日本发生的葡萄病毒类病毒病

目前,被认为是病毒或病毒性的葡萄病害有３０多种,从葡萄上检测出病毒约３０种（Ｂｏｖｅｙ等,１９８０）,并已弄明,其中的２０种病毒的传播媒介为昆虫、线虫、土壤菌（表１）。其中,世界性广泛发生、危害严重的有葡萄扇叶病、葡萄卷叶病,尤其在欧美,以扇叶病为代...     

葡萄扇叶病毒的分离、鉴定、提纯及血清学研究

从表现扇叶和叶肉褪绿斑驳症状的先锋、葡萄园皇后和北醇的杂交单株中分离到3个与国外扇叶病毒(GFV)DIL分离物相似的GFY-DIL类似物。它们在昆诺藜、苋色藜、千日红和菜豆上表现症状。提纯病毒颗粒为直径约30nm的球形颗粒。在免疫双扩散试验中均与扇叶病毒抗血清形成完全融合的沉淀线。免疫电镜下病毒颗粒受扇叶病毒抗血清的修饰。利用三种间接异种动物抗体双夹心法和金黄色葡萄球菌蛋白A夹心酶联免疫吸附试验(PAS—ELISA)从感病的葡萄植株或组培苗叶片中检测了GF。间接异种动物抗休双夹心法能检测提纯GFV的最低浓度为1.6ng—8ng/ml。春季的芽和幼叶为合适的检测器官。     

葡萄扇叶病毒的分离和鉴定简报

葡萄病毒类病害是影响葡萄生产的一个主要因素,至今世界上报道的有二十余种。其中最主要的两种病害一扇叶病和卷叶病。本文首次报道从我国分离出葡萄扇叶病毒。一、田间症状:北京地区5月上旬“巨峰”葡萄病株在田间症状有二类。1.植株矮小,腋芽萌发受阻,下部叶片花叶,新生叶小而黄,整个植株生长势弱。症状发展至7月上甸,黄花叶片边缘有干枯现象,植株不挂果,无产量。     

线虫传植物病毒病

自1958年 Hewitt 证明检索剑线虫Xiphinema index 可传染葡萄扇叶病毒以来,已有很多报道。目前已知有20种以上的病毒可由线虫传染(见表1、2)。此外,还有数种病毒虽未确认线虫传染,但具有线虫传染的相似性状,如可可坏死病毒,葡萄铬黄花叶病毒,樱桃李潜隐环斑     

山东葡萄产区主要病毒病发生危害调查

采用DAS- ELISA检测方法 ,对山东省葡萄主产区的葡萄病毒病害进行了调查 ,明确危害当地葡萄主要是葡萄扇叶病毒 (grapevine fanleaf virus ,GFLV)和葡萄卷叶病毒 (grapevine leafroll associated virus,GLRaV)。病毒感染率为 59.1% ,其中鲜食品种病毒感染率为57% ,酿酒品种的感染率为 62.5%。苗木与成龄树感染GFLV的比率分别为 78.4%和56% ,感染GLRaV的比率分别为55.3%和70%。病毒感染率较高的品种有霞多丽、梅露汁和佳丽酿。病毒病的发生与品种、栽培年限、繁殖方式和苗木来源有关 ,其中带毒苗木是葡萄病毒病传播的关键因素     

田间如何诊断线虫传毒病害

田间如何诊断线虫传毒病害李笃肇（西南农业大学植保系北碚６３０７１６）１９５８年赫尤特首次发现葡萄扇叶病毒是由标准剑线虫（ｘｉｐｈｉｎｅｍａｉｎｄｅｘ）传播。现已证明植物寄生线虫５个属剑线虫（Ｘｉｐｈｉｎｅｍａ）、长针线虫（Ｌｏｎｇｉｄｏｒｕｓ）、拟长...     

葡萄病毒B CP基因植物表达载体构建及烟草遗传转化

葡萄病毒B Grapevine virus B(GVB)是葡萄皱木复合病中栓皮病的病原,为开展抗GVB转基因研究,本研究利用RT-PCR技术克隆GVB外壳蛋白(coat protein,CP)基因,与植物表达载体pRI 101-AN连接构建植物表达载体pRI-GVB CP。采用电击转化法将植物表达载体pRI-GVB CP导入农杆菌LBA4404,并利用农杆菌介导的叶盘转化法将外源基因导入西方烟‘37B’。共获得16个烟草再生株系,PCR检测其中3个株系为阳性,阳性株系播种获得的64株T_1代植株中有30株扩增到目的条带,阳性率为46.9%,表明目的基因GVB cp成功导入烟草并可成功遗传到子代。28株T_1代转基因植株接种病毒进行抗病性鉴定,其中有6株对接种病毒GVB具有抗性。     

