内生解淀粉芽孢杆菌TB2液体发酵条件的研究

采用单因素试验和正交试验对具有广谱拮抗作用的内生解淀粉芽孢杆菌TB2菌株的摇瓶发酵培养基和发酵条件进行优化。结果表明,最佳培养基组份为:玉米淀粉1.0%、豆粉1.0%、(NH4)2SO40.5%、MgSO4·7H2O0.1%、FeSO4·7H2O0.03%、K2HPO4·3H2O0.02%、KH2PO40.01%;培养条件为:初始pH值为7.5,温度35℃,接种量3%,装液量50mL/250mL三角瓶,摇床转速200r/min,发酵周期22～26h。优化条件下发酵水平活菌数达到8.52×1010cfu/mL。     

解淀粉芽孢杆菌TWC2发酵条件的优化

为了提高解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens TWC2菌株活性代谢物质的产量,以菌体生物量和发酵液拮抗甘蔗赤腐病菌(Colletotrichum falcatum Went.)活性为指标,采用单因素和正交试验的方法对TWC2菌株发酵培养基成分和发酵条件进行优化。结果表明,TWC2菌株最佳发酵培养基组成为:5 g/L麦芽糖,10 g/L果糖,10 g/L蛋白胨,10 g/L酵母浸出粉,1 g/L CaCl_2。最适发酵条件为:培养温度34℃,摇床转速200 r/min,发酵起始pH 6.0~6.5,接种量7%,装液量40 mL/250 mL,发酵时间为48 h。在最佳发酵培养基和培养条件下,发酵液抑制甘蔗赤腐病菌的能力较优化前提高了39.91%。     

蔗糖发酵右旋糖酐工艺条件的优化

本文研究了肠膜明串珠菌Lm-31208以蔗糖为底物发酵生产右旋糖酐的工艺条件,通过优化培养基的碳源、氮源、pH、温度、接种量等,实现较高的蔗糖转化率和右旋糖酐产率。结果表明：当培养基蔗糖浓度为210g／L、蛋白胨浓度为2．Ogre、接种量为10％时,在5L全自动发酵罐中发酵,控制pH6．5、温度为25℃、转速100rpm,发酵到20h时,蔗糖转化率达到90％左右。     

纳豆激酶液态发酵工艺的优化

对由纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)液体摇瓶发酵生产纳豆激酶的发酵条件进行优化,并对5L发酵罐放大工艺进行研究。结果表明:以4%(w/v)的可溶性淀粉作为碳源,种龄10 h,接种量3%(v/v),通气量0.5 vvm,发酵罐转速由220 r·min-1提升至700 r·min-1,使发酵罐中溶解氧保持在20%以上,以上条件更有利于纳豆激酶的表达。条件优化后,摇瓶中纳豆激酶的表达量由低于1 000 IU·m L-1,提高到2 051.3 IU·m L-1(以尿激酶活为标准)。     

枇杷细胞悬浮培养生产熊果酸的调控

以枇杷悬浮培养细胞的生长量及熊果酸（UA）的含量为考察指标,从蔗糖浓度、装液量、pH值、接种量、温度、光照强度、摇床转速、激素等开展培养参数的筛选。结果表明：接种量8 g/100 mL,pH6.0,蔗糖30 g/L,25 ℃,白炽灯400 lx,转速130 r/min,装液量130 mL/250 mL,MS+NAA 0.5 mg/L,15 d收获,细胞鲜重是起始的3.577倍,UA含量为34.993 mg/g DW,是自然界枇杷叶的约3.5倍。     

