Alcalase酶水解花生蛋白制备花生短肽的研究

对Alcalase水解花生蛋白制备花生短肽过程中,酶用量、底物浓度、pH值、反应温度、反应时间等影响因素进行了系统地研究,建立了短肽得率及水解度与各种影响因素的回归模型;在此基础上,结合实际生产确定出了Alcalase酶解花生蛋白的最适条件为pH值8.0,水解温度54℃,底物浓度4%,酶用量3480 U/g,水解时间106 min。在此条件作用下,体系中短肽得率为79.08%,水解度为17.08%,短肽平均链长为5.85,平均分子量为661.5。     

丝胶蛋白抗氧化肽的酶法制备及功能评价

为进一步开发利用废蚕丝,充分挖掘丝胶蛋白的可利用程度,该文研究了6种蛋白酶水解制备丝胶肽及产品的抗氧化活性。筛选出Alcalase碱性蛋白酶为制备丝胶抗氧化肽的理想蛋白酶,并以ABTS体系评价了丝胶肽的抗氧化活性。通过单因素试验研究了反应时间、底物浓度、反应温度、pH值、酶底物比对酶水解制备丝胶肽的影响;并通过回归正交旋转试验设计对水解条件进行优化,建立各因素与水解度和抗氧化活性的数学模型,确定Alcalase酶水解丝胶蛋白的最佳水解条件为:反应时间240min,底物浓度2%,反应温度55℃,pH8.5,酶底物比2.375%。最佳水解条件下水解度为33.35%,ABTS清除活性为43.19%。该研究为开发丝胶抗氧化肽功能产品提供了技术依据。     

汽爆处理对鳙鱼骨酶解特性的影响

为研究汽爆预处理对鱼骨蛋白酶解特性的影响,以鳙鱼骨为研究对象,采用Alcalase酶解鳙鱼鱼骨,研究不同保压时间、汽爆压力对鳙鱼骨的水解度、蛋白质回收率、三氯乙酸(TCA)可溶性氮得率的影响。结果表明,汽爆预处理能显著提高鳙鱼骨蛋白的溶出率。0.6 MPa、2.0 min汽爆预处理鱼骨经Alcalase酶解3.0 h后,酶解产物的水解度为8.69%,蛋白质回收率为32.69%,TCA可溶性氮得率为28.79%,均显著高于未处理组;酶解产物相对分子质量主要分布在1 000 Da以下,高达93%。本研究结果为鱼骨资源利用提供了一定的技术支持。     

中性蛋白酶水解鸡骨泥制备短肽工艺优化

为了探究酶法制备鸡骨泥短肽的最佳工艺,该文研究了以中性蛋白酶酶解鸡骨泥时各因素对短肽得率和羟自由基清除率的影响,以及鸡骨泥肽清除超氧阴离子自由基和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl)的能力。试验探究了酶解过程中不同底物浓度、酶浓度、反应温度和反应时间对短肽得率和羟自由基清除率的影响,采用响应曲面优化得到了以短肽得率为目标的中性蛋白酶酶解鸡骨泥的最优工艺,当反应液p H值为7.2,反应温度42℃,反应时间2 h,底物质量分数5%,酶添加量200 mg/g,该条件下制备鸡骨泥肽,测得其短肽得率为56.16%,羟自由基清除率为54.12%。采用该酶解工艺制备鸡骨泥肽,测得其对超氧阴离子自由基最高清除率为56.01%,对DPPH自由基最高清除率为81.57%,说明鸡骨泥肽具有一定的抗氧化活性,研究结果为酶法制备鸡骨泥肽提供参考。     

预热处理对甘薯蛋白酶解特性的影响

以碱性蛋白酶（Alcalase）为水解酶,研究了不同预热处理温度和时间对甘薯蛋白酶解特性的影响。采用单因素试验及响应面分析法,对Alcalase水解预热处理条件进行了研究,建立了水解度（DH）及三氯乙酸氮溶解指数（TCA-NSI）与预热处理的回归模型,分析了模型的有效性及因子间的交互作用。结果表明,预热处理对Alcalase酶解甘薯蛋白的DH和TCA-NSI的影响显著（P＜0.05）;甘薯蛋白预热处理的最优工艺参数为：温度92℃,时间13?min。在此条件下,DH与TCA-NSI分别为26.32%和84.33%。与直接酶解天然甘薯蛋白相比,在预热处理的最佳工艺条件下所得到的DH和TCA-NSI分别提高了15.89%和53.37%。     

