克隆山羊成纤维细胞IGF2-H19基因座甲基化分析

旨在研究山羊体细胞核移植对克隆后代成纤维细胞IGF2-H19基因座甲基化的影响。以奶山羊耳成纤维细胞(GFC,对照组)和克隆山羊耳成纤维细胞(CFC,试验组)为试验材料,培养至第5代时,采用细胞计数法绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR分析基因的表达差异,亚硫酸氢盐测序(BSP)分析差异甲基化区域的甲基化水平。结果显示,GFC和CFC组细胞的生长曲线均呈典型"S"型,但CFC组细胞的凋亡率显著高于GFC组(P0.01);CFC组细胞中Dnmt1(P0.01)、Dnmt3b(P0.01)、Tet1(P0.05)、Tet2(P0.05)、H19(P0.05)和IGF2(P0.01)基因表达水平均显著低于GFC组,而Tet3、Dnmt3a和IGF2R在2组间无显著性差异;CFC组细胞中IGF2两个差异甲基化区域(DMR1和DMR2)的甲基化水平均显著低于GFC组(74.1%vs.57.8%,P0.01;76.8%vs.40.0%,P0.01),但IGF2-H19印记基因控制区域甲基化水平显著高于GFC组(68.8%vs.84.0%,P0.01)。体细胞核移植通过影响Dnmt和Tet家族基因的表达引起IGF2-H19基因座甲基化的异常,导致基因印记紊乱,进而影响再克隆的效率。     

不同体重阶段荣昌猪基因组DNA甲基化水平检测

采集不同体重阶段(10,20,35,50,80,100 kg)的健康荣昌猪阉公猪肝脏组织,用HPLC法检测其DNA甲基化水平.结果表明:5-甲基脱氧胞苷(5-mC)占总胞苷的百分含量在10 kg体重阶段显著高于80 kg体重阶段(P<0.05),极显著高于100 kg体重阶段(P<0.01);20,35,50 kg体重阶段显著高于100 kg体重阶段(P<0.05);其余体重阶段间差异不显著(P>0.05).说明荣昌猪基因组DNA甲基化水平随体重的增加呈下降趋势,10～50 kg体重阶段下降幅度较小,51～100 kg体重阶段下降幅度较大.     

包膜复合酸化剂对东乡绿壳蛋鸡生产性能、矿物元素代谢及血清生化指标的影响

本试验旨在研究包膜复合酸化剂对东乡绿壳蛋鸡生产性能、矿物元素代谢及血清生化指标的影响。选用48周龄健康东乡黑羽绿壳蛋鸡300羽,随机分为5组,每组5个重复,每个重复12羽,分别饲喂在基础饲粮中添加0(对照)、100、250、500和1 000 mg/kg的包膜复合酸化剂的试验饲粮,试验期28 d。结果表明:与对照组相比,1)500和1 000 mg/kg组可显著提高产蛋率(P0.05),显著降低料蛋比(P0.05);2)250 mg/kg组显著提高了蛋黄指数(P0.05),500 mg/kg组显著提高蛋壳厚度(P0.05);3)100 mg/kg组显著或极显著提高了蛋鸡血清总蛋白(P0.01)、白蛋白(P0.05)和葡萄糖含量(P0.05),250 mg/kg组血清总蛋白(P0.05)、尿酸含量(P0.05)和白蛋白/球蛋白(P0.01)显著或极显著上升,500 mg/kg组白蛋白/球蛋白极显著提高(P0.01),1 000 mg/kg组血清钙含量显著提高(P0.05);4)酸化剂可显著提高蛋黄中铜含量(P0.05),500和1 000 mg/kg组蛋黄中锰含量极显著提高(P0.01),1 000 mg/kg组粪中锰含量极显著降低(P0.01),250、500和1 000 mg/kg组粪中镁含量极显著降低(P0.01)。由此可见,产蛋期东乡绿壳蛋鸡饲粮中添加250~500 mg/kg包膜复合酸化剂为宜。     