福建省葡萄病毒病的调查和研究

１９９０～１９９２年作者对福建省葡萄产区进行了抽样调查，发现该省约３１％的果园有葡萄扇叶病（ＧＦＬＶ）和葡萄卷叶病（ＧＬＲＶ）。在调查的１１３００株葡萄中（６０２亩），ＧＦＬＤ株发病率为１３．２７％，造成葡萄减产２７．２％；ＧＬＲＶ株发病率为７．３％，减产２１．５％。病株表现为不同程度的种性退化，生长赢弱、停滞，果实品质下降，果粒成熟不齐。     

福建省葡萄病毒病的调查和研究

１９９０～１９９２年作者对福建省葡萄产区进行了抽样调查，发现该省约３１％的果园有葡萄扇叶病（ＧＦＬＶ）和葡萄卷叶病（ＧＬＲＶ）。在调查的１１３００株葡萄中（６０２亩），ＧＦＬＤ株发病率为１３．２７％，造成葡萄减产２７．２％；ＧＬＲＶ株发病率为７．３％，减产２１．５％。病株表现为不同程度的种性退化，生长赢弱、停滞，果实品质下降，果粒成熟不齐。     

日本果树母本树病毒病检查要点修正

确保果树母本树的健康以及利用无病接穗繁殖树苗,是防治果树病毒病的基本对策。日本自1961年起,作为振兴果树生产的一环,建立了果树母本树的病毒病检疫制度。1965年前主要是柑桔和苹果,1966年以后又增加了桃、樱桃和葡萄,共确定五种母本树为检疫对象。在这期间,由于对温州蜜柑矮缩病、苹果高接病、桃和樱桃坏死环斑病毒以及葡萄扇叶病毒等加强了检查,取得     

酵母pac1基因介导对葡萄B病毒的抗性

为明确广谱性抗病毒基因—酵母pac1基因对葡萄B病毒(Grapevine virus B,GVB)的抗性效果,通过农杆菌介导的遗传转化,将pac1基因导入西方烟37B,对转基因植株进行PCR鉴定及Southern blot分析,通过病毒摩擦接种观察症状以及实时荧光定量RT-PCR检测植株体内病毒含量,并对转基因植株抗病性进行初步鉴定。结果表明,目的基因pac1成功导入并整合至西方烟37B基因组,共获得10个转基因株系。不同株系的T1代烟草中阳性植株比例为16.7%~72.7%,表明目的基因可成功遗传到子代。接种病毒后转基因植株普遍延迟发病,但后期症状与非转基因对照相似,其中仅1个转基因株系B6具有不表现典型症状等抗性反应。接种植株病毒含量检测中,所有转基因植株均检测到病毒存在,但表现为抗病的B6株系中病毒含量显著低于非转基因对照,表明该转基因植株虽不能完全抵抗GVB侵染,但对GVB具有耐病性。     

欧盟委员会批准转基因玉米MON863进入欧盟动物食品市场

欧盟委员会已批准美国盂山都公司开发的具有抗叶甲虫性能的转基因玉米进入欧盟动物食品市场。今年6月。欧盟环境部长理事会未能就这一问题达成一致，在这种情况下欧委会自主做出决定，德国专利局作为大会报告起草人正式批准该产品在欧盟使用。     

葡萄扇叶病毒引起的寄主细胞病变研究

 电镜观察了葡萄扇叶病毒杭州分离物(Grapevine fanleaf virus Hangzhou isolate,GFLV-H)侵染苋色藜(Chenopodium amaranticolor)和昆诺藜(C.quinoa)的细胞超微结构变化。病毒粒子存在于叶肉组织薄壁细胞的细胞质内,常成单纵列排列在小管结构中,小管形成聚集体。在系统感染的昆诺藜细胞中位于管状结构中的病毒粒子穿过胞间连丝。2种感病寄主细胞质内膜结构增生,在核周围形成含细纤维状物质的小囊泡。液泡边缘存在少许小泡,有多泡体和髓鞘样结构伸入液泡,叶绿体和线粒体等细胞器也发生不同程度的变化。     

