长期冻存对昆虫细胞系SL2和NIH-SaPe-4活性的影响

对2种双翅目昆虫细胞系(黑腹果蝇胚细胞系SL2以及麻蝇胚细胞系NIH-SaPe-4)38个月长期液氮深低温保存效果进行了研究,通过对冻存时间和保护剂对2种细胞系冻后活力、圆度以及恢复时间影响的测定,比较了3种不同配方冻存保护液的效果。结果表明:2种昆虫细胞系冻后活性均随着冻存时间的增长而逐渐降低。长期冻存期中,使用90%胎牛血清(FBS)+10%二甲基亚砜(DMSO)冻存SL2效果较好,NIH-SaPe-4使用10%DMSO即可满足冻存的需要,而无需额外添加高浓度FBS。甘油不适用于这2种昆虫细胞系的长期保存。     

大孔吸附树脂对白蜡虫多糖脱色及抗氧化活性的影响

试验研究了大孔吸附树脂对白蜡虫粗多糖脱色效果的影响和脱色前后多糖抗氧化活性的变化。通过静态吸附法确定大孔吸附树脂NKA-9较适合白蜡虫粗多糖脱色,动态吸附法确定白蜡虫多糖脱色条件为30 ℃下10 mg·mL^-1多糖溶液（pH值8.0）以1 BV·h^-1流速上样1 BV后,以5 BV水洗脱,脱色率为71.4%、脱蛋白率51.9%、多糖收率为60%。体外细胞抗氧化结果表明：脱色前多糖溶液仅在1 000 μg·mL^-1浓度时能提升过氧化氢损伤人神经母细胞瘤细胞的存活率,而脱色后多糖溶液在10 1 000 μg·mL^-1范围内均能提升模型细胞存活率,其中,1 000 μg·mL^-1的脱色白蜡虫多糖与模型组的差异显著（P<0.01）,结果表明,脱色后多糖抗氧化能力增加。     

华北沙地小黑杨林生物量及其与树冠关系的研究

应用相对生长法和典型样方调查法对华北沙地不同密度、不同年龄的小黑杨人工林生物量和生产力进行了估算,同时对树冠与生物量的关系进行了研究。结果表明:密度为1 000株· hm^-2、500株· hm^-2、250株· hm^-2的小黑杨林分(27年生)的生物量分别为85.31 t·hm^-2、102.60 t·hm^-2、86.74 t·hm^-2;生产力分别为3.16 t·hm^-2·a^-1、3.80 t·hm^-2·a^-1、3.21 t·hm^-2·a^-1,密度500株· hm^-2为华北沙地小黑杨的合理密度。不同密度小黑杨不同器官生物量所占的比例差异不明显,地上部分生物量在83% - 86%之间,其中干57% - 62%,枝11% - 16%,叶2% - 3%,皮8% - 10%;地下部分生物量在14% - 17%之间。对不同年龄小黑杨的生物量和生产力研究表明,27年生的比23年生的分别高59.74%和36.20%。同时,23年生小黑杨的根、叶所占比例明显高于27年生的根、叶比例,但是干生物量所占比例低于27年生小黑杨,反映了23年生小黑杨的生物量和生产力处在快速生长期,小黑杨的轮伐期应在27年以后。小黑杨生物量与树冠之间存在极显著的相关关系,其中树干生物量与树冠指数之间可以用线性模型y=ax+b描述,利用遥感技术可以反映小黑杨林树干生物量,为进一步利用遥感预测小黑杨木材材性提供了重要的基础数据。     

鹅掌楸Genomic-SSR反应体系优化

The optimization of the Genomic-SSR reaction system is a basic protocol when the Genomic-SSR is used for genetic analysis in Liriodendron. The concentrations of Mg²⁺, dNTP, Primer and rTaq were tested by L₉(3⁴) orthogonal experiment and single factor gradient experiment to gain the optimal reaction system. The results indicated that the optimal reaction system should contain 75 ng of genomic DNA, 1 μL of 10×buffer, 0.4 μL of 10 mmol·L^-1 dNTP, 0.75 μL of 2.5 mmol·L^-1 MgCl₂, 0.25μL of 10 μmol·L^-1 Primer, 0.05 μL of 5 U rTaq and final volume of 10μL. Repeated trials and two verification tests showed that this optimal reaction system was stable, reliable, efficient and suitable for the applications of Genomic-SSR in Liriodendron population genetics and quantitative genetics research.     

