脱蛋白工艺对茶多糖提取率及蛋白质含量的影响

大量研究表明，茶多糖是一种酸性糖蛋白，具有防辐射、抗凝血、抗血栓、降血糖、增强机体免疫能力、降血压、降血脂、耐缺氧及增加冠状动脉血流量等作用。目前国内外普遍采用的提取、纯化工艺流程为：茶叶→水浸提→浓缩→乙醇沉淀→洗涤→脱蛋白→透析→冷冻干燥得粗产品。对于脱蛋白工艺，最……     

紫薯多糖脱蛋白工艺的研究

以紫薯多糖为原料,研究不同酶添加量、时间、温度和pH值对蛋白质脱除率和多糖损失率的影响。通过正交试验法得到酶法脱除紫薯多糖中蛋白的最优工艺,并与Sevag法和三氯乙酸法相比较。结果表明:酶法是最佳的脱蛋白方法,其脱蛋白最佳工艺为:酶添加量为460 U/mL,温度为50℃,时间为60 min,蛋白质脱除率为87.71%,多糖的损失率为29.55%。     

乌龙茶多糖脱色和脱蛋白工艺研究

本文研究乌龙茶多糖的绿色环保脱色脱蛋白工艺,以活性炭、AB-8树脂、D101树脂、PHD500树脂为材料,比较茶多糖脱色率与多糖保留率差异;以木瓜蛋白酶、AB-8树脂、D101树脂、PHD500树脂为材料,比较蛋白脱除率和多糖保留率差异。结果表明,PHD500树脂0.2g/mL添加量为最佳脱色方法,脱色率为23.19%,多糖保留率为70.78%;AB-8树脂0.2g/mL添加量为最佳脱蛋白方法,脱蛋白率为57.76%,多糖保留率为66.44%。综合考虑,为了提高脱色率、脱蛋白率的效果,节省材料,减少多糖损失和简化工艺流程,确定采用AB-8树脂用于乌龙茶多糖脱色脱蛋白工艺。     

超声微波协同提取橄榄多糖及其脱蛋白工艺的研究

为了研究超声微波协同提取橄榄多糖及其脱蛋白工艺,通过考察超声波功率、微波功率和提取时间等3个单因素对多糖得率影响的基础上,采用正交试验对超声微波协同提取橄榄多糖的工艺条件进行优化,并采用酶法对橄榄粗多糖脱蛋白工艺进行研究。结果表明,超声微波协同提取橄榄多糖的最佳工艺条件为：超声波功率为250 W、微波功率为150 W和提取时间为15 min,在此条件下,橄榄多糖的得率为（10.6±0.3）％;橄榄多糖酶法脱蛋白的最佳工艺条件为：酶解温度为40 ℃、酶解时间为70 min和酶添加量为70 U/g,在此条件下,橄榄多糖脱蛋白率为（77.0±2.5）％。超声微波协同提取法是一种快速有效的提取橄榄多糖的方法。     

笋壳多糖脱蛋白方法的比较

为了研究笋壳多糖的脱蛋白工艺,以脱蛋白率、糖保留率和DPPH自由基清除能力为指标,对比研究了Sevag法、TCA法、酶法和醋酸铅法的笋壳多糖的脱蛋白效果。结果表明,最佳笋壳多糖脱蛋白方法为醋酸铅法,其脱蛋白工艺为：1 mg/mL糖液中添加醋酸铅使终浓度为1.0％,室温静置1 h,5 000 r/min离心20 min,最终脱蛋白率为80.17％,多糖保留率为81.12％,自由基清除能力为40.56％。该方法操作简便,脱蛋白效果好,且兼具良好的脱色澄清效果,适合工业上大规模生产使用。     

猪肚菇粗多糖脱蛋白脱色工艺优化研究

以猪肚菇粗多糖为原料,对其脱蛋白和脱色工艺条件进行优化。采用蛋白酶法和sevag法联合除蛋白,研究不同酶添加量、处理温度、pH值和处理时间等因素对蛋白脱除率的影响,采用正交设计对工艺条件进行了优化。猪肚菇多糖脱色采用大孔吸附树脂,系统研究树脂静态吸附与动态吸附试验。结果表明：最佳脱蛋白工艺为：2 mg/mL猪肚菇粗多糖溶液,木瓜蛋白酶用量1 mg,酶解温度60 ℃,酶解pH值5.5,酶解时间5 h,sevag试剂处理2次,猪肚菇多糖蛋白质脱除率和多糖损失率分别为85.18％和23.41％;最佳脱色工艺为：选用NKA-9树脂脱色,静态吸附时树脂用量1 ∶ 10,时间5 h,温度30 ℃,动态吸附时pH6.0,洗脱速率3 BV/h,猪肚菇多糖脱色率和多糖损失率分别为84.19％和20.79％。     

费菜多糖脱蛋白方法及工艺研究

以蛋白质脱除率和多糖损失率为指标,比较了三氯乙酸法、酶法和酶-Sevag结合法对费菜多糖脱蛋白效果,在单因素试验的基础上,并对最优的方法采用正交设计,优化最佳工艺.结果表明:三氯乙酸法、酶法、酶-Sevag结合法的蛋白质脱除率分别为82.84％、55.66％、74.99％,多糖损失率分别为32.64％、35.72％、45.35％.三氯乙酸法脱蛋白最优工艺条件:三氯乙酸浓度为10％,脱蛋白次数为4次,振荡时间为10 min,蛋白质脱除率和多糖损失率分别为(82.84±0.11)％和(32.64±0.08)％.     