人参内生菌B69菌株抑菌活性物质产生条件的优化

目的探索人参内生菌B69菌株对根腐病的抑制作用,优化人参病害拮抗菌株B69的发酵条件,提高发酵液的活菌含量和抗菌活性。方法以B69发酵液对病原菌根腐病的抑制作用为活性指标,采用正交试验和单因素试验方法对菌株的最适发酵培养基成分及发酵条件进行优化。结果在最佳发酵培养基和培养条件下,经检测发酵液的活菌数含量为8.25×108 cfu/m L,较优化前的活菌含量1.82×108cfu/m L增幅达到了显著差异(P0.05),此含量达到了农业部微生物肥料的技术标准(有效活菌数≥2.0亿/m L)。发酵液对人参根腐病的抑菌圈也由优化前的18mm增加到35mm。结论最佳培养基配方为蔗糖2.0%、淀粉1.0%、牛肉浸膏0.5%、酵母粉0.5%、蛋白胨0.2%和Na Cl0.5%;初始p H7.0;最适装液量为100 m L/250 m L;培养条件为35℃、170r/min振荡培养;接种量5%,发酵时间为48h。     

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CS27液体发酵条件优化

从提高细胞生物量并降低发酵生产成本的目的出发,本文采用单因素试验和正交试验方法,对已筛选出的枯草芽孢杆菌CS27菌株进行液体发酵培养基和工艺条件优化。得到最佳培养基配方为:1.5%黄豆粉、0.5%糖蜜、0.8%氯化铵、1.0%氯化钠、0.1%柠檬酸钠、0.5%碳酸钙、0.1%七水合硫酸镁;最佳发酵条件为:发酵温度32℃,最佳装液量50 mL/250 mL,最适接种量10%,初始pH7.0。在优化后的培养基发酵条件下细胞生物量可以达到1.75×10~9 cfu/mL,为枯草芽孢杆菌CS27菌株规模化生产及应用提供科学依据。     

五指山绿茶酒的研制

以五指山绿茶为原料,研究绿茶汁的浸提工艺和绿茶酒的发酵工艺。通过单因素试验,确定最佳浸提条件为：茶水比1∶70(g/mL),浸提温度85℃,浸提10 min,所得的茶汁感官品质良好。通过正交实验优化得到绿茶酒的最佳发酵工艺条件为：酵母接种量0.05%,蔗糖添加量190 g/L,初始pH值4.0,发酵温度28℃。在此条件下生产的绿茶酒色泽黄绿透明;酒香淡雅,茶香怡人;酒体丰满,酸甜适口;具有本品独特的风格。     

米曲霉40214高产中性蛋白酶发酵条件的优化

运用现代生物学技术,对米曲霉40214菌株发酵产中性蛋白酶的培养基组分及培养条件进行优化,旨在提高菌株产中性蛋白酶的产量。通过单因素实验和正交实验确定了发酵培养基的最佳组分,添加葡萄糖8.0%,酵母粉4.0%,Na2HPO40.10%;最适发酵条件为发酵温度28℃,初始pH值6.5,发酵时间96 h,加水量60.0%,经过优化后酶活性提高了1.75倍,达到2 845.68 U/mL,实验为进一步提高米曲霉40214菌株产中性蛋白酶的能力并将其应用到食品发酵中奠定了理论基础。     

基于EDEM和RSM的红茶发酵机参数优化

发酵是红茶品质形成的关键工序，而发酵条件是影响发酵程度的重要因素。为优化自行设计的滚筒式红茶发酵机性能参数，使用离散元仿真方法(Extended distinct element method,EDEM)对柔性刮板的转速进行3个梯度的仿真并比较其翻拌的均匀性；并以感官得分作为评价指标，采用响应面法(Response surface method,RSM)对影响发酵品质的3个关键因素(发酵温度、发酵时间、翻拌间隔)进行优化。结果表明，36(°)·s^-1的转速下发酵叶翻拌的均匀性最好；基于此转速，各因素对发酵品质的影响重要性顺序为发酵时间>发酵温度>翻拌间隔，最优工艺参数为：发酵时间230 min，发酵温度28.5℃，翻拌间隔20 min。     

Microbial populations associated with the retting of melon pods ( Colocynthis citrullus L.) during seed recovery