中国思茅松林生态服务功能价值动态研究

对我国思茅松林生态服务功能价值20年来的变化规律进行了研究。1987—2002年期间,思茅松林面积呈下降趋势,思茅松林的生态服务功能价值也相应下降,从365.81×10⁸元·a^-1降至313.50×10⁸元·a^-1,之后随思茅松林资源的恢复而增至328.44×10⁸元·a^-1;思茅松林生态服务功能价值随着资源的增长而增长,随着思茅松林资源的消耗而降低。思茅松林单位面积生态服务     

花吊丝竹组培快繁育苗技术研究

The rapid propagation technology of Dendrocalamus minor var. amoenus was studied by investigating the effects of some factors such as selection of explant, phytohormone, culture method etc. The results show that: The best month for explant collection of D. minor var. amoenus is May and June. The best position for explant collection is middle-upper part knot of semi-lignification branch. The clump shoot could be induced in medium with 3/4MS+BA 4 mg·L^-1+KT 1 mg·L^-1+CW 100 mL·L^-1. The optimal medium for subculture of D. minor var. amoenus is 3/4MS+BA 2 mg·L^-1+KT 1 mg·L^-1+CW 100 mL·L^-1. Liquid medium is beneficial for improving growth condition and proliferation rate of clump shoot. The medium 1/5MS+IBA 8 mg·L^-1+ NAA 4.5 mg·L^-1 + KT 0.1mg·L^-1 is a relative suitable rooting medium for D. minor var. amoenus, with the rooting method of synchronized treatment first and then rooting. The survival rate of seedlings could be higher than 90% in substrate of fine river sand∶peat soil=3∶ 1.     

落叶松胚性细胞系分化能力及染色体变异的研究

以落叶松未成熟合子胚诱导的16个胚性细胞系为材料,对继代培养的细胞系间及不同世代间染色体数目和体细胞胚胎发生率进行对比研究,结果表明:落叶松胚性细胞系随继代培养时间的增加,总体体细胞胚分化能力逐渐下降,平均体细胞胚分化率从继代培养第7次后的335.6个·g ^-1降低到第22次后的268.2个·g^-1,细胞染色体数目变异率逐步增加,从5.4%上升到40.0%;不同细胞系间体细胞胚分化能力及稳定性差异明显,分化能力较高的细胞系染色体数目变异几率相应较小,在继代培养第25次后,细胞系a214染色体数目变异率为0%,体细胞胚分化率为416.1个·g ^-1。     

山苍子AFLP反应体系的建立及其引物筛选

通过对山苍子幼嫩叶片、顶芽、花蕾3种组织的DNA提取效果分析和对影响酶切及选择性扩增效果的4个主要因素(酶切时间、Mg²⁺浓度、dNTPs浓度、引物浓度)的比较研究,建立了适合于山苍子AFLP分析的技术体系。结果表明,山苍子的顶芽是较好的DNA提取材料;山苍子基因组DNA经5 U EcoR I和5 U Mse I酶切1 h即可完全酶切;最佳的选择性扩增体系为20 μL反应体系中含有1.0 U rTaq聚合酶、2.0 μL 10×PCR缓冲液、1.8 μL 25 mmol·L^-1MgCl₂、1.4 μL 2.5 mmol·L^-1dNTP、100 ng·μL^-1引物各1.0 μL。使用该反应体系获得了清晰、稳定的DNA指纹图谱,并筛选出10对多态性较好的AFLP引物组合,为利用AFLP标记技术进一步开展山苍子种群遗传结构、遗传分化等研究奠定了基础。     