暴露纳米氧化锌对雄性小鼠糖、脂代谢及组织学的影响

根据小鼠的体质量,以不同剂量经口连续染毒纳米氧化锌,90d后摘眼球取血,对血脂、血糖、肝脏抗氧化指标进行检测。结果显示:对照组、80mg/kg剂量组小鼠血糖显著高于160mg/kg剂量组(P<0.05)。对照组、80mg/kg剂量组小鼠血糖极显著高于40mg/kg剂量组(P<0.01);40,80 mg/kg剂量组小鼠血脂含量显著高于对照组(P<0.05),160mg/kg剂量组小鼠血脂含量极显著高于对照组(P<0.01);40,160 mg/kg剂量组小鼠血清总胆固醇含量显著高于对照组(P<0.05);40mg/kg剂量组小鼠血清低密度脂蛋白含量显著高于对照组、80mg/kg剂量组(P<0.05),各组间血清高密度脂蛋白含量无显著差异;80,160mg/kg剂量组小鼠肝脏过氧化氢酶活性显著高于对照组、40mg/kg剂量组(P<0.05),80mg/kg剂量组小鼠肝脏过氧化氢酶活性极显著高于40 mg/kg剂量组(P<0.01);40,80mg/kg剂量组小鼠肝脏Cu-Zn SOD活性显著高于对照组(P<0.05);160 mg/kg剂量组小鼠肝脏抑制羟自由基能力显著低于对照组、40mg/kg剂量组及80mg/kg剂量组(P<0.05);随染毒剂量增加,小鼠肝脏MDA含量增加,但各组间含量差异不显著;随染毒剂量增加,小鼠肝脏谷胱甘肽过氧化物酶活性提高;但各组间活性差异不显著。各组间肝脏H2O2含量、总SOD活性无显著性差异。病理学检查发现,大脑细胞存在噬神经现象,脾脏红髓与白髓的界限不清晰;肺泡壁增厚,局部炎性细胞浸润,曲精小管间的间隙增大,生精细胞排列紊乱、脱落。结果表明:经口连续染毒纳米氧化锌90d能影响雄性小鼠肝脏抗氧化系统,导致小鼠糖、脂代谢紊乱,引起高脂血症,纳米氧化锌对雄性小鼠具有神经毒性及生殖毒性。     

紫锥菊提取物对小鼠免疫器官指数及血清溶血素水平的影响

探索紫锥菊提取物对小鼠免疫功能的影响。试验选取健康成年小鼠80只,随机分为8组,每组10只,分别为空白对照组(生理盐水灌胃),免疫抑制模型组(腹腔注射环磷酰胺100 mg/kg),免疫抑制小鼠紫锥菊提取物高、中、低剂量组,正常对照小鼠紫锥菊提取物高、中、低剂量组,免疫抑制小鼠紫锥菊提取物组和正常对照小鼠紫锥菊提取物组高、中、低剂量组分别按100mg/kg、50 mg/kg、25 mg/kg灌胃,连续灌胃21d,测定其脾脏指数、胸腺指数和血清溶血素水平。试验结果表明,与空白组比较,模型组小鼠脾脏指数、胸腺指数显著降低(P0.05),血清溶血素水极显著降低(P0.01);正常小鼠高剂量试验组脾脏指数显著提高(P0.05);紫锥菊高、中剂量组胸腺指数显著提高(P0.05),血清溶血素水平显著提高(P0.05)。与模型组相比,免疫抑制小鼠紫锥菊高、中剂量组脾脏指数极显著提高(P0.01);各试验组胸腺指数极显著提高(P0.01);紫锥菊高、中剂量试验组血清溶血素水平有极显著提高(P0.01),低剂量组差异显著(P0.05)。     

盐酸克仑特罗对小鼠心电图的影响

为研究盐酸克仑特罗对小鼠心电图(ECG)的影响,选用4周龄健康清洁级雄性昆明小鼠50只,体重18~22g,随机分为5组,每组10只,分别为对照组(生理盐水)、1组(0.1mg/kg b.w.)、2组(1mg/kg b.w.)、3组(2mg/kg b.w.)和4组(5mg/kg b.w.),各组小鼠均通过腹腔注射给药,1次/d,连续给药30d。末次给药后24h,监测小鼠的心电图(ECG)变化。结果表明:第2、3和4组小鼠心率加快,窦性心动过速,T波低平,与对照组相比差异均极显著(P0.01);J点下移,第2组与对照组相比差异显著(P0.05),第3组和第4组与对照组相比差异均极显著(P0.01)。盐酸克仑特罗导致小鼠ECG异常,且具有剂量依赖性。     