葡萄茎尖组培苗中扇叶病毒的酶联（ELISA）检测

目前使用的扇叶病毒(GFLV)检测方法包括:接种昆诺藜与千日红、嫁接接种砂地葡萄(Vitis rupestris Scheele)的St.George 品种、免疫双扩散,抗体致敏乳胶试验、免疫电镜及酶联免疫吸附试验(ELISA)。(ELISA)方法由于无需特殊设备,从而得到最广泛应用。在植株体内,GFLV 的含量随季节而变化。在某些时期,含量很低,即使用ELISA,也无法测出其中的 GFLV。茎尖     

用生物素标记外壳蛋白基因cDNA探针检测葡萄扇叶及马铃薯Y病毒

 以葡萄扇叶病毒(GFV)干u马铃薯Y病毒(PVY)外壳蛋白基因的重组质粒为模板,用聚合酶链式反膨技术(PCR)分别合成了长度为1.5kb和0.75kb的生物素标记双链cDNA探针,在斑点杂交反应中,探针的最适使用浓度为1/100,GFV探针检测GFV-RNA的灵敏度为10pg,检测提纯GFV的灵敏度为25pg,检测感病苋色藜的最大稀释倍数为10000倍;PVY探针检测PVY-RNA的灵敏度为30pg,检测提纯PVY灵敏度为500pg,感病烟草检测的最大稀释度为8000倍,阴性对照均无杂交信号出现。     

利用RNA干扰介导抗病性获得兼抗四种病毒的转基因马铃薯

为获得兼抗马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)、马铃薯卷叶病毒(Potato leaf roll virus,PLRV)和马铃薯潜隐花叶病毒(Potato virus S,PVS)4种病毒的转基因马铃薯新材料,分别以这4种病毒全长CP基因为模板,通过设计PCR引物和亚克隆获得4种病毒CP基因相对保守区段的基因片段,并将其拼接成融合基因,以载体pHANNIBAL和pBI121为基础,构建RNA干扰(RNA interference,RNAi)载体,利用农杆菌介导的转基因体系进行马铃薯遗传转化,并对获得的转基因马铃薯进行病毒抗性检测。结果表明,所获得的融合基因片段RH1和RH2,酶切鉴定分别得到长度为1 200 bp的条带,与预期片段相符;构建了含pdk内含子和RH1、RH2融合基因的RNAi植物表达载体,经Bam H I/Sac I双酶切,获得长度约3 200 bp的片段,表明RNAi植物表达载体pBI121-pRH构建成功;转化易感病毒马铃薯品种陇薯11号,PCR检测和PCRSouthern杂交分析表明融合基因已整合到陇薯11号马铃薯基因组中;抗病性检测显示4株转基因马铃薯植株对4种病毒均免疫。表明利用RNAi可筛选出抗多种病毒的转基因马铃薯新种质。     

菊花母株病毒鉴定及其茎尖组培脱毒苗的病毒检测

选用显斑驳症状的兼云香、赤线金钩和叶片黄化的泉乡万圣和泉乡冲天等共4个品种的葡萄母株，龙茎脱毒获得的茎组培苗用生物学和血清学方法检测葡萄母株和组培苗的带毒情况。鉴定结果表明，兼云香母株（1A）带有葡萄B病毒，其组培苗未能脱去该病毒。赤线金钩母株（2A）带有番茄不孕病毒（TAV）和葡萄B病毒（CVB）复合侵染，其组培苗脱去了TAV病毒还带有CVB病毒。万乡泉圣母株（3A）和泉乡冲天母株（4A）带有菊花B病毒，其组培苗均脱去了此病毒，是真正的脱毒组培苗。     

欧盟环境部长们审慎回应转基因物质阻滞计划

在首轮议案讨论会上,欧盟环境部长们同意成员国有权阻滞转基因作物的种植。但是,有几位部长对议案提出异议,认为应按2008年部长会议要求,待欧盟委员会对转基因作物许可推进计划实施后再提给予成员国权利。环境     

应用基因工程创造抗黄矮病毒转基因小麦新种质

应用花粉管通道法和基因枪法将大麦黄矮病毒ＧＰＶ株系外壳蛋白基因导入小麦栽培品种，获得了抗大麦黄矮病毒ＧＰＶ株系的转基因小麦株系（文献检索证明世界上无任何其它抗病毒转基因小麦报道）。转基因植株经ＰＣＲ、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ检测，证明ＣＰ基因可稳定遗传到Ｔ３代；经Ｗｅｓｔｅｒｎ测定，证明ＣＰ基因在转基因小麦中已经得到表达；经带毒蚜温室和田间人工接种试验，获得了一些抗病性明显的后代，并得到了ＥＬＩＳＡ验证