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经半固体诱导,用M-肉汤培养沙门氏菌,离心收集细菌,将其悬浮于PH2.0溶液中,室温缓慢振荡30分钟.再经差速离心取上清液用1NNaOH溶液调pH至7.2左右。经硫酸铵沉淀,过SephacrylS-300柱,收集第一峰。电镜观察、SDS-PAGE、等电聚焦试验及ELISA试验结果均表明提纯的鞭毛蛋白纯度高。 相似文献
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为了探究沙门氏菌鞭毛蛋白共同抗原模拟表位阳性克隆生物学特性。用从噬菌体线性肽库及限制性库中筛选出的阳性克隆1和62分别免疫BALB/c小鼠,其高免血清对单抗de7的竞争-ELISA郊价达10^6以上,而其他血清则无抑制作用。在间接免疫荧光试验中,免疫血清均能与11株不同血清型的沙门氏菌反应,而不与大肠杆菌反应。以上结果表明,筛选获得的沙门氏菌鞭毛蛋白共同抗原模拟表位,不仅很好地模拟了天然表位,而且具有很好的抗原性。这为该表位分子基础及模拟表位疫苗的研究奠定了基础。 相似文献
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吉林省某鸡场1988年从美国引进一批雏鸡,到场后当天即有发生腹泻死亡病例。经的菌分离培养、生化和血清学试验,确诊为由哈特福德沙门氏菌(S.hartford)感染引起的副伤寒,该菌为C1群沙门氏菌,抗原式为6,7:y:e,n,x,在国内外病鸡中检出哈特福德沙门氏菌尚属首次。 相似文献
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沙门氏菌属是一群形态、培养、生化反应和抗原构造相类似的革兰氏阴性杆菌,种类繁多。迄今已发现的沙门氏菌有2000多个种(或型),我国发现近200多种菌型[1]。世界上,每年由沙门氏菌引起的食物中毒病例多达几千万。在我国,沙门氏菌引起的食物中毒占首位,沙门氏菌食物中毒和动物感染沙门氏菌十分严重,已引起各界学者的广泛重视[2]。肉制品是人类沙门氏菌中毒的主要食品之一,而肉制品中的沙门氏菌污染与动物所食饲料中沙门氏菌的污染有直接关系。为了解沙门氏菌在动物饲料中的分布情况,从而判明其对人们健康的潜在威胁程度,保护国内的人畜健康,… 相似文献
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川西北高原的红原、若尔盖、阿坝和松潘等县的部分地区,牦牛发生以高热和下痢为特征的急性或慢性传染病。经调查11个分场的27个发病牛群,发病率为2.76— 相似文献
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为了开发基于乳酸乳球菌载体表达的新型沙门氏菌口服疫苗,试验按照乳酸菌偏好优化密码子,将合成的截短的聚-γ-谷氨酸合成酶A(PgsA′)和截短的沙门氏菌鞭毛融合基因(Salmonella FliC)克隆到载体pUC57中,通过PCR和双酶切鉴定正确性;通过双酶切和T4连接插入目的基因到乳酸乳球菌表达载体pNZ8048中,构建重组质粒pNZ8048-PgsA′-FliC,通过PCR和双酶切鉴定正确性;提取质粒后将重组质粒利用电穿孔法转入乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)NZ9000中,挑取阳性克隆,扩增培养后提取质粒,通过PCR和双酶切鉴定正确性;通过Western-blot检测外源基因在重组菌中的表达情况;对Balb/c小鼠口服免疫重组乳酸乳球菌NZ9000/pNZ8048-PgsA′-FliC,以NZ9000/pNZ8048和PBS为对照,通过ELISA测定小肠黏液中特异性sIgA抗体表达水平。结果表明:成功构建了重组质粒pNZ8048-PgsA′-FliC与重组乳酸乳球菌NZ9000/pNZ8048-PgsA′-FliC,并成功表达PgsA′-Fli... 相似文献
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鹧鸪猪霍乱沙门氏菌的分离鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