响应面法优化金柑多糖碱提取工艺的研究

为研究碱溶液提取金柑多糖的最佳工艺,考察液料比、提取时间、提取温度、Na OH浓度和提取次数等5个因素对金柑多糖得率的影响。在单因素研究的基础上,采用五元二次旋转正交设计对其工艺进行优化,利用SAS 9.2响应面分析程序得到回归方程。结果表明:回归方程达到显著水平,多糖的最佳碱提取工艺条件为:液料比(V/W)41∶1,提取时间3.5 h,提取温度89℃,Na OH浓度0.05 mol/L,提取次数3次。在此条件下,多糖得率为(8.56±0.23)%,与理论预测值基本一致,相比传统热水浸提法,多糖得率提高3.73倍。     

菠萝酶对天然胶乳的生物凝固和脱蛋白研究

用菠萝的副产品－－菠萝皮汁和菠萝干酶作为天然胶乳的生物凝固剂，对胶乳具有良好的脱蛋白作用，研究结果表明：菠萝酶活力愈高，对胶乳的脱蛋白效果愈好；菠萝皮汁以 乳凝固和脱氮效果优于等酶活力的菠萝干栈，按此工艺生产天然胶，氮含量可控制在０．２％以下，但生胶的Ｐｏ值较高，湿胶料较难干燥。     

木瓜蛋白酶水解大豆浓缩蛋白实验研究

采用木瓜蛋白酶对大豆浓缩蛋白进行酶水解改性,通过氮溶解指数(NSI)的测定确定水解的有效性。实验表明,木瓜蛋白酶对大豆浓缩蛋白产生了有限水解,对大豆浓缩蛋白的功能特性有一定影响。通过L9(34)实验确定了最佳水解条件是:酶浓度为7000u/g、温度为65℃、pH为6·5、反应时间为2h、底物浓度为5·5%。     

金弹试管苗叶片MLP2基因的克隆及其生物信息学分析

采用RT-PCR结合RACE技术,以金弹(尤溪金柑Fortunella crassifolia cv.Youxijingan)试管苗的叶片为材料,克隆得到金弹Fc-MLP2基因的全长cDNA序列,其在GenBank中的登录号为JX310276.Fc-MLP2基因全长908 bp,含有一个669 bp的开放阅读框,编码223个氨基酸.生物信息学分析表明:该蛋白是定位于细胞外的一种疏水性分泌蛋白,具有2个功能位点、13个磷酸化位点和信号肽,其二级结构由α螺旋、β折叠、β转角、无规则卷曲组成.系统进化树分析表明,金弹Fc-MLP2与粗皮柠檬的RlemMLP2蛋白亲缘关系较近,聚为同一类.该蛋白可能在植物抗虫、抗病原菌、抗饥饿和延缓植物衰老方面起到一定作用.     

富锗树舌胞内多糖抗氧化活性研究

利用树舌深层发酵法制备富锗胞内多糖,并测定其体外抗氧化活性.结果表明:氧化锗在250 μg/mL质量浓度时,对胞内多糖产量及有机锗的含量有显著提高,同时富锗胞内多糖对超氧自由基(02·-)、羟基自由基(·0H)、DPPH·及亚硝酸盐有较好的清除作用,且还原能力较强.     

丝瓜络多糖提取工艺的研究

研究了丝瓜络多糖的提取工艺。在进行预处理方法和提取次数试验后,对浸提温度、料液比、浸提时间分别进行单因素试验和L9(33)正交设计对丝瓜络多糖的提取工艺进行优化。结果表明:丝瓜络晒干后直接提取、在浸提温度70℃、料液比1∶30、浸提时间10h、浸提1次为最佳提取条件。在此条件下,丝瓜络多糖粗品的提取率为10.08%,多糖含量为19.27%。     

金线莲多糖的提取工艺优化

以金线莲为试验材料,采用热水浸提法,对其多糖提取工艺进行优化。在单因素试验的基础上,通过正交试验考察料液比、提取温度、提取时间及提取次数对多糖提取得率的影响,优选出最佳提取工艺条件。结果表明:影响金线莲多糖提取率的主次因素为:提取温度提取次数提取时间料液比,并且4个因子对多糖提取得率影响均达到显著水平。金线莲多糖的最优提取工艺条件为:料液比1︰30、水浴温度70℃、提取时间90 min、提取4次。在最优提取工艺条件下,金线莲多糖提取得率为26.68%。研究认为应用此工艺多糖得率高,且简单易于调控,具有一定的应用价值。     