地克珠利对肉鸡生长、屠宰性能、免疫机能及血清生化指标的影响

选用288只1日龄AA肉鸡,随机分为4组,每组6个重复,每重复12只鸡.对照组饲喂基础日粮,试验组分别于基础日粮中添加1、2、4 mg/kg地克珠利,试验期49 d.结果表明,基础日粮中添加1～4 mg/kg地克珠利对肉鸡生长性能和屠宰性能均无显著影响(P＞0.05);1 mg/kg地克珠利组肉鸡免疫器官指数、新城疫抗体效价和外周血T淋巴细胞转化率与对照组均无显著差异(P＞0.05),2、4 mg/kg组外周血T淋巴细胞转化率显著低于对照组(P＜0.05或P＜0.01),4mg/kg组肉鸡于28日龄免疫器官指数显著高于对照组(P＜0.05),血清新城疫抗体效价显著低于对照组(P＜0.05);肉鸡血清淀粉酶活性,2、4 mg/kg组于28、35(停药0d)、42日龄(停药7d)显著低于对照组和1 mg/kg组(P＜0.05或P＜0.01);3个试验组血清总蛋白含量于28、35(停药0d)、42日龄(停药7d)均显著或极显著(P＜0.05或P＜0.01)高于对照组;血清总超氧化物歧化酶活性,2、4 mg/kg组于28日龄显著或极显著(P＜0.05或P＜0.01)高于对照组和1 mg/kg组;4 mg/kg组于35日龄(停药0d)和42日龄(停药7d)显著低于对照组和其他2个试验组(P＜0.05或P＜0.01);血清葡萄糖含量各组间均差异不显著(P＞0.05).49日龄(停药14 d)各组间上述血清生化指标差异均不显著(P＞0.05).相关分析表明,血清总蛋白含量和葡萄糖含量与平均日增重间存在着极显著的正相关关系(P＜0.01),总超氧化物歧化酶活性与平均日增重间存在着极显著的负相关关系(P＜0.01).     

冷冻保存对猪耳成纤维细胞H19和IGF2R基因DNA甲基化和基因表达的影响

为探索冷冻保存对猪体细胞H19和IGF2R基因DNA甲基化的影响,本研究以梅山猪耳成纤维细胞为材料,采用亚硫酸氢盐测序和RT-PCR技术,检测了新鲜和冷冻保存细胞中H19和IGF2R基因的DNA甲基化状态和表达量,并对甲基化相关基因的表达水平进行分析。结果表明:冷冻组中H19基因DMR1和DMR3的甲基化率极显著高于新鲜组(P0.01),H19基因DMR2表现为去甲基化,极显著低于新鲜组中的甲基化率(P0.01),且该基因表达量极显著高于新鲜组(P0.01);冷冻组IGF2R基因DMR2表现为超甲基化,冷冻组极显著高于新鲜组中的甲基化率(P0.01),但IGF2R基因表达量无显著差异(P0.05);冷冻组中DNMT3A和DNMT1的基因表达量极显著高于新鲜组(P0.01),DNMT3B基因表达量则无显著差异(P0.05)。本实验条件下,冷冻保存影响了H19和IGF2R基因甲基化控制区的DNA甲基化状态,从而影响了该基因的表达水平。     

棉酚对雄性小鼠的生殖毒性作用

为了观察棉酚对雄性小鼠的生殖毒性,将48只雄性小鼠随机分成4组。对照组(羧甲基纤维素钠)、低剂量组(30 mg/kg·d)、中剂量组(60 mg/kg·d)和高剂量组(240 mg/kg·d)。连续灌胃给药20 d。第21天处死,取睾丸称重并计算脏器指数,将睾丸进行病理组织学观察。结果:前两周,高剂量组体重显著下降(P0.05),对照组体重显著上升(P0.05),第3周高剂量组体重差异极显著(P0.01);与对照组相比,低剂量组睾丸脏器指数差异极显著(P0.01),中剂量组差异显著(P0.05),高剂量组差异不显著(P0.05);睾丸组织进行H.E.染色,对照组无明显病理变化,低、中剂量组病变轻微,高剂量组正常结构遭到破坏,结构松散。结论:棉酚能够抑制小鼠体重的增长,不同浓度的棉酚对小鼠睾丸组织造成不同程度的病理损伤,60 mg/kg·d和240 mg/kg·d棉酚对雄性小鼠有致死作用。     

