穿刺巴斯德芽菌Ppgh-3对番茄根结线虫病防效研究

为了探讨穿刺巴斯德芽菌Ppgh-3对番茄根结线虫病的防效,对种植在含有根结线虫土壤中的番茄根系周围接种不同量的穿刺巴斯德芽菌Ppgh-3,在接种后的30、45、60 d分别测定番茄的株高、茎粗、根重、地上部重、根冠比、根系活力、病情指数,并在结果期测定单果重和3穗果的单株产量。结果表明：根结线虫侵染会造成番茄株高、产量、地上重显著降低,茎粗明显变细,根重、根冠比显著增加,根重、根系活力先升高后降低。接种穿刺巴斯德芽菌后,各处理的株高、产量、地上部重、茎粗均较只施线虫对照增加,而根重、根冠比则降低,接种穿刺巴斯德芽菌量最多的处理,株高比只接种根结线虫的处理增加6.55％,茎粗增加了16.99％,地上重增加了34.26％,根重减少了13.98％,病情指数降低了64％,果实产量增加了61.56％,与接种根结线虫的处理存在显著差异。这说明穿刺巴斯德芽菌Ppgh-3对根结线虫具有防治效果,而高接种量的穿刺巴斯德芽菌对番茄根结线虫病的防治效果最好。     

南方根结线虫被穿刺巴斯德芽菌侵染后寿命和生殖相关基因的表达变化

为了探讨南方根结线虫在植物体外被穿刺巴斯德芽菌感染后存活率的变化及感染初期线虫寿命和生殖相关基因的表达情况。首先利用单卵块孵化法对从野外采集的根结线虫进行纯化和分子鉴定。以穿刺巴斯德芽菌孢子体外吸附的南方根结线虫为材料,在显微镜下观察供试线虫的存活情况,每24 h计数一次死亡线虫的条数,总共观察12 d。在被穿刺巴斯德芽菌吸附的第3天收集根结线虫,提取线虫总RNA,采用实时荧光定量PCR检测线虫寿命相关基因cyp-33和生殖相关基因lin-45/mek-2的表达情况。结果表明：通过分子鉴定确认纯化的根结线虫为南方根结线虫;感染了穿刺巴斯德芽菌的南方根结线虫死亡率显著升高;同时在穿刺巴斯德芽菌吸附南方根结线虫的初期,线虫寿命相关基因cyp-33和生殖相关基因lin-45/mek-2的表达水平与对照组相比均下调（p<0.05）。这说明穿刺巴斯德芽菌在吸附南方根结线虫的初期能够促使线虫的存活率降低,并抑制其生殖能力,这可能与基因cyp-33、lin-45和mek-2的调控有关。     

海南省根结线虫的危害及其对侵入巴斯德氏芽菌的亲和性

从2001～2002年对海南省根结线虫的危害进行了调查，结果表明，所调查的14科25种植物中，除禾本科水稻以外全部遭受到不同程度的根结线虫危害，其中苦瓜、辣椒、空心菜和番石榴受害特别严重。从苦瓜、茄子和番石榴的受害植株根分离得到了大量的线虫2龄幼虫，记录了这些2龄幼虫的形态特征。最后通过分离线虫的2龄幼虫和侵入巴斯德氏芽菌的吸附试验，发现分离自苦瓜、茄子和番石榴的2龄幼虫对侵入巴斯德氏芽菌HL—1菌株有较好的亲和性，而对HL-2菌株的亲和性则不明显。这些结果表明在海南采集到的根结中有南方根结线虫。     

侵入巴斯德氏芽菌对海南瓜菜根结线虫病害的生物防治效果

2002年春季,利用化学农药丁硫克百威、氯唑磷、侵入巴斯德氏芽菌(Pasteuria penetrans)制剂,在海南省进行辣椒和苦瓜根结线虫病害的防治试验。结果表明,药剂处理35 d后,在盆栽环境下,侵入巴斯德氏芽菌处理组的根结指数明显低于化学农药处理组,但在田间,各处理组之间效果差异不明显。另外,田间试验中,对照和侵入巴斯德氏芽菌剂处理组的植株均受到疫病的严重危害。说明侵入巴斯德氏芽菌制剂对抑制根结线虫病害具有一定的效果,而且在盆栽条件下,其效果优于供试的2种化学农药,但对其它病害的发生没有影响。     

