籼稻YTB成熟种子的预处理对愈伤组织诱导的影响

通过对籼稻YTB成熟胚种子储存时间、预处理温度、消毒等预处理措施的系统试验,优化了愈伤组织诱导的种子预处理方法.精选当年产的新种子,于50℃去休眠48 h,只采用1.5％的次氯酸钠溶液消毒3次,每次15 min的消毒方法,即可达到提高愈伤组织诱导率的目的.简化后的消毒步骤,避免了酒精对种子内部结构的损伤,减少了氯化汞对环境的污染.     

蓖麻花药愈伤组织诱导的研究

以通蓖5号为试验材料,诱导蓖麻花药的愈伤组织.分别以接种密度(1/5个、2/5个、3/5个、4/5个、1个花蕾)、基本培养基种类(MS、NB、B_5、N_6)、低温预处理时间(0d、1d、3d、5d、7d、9d)、培养基添加物(糖、生长激素、脯氨酸、水解酪蛋白、抗坏血酸)等因素为变量,对蓖麻花药愈伤组织进行诱导试验.结果表明,3/5个花蕾的接种密度、30g/L的糖浓度、MS培养基(添加1.5mg/L 6.BA和0.9mg/L NAA)以及5d的低温(4℃)预处理均有利于花药愈伤组织的形成;同时脯氨酸、水解酪蛋白、抗坏血酸等的加入均可有效地提高蓖麻花药愈伤组织诱导率.     

激素和低温预处理对胡麻花药愈伤组织诱导的影响

本文以胡麻杂交组合IS×95005的F_1为材料,研究了激素和低温预处理对花药愈伤组织诱导的影 响.研究结果表明,不同培养基不仅对花药愈伤组织的诱导率有影响,而且对愈伤组织的颜色、生长速率和质地也有较大的影响.KT+2,4-D激素组合对花药愈伤组织的诱导效果优于KT+NAA.接种前花蕾4℃低温预处理能显著提高化药愈伤诱导率.在相同培养基中,低温预处理大数对愈伤诱导率起主要作用.综合考虑愈伤组织的质量和诱导率,胡麻组合1S×95005的F_1代花药愈伤诱导率存低温预处理5 d,附加KT 1.0 mg/L+2,4-D2.0 mg/L的MS固体培养基上诱导效果最好.     

不同预处理对白菜型油菜花药愈伤组织诱导的影响

本试验以白菜型春油菜品种——‘天祝小油菜’为试验材料,研究不同花蕾部位、不同诱导培养基及不同低温等预处理时间对花药愈伤组织诱导率的影响。无预处理时,筛选不同花蕾部位接种到不同诱导培养基的最佳组合,结果表明：以主花序蕾盘中盘青绿色、长度2～3 mm的花药为接种材料,在添加1.5 mg/L2,4-D、1 mg/L KT的B5培养基上培养,其花药愈伤组织诱导率最高为27.26%,均高于内盘、外盘花蕾花药与其他诱导培养基组合诱导率。预处理结果表明：4℃预处理4 d对花药愈伤组织诱导最有效,诱导率为60.27%,显著高于同期对照1.21倍;0.2 mg/L甘露醇培养4 d对花药愈伤组织诱导率为48.07%,显著高于对照和其他甘露醇溶液处理。花蕾在0.1 mol/L蔗糖溶液浸泡处理30 min后,花药愈伤组织诱导率为54.8%,显著高于对照和其他蔗糖溶液处理。综上以白菜型油菜主花序蕾盘、中盘青绿色,长度2～3 mm的花药为接种材料,4℃预处理4 d后接种在添加1.5 mg/L 2,4-D、1 mg/L KT的B5培养基上愈伤组织诱导效果最好。     

不同外源激素对油棕愈伤组织诱导的影响

以油棕幼胚为外植体,以N6培养基上添加不同浓度的生长素与细胞分裂素进行愈伤组织诱导研究。结果表明,无激素的培养基上不能诱导出愈伤组织,单独加入2,4-D、IAAIBA、6-BA中N6+2,4-D110mg/L的浓度愈伤组织形成率最高,为83.75%,诱导过程中褐化现象少。N6+2,4-D110mg/L+PVP5g/L+蔗糖6%+AC0.3%培养基促进愈伤组织的诱导和生长,适合进一步继代培养。     

八仙花花药培养诱导愈伤组织

建立花药离体培养再生体系是获得单倍体的重要途径之一.先以八仙花花蕾为试材,研究花粉发育时期与花蕾和花药形态特征的相关性;然后再以3个品种八仙花花药为外植体,研究花粉发育时期、基因型、不同激素种类及浓度配比对花药诱导愈伤组织的影响.结果 表明,尚未开放的可孕花花蕾为粉紫色且有深紫色痕迹时,不孕花花萼全部着色,花粉发育处于...     