脱酰胺与双酶协同作用提高小麦面筋蛋白酶解效率

为了探讨了不同脱酰胺处理和双酶协同作用方式对小麦面筋蛋白酶解效率及其产物抗氧化活性的影响,该文研究了小麦面筋蛋白在各种预处理方式和酶解条件下的蛋白回收率、水解度、抗氧化性能及肽分子量分布情况。结果显示,单独热处理(90℃,30 min)小麦面筋蛋白对其酶解效率无显著影响,而采用添加0.5 mol/L柠檬酸溶液进行热处理(质量分数为5%,90℃,30 min)可显著(P0.05)提高其蛋白回收率。此外,酶制剂添加顺序及双酶共同水解作用时间对酶解效率均具有较大影响:加入谷氨酰胺酶预先水解对小麦面筋蛋白的深度水解有促进作用;一定时间内的双酶协同作用有利于酶解的进行,但较长时间的双酶作用反而会抑制酶解效率。采用谷氨酰胺酶(质量分数为0.2%)对经柠檬酸加热处理的小麦面筋蛋白作用12 h后再加入胰酶(质量分数为0.6%)共同作用7 h可使蛋白回收率达70.74%,水解度达到9.88%;另外,酶解产物的自由基清除能力ABTS+(2,2’-Azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate)+)值与氧化自由基吸收能力(ORAC,oxygen radical absorbance capacity)值分别达到478.95 mmol/g和213.85μmol/g,提示该酶解产物是一种潜在优秀食品抗氧化剂。研究结果可为拓宽小麦面筋蛋白的应用领域,以及高效制备抗氧化活性肽提供方法和理论指导。     

酶解制备鱼鳞蛋白降血压肽的工艺优化

为有效利用鱼鳞制备降血压肽,以罗非鱼鱼鳞为原料,在121℃条件下进行热预处理15 min后,运用响应面分析法优化酶解制备鱼鳞蛋白ACE抑制肽的工艺条件。结果表明,以水解度和ACE抑制率为评价指标,筛选出碱性蛋白酶为最优酶。在单因素试验的基础上,根据Box-Behnken中心组合试验设计原理,最终确立最优的酶解工艺参数为:酶解时间2 h、酶解温度56.3℃、pH值8.0,酶底比1.1%,此条件下ACE抑制率理论值为87.95%,实际值为88.26%。最优条件下制得的酶解产物相对分子质量集中在300～3 000 Da之间,水解效果较好。本研究结果对酶解法制备鱼鳞蛋白降血压活性肽具有一定的实践参考价值。     

超声预处理微波辅助酶解生产猪血活性肽工艺优化

为了充分挖掘畜禽血液蛋白质资源及开发具有保健功能的血液深加工生物制品,以猪血细胞为原料,在超声波破碎细胞后,利用微波辅助技术,对Alcalase内切酶酶解猪血红蛋白的工艺条件进行了优化。结果表明：当水与血细胞体积比为5：1,超声波功率为300 W时,超声处理25 min后,在功率为500 W的微波中进行酶解,得出最佳酶解条件为：Alcalase内切酶加酶量体积比6.77%,酶解温度54℃,酶解时间11 min,得到血红蛋白的水解度为23.63%,酶解产物大部分为相对分子质量在635.7～1151.1 Da的短肽。该文提供了一种快速提取猪血活性肽的试验方法,在实际生产中具有较好的应用价值。     

黑豆蛋白肽果汁复合饮料的研制

黑豆是种皮为黑色的大豆，其蛋白质含量高达50%，是极具开发潜力的植物蛋白资源，但黑豆蛋白质分子高度压缩折叠、不易消化，使其加工利用受到了限制。该试验采用2709碱性蛋白酶对黑豆蛋白进行有控制的水解，制备酸溶性好、易消化吸收的黑豆蛋白肽，经水解度与酸溶性蛋白肽得率测定，确定了酶解工艺条件：底物浓度为每100 mL黑豆浆含3.75 g蛋白质，酶-底物比为8 000 u/g，pH值9.0，温度50℃，酶解时间2.0 h，水解度为10%，酸溶性蛋白肽得率达85%。2709蛋白酶对黑豆蛋白具有较好的水解效果，1 kg黑豆经磨浆、酶解与离心去渣脱苦制得20 L黑豆蛋白肽混合液，将其与天然澄清苹果汁按80∶20(V/V)混合调配制备黑豆蛋白肽果汁复合饮料，产品色泽棕红清亮，具天然果汁与黑豆清香风味，蛋白质与肽类物质含量(m/V)≥1.5%，酸度(以柠檬酸计) ≥0.4 g/100 mL。     