油茶SRAP-PCR反应体系的优化

Camellia oleifera is one of the important oil tree species in south China, and C. oleifera industry is quickly developed with the support of the national policies in recent years. The disorder of C. oleifera varieties is one of the key issues restricting the development of C. oleifera industry. Because of high polymorphism, good repeatability, less use of DNA and so on, SRAP as a new marker was used in identification of cultivars, analysis of genetic resources and genetic diversity in recent years. In this paper, the orthogonal design was used to optimize SRAP-PCR system for C. oleifera by 5 factors (Mg²⁺, dNTPs, primer, Taq polymerase, DNA template) and 4 levels, respectively. The data were analyzed by software SPSS V13.0. A suitable SRAP-PCR system (20 μL) was established as: 75 ng DNA template, 1.5 mmol·L^-1 Mg²⁺, 0.15 mmol·L^-1 dNTPs, 1U Taq DNA polymerase, 0.4 μmol·L^-1 primer, 1×PCR buffer. The result of optimal SRAP-PCR system will provide a foundation for the identification of C. oleifera cultivars.     

不同径级云南松各部位生物量及其分布规律

利用标准木法测定了不同径级云南松人工林生物量及生物量在垂直方向上的分布规律。结果表明:云南松生物量随径级的增大而增大,5~7.5 cm径级云南松生物量为(6.642±1.129)×10³ g·株^-1;7.6~12.5 cm径级为(2.533±0.387)×10⁴ g·株^-1;12.6~17.5 cm径级为(5.897±1.331)×10⁴ g·株^-1;17.6~22.5 cm径级为(1.063±0.211)×10⁵ g·株^-1;≥22.6 cm径级为(2.208±0.409)×10⁵ g·株^-1。在不同径级组成中云南松各器官生物量的分配比例存在一定的变化:随着径级的增大,主干和根部生物量呈现先下降后上升的趋势,枝和叶生物量占总生物量的比例为先升高后降低,而树皮的比例则一直下降。主干生物量在0~2 m高度层最大,占总生物量的27.62%。6~8 m高度层枝、叶生物量最大,分别占各自总生物量的35.85%、38.34%。云南松根系生物量主要分布在0~30 cm土层深度内,占总根系生物量的65.49%。     

分月扇舟蛾颗粒体病毒生物测定

从黑龙江省双城林场采集健康的分月扇舟蛾2龄幼虫,将室内保存一年的分月扇舟蛾虫尸研碎,分离提纯得到纯净的颗粒体病毒。将病毒悬液稀释为1..58×103PIB·mL-1,1.58×104PIB·mL-1,1.58×105PIB·mL-1,1.58×106PIB·mL-1,1.58×107PIB·mL-1,1.58×108PIB·mL-1,1.58×109PIB·mL-17种浓度,采集新鲜的杨树叶分别浸入上述不同浓度的悬液,对采集的健康幼虫进行接毒。9天实验结果表明,浓度为1..58×103PIB·mL-1时校正死亡率最小(7.32%),浓度是1.58×109PIB·mL-1时校正死亡率最大(97.36%),浓度对数和死亡几率值的回归直线方程为y=1.946 0.558x,LC50为2.97×105PIB·mL-1。1.58×105PIB·mL-1,1.58×106PIB·mL-1,1.58×107PIB·mL-1,1.58×108PIB·mL-1,1.58×109PIB·mL-1w所对应的半致死时间(LT50)分别为8.55d,6.89d,5.9d,4.65d,4.08d。随着浓度的增大,LT50逐渐缩短,说明该病毒的毒力较强,作为杀虫剂具有很好的应用潜力。     

油桐尺蠖核型多角体病毒(BusuNPV)生物学与检测技术研究

油桐尺蠖(Buzura suppressartia Guenee)又称油桐尺蛾、大尺蠖,是一种暴食性害虫,主要危害茶、油桐、柑桔、杨梅、桉树等多种植物,常造成巨大的经济损失.国内主要分布在湖北、湖南、广东、广西等地区,国外在孟加拉西部以及印度地区有分布.目前对其采取的治理方法主要为化学农药防治,虽能起到一定的防效,却带来了污染环境,伤害天敌,生态环境平衡失调,降低茶叶、柑橘、杨梅等质量的严重后果.     