玉米对南部根结线虫的抗性

玉米受多种植物寄生性线虫的侵袭,尽管和美国南部根结线虫时常侵害玉米,但有关玉米对这些线虫易感性的报导却不一致。Windham 等(1987)对64个作为寄主的商用玉米杂交种对根结线虫 M.arenaria 2号小种和黄麻根结线虫(M.incognita)4号小种群体的寄生适应性进行了评价。     

拟禾本科根结线虫对水稻根系的侵染特性及其生活史

在人工接种情况下,利用次氯酸钠-酸性品红染色方法,研究拟禾本科根结线虫对汕优63杂交稻幼苗根系的侵染特性及其生活史。结果表明:在26℃大量群体接种情况下,2龄线虫在接种后4～6 h内侵入根系,主要侵入时间为接种后24～48 h;2龄幼虫侵入部位为根尖分生区或伸长区,侵入后虫体迁移方向与根纵中轴平行,在皮层薄壁细胞间迁移,最终聚集于根冠最内侧的分生区,直待分生区原形成层发育成维管束后,2龄幼虫才侵入维管束内取食;根冠内侧分生区至伸长区的2龄幼虫呈侵染态线状至长颈瓶状逐渐发育膨大过程,其发育快慢可能与2龄幼虫开始定殖并侵入维管来取食时间先后有紧密关系;2龄幼虫可直接在根内孵化,并迁移至发育中的侧根,或迁移到新根根冠内侧分生区处,待分生区原形成层发育成维管束后进行再侵染;拟禾科根结线虫最短生活史在26℃下为22 d,在26～37℃环境温度下为18 d,其侵染具有群体优势特性。     

我国花生根结线虫种和小种鉴定及其细微结构观察和地区分布

本研究首次对我国4个重病区的花生根结线虫(Meloidogyne hapla、M.aren-aria)病病原统一进行了较系统的形态学观察、测量、描述及鉴别寄主鉴定、明确了我国花生上的两个根结线虫种按南,北方两个重病区有其明确的区系分布界限,未发现混生现象,即各分别为:在南方—北纬25°的广东省遂溪县等地区是花生根结线虫1号(Meloidogyne arenaria race 1)生理小种;在北方—北纬37°以北的山东省栖霞县、文登县以及河北省滦县等地区是北方根结线虫(M.hapla);而且在本研究所取样本地区均为单一根结线虫种,亦未发现有其它根结线虫种为害花生。同时还看出北方根结线虫种内四个群体间的二龄幼虫头部细微结构有所不同。     

福建省香蕉根结线虫病调查与病原鉴定

2008~2013年,在福建省漳州市进行香蕉根结线虫病害的分布和危害性调查,结果表明：香蕉根结线虫病发生普遍,田间香蕉的株发病率达79.3％,苗圃香蕉假植苗株发病率达94.8％,带病香蕉苗成为香蕉根结线虫病的重要侵染源。香蕉根结线虫病的病原种类鉴定结果为南方根结线虫（Meloidogyne incognita）、爪哇根结线虫（M. javanica）和花生根结线虫（M. arenaria）,南方根结线虫为优势种,且存在根结线虫的混合种群。     