酶解鹰嘴豆蛋白制备抗氧化肽工艺优化研究

为优化 Alcalase 蛋白酶酶解鹰嘴豆蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,采用响应面分析法,以还原能力、超氧阴离子捕获率为响应值,研究了酶与底物的比值([E]/[S])、酶解温度和酶解时间对制备抗氧化肽工艺的影响.综合考虑成本和工艺要求等问题,最终确定酶解鹰嘴豆蛋白制备抗氧化肽的工艺条件为:底物浓度2%,pH值8.0,[E]/[S]2.72%,温度52℃,时间31 min.该条件下制备的鹰嘴豆酶解产物还原能力和超氧阴离子捕获率分别为0.667和61.55%,与理论预测值的相对误差在±1%以内,说明利用该文建立的模型在实践中进行预测是可行的.     

三文鱼皮四种蛋白酶酶解物抗氧化活性及功能特性的差异研究

为进一步合理开发利用三文鱼皮,本研究对碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶和复合蛋白酶水解所制备三文鱼皮酶解物的抗氧化活性与功能特性进行了比较.结果 表明,三文鱼皮碱性蛋白酶酶解物的水解度(20.18％)和三氯乙酸可溶性氮得率(40.14％)最高,小分子肽含量高达99.97％,其抗氧化活性显著优于其他组(P＜0.05);...     

Production of cod (Gadus morhua) muscle hydrolysates. Influence of combinations of commercial enzyme preparations on hydrolysate peptide size range

The complement of enzyme activities of a selection of commercial protease preparations were determined using fluorogenic substrates. Alcalase was used in combination with other commercial enzyme preparations to produce cod muscle (Gadus morhua) hydrolysates. Each muscle hydrolysate was characterized with respect to the percentage degree of hydrolysis (DH %), peptide molecular weight range, and free amino acid content. The enzyme preparations containing predominantly protease or endopeptidase activities achieved high DH % and produced significant amounts of peptides below a molecular weight of 3000. Alcalase combined with exopeptidase-rich preparations produced hydrolysates rich in low-molecular-weight peptides. Selecting combinations of enzyme preparations with complementary activity profiles could be used to manipulate the peptide molecular weight profile of hydrolysates.     

高压均质-酶解改性提高酸性条件下花生蛋白的溶解性及其稳定性研究

花生蛋白在酸性条件下会絮凝沉淀,溶解性降低,限制了其在酸性饮料加工领域的应用.本研究通过利用高压均质-中性蛋白酶酶解复合改性提高花生蛋白在pH值4.0条件下的溶解度,并根据Turbiscan多重光散射稳定性分析仪的背散射光强值和体系不稳定指数(TSI)分析不同浓度改性蛋白添加量对酸性果汁稳定性的影响.响应面分析结果表明...     

Investigation of enzymatic hydrolysis conditions on the properties of protein hydrolysate from fish muscle (Collichthys niveatus) and evaluation of its functional properties

This study was carried out to investigate the enzymatic hydrolysis conditions on the properties of protein hydrolysate from fish muscle of the marine fish species Collichthys niveatus. About 160 fish samples were tested, and the analyzed fish species was found to be a lean fish with low fat (1.77 ± 0.01%) and high protein (16.76 ± 1.21%). Fish muscle of C. niveatus was carefully collected and hydrolyzed with four commercial enzymes: Alcalase, Neutrase, Protamex, and Flavourzyme under the conditions recommended by the manufacturers. Among the tested proteases, Neutrase catalyzed the hydrolysis process most effectively since the hydrolysate generated by Neutrase has the highest content of sweet and umami taste amino acids (SUA). The effect of hydrolysis conditions was further optimized using response surface methodology (RSM), and the optimum values for temperature, pH, and enzyme/substrate ratio (E/S ratio) were found to be 40.7 °C, 7.68, and 0.84%, respectively. Finally, the amino acid composition of the hydrolysate was analyzed by AccQ·Tag derivatization and HPLC-PDA determination. Major amino acids of the muscle of C. niveatus were threonine, glutamic acid, phenyalanine, tryptophan, and lysine, accounting for respectively 10.92%, 10.85%, 10.79%, 9.86%, and 9.76% of total amino acid content. The total content of essential amino acids was 970.7 ng·mL(-1), while that of nonessential amino acids was 709.1 ng·mL(-1). The results suggest that the fish muscle and its protein hydrolysate from C. niveatus provide a versatile supply of the benefits and can be incorporated as supplements in health-care foods.     

