细胞的简易冻存技术与冻存液的选择

在组织培养和细胞杂交工作中,培养细胞的保种十分重要。目前保存细胞的唯一途径是液氮冻存。我们试用简易冷冻技术和不同的冻存液,对数种细胞株/系进行了冻存、复苏试验,现报告如下。     

杂交瘤细胞筒易冻存法

细胞杂交获得成功以后,往往由于细胞冻存方法不当或冻存液成分的差异而造成杂交瘤细胞的大量丢失。为此,我们利用本室现有的杂交瘤细胞株进行了几种冻存液及冻存方法的摸索、比较,选择出了一种简单快速的冻存方法,现报告如下。     

弓形虫,泰氏锥虫和伊氏锥虫超低温冷冻保存的试验研究

根据液氮(-196℃)超低温冷冻保存组织细胞的原理,本文选用Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ号保护剂分别对来自体外培养的弓形虫和泰氏锥虫、小鼠血液内的伊氏锥虫以及小鼠腹腔液内的弓形虫进行超低温冷冻保存试验。试验表明,在没有特殊逐步降温设备的情况下,直接冻存法比间接冻存法更方便,效果更为确实。截至报道之日止,弓形虫保存已达954天,泰氏锥虫达1189天,伊氏锥虫达1089天,虫体形态、活力、增殖力和致病性均无明显改变,为虫体的长期保存提供了一较为简便可靠的方法。     

甘油、DMSO细胞冻存液冻存效果的比较实验研究

目的采用两种不同的细胞冻存液对Vero细胞的冻存效果进行研究。方法本实验主要研究甘油和二甲基亚砜这两种细胞冷冻保护剂,以及他们与血清、基础培养基的不同配比与细胞冻存效果之间的关系。结果发现不同的细胞冻存液在一定的所占比例内与细胞复苏后的成活率有一定的相关性,即在一定比例的冷冻剂保护下,细胞冻存的效果才会达到最佳。结论保护剂,无论是DMSO,还是甘油,其比例只有在10%-15%之间,细胞复苏后的成活率才达到最佳状态,即有利于细胞的冻存。且冷冻解冻后的细胞呈现正常的分裂增殖生长模式。     

山羊小肠上皮细胞冻存与复苏的试验研究

在体外细胞培养工作中,为了保种和长期保存其生物活性,细胞的冷冻与复苏成了一个重要的环节.对于体外培养的细胞,必须能够以一种较高的效率实现冻存与复苏,才能达到组织工程种子细胞的要求.试验采用不同的冻存液、不同的冻存速率对体外分离培养的山羊IEC进行冻存与复苏,旨在提出最佳的冻存复苏方案.     

细胞冻存保护剂二甲基亚砜的细胞毒作用

二甲基亚砜(DMSO)是目前最好的细胞冻存保护剂,但也是一种对细胞毒性很大的化学试剂。本研究结果表明,培养液中DMSO浓度为10％时,细胞生长抑制率近100％;1‰浓度时抑制率为35％;即使是0.04‰的浓度,DMSO对细胞的生长也有不利的影响。我们认为,培养液中残存的DMSO是冻存细胞复苏后出现细胞毒现象的主要原因。因此我们提出,冻存细胞时操作过程要迅速;细胞融化后务必洗涤,尽量去除DMSO,是减少其对细胞毒性作用、保证细胞尽快恢复生长增殖的关键步骤。     

细胞冻存保护剂二甲基亚砜的细胞毒作用

二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）是目前最好的细胞冻存保护剂，但也是一种以细胞毒性很大的化学试验剂。本研究结果表明，培养液中ＤＭＳＯ浓度为１０％时，细胞生长抑制率近１００％；１‰浓度时抑制率为３５％，即使是０．０４‰的浓度，ＤＭＳＯ对细胞的生长也有不利的影响。我们认为，培养液中残存的ＤＭＳＯ是冻存细胞复苏后出现的细胞毒现象的主要原因。因此我们提出，冻存细胞时操作过程要迅速；细胞融化务必洗涤，尽量去除ＤＭＳＯ，     

细胞转瓶培养研究进展

转瓶培养细胞作为大规模培养技术成熟前的一种细胞过渡阶段,是各种培养条件（血清浓度、细胞密度、接毒时间）从实验室放大到车间生产进行优化的一个重要步骤。对转瓶技术在细胞大规模培养生产中的地位变化及现状进行了综述,为进一步优化和改进转瓶培养技术提供参考。     