The traditional process for the retting of melon pulp and microbiological characteristics in the recovery of melon seeds ( Colocynthis citrullus L.) were investigated. Melon pods were sliced open and exposed for seven days. The pulp underwent a natural fermentation that was characterised by the growth of microorganisms to 108–1010 cfu/g. The pH fluctuated between 4.8 and 5.1 with a lactic acid content of 0.72%. Bacillus subtilis, B. polymyxa, Lactobacillus fermentum, L. brevis and Streptococcus faecalis were the predominant microorganisms but, significant contributions were made by Staphylococcus saprophyticus and Enterobacter cloacae. Penicillium, Aspergillus and Rhizopus species including the yeasts, Sacharomyces cerevisiae Candida krusei and Deboromyces hansenii were isolated from the fermentation. Growth of microorganisms was completely inhibited in antibiotic-treated samples indicating that the melon pods were the main source of microorganisms for the fermentation.     

海洋青霉HN89菌株次生代谢产物抗菌活性的研究

海洋青霉HN89菌株次生代谢产物的抗菌活性与发酵条件对抗生素产量影响的研究结果表明:海洋青霉HN89菌株的次生代谢产物对细菌、酵母、霉菌均有抑制作用;摇瓶发酵产生抗生素(HN89A)的最佳培养基成分为:玉米淀粉20g/L,黄豆粉2g/L,K2HPO41g/L,NaCl0.5g/L,MgSO4 0.5g/L,FeSO4·7H2O0.01g/L,蛋白胨1g/L,用海水配制的海带汁(W/V,2%)1L,最佳发酵条件为28℃下振荡培养(200r/min)96~108h。合适的温度刺激能促进HN89A的合成。      

香蕉果酒接种发酵和自然发酵过程中乳酸菌菌落变化及有机酸代谢特征

香蕉营养丰富、活性物质含量高，可作为深加工产品的优质原料。香蕉果酒是香蕉精深加工产品中的重要一类。由于香蕉果浆碳水化合物含量较高、酸度低、糖分高，其酿造过程中适宜各种微生物的生长繁殖，特别是乳酸菌数量的变化与酸类物质的产生密切相关。乳酸菌群落的变化容易增加发酵过程的风险，造成香蕉酒挥发酸含量超标、品质低下等不良结果。因此明确香蕉果酒发酵过程中自然存在的乳酸菌的生长繁殖规律及其对有机酸代谢的影响，可为精准调控发酵过程、提高产品质量提供理论依据。试验设置商业酵母Lalvin K1^TM接种发酵过程（K1）与香蕉果汁自然发酵过程（SF）2组对比，采用实时定量PCR方法和高效液相色谱法对香蕉汁接种发酵（K1）与自然发酵过程（SF）中酵母菌、乳酸菌的生长规律以及有机酸的含量变化进行监测。结果表明：2种发酵处理下，酵母菌和乳酸菌的生长规律有差异；K1酵母菌主导的发酵过程中，乳酸菌的生长受到显著抑制，最大生长量仅为4.0×10⁶ CFU/mL，而酵母菌生物量为1.2×10⁷ CFU/mL；在自然发酵过程中，乳酸菌与酵母菌的生长周期完全错开，但对乳酸菌的生物量无显著影响，乳酸菌与酵母菌的生长量分别达到1.0×10⁷ CFU/mL和1.6×10⁷ CFU/mL。2种发酵过程均表明，酵母菌和乳酸菌的生长存在竞争与抑制关系；有机酸代谢主要与乳酸菌菌落数量相关，不同有机酸的总体变化趋势一致；在发酵过程中，乳酸含量逐渐增加，乙酸含量呈先增后降的趋势，二者在自然发酵样品中的累积量均高于接种发酵；柠檬酸、苹果酸、酒石酸含量整体呈下降趋势。     