Enzymatic solubilization of proteins in brewer's spent grain

Brewer's spent grain (BSG) is an abundant, protein-rich coproduct from the beer industry. There is a growing interest in increasing and diversifying the exploitation of BSG and related coproducts for economic and environmental reasons. In this paper, we report on a study of the solubilization of proteinaceous material from BSG using several commercial peptidase preparations. Our data show that Alcalase is the most effective peptidase for solubilization of BSG proteins, with an ability to release up to 77% of total protein. The peptides produced by Alcalase had lower average molecular weight than peptides produced by the less effective enzymes. Processes that combined peptidase treatment with carbohydrate-degrading enzyme preparations such as Depol740 increased the solubilization of dry matter (from 30 to 43% under optimal conditions). However, such additional treatment had little effect on the solubilization of protein. The choice of enzyme dosage depends on the desired hydrolysis time and was assessed through several experiments. Protein solubilization was consistently better at pH 8.0 as compared to pH 6.8. Maximum protein solubilization at pH 8.0 within 4 h required the use of 10-20 microL Alcalase per g of dry matter. However, a considerable degree of solubilization (64%) and hydrolysates with high protein content could be obtained using doses down to only 1.2 microL. Amino acid composition analyses showed that Alcalase treatment solubilizes proline and glutamine (constituents of barley hordein) slightly more efficiently than the other amino acids in BSG.     

施用乙烯利和磷肥对玉米//花生间作氮吸收分配及间作优势的影响

【目的】在玉米//花生间作体系中,喷施乙烯利明显降低玉米株高,提高花生和间作体系的产量,研究施用乙烯利和磷肥对玉米花生间作氮吸收分配和间作优势的影响,明确其调控机理,对实现玉米、花生间作高产高效具有重要指导意义。【方法】本试验于2012~2013年在河南科技大学农场进行,设玉米单作、花生单作、玉米//花生间作和玉米//花生间作+喷施乙烯利4种种植方式,分别施磷和不施磷,共8个处理,分析了不同处理玉米、花生不同器官氮含量及氮积累量,讨论了喷施乙烯利和施磷对间作体系氮吸收间作优势的影响。【结果】与单作相比,玉米花生间作显著提高了玉米茎、叶、籽粒的氮含量和氮积累量,促进了氮向籽粒的分配;提高了花生茎、叶、果仁的氮含量,但明显降低了花生氮积累量,不利于氮向果仁分配;与单作体系相比,间作体系的氮吸收间作优势为N 26.88~42.21 kg/hm2。喷施乙烯利减少了玉米对花生的氮竞争比率,降低了间作玉米茎、叶、籽粒的氮含量和氮积累量,促进氮向籽粒的分配,并且还提高了间作花生茎、叶、果仁的氮含量和氮积累量,促进氮向果仁的分配,间作花生的氮吸收量提高23.67%~49.54%（P < 0.05）,间作体系氮吸收间作优势提高4.95%~54.65%。与不施磷相比,施磷提高了喷施乙烯利间作体系中玉米和花生吸氮量,分别提高19.49%~27.71%和34.26%~43.24%（P < 0.05）,氮吸收间作优势提高69.97%~162.57%（P < 0.05）。【结论】施用磷肥可进一步提升喷施乙烯利在降低玉米对花生的氮竞争比率,促进玉米花生间作体系氮吸收及氮向籽粒中分配,提高氮吸收间作优势的作用,促进氮素的高效利用。     

Hydrophobicity,Solubility, and Emulsifying Properties of Enzyme-Modified Rice Endosperm Protein