黄竹细胞悬浮培养和原生质体分离*

以牡竹属黄竹（ＤｅｎｄｒｏｃａｌａｍｕｓｍｅｍｂｒａｎｃｅｕｓＭｕｎｒｏ）的竹节及无菌苗根颈为外植体，培养于含有５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ、０．２ｍｇ／ＬＫＴ和２００ｍｇ／ＬＬＨ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织，然后移至相同成份或不同浓度２，４－Ｄ的液体培养基中，进行悬浮培养，以建立分散性良好的悬浮细胞系。利用悬浮细胞和无菌苗叶片经酶解获大量原生质体，其产量分别约为每克鲜重２．５×１０５个和５×１０５个，活力均可达８０％。     

松褐天牛成虫高毒力绿僵菌菌株筛选及液体振荡培养条件

对3株绿僵菌菌株通过不同温度水浴处理,发现了孢子的萌发条件;并开展了3菌株对松褐天牛成虫的毒力测定,筛选出Ma₇₈₉菌株的致病力较强。通过正交试验对其液体振荡培养条件进行了分析,选出了菌丝体生长最适培养基为蔗糖20 g·L^-1,酵母粉10 g·L^-1,KH₂PO₄ 3.0 g·L^-1,MgSO₄·7H₂O 1.0 g·L^-1,CaCl₂ 0.5 g·L^-1;培养液生孢子最适培养基为蔗糖20 g·L^-1,蛋白胨10 g·L^-1,KH₂PO₄ 1.5 g·L^-1,MgSO₄·7H₂O 2.0 g·L^-1,CaCl₂ 0.5 g·L^-1。     

Simplified and improved somatic embryogenesis of hybrid larches (Larix × eurolepis and Larix × marschlinsii). Perspectives for breeding

? Development of clonal propagation method, such as somatic embryogenesis, has numerous applications such as mass-production of genetically improved plants and the amenability of embryogenic cultures to cryogenic storage. Since the 90’s, researchers at INRA have engaged in research on somatic embryogenesis in Larix species (Larix × eurolepis, Larix × marschlinsii).

? The aim of this work was to improve and to simplify all steps of somatic embryogenesis and to apply this protocol to the new hybrid variety REVE-VERT.

? The somatic embryogenesis initiation frequency from immature zygotic embryos was high (65%) on a medium with reduced plant growth regulator concentrations (2.2 μM of 2.4-dichlorophenoxyacetic acid and 2.3 μM of 6-benzyladenine). Simplified cryopreservation method (no need of programmable freezer) of the embryonal masses resulted in 100% recovery of cryopreserved lines. Maturation of a large number of somatic embryos was greatly improved when embryonal masses were dispersed on filter paper placed on medium containing high concentration of gellan gum (8 g·L^?1). Under these conditions, 94% of the lines matured somatic embryos that developed into plantlets. Clearly ageing and cryopreservation did not reduce embryogenic potential of embryonal masses.

? Requirements for the effective integration of somatic embryogenesis into the larch breeding programme are discussed.

     

Cd及矿质营养元素在结缕草植株中的积累特性

以水培方法研究了镉在结缕草中的积累特性及对矿质元素含量的影响。结果表明:Cd²⁺处理下结缕草根、叶中镉的分布比例为细胞壁>胞液>细胞器。低浓度(1、10 mg·L^-1)处理下,结缕草茎细胞液中镉的比例分别较细胞壁中镉的比例高出61.70%、69.60%;高浓度(100 mg·L^-1)处理下,细胞壁中镉的比例较细胞液中镉的比例高出47.70%。低浓度(1、10 mg·L^-1)处理的结缕草地下部的镉含量显著高于地上部,而高浓度下(100 mg·L^-1)结缕草地上部的镉含量较地下部显著提高37.31%;随着处理浓度的升高,镉转运系数显著提高,100 mg·L^-1处理下镉转运系数分别较1、10 mg·L^-1提高了4.12、2.45倍。高浓度(100 mg·L^-1)处理下,结缕草地下部N、K、Ca、Mg含量下降,P、S含量有所提高。高浓度(100 mg·L^-1)镉处理下,地上部N含量较对照显著上升16.11%,Ca、Mg的含量均较对照升高;不同浓度镉处理的地上部P、K、S含量均较对照降低。     