1999年6月,某饲养场9日龄鹧鸪发生大批死亡,临床表现为不食、呆立、羽毛松乱、腹泻;病理变化主要表现为肝呈土黄色、出血、并有坏死灶。从肝、脾分离出4株猪霍乱沙门氏菌(Salmonella choleraesuis),均有较强的致病性。 相似文献
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鸡白痢沙门氏菌的分离与鉴定 总被引:4,自引:0,他引:4
在禽类 ,沙门氏菌可引起鸡白痢、鸡伤寒和副伤寒。其中鸡白痢沙门氏菌感染往往是终生带菌的 ,感染母鸡所产的蛋 ,高达 1/ 3带菌。带菌蛋的孵化率低 ,孵出的雏鸡的成活率也低[1,2 ] 。所以 ,鸡白痢所造成的经济损失是巨大的。2 0 0 2年 8月南宁市某养鸡场有一群 8- 11日龄的雏鸡发病 ,发病率为 10 % ,死亡率为1%。经实验室的细菌分离和一系列的生化试验 ,确诊该群雏鸡感染了鸡白痢沙门氏菌。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 培养基血液琼脂平板、麦康凯琼脂平板、伊红美兰平板、半固体培养基等常用培养基 ,由本室制备和保存。1.1.2 生化反应管… 相似文献
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2只从市场收购的野生小灵猫急性发病死亡,病变为肝肿大、坏死、心内外膜出血、肠炎、肠外膜有出血斑点。经实验室检查,分离到1株致病力强的鼠伤寒沙门氏菌,抗原模式为1,4,5,12:1;1,2药敏试验结果表明对多种药物具有较强耐药性。 相似文献
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某鸵鸟场共饲养250余只非洲鸵鸟,自1998年11月开始零星死亡,病鸟临床表现排便不畅,粪便呈卵石状;以胃,肠消化道粘膜充出血为主要病变特征。从送检的两只病死鸟鸟分离到两株细菌,经生化试验,血清学试验证实两株细菌均为鼠伤寒沙门氏菌,其抗原为4,5,1,2:i:1,2。 相似文献
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1 流行病学及临诊症状 1.1病例一 乍浦某鸡场3000多只苗鸡,3日龄时突然出现呼吸困难、喘息倦怠等症状,随即开始死亡,1周左右达到死亡高峰.呈最急性死亡的无明显症状,到后期多数病鸡还出现歪头、角弓反张等神经症状.10日龄时死亡率高达70%. 相似文献
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本试验旨在表达并纯化鞭毛蛋白,为研究并获得高效蛋白佐剂奠定基础。用PCR扩增鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白基因fljB、fljB’和fliC,将扩增产物克隆至pMD19-T Simple Vector上,构建了克隆质粒pMD19-fljB、pMD19-fljB’和pMD19-fliC。克隆质粒经双酶切后将片段克隆至pET-30a中,构建原核表达质粒pET30a-fljB、pET30a-fljB’fliC和pET30a-fliC。经PCR、酶切及测序鉴定后将阳性表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导表达后的菌体经超声处理取上清,用Ni柱进行纯化。Western blotting证实了表达的蛋白能与豚鼠抗鞭毛蛋白血清发生特异性反应。通过优化表达条件,鞭毛蛋白fljB、fliC和fljB’fliC均以可溶性表达,纯化得到的鞭毛蛋白为后续评价其佐剂效应奠定基础。 相似文献
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汤卜逊沙门氏菌的分离鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
从内蒙古呼和浩特市某养鸡场急性死亡雏鸡中分离到18株细菌,经生化和血清学试验确诊为汤卜逊沙门氏菌(Salmonalla thompson)。对该菌进行了药敏试验,至病性试验和透射电镜观察,该菌为C1菌沙门氏菌,抗原结构式为6,7:k:1,5。 相似文献
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从某国进口的鸭羽中检出1株沙门氏菌,经鉴定血清型为沙门氏菌4,(5),12:e,h:e,x.该株细菌可致死小白鼠,可引起雏鸭蹼趾、关节肿瘤,腹泻及生长发育受阻。 相似文献