Rice endosperm protein was modified to enhance solubility and emulsifying properties by controlled enzymatic hydrolysis. The optimum degree of hydrolysis (DH) was determined for acid, neutral, and alkaline type proteases. Solubility and emulsifying properties of the hydrolysates were compared and correlated with DH and surface hydrophobicity. DH was positively associated with solubility of resulting protein hydrolysate regardless of the hydrolyzing enzyme, but enzyme specificity and DH interactively determined the emulsifying properties of the protein hydrolysate. The optimum DH was 6–10% for good emulsifying properties of rice protein, depending on enzyme specificity. High hydrophobic and sulfhydryl disulfide (SH-SS) interactions contributed to protein insolubility even at high DH. The exposure of buried hydrophobic regions of protein that accompanied high-temperature enzyme inactivation promoted aggregation and cross-linking of partially hydrolyzed proteins, thus decreasing the solubility and emulsifying properties of the resulting hydrolysate. Due to the highly insoluble nature of rice protein, surface hydrophobicity was not a reliable indicator for predicting protein solubility and emulsifying properties. Solubility and molecular flexibility are the essential factors in achieving good emulsifying properties of rice endosperm protein isolates.     

施氮水平对不同花生品种产量与品质的影响

为了探讨氮对不同花生品种产量和品质的影响,采用盆栽法开展了不同氮用量对3个不同花生品种产量和品质影响的研究。结果表明,不同花生品种达到最高产量的施氮量不同,白沙1016和鲁花12施氮 112.5 kg/hm2时荚果产量最高,远杂9102施氮 75 kg/hm2时荚果产量最高。相对于不施氮,施氮后花生子仁蛋白质和氨基酸平均含量分别增加了4.9%和15.0%; 施氮375N1125 kg/hm2比不施氮粗脂肪平均含量提高3.7%; 施氮可有效增加子仁苏氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸等必需氨基酸含量; 除脯氨酸外,其它非必需氨基酸含量均显著提高; 与不施氮相比,施氮后子仁硬脂酸、花生酸和山嵛酸平均含量分别提高了13.6%、6.9%和5.5%。3个品种相比,子仁蛋白质、氨基酸和粗脂肪含量差异显著; 氨基酸组分除苏氨酸、色氨酸、甘氨酸含量外,其它差异显著,而脂肪酸组分除十七酸、硬脂酸外,其它差异不显著。总之,供试不同品种花生达到最高产量的施氮量存在明显差异; 施氮可显著提高花生子仁营养品质。     

胃蛋白酶水解珠蛋白获得ACE抑制肽的工艺优化(简报)

以猪血中提取的珠蛋白为原料,水解度为指标,对胃蛋白酶水解珠蛋白的工艺条件进行优化,然后测定不同水解阶段产物对血管紧张素Ⅰ转换酶（ACE）抑制活性的影响,来筛选具有较高抑制ACE活性的生物功能活性肽。结果表明：在酶量为0.3%,初始pH 值2.6,蛋白浓度0.7%,温度37℃条件下,时间为12 h时,水解度值最大,为11.85%;在其他因素不变条件下,水解时间为4 h时,水解产物对ACE抑制率达到最大值,其ACE抑制率为93.2%,水解度为9.64%。     

花生抗氧化水解产物制备及其抗氧化活性研究

研究花生抗氧化水解产物,为进一步研究花生抗氧化肽提供理论基础。本研究运用Box-Behnken设计的响应面试验方法对花生抗氧化水解产物的制备工艺条件进行优化,其最佳制备工艺条件为:经复合多糖酶(Viscozyme L)预处理的花生粕粉,调节pH值8.2,加入4000U·g-1底物的碱性蛋白酶(Alcalase),在50.0℃下酶解94.0min。此工艺下制备的花生抗氧化水解产物对1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)清除率为77.38%。花生抗氧化水解产物的抗氧化活性结果显示,对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除率的IC₅₀值分别为6.65、0.56和7.67mg·mL-1,对铁离子和铜离子螯合率的IC₅₀值分别为8.02和12.39mg·mL-1,对脂质过氧化的抑制率的IC₅₀值为8.45mg·mL-1,铁还原力和钼还原力吸光值为0.5时,所需抗氧化水解产物浓度分别为26.40和4.59mg·mL-1。