范围;(3)100 ℃以内加热20 min对凤眼莲活性提取物的抑菌活性无显著影响;(4)对菌种的作用时间相同时,活性提取物的浓度越高,抑菌率越高;提取物浓度相同时,作用时间越长,抑菌率越高.     

女贞子抑菌活性研究

[目的]研究女贞子的抗菌作用。[方法]采用试管连续稀释法,测定不同稀释度女贞子水煎液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的抑制作用。[结果]女贞子水煎液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的最低抑菌浓度（MIC）均为31 mg/ml,最低杀菌浓度（MBC）为62 mg/ml,枯草芽孢杆菌MIC为4 mg/ml,MBC为8 mg/ml。[结论]女贞子能有效地抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌,具一定的抗菌作用。     

苦参总碱提取条件的优化研究

采用酸水回流提取和乙醇回流提取两种方法对苦参总碱的提取效果进行了综合研究。结果表明，乙醇回流提取效果较好，其最佳提取条件为：采用筛分目数20-60目的苦参粉，以60％的乙醇溶液，液料比为12，回流提取2次，可以得到最佳的提取效果。     

发根农杆菌诱导苦参毛状根的研究

[目的]为苦参有用成分的大量生产提供新的途径。[方法]利用发根农杆菌R1601分别对药用植物苦参的根段、茎段、叶片、子叶进行侵染。[结果]在相同条件下,叶片、茎段和根段成功诱导出毛状根,但诱导频率不同,茎段作为外植体诱导率最高,达到26.7%,更适合作为外植体选用。毛状根除菌后,能在MS培养基上自主生长。[结论]发根农杆菌的RiT-DNA基因已经整合到苦参基因组中。该研究为采用生物技术生产苦参活性成分奠定了基础。     

苦参毛状根诱导及其培养条件的研究

[目的]为药用成分苦参碱及氧化苦参碱的来源提供新途径。[方法]考察了R1601菌株对苦参不同外植体在不同浓度乙酰丁香酮和侵染时间影响下苦参毛状根的诱导率;研究了培养基中的组分和浓度对苦参毛状根继代生长的影响。[结果]以苦参幼芽为外植体,在R1601菌液中添加100μmol/L乙酰丁香酮,侵染20 min,(25±1)℃,MS共培养基上暗培养2 d,苦参毛状根的诱导效果较好,诱导率28.6%,存活率46.7%;苦参毛状根在改良的继代培养基上生长良好。[结论]苦参毛状根的最佳诱导条件:以生长1周的苦参幼芽为外植体,R1601为菌株,添加100μmol/L的乙酰丁香酮,侵染20 min,(25±1)℃暗处诱导。     

苦参愈伤组织的诱导及苦参总碱含量的检测

为了探索苦参愈伤组织培养的适宜条件和选择苦参总碱含量高的愈伤组织,用不同的消毒方法和不同的激素配比对苦参的子叶、叶片、地上茎和地下茎进行离体培养,诱导愈伤组织;并对外植体以及分别诱导出的愈伤组织进行苦参总碱的检测。结果表明,对苦参的外植体采用自来水冲洗30 min,75%酒精处理30 s,4%NaClO、滴加一滴tween-20,消毒5min就能取得较好的消毒效果;不同外植体以MS培养基为基本培养基加1.0 mg/L 2,4-D和1.5~2.5 mg/L NAA的条件下,均能高效率的诱导出愈伤,且生长较好;初步认为子叶和地下茎的愈伤组织中苦参总碱含量较高,适合选择子叶或地下茎的愈伤组织进一步进行筛选高产细胞系。     

HPLC法测定苦参不同器官氧化苦参碱含量

采用HPLC法测定苦参不同器官中氧化苦参碱的含量,结果表明,根中氧化苦以碱含量较高;茎、叶、花中含量较低。     

贵州栽培苦参中苦参碱的含量测定

为建立贵州栽培苦参药材中有效成分苦参碱含星的测定方法,采用HPLC法DiamonsiITM(钻石)C18色谱柱,以乙睛、3%磷酸(70:30)为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长210 nm.结果显示方法线性关系良好,平均加样回收率98.01%,RSD=1.15%,表明该法简便快速,结果准确,可以作为控制栽培苦参药材质量的方法.     

苦参杀鼠活性研究

通过对苦参不同部位杀鼠活性的测定,结果表明,在20％浓度时,苦参根、茎叶对小白鼠个体的毒杀率分别为100％和50％;在15％浓度时分别为100％和20％。饵料中苦参根、茎叶的含量为20％时,试鼠的摄食系数分别为0.59和0.72。说明苦参对试鼠有较好的毒杀活性以及较好的适口性。以家鸡进行安全性试验,无二次中毒现象。     

HPLC法测定苦参碱类生物碱传递体包封率

高速离心分离游离的苦参碱(MAT)和氧化苦参碱(OMT),应用HPLC法测定MAT和OMT的浓度并计算包封率,建立苦参碱类生物碱传递体包封率的HPLC测定方法。结果显示,MAT进样量在0.074~0.370μg/mL、OMT进样量在0.263~1.315μg/mL时,两者峰面积与进样量具有良好的线性关系。在高加样量0.148μg/mL和低加样量0.111μg/mL下,MAT的平均加样回收率分别为100.2%和98.2%,RSD分别为1.07%和2.38%;OMT的平均加样回收率分别为98.3%和100.2%,RSD分别为0.75%和0.66%。制剂中MAT和OMT的包封率分别为80.43%和74.70%,RSD分别为1.03%和1.11%。建立的方法适用于苦参碱类生物碱传递体包封率的测定。     

苦参内生拮抗细菌B36菌株最适发酵条件的研究

为提高拮抗菌株B36发酵生产的菌量和抗菌物质的产率,通过单因子试验和正交试验方法,对其摇床发酵培养基成分及发酵条件进行研究。结果表明,最适宜发酵条件为发酵温度28℃,转速150r·min^-1,接种量20％,初始pH值9．0,在250mL三角瓶的装液量为50mL,发酵36h。最佳培养基组成为葡萄糖2．0％,酵母粉0．5％,大豆粉0．5％,NHaNO3 0．5％,CaCO31．0％。     

人口地理数据的不确定性及其对策研究

采用超声波、冷凝回流及常温浸泡3种方法从苦参中提取分离生物碱,经初步分析,其主要成分为苦参碱、氧化苦参碱等.运用药理学方法对得到的生物碱进行了抗鱼体车轮虫试验,结果显示:苦参生物碱能对鱼体鳃部车轮虫起到有效的驱杀作用;不同提取方法的提取物中由于生物碱的成分与含量有差异,对车轮虫的杀灭效果也有显著差异;超声波提取物中苦参碱的含量最高,对车轮虫的杀灭效果也最好,表明苦参生物碱中对车轮虫起驱杀作用的成分主要是苦参碱.