桦木酸对环磷酰胺致小鼠免疫器官氧化损伤的保护作用

为了研究桦木酸(BA)对环磷酰胺(Cy)诱导小鼠免疫器官氧化损伤的影响。将50只健康雄性昆明小鼠随机分为5组,即对照组、Cy组及0.05、0.50、5.00 mg/kg BW BA组。对照组和Cy组灌服1%的可溶性淀粉溶液,其余各组按不同剂量的BA灌服,连续14 d后,除对照组注射生理盐水外,其余4组均腹腔注射Cy(50 mg/kg BW)诱导氧化应激模型。收集血清、脾脏和胸腺,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性及白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)含量,检测脾脏和胸腺超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性及还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量。结果显示:1)对于体重,对照组与Cy组无显著差异(P0.05),各剂量BA组与Cy组无显著差异(P0.05)。2)与对照组相比,Cy极显著提高了血清AST、ALT活性(P0.01),而5.00 mg/kg BW BA极显著缓解了这一现象(P0.01)。3)与对照组相比,Cy引起了脾脏指数和胸腺指数的显著降低(P0.05),而0.05 mg/kg BW BA显著缓解了胸腺指数的降低(P0.05)。4)与对照组相比,Cy组胸腺SOD活性、胸腺CAT活性、脾脏GSH含量显著或极显著下降(P0.05或P0.01),脾脏MDA含量极显著升高(P0.01);与Cy组相比,0.50 mg/kg BW BA组显著或极显著提高了脾脏和胸腺GSH-Px和CAT活性及脾脏GSH含量(P0.05或P0.01),极显著降低脾脏M DA含量(P0.01),但极显著降低了胸腺SOD活性(P0.01);与Cy组相比,5.00 mg/kg BW BA组显著或极显著提高了脾脏和胸腺GSH-Px和CAT活性(P0.05或P0.01),极显著降低脾脏MDA含量(P0.01)。由此可见,BA能够改善Cy引起的小鼠免疫器官的氧化应激,对Cy诱导的氧化损伤有预防性的保护作用。     

包被氧化锌对断奶仔猪生长性能、血清生化指标及营养物质表观消化率的影响

本试验通过与未包被氧化锌(Zn O)对比,考察包被氧化锌(C-Zn O)对断奶仔猪生长性能、血清生化指标、营养物质表观消化率影响,旨在研究C-Zn O取代传统Zn O的效果,对生产实践中减少Zn O用量的可能性和加强其效果的可能性进行探讨。选28日龄遗传背景相似、平均体重为(9.32±0.38)kg的断奶大白仔猪120头,随机分成5组,每组4个重复,每个重复6头猪(公母各占1/2)。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加2 400 mg/kg Zn O和1 800、2 400、2 760 mg/kg C-Zn O。试验期为28 d。结果表明:与对照组相比,饲粮中添加2 400 mg/kg C-Zn O可极显著提高断奶仔猪的平均日增重(P0.01),显著降低料重比(P0.05),极显著降低腹泻率(P0.01),其中2 400 mg/kg C-Zn O组的平均日增重极显著高于Zn O组(P0.01)。与对照组相比,2 400 mg/kg C-Zn O组血清生长激素、免疫球蛋白G、免疫球蛋白M含量极显著升高(P0.01);粗蛋白质和粗脂肪的表观消化率极显著改善(P0.01);大肠杆菌菌群数量极显著降低(P0.01),双歧杆菌菌群数量极显著升高(P0.01)。2 400 mg/kg C-Zn O组与Zn O组相比,血清生长激素含量显著提高(P0.05),碱性磷酸酶活性显著降低(P0.05)。1 800 mg/kg C-Zn O组与Zn O组生长性能、血清指标及营养物质表观消化率差异均不显著(P0.05)。Zn O组与对照组相比腹泻率显著降低(P0.05),其他生长性能指标差异不显著(P0.05)。本研究结果提示:添加2 400 mg/kg C-Zn O可显著提高断奶仔猪的生长性能,改善营养物质消化状况,有效控制仔猪腹泻;1 800 mg/kg C-Zn O可替代2 400 mg/kg Zn O。     