出口盆栽榕树根结线虫病的发生与防控药剂选择

以出口盆栽榕树种植示范基地为观测点,剖析检测根结线虫病的病原种类、为害症状、发病规律和传播控制,选择测定阿维菌素、毒死蜱、益舒宝和克百威对基质和根系根结线虫的防控效果,评价根结线虫对这4种药剂的敏感性。结果表明:对出口盆栽榕树造成为害的主要是南方根结线虫。阿维菌素原浆、毒死蜱乳油对盆栽榕树基质和根系根结线虫的防控效果均较理想,极显著优于两颗粒剂益舒宝和克百威。基质根结线虫对阿维菌素和毒死蜱敏感,LD50分别为0.215 4 mg/L和0.215 5 mg/L,无明显差异。根系根结线虫对阿维菌素的LD50为8.64 80 mg/L,是毒死蜱的3.10倍;克百威的LD50为2.127 9 g/盆,是益舒宝的1.35倍;各处理抗性个体出现频率会有不同,要尽可能轮换或交替使用。     

花生根结线虫病综合防治技术研究

研究表明，每公顷用10％益舒丰颗粒剂30kg、5％涕灭威颗粒剂45kg、98％毖速灭颗粒剂60kg对花生根结线虫病的防治效果分别可达55．9％、63．8％、63．7％；施用益舒丰以播种沟撒施和花生墩间施用为好，施用该药剂的深度以10～15cm为宜；采用深耕、增施有机肥(鸡粪)及轮作换茬、地膜覆盖栽培等措施，对防治花生根结线虫病也有明显效果。     

花生对北方根结线虫病抗性遗传规律的研究

用对花生根结线虫病表现抗性和感病的材料进行杂交,并将杂交得到的F1代种子及F1代自交得到的F2代种子种植在病圃内,调查植株的抗感病性,结果显示,F1代植株全部表现为感病,F2代抗病植株与感病植株的分离比率为1∶3,符合遗传分离规律。初步认为,亲本花生抗病材料的抗性是受一对隐性基因控制。     

栀子根结线虫病的病原鉴定

为明确广西贺州市栀子根结线虫病病原种类,采集根部有明显根结的栀子根系进行根结线虫分离鉴定,通过观察根结线虫2龄幼虫、雌成虫、会阴花纹特征对其进行形态学鉴定,并利用核糖体ITS区和28S rDNA D2D3区序列比对和系统发育树分析方法对其进行分子生物学鉴定。结果表明,该病原线虫2龄幼虫和雌成虫形态特征及形态测量值与象耳豆根结线虫（Meloidogyne enterolobii Yang & Eisenback, 1983）相似;该病原线虫核糖体ITS区与NCBI数据库中象耳豆根结线虫相应序列的相似度为100%,28S rDNA D2D3区与NCBI数据库中象耳豆根结线虫相应序列的相似度为99%以上;该病原线虫核糖体ITS序列以99%的支持率与象耳豆根结线虫聚为同一分支。综合形态学和分子生物学鉴定结果将广西贺州市栀子根结线虫病病原种类鉴定为象耳豆根结线虫,栀子（Gardenia jasminoides Eills）是该线虫的新寄主纪录。     

一株抗根结线虫芽孢杆菌的分离筛选及鉴定

从海南省尖峰岭热带雨林土壤中分离获得143株芽孢杆菌。经松材线虫初筛,获得8株拮抗活性在80%以上的菌株;经南方根结线虫二龄幼虫(J2)复筛,获得4株拮抗活性在50%以上的菌株,其中菌株DB13184的发酵上清液稀释10倍后,校正死亡率仍有56.7%。基于16S rDNA系统发育分析,显示菌株DB13184属于芽孢杆菌属,与菌株Bacillus toyonensis BCT-7112T的序列相似度达100%,二者在系统发育树上亦处于同一分支;结合该菌的培养特征、形态特征及生理生化特征,将其鉴定为Bacillus toyonensis。     

Effect of Introducing Nematode-Resistant Sweet Potato Cultivars on Crop Productivity and Nematode Density in Sweet Potato-Radish Double-Cropping Systems