不同细胞密度冻存对奶牛乳腺上皮细胞的影响

试验采用了内蒙古呼和浩特健康荷斯坦奶牛乳腺组织经5代纯化后,将奶牛乳腺上皮细胞分别设为1组（1×104个细胞/mL）、2组（1×105个细胞/mL）、3组（1×106个细胞/mL）、4组（1×107个细胞/mL）4个密度梯度进行冻存,复苏后检测细胞死亡率、贴壁率、凋亡率并进行形态学观察。结果显示,4组复苏后死亡率极显著低于其他3组（P〈0.01）,贴壁率显著高于其他3组（P〈0.05）;3组细胞凋亡率显著低于其他3组（P〈0.05）;3、4组细胞到第3天基本铺满瓶底,生长状态良好。     

不同细胞密度冻存对奶牛乳腺上皮细胞的影响

试验采用了内蒙古呼和浩特健康荷斯坦奶牛乳腺组织经5代纯化后,将奶牛乳腺上皮细胞分别设为1组(1×104个细胞/mL)、2组(1×105个细胞/mL)、3组(1×106个细胞/mL)、4组(1×107个细胞/mL)4个密度梯度进行冻存,复苏后检测细胞死亡率、贴壁率、凋亡率并进行形态学观察。结果显示,4组复苏后死亡率极显著低于其他3组(P<0.01),贴壁率显著高于其他3组(P<0.05);3组细胞凋亡率显著低于其他3组(P<0.05);3、4组细胞到第3天基本铺满瓶底,生长状态良好。     

不同细胞密度冻存对奶牛乳腺上皮细胞的影响

试验采用了内蒙古呼和浩特健康荷斯坦奶牛乳腺组织经5代纯化后,将奶牛乳腺上皮细胞分别设为1组(1×104个细胞/mL)、2组(1×105个细胞/mL)、3组(1×106个细胞/mL)、4组(1×107个细胞/mL)4个密度梯度进行冻存,复苏后检测细胞死亡率、贴壁率、凋亡率并进行形态学观察.结果显示,4组复苏后死亡率极显著低于其他3组(P＜0.01),贴壁率显著高于其他3组(P＜0.05);3组细胞凋亡率显著低于其他3组(P＜0.05);3、4组细胞到第3天基本铺满瓶底,生长状态良好.     

小鼠肾细胞冻存过程中甘油浓度的优化

目的:探讨在冻存小鼠肾细胞过程中,通过优化冷冻保护剂中甘油浓度的加入量,以达到小鼠肾细胞的最佳冻存效果。方法:将小鼠肾细胞制备成单细胞悬液,然后加入不同浓度的冷冻保护剂甘油,冻存细胞,比较细胞冻存效果,计算细胞成活率。四个组的甘油加入量分别为5%、10%、15%、20%。结果:在小鼠肾细胞冻存过程中,当冷冻保护剂中甘油的浓度达到10%时,冻存效果最佳,细胞成活率达到89.57%。     

简易快速巢框穿线法

为了提高工效,迅速地拉紧铅丝,减轻劳动量,我们应用巢框下梁的张力,把铅丝拉紧。这种方法不需要什么工具,操作简便迅速,同时可以拉得很     

真假鱼粉快速简易识别法

饲料原料掺假最多的是鱼粉掺假。常见掺假物的种类有:植物性物质如稻壳粉、麦麸、草粉、米糠、木屑、棉籽粕和菜籽粕等;动物性物质如水解羽毛粉、肠衣粉、血粉、肉骨粉等;另外还有尿素、尿素—甲醛聚合物,铵盐等含氮化合物以及砂石、石粉、黄泥等。 由于大量掺假鱼粉充斥市场,以次充好,以假乱真,给许多畜牧业生产单位尤其是养殖专业户造成了严     

真假鱼粉快速简易识别法

饲料原料掺假最多的是鱼粉掺假。常见掺假物种类有：植物性物质，如稻壳扮、麦茨、草粉、米糠、木屑、棉籽粕和菜籽粕等；动物性物质，如水解羽毛粉、肠衣粉、血粉、肉骨粉等；另外还有尿素、尿素一甲醛聚合物、按盐等含氮化合物以及砂石、石粉、黄泥等。由于大量掺假鱼粉充斥市场，以次充好，以假乱真，给许多畜牧业生产单位尤其是养殖专业户造成了严重损失，如何快速、准确、简易鉴别龟粉的真伪，已成为养殖业技术人员必备的知识。l感官检查法根据鱼粉成分的形状、结构、颜色、质地、光泽度、透明度、颗粒度等特征进行品质鉴定。标准充粉…     

介绍两种简易的冻精颗粒快速转移钳

为提高颗粒冷冻精液的受胎率,我们试制了两种简易的速转钳,经数十个配种站多年实践,较为实用,介绍如下: 一、结构造型1.直速转钳由钳身、轴和柄构成。钳身一支内侧有槽并稍长,一支呈圆锥形可镶入对支槽内,两支组合成13度锐尖;两支基部有轴,两柄之间有钢簧;握柄时