晚松悬浮细胞系的建立和原生质体的分离

植物悬浮细胞系的建立和原生质体的分离已被广泛地应用于生理学、生物化学、细胞学、遗传学及分子生物学的研究 ,它是生物技术中进行原生质体培养、杂交、基因转移、突变系筛选等项研究的较理想手段[1] 。针叶树在这方面的研究起步虽晚 ,但至今已取得令人瞩目的进展[2 ] 。晚松     

4种药剂对沙棘绕实蝇成虫的触杀活性

目的]沙棘绕实蝇在我国新疆和内蒙古地区对沙棘果实造成重大危害,如何选取高效、易降解、低残留的农药种类成为当前沙棘绕实蝇成虫防控工作中的迫切课题。[方法]野外采集沙棘绕实蝇蛹,室内待其羽化后,雌、雄分组放置于不同浓度梯度的4种农药条件下进行触杀实验。[结果]通过KT_(50)(median knockdown time)的数据分析结果显示,同种农药同种浓度时,药物对雄性的触杀效果比雌性强,其中苦参碱在浓度为0.005 mg·m L~(-1)时,雄性KT_(50)值为39.21 h,小于雌性KT_(50)值56.13 h,但个别情况下出现对雌性触杀效果比雄性高的情况,如苦参碱在浓度为0.05 mg·m L~(-1)时,雄性KT_(50)值为15.76 h,大于雌性KT_(50)值12.39 h。通过测定4种农药对沙棘绕实蝇成虫的致死中浓度LC_(50)(median lethal dose),得出触杀作用时间为12 h时,LC_(50)分别为:印楝素7.737 mg·m L~(-1)、高效氯氟氰菊酯0.002 mg·m L~(-1)、苦参碱0.042 mg·m L~(-1)、阿维菌素0.008 mg·m L~(-1),其触杀毒力次序为:高效氯氟氰菊酯阿维菌素苦参碱印楝素;触杀作用时间为24 h时,LC_(50)分别为:印楝素6.963 mg·m L~(-1)、高效氯氟氰菊酯0.001 mg·m L~(-1)、苦参碱0.008 mg·m L~(-1)、阿维菌素0.001 mg·m L~(-1),其触杀毒力次序为:阿维菌素高效氯氟氰菊酯苦参碱印楝素;触杀作用时间为48 h时,LC_(50)分别为:印楝素0.891 mg·m L~(-1)、高效氯氟氰菊酯0.001mg·m L~(-1)、苦参碱0.002 mg·m L~(-1)、阿维菌素0.001 mg·m L~(-1),其触杀毒力次序为:阿维菌素=高效氯氟氰菊酯苦参碱印楝素。[结论]阿维菌素和高效氯氟氰菊酯对沙棘绕实成虫的触杀效果较显著,其次为苦参碱,印楝素的触杀效果不显著。     

长江滩地I-72杨人工林生物量和生产力研究

应用典型样地调查法和相对生长法,测定了长江滩地4种密度14年生I-72杨人工林的生物量与生产力.发现在密度250～370株·hm-2的范围内,I-72杨林分生物量从102.40 t·hm-2增加到147.20 t·hm-2,生产力从7.31 t·hm-2·a-1增加到10.52 t·hm-2·a-1.在所调查的林分中,地上部分生物量占总生物量的90％,其中干54％、枝28％、皮7％、叶1％;地下部分生物量仅占总生物量10％.在4种密度的林分中,I-72杨人工林生物量的径级分布表现为波浪形,随着林分密度的增大,生物量高峰出现时的径阶有减小的趋势.