艾蒿水提物对肉仔鸡肝和胸肌抗氧化指标的影响

试验旨在研究不同水平的艾蒿水提物对肉仔鸡肝和胸肌抗氧化指标的影响。试验选取192只健康1日龄AA雏鸡,随机分为4个处理组,每组6个重复,每重复8只。4种饲粮分别在基础饲粮中添加0、500、1 000和2 000 mg/kg的艾蒿水提物。结果表明:21日龄雏鸡,1 000 mg/kg添加组的肝过氧化氢酶(CAT)活性极显著升高(P0.01);2 000 mg/kg添加组的肝CAT和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著或极显著高于对照组(P0.05或P0.01);42日龄雏鸡,500 mg/kg添加组的肝超氧化物歧化酶(TSOD)活性及胸肌总抗氧化能力(T-AOC)水平和T-SOD活性均显著升高(P0.05),且肝的GSH-Px活性极显著升高(P0.01);1000 mg/kg添加组的胸肌T-SOD活性极显著升高(P0.01);2 000 mg/kg添加组的肝T-AOC水平和胸肌T-SOD的活性显著或极显著升高(P0.05或P0.01),但肝CAT和T-SOD活性及胸肌T-AOC水平均显著降低(P0.05)。此外,500和1 000 mg/kg添加组的丙二醛(MDA)含量均显著降低(P0.05)。结果提示,日粮中添加艾蒿水提物可提高肉仔鸡肝和胸肌的抗氧化能力。     

抗菌肽Sublancin增强小鼠获得性免疫的研究

本试验旨在研究抗菌肽Sublancin灌胃对卵清白蛋白(OVA)免疫小鼠获得性免疫反应的影响。试验选用6周龄雌性BALA/c小鼠60只,随机分为5个组,每组12只小鼠。空白对照组小鼠灌胃生理盐水,阳性对照组小鼠灌胃2.5 mg/kg体重的左旋咪唑溶液,抗菌肽Sublancin组小鼠灌胃0.5、1.0和2.0 mg/kg体重的抗菌肽Sublancin溶液。各组小鼠连续灌胃14 d。在灌胃结束24 h后用模式抗原OVA皮下注射对各组小鼠进行免疫,14 d后加强免疫1次,二次免疫7 d后采血和取脾脏,用间接酶联免疫吸附测定(ELISA)法对血清OVA特异性免疫球蛋白G(Ig G)及其亚类Ig G1、Ig G2a和细胞因子含量进行检测。结果表明:1)与空白对照组相比,0.5、1.0和2.0 mg/kg抗菌肽Sublancin组和阳性对照组小鼠血清OVA特异性Ig G含量均显著或极显著提高(P0.05或P0.01)。2)与空白对照组相比,1.0和2.0 mg/kg抗菌肽Sublancin组和阳性对照组小鼠血清OVA特异性Ig G1含量显著或极显著提高(P0.05或P0.01),1.0 mg/kg抗菌肽Sublancin和阳性对照组小鼠血清OVA特异性Ig G2a含量显著提高(P0.05),1.0 mg/kg抗菌肽Sublancin组和阳性对照组的小鼠脾脏淋巴细胞的刺激指数显著提高(P0.05)。3)与空白对照组相比,1.0 mg/kg抗菌肽Sublancin组和阳性对照组的小鼠脾脏淋巴细胞上清液中1型辅助性T细胞(Th1)细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-2(IL-2)的含量均显著或极显著提高(P0.05或P0.01)。4)与空白对照组相比,0.5和1.0 mg/kg抗菌肽Sublancin组和阳性对照组的小鼠脾脏淋巴细胞上清液中2型辅助性T细胞(Th2)细胞因子白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)的含量均显著或极显提高(P0.05或P0.01)。5)0.5、1.0和2.0 mg/kg抗菌肽Sublancin组与阳性对照组之间的以上检测指标均没有显著差异(P0.05)。本试验结果表明,抗菌肽Sublancin可以诱导OVA免疫小鼠产生Th1和Th2混合型免疫反应,增强其体液免疫和细胞免疫功能。     