巴西橡胶树14-3-3蛋白基因的克隆及表达分析

根据在巴西橡胶树幼态无性系与老态无性系胶乳之间差异表达的一个SSH片段序列信息设计引物,通过RACE技术获得了2个编码14-3-3蛋白的cDNA,命名为Hb14-3-3a和Hb14-3-3b。序列分析表明,Hb14-3-3a和Hb14-3-3b基因长度分别为1 154、1 050 bp,分别编码252、263个氨基酸,分子量为61.7 Ku和64.7 Ku,等电点为5.51和5.14。Hb14-3-3a/b基因在所检测的组织中均有表达,但Hb14-3-3a和Hb14-3-3b的表达模式不一样,Hb14-3-3a在树皮中表达量最高,而Hb14-3-3b在叶中表达量最高。     

玉米转脂蛋白基因ZmLTP3的克隆及表达特性分析

转脂蛋白(Lipid transfer proteins,LTPs)是广泛存在于植物中的一类小分子蛋白,在植物生长发育及逆境应答中起着十分重要的作用。通过RT-PCR方法从玉米中克隆1个与拟南芥LTP3基因同源的全长cDNA,命名为ZmLTP3。推测ZmLTP3蛋白含有123个氨基酸,分子量为12.5 kDa,等电点为9.38。半定量RT-PCR分析表明,ZmLTP3可以被甘露醇、高盐和水杨酸(SA)诱导。在不同组织中ZmLTP3的表达模式不同,在子房中的表达量最高。结果表明,ZmLTP3可能在植物逆境反应及生殖生育过程中起多重作用。     

取食Bt蛋白对棉铃虫和斜纹夜蛾幼虫爬行能力的影响

为研究Bt棉田靶标害虫棉铃虫和非靶标害虫斜纹夜蛾的爬行规律及Bt蛋白对其爬行能力的影响,采用TrackSphere LC-100昆虫行为记录仪分别进行测定。结果表明:随着龄期的增加,棉铃虫幼虫停留次数逐渐增加,且幼虫在白天的活动能力显著高于晚上,而斜纹夜蛾则相反,随着龄期的增加,斜纹夜蛾幼虫的停留次数逐渐减少,同时幼虫在各时间段之间的差异也逐渐显著。用Bt棉或Bt蛋白饲喂2种幼虫发现,Bt蛋白对棉铃虫爬行能力的影响显著大于斜纹夜蛾,这种影响主要集中在低龄段,且一定浓度阈值范围内Bt蛋白对棉铃虫和斜纹夜蛾的爬行能力具有促进作用,超过此阈值范围其促进作用开始转化为抑制。结果为进一步了解棉铃虫和斜纹夜蛾幼虫爬行规律,研究Bt棉对棉铃虫的控制作用及次要害虫斜纹夜蛾的再度猖獗原因提供重要科学依据。     

巴西橡胶树胚胎晚期丰富蛋白基因的克隆及序列分析

根据抑制性消减杂交文库分离的EST片段,采用3’-RACE技术从巴西橡胶树胶乳中获得HbLEA14基因的全长cDNA序列,其ORF长456 bp,编码151个氨基酸,预测HbLEA14蛋白分子量为16.58 ku,等电点为5.10。同源性比对显示,HbLEA14与蓖麻RcLEA14、乳浆大戟EeLEA14、陆地棉GhLEA14、大豆GmLEA14、拟南芥AtLEA14、番茄SlER5的同源性分别为88%、80%、75%、73%、65%和61%,属于非典型第2组LEA蛋白。RT-PCR结果显示,死皮植株胶乳中HbLEA14的表达量明显高于健康树。     

橡胶树体细胞胚胎发生相关类受体蛋白激酶基因（HbSERK1）的克隆及表达分析

从橡胶树体细胞胚中克隆了一个与体细胞胚胎发生相关的类受体蛋白激酶基因,命名为HbSERK1。HbSERK1长2 159 bp,含有一个1 482 bp的阅读框,编码493个氨基酸。HbSERK1序列与毛果杨、葡萄、胡萝卜、马铃薯、拟南芥和燕麦的体细胞胚胎发生相关类受体蛋白激酶同源性分别为91%、90%、88%、88%、87%、86%。生物信息学分析表明,HbSERK1含有一个高度保守的蛋白激酶家族结构域,同时含有ATP结合区、蛋白激酶活化位点和Ser/Thr活性位点。RT-PCR半定量分析表明,HbSERK1在叶、胶乳、雄花、生长在愈伤诱导培养基上30 d和50 d的愈伤组织及生长在胚状体诱导培养基上12 d的胚性愈伤组织中均未表达,而生长在胚状体诱导培养基上21 d和40 d的胚性愈伤组织及成熟体细胞胚中表达。橡胶树HbSERK1基因主要在体细胞胚发生的早期表达,表明其可能参与橡胶树的体细胞胚早期发生过程。