不同激素和浓度对夏天无愈伤组织诱导的影响

以夏天无块茎、芽及叶柄作为外植体,采用不同激素浓度配比对夏天无进行愈伤组织诱导的研究,摸索夏天无组培快繁的条件.结果表明:(1)对夏天无块茎愈伤组织诱导效果较好的激素种类及浓度配比是1/2 MS +6-BA(2 mg/L)+NAA(1 mg/L);平均诱导率达59.38％,形成愈伤组织的时间约20d,但后期愈伤组织未分化出芽.(2)对夏天无的芽进行愈伤组织诱导研究表明,效果较好的激素种类及浓度配比是1/2 MS +6-BA(3.5 mg/L)+ NAA(0.1 mg/L);平均诱导率为100％,愈伤组织7d左右形成,且后期大多分化出芽.(3)对夏天无叶柄愈伤组织诱导效果较好的激素种类及浓度配比是1/2 MS +6-BA(3 mg/L) +2,4-D(2 mg/L);平均诱导率仅为13.89％,且后期愈伤组织未能分化成芽.     

燕麦愈伤组织的诱导

以白燕2号为材料,研究了不同的外植体、培养基比例和外植体的放置方式对燕麦愈伤组织诱导的影响,以及最有效的消毒方法。试验结果表明,外植体最有效的消毒方法是采用75%酒精消毒1min后无菌水冲洗,再用30%的次氯酸钠溶液消毒40min(间隔20min换1次);诱导培养基中2,4-D最适浓度为3mg/L;燕麦种子是较理想的外植体,接种时将种子盾片朝下放置直接接触培养基,会得到更高更理想的出愈率。     

三个大果型番茄花药愈伤组织诱导分析

本研究以3个大果型番茄杂交种F1代('1401','1403','卡莱')的花药为试验材料,对其花药愈伤组织诱导的影响因素进行初步研究.结果表明:大果型番茄花药小孢子发育时期与花蕾长度以及花药长度呈正相关.较适番茄花蕾消毒方法为用70％酒精对番茄花蕾进行表面消毒30 s,然后再用加了0.1％吐温20的15％NaC1O消...     

普通野生稻(Oryza rufipogon Griff)花药培养研究——Ⅰ.提高花粉愈伤组织诱导率和绿苗分化率的研究

对79份采自广西不同地理环境的不同类型的普通野生稻进行了花药培养研究,发现不同类型材料的花培力有较大的差异,有41个编号的材料得到花粉绿苗。试验结果表明:孕穗期施复合肥料不仅提高了供体植株的营养水平,而且也明显地提高了花粉愈伤组织诱导频率。接种前稻穗用6—8℃低温预处理8—12天,愈伤组织诱导率和绿苗分化率可提高     

影响月季愈伤组织诱导和分化的因素

以“萨蔓莎”(Samantha“)、金斯莱克”(Jimthelanky“)、休姆主教”(HumeBasil)等9个月季品种为材料,研究了影响月季愈伤组织诱导和分化的因素。试验结果表明,不同品种之间愈伤组织诱导率和诱导数量差异显著。细胞分裂素BA、KT、ZT和生长素NAA、2,4-D6种激素中,KT或ZT与NAA组合能够较好地诱导月季愈伤组织。试验选择了含有不同浓度KT和NAA以及ZT和NAA两组培养基试验不同激素浓度对月季愈伤组织诱导的影响,结果表明激素浓度主要影响愈伤组织的颜色和质地;一般生长素浓度越高,愈伤组织颜色偏向于黄色,质地也越松散;但是有些品种当生长素达到一定浓度时,会发生不定根;并且不同品种适宜的激素浓度不同。愈伤组织形成后在原培养基中继续培养或转接于含有不同浓度ZT和NAA以及含有TDZ、NAA和GA的两组愈伤组织分化培养基中,结果表明,在愈伤组织分化过程中,生长素仍然是必要的;GA对愈伤组织增殖具有负作用。暗培养和固液两相培养基有利于愈伤组织的分化。试验得到了月季品种“金斯莱克”的再生植株以及“萨蔓莎”愈伤组织分化的芽状体和叶状体。     