Abstract

The root-knot nematode (RKN) is a significant pest in upland farming. We studied the effects of introducing nematode-resistant sweet potato cultivars on crop yield, crop quality, and RKN population dynamics in sweet potato-radish double-cropping systems. Three cropping systems with and without nematicide treatment (6 systems in total) were arranged for a 4-yr field experiment from 2003 to 2006. In two nematode-suppressive cropping systems, highly nematode-resistant J-red, (J) or Sunny red (S) and moderately nematode-resistant Kyushu No. 139 (K139) or Murasakimasari (M) sweet potato cultivars were cropped in alternate years beginning with the former and the latter, and in the non-nematode-suppressive cropping system, nematode-susceptible Kokei No. 14 (K14) and M were cropped in alternate years beginning with the former, from 2003 to 2005. In all cropping systems, K14 was cropped in 2006 to estimate the nematode-suppressive effect of the preceding 3-yr cropping. Introduction of J and S to the cropping system decreased the number of RKNs. In 2006, the extent of injury of K14 was decreased in nematode-suppressive cropping systems. The RKN population density, however, recovered during the cropping of K14 even after cropping of J or S or after nematicide treatment. This suggests that the effects of these measures last for only 1 yr. Nematode injury in radish decreased after nematicide treatment and after cropping of highly nematode-resistant J or S. These results indicate that the introduction of nematode-resistant sweet potato cultivars in cropping systems is effective for reduction of agrochemical use for sustainable agriculture.     

海南省甘蔗寄生线虫调查与鉴定

2011～2014年,调查了海南省6个县市125份甘蔗根际土样的植物线虫发生情况。结果显示,海南甘蔗地每百克土壤中平均含有植物寄生线虫57条,其中沙性土壤中线虫平均含量达到143条,高于粘性土壤的42条。所分离出的线虫分布于13个属,包括矮化线虫属(Tylenchorhynchus spp.)、根结线虫属(Meloidogyne spp.)、短体线虫属(Pratylenchus spp.)、剑线虫属(Xiphenema spp.)、长针线虫属(Longidorus spp.)、毛刺线虫属(Trichodorus spp.)、拟毛刺线虫属(Paratrichodorus spp.)、拟长针线虫属(Paralongidorus spp.)、螺旋线虫属(Helicotylenchus spp.)、肾形线虫属(Rotylenchulus spp.)、垫刃线虫属(Tylenchus spp.)、滑刃线虫属(Aphelenchus spp.)和小环线虫属(Criconemella spp.)等。根据形态学特征及测量值,初步鉴定饰环矮化线虫(Tylenchorhynchus annulatus)及玉米短体线虫(Pratylenchus zeae)为海南甘蔗上的优势种类。     

Evaluation of resistance to root-knot nematode (Meloidogyne incognita) in okra cultivars

The root-knot nematode, Meloidogyne incognita, is one of the major limiting factors affecting plant growth and yield causing an estimated $100 billion loss per year worldwide. Synthetic pesticides, though instantaneously effective, are usually prohibitively expensive, not readily available, may cause hazards to both man and livestock, and inflict injury to the environment. Notable among the alternatives to nematicides is the use of resistant cultivars which are inexpensive and eco-friendly. In the present studies, twelve okra (Abelmoschus esculentus L) cultivars were evaluated for their resistance against M. incognita under field conditions. Ten-day old okra plants of test cultivars were inoculated with 3000 freshly hatched second stage juveniles of M. incognita. The nematode caused reductions in various growth parameters of all the cultivars to varying levels over their respective controls. None of the cultivars was found completely resistant. The cultivar ‘Sharmeeli’ was highly susceptible as >100 galls were recorded on the roots. Sharmeeli also showed maximum reductions in growth among the cultivars evaluated. The cultivars Anmol and Sindha were susceptible with 71–100 galls. The cultivars Sabz Pari, Super Star, PMS-55 and PMS Beauty were moderately susceptible with 31–70 galls and comparatively less reductions in growth. Cultivars Sanam, Dikshah, Arka Anamika, Ikra-1 and Ikra-2 with 11–30 galls were rated as moderately resistant and showed less damage by the nematode as compared to susceptible cultivars and their planting could provide a useful tool to control root-knot nematodes.