橘林油脂酵母发酵条件的初步研究

以橘林油脂酵母（Lipomyces kononenkoae CICC1714）为实验材料,通过设计单因素实验,确定了摇瓶发酵培养的最佳产油条件为：氮源为硫酸铵,碳源为葡萄糖,培养温度28℃,接种量10%,初始pH值为7.0,最适碳氮比为99。优化后批次发酵的生物量为7.01g/L,油脂含量15.91%,油脂产量1.12g/L。经半连续发酵后最终的生物量为24.13g/L,油脂产量为3.06g/L。     

茶鲜叶匀浆悬浮发酵体系优化模型

采用旋转回归正交组合设计,研究了温度,ｐＨ、供氧及发酵时间等因子对悬浮发酵红茶色素形成的综合效应,建立了以茶黄素（ＴＦｓ）、茶红素（ＴＲｓ）和ＴＲｓ／ＴＦｓ为目标函数的数学模型。借助模型研究了各因子及其交互作用对ＴＦｓ含量的影响,结果表明：发酵过程中采取先高温后逐步降低温度、降低ｐＨ值和早期充分供氧,有利于ＴＦｓ的积累。对数学模型进行计算机选优,筛选出ＴＲｓ和ＴＲｓ／ＴＦｓ取值限分别在１０％～１２％和１０～１２的悬浮发酵体系的最佳因子组合为：温度２８５～２９０℃,ｐＨ４６～４８,供氧１３０～１５０ｍｌ／ｍｉｎ,发酵时间（ＦＴ）５５５～５８９ｍｉｎ。     

Solid state fermentation of agricultural wastes for endoglucanase production

The lignocellulosic biomass (especially agricultural wastes) is known to be an excellent carbon source for microbial enzyme production. In this paper, the cellulase production from lignocellulosic materials under solid state fermentation (SSF) was investigated. The effects of fermentation conditions, such as moisture content, initial pH, temperature, and composition of mixed substrate (wheat straw and wheat bran) on endoglucanase production by Aspergillus niger 38 were studied. With a moisture content of 74% a pH range of 4.5–5.5 on mixed substrate containing wheat straw:wheat bran of 9:1, 14.80 international units (UI) endoglucanase activity/ml were obtained in 96 h.     

绿僵菌在3种不同培养基上培养时产孢量的影响因素

分析了绿僵菌菌株在3种不同培养基上培养时其产孢量的2个影响因素(初始接种浓度和相对湿度),得出菌株在3种不同培养基上培养时须分别配以适宜的接种浓度和相对湿度,以获取最大产孢量(燕麦培养基:1×107cfu/mL,65%;PPDA培养基:1×106cfu/mL,85%;玉米粉酵母浸膏培养基:1×108cfu/mL,75%)。另外,随继代培养代数增加,菌株在这3种培养基上前五代的产孢量比较稳定,第七代及之后的产孢量明显下降。根据3种培养基不同的功能,在PPDA培养基上培养菌株时要着重注意不同继代培养代数对产孢量的影响,其它2种培养基培养菌株一般不超过五代,产孢量比较稳定。     

酿酒酵母DCCS101脱除荔枝酒挥发醋酸的效果研究

以酿酒酵母DCCS101为出发菌株，研究其在不同条件下脱除挥发醋酸的效果。结果表明：以新鲜的荔枝汁作为发酵基质，酿酒酵母脱除外源醋酸的能力最大可达45%，但外源醋酸浓度高达2 g/L时，发酵终了醋酸浓度仍然达不到荔枝酒挥发酸最低标准的要求； 酿酒酵母DCCS101脱除醋酸的速度与酵母生长繁殖速度有关。在以新鲜荔枝汁作为发酵基质的情况下，酵母生长繁殖指数期时脱除醋酸的速度最快；用新鲜荔枝汁调整荔枝酸酒作为发酵基质，在低糖高酒精度增氧条件下醋酸脱除率高达86.3%；以荔枝酸酒直接作为发酵基质，酿酒酵母DCCS