白芦笋花药愈伤组织诱导及绿芽分化

为建立芦笋单倍体育种技术体系以解决国内芦笋新品种资源贫乏问题,笔者以白芦笋花药为外植体进行了愈伤组织的诱导及绿芽分化研究。试验结果表明,芦笋花药经过4d的冷藏(4℃)处理后,接种于含有NAA2.0 mg/L、6-BA1.0mg/L及6%蔗糖的1/2MS培养基上,可产生愈伤组织;每年的4月份接种花药的愈伤组织诱导率最高,8月份次之,11月份最低。品种间、同一品种不同单株间花药的愈伤组织诱导率不同,以‘UC155’品种(18.9%)最高,显著高于其他三个品种‘UC142’(11.6%)、‘Gijnlim’(10.3%)、‘Thielim’(5.8%),所有试验株系中以‘UC155’-8的愈伤组织诱导率最高,达83.5%;每日补充光照强度为1000 lx的光照,比全暗培养更有利于芦笋花药愈伤组织的形成;花药接种前进行离心处理(4000 r/min)30 min,不能提高愈伤组织诱导率;愈伤组织转瓶培养于NAA 0.5 mg/L、6-BA 1.0 mg/L及3%蔗糖的MS培养基上,能分化出无根绿芽;不同品种间绿芽分化率有差别,以‘Gijnlim’品种最高(67.2%),‘UC142’品种最低(14.1%);未分化绿芽的愈伤组织再转入于不含植物生长调节剂的MS培养基上培养,部分愈伤组织能分化出绿芽     

提高水稻同源四倍体花药培养愈伤诱导率的研究

以同源四倍体水稻原种零轮、02428、培矮64、轮回422及其成对二倍体为实验材料,分别以琼脂浓度（0.5%、0.75%和1%）、碳源种类（蔗糖和麦芽糖）与用量（60 g L^-1和80 g L^-1）、不同激动素（KT和Zip）以及不同基本诱导培养基（MS、N6、M8、NB）等因素为变量,共设计26种诱导培养基（2种对照）,进行了花药愈伤诱导实验,旨在筛选出愈伤诱导率的培养基优化组合。结果表明,琼脂浓度0.75%和60 g L^-1蔗糖组合对提高水稻花药诱导率作用较好, N6培养基及其衍生NB培养基对提高四倍体水稻特别是粳稻花药诱导率有着较好作用。激动素的加入,能显著提高愈伤诱导率,最高可达到84%。在供试的26种培养基中,有6种诱导培养基得到较高的四倍体粳稻愈伤诱导率,有2种诱导培养基得到较高的四倍体籼稻愈伤诱导率,在8种较好的诱导培养基中有3种不但有较高的愈伤诱导率而且具有较高的绿苗率。     

宁夏枣树花药离体培养再生体系的建立

采用宁夏3个特色枣树品种的花药为外植体,探索MS培养基中不同激素、激素的不同浓度配比对愈伤组织诱导、不定芽分化的影响,建立其愈伤组织诱导及不定芽再生体系。结果表明,细胞分裂素6-BA对宁夏枣树胚性愈伤组织诱导起重要作用,AgNO3对愈伤组织分化不定芽影响显著。经过正交试验分析得出,最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D1.0 mg/L+IBA 0.4 mg/L;最佳分化培养基是：MS+6-BA 1.5 mg/L +IBA 0.6 mg/L +AgNO3 0.5 mg/L。在最佳诱导培养基中灵武长枣诱导率最高,达89.0%,在最佳分化培养基中同心圆枣分化率最高,达88.0%。     

小麦花药愈伤组织耐盐变异体的筛选

在培养基中加入一定浓度NaCl,对小麦F_1花药愈伤组织的耐盐变异体,进行细胞水平上的筛选.采用直接筛选法及逐渐增加盐浓度筛选法,结果表明,后者是提高耐盐变异体频率的有效措施.C_(17)+0.1%NaCl(转移愈伤组织)C_(17)+0.3%NaCl及C_(17)+0.1%NaCl(转移愈伤组织)C_(17)+0.5%NaCl处理的绿苗分化率,较直接筛选法分别提高5.06及15.0倍.在较高(加0.3%NaCl)盐含量的培养基上分化的花粉植株及其后代(H_2、H_3)表现耐盐性较强.获得了在0.4%含盐量土壤上种植能正常或基本正常生长的高耐盐株系3个.     

中国粗榧愈伤组织诱导及再生体系的建立

（郑州大学生物工程系,郑州 450001）