纳米氧化锌对小鼠的亚慢性损伤研究

为检测纳米氧化锌对小鼠的亚慢性损伤作用,以不同剂量经口连续染毒纳米氧化锌,90d后摘眼球取血,对血常规、肝功、肾功、抗氧化指标进行检测。并扑杀各组小鼠,取肝脏、肾脏等组织,切片后经HE染色观察染毒小鼠的病理损伤。结果发现,40、160及320mg/kg剂量组小鼠红细胞数显著低于对照组(P0.05);40mg/kg剂量组小鼠血红蛋白含量极显著低于对照组(P0.01)。40mg/kg剂量组小鼠谷丙转氨酶(ALT)活性显著高于对照组(P0.05)。80、320mg/kg剂量组小鼠谷草转氨酶(AST)活性显著高于对照组(P0.05)。80、160mg/kg剂量组小鼠血清肌酐含量极显著高于对照组(P0.01)。各染毒组小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性极显著高于对照组(P0.01)。40、80及320 mg/kg剂量组小鼠血清抑制羟自由基能力极显著低于对照组(P0.01)。40mg/kg剂量组丙二醛(MDA)含量极显著高于对照组(P0.01)。80mg/kg剂量组小鼠血清过氧化氢酶(CAT)活性极显著高于40、160及320mg/kg剂量组(P0.01)。病理学检查结果显示,小肠黏膜结构不完整,绒毛出现断裂,黏膜上皮脱落。心肌纤维断裂,心肌细胞肿大,细胞核溶解、形状不规则。肝细胞排列不规则,轮廓模糊,有少量核溶解、核破裂现象,部分区域炎性细胞浸润。肾脏部分区域炎性细胞浸润,少量肾小球萎缩。结果表明,90d暴露纳米氧化锌能影响小鼠的抗氧化系统,并对小肠、肝脏、肾脏、心脏等脏器产生损伤作用。     

莫沙必利用于小鼠试验最佳剂量筛选

为了筛选用于小鼠试验用莫沙必利的最佳剂量,本试验随机选用120只昆明系小鼠,分别用20 mg/kg·bw、10 mg/kg·bw、5 mg/kg·bw、2 mg/kg·bw的莫沙必利混悬液对小鼠进行粪便试验和肠推进试验,观察小鼠的首粒黑便时间,6 h和24 h排便量及重量,以及墨汁在小肠中的推进率。结果显示,小肠推进率试验中10 mg/kg·bw莫沙必利组与空白组比较有显著差异(P0.05),各组与阳性对照组差异极显著(P0.01);粪便试验中,10 mg/kg·bw莫沙必利组与药物空白组相比各项指标差异均为极显著(P0.01),而且与模型空白组相比较除首粒黑便时间表现出极显著外(P0.01),其余指标均表现为不显著,此结果与其余剂量组相比较有着较大优势。表明小鼠试验用莫沙必利剂量宜选用10 mg/kg·bw。     

桦木酸对地塞米松致小鼠氧化应激的机制研究

本试验旨在研究桦木酸(BA)对地塞米松(Dex)诱导氧化应激小鼠的保护作用和机制。将40只健康雄性昆明小鼠随机分为5组,即对照(NC)组、Dex组、0.25 mg/kg BA组、0.50 mg/kg BA组、1.00 mg/kg BA组。NC组和Dex组小鼠灌服1%的可溶性淀粉糊,其余各组按不同剂量的BA灌服,连续14 d后,除对照组注射生理盐水外,其余4组均腹腔注射Dex(25 mg/kg BW)诱导氧化应激模型。检测各组小鼠肝脏、脾脏和胸腺总抗氧化能力(T-AOC)、抑制羟自由基能力和过氧化物酶(POD)的活性,反转录(RT)-PCR检测脾脏和胸腺丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中凋亡信号调节激酶1(ASK1)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和P38基因的表达量,蛋白质免疫印迹(Western Blot)法检测脾脏MAPK信号通路中ASK1、JNK和P38蛋白的表达量。结果表明:1)与NC组相比,Dex组的肝脏T-AOC、抑制羟自由基能力,脾脏POD活性,胸腺T-AOC、抑制羟自由基能力均极显著下降(P0.01);与Dex组相比,0.50和1.00 mg/kg BA组肝脏T-AOC、抑制羟自由基能力以及POD活性均显著或极显著的升高(P0.05或P0.01),0.50 mg/kg BA组脾脏T-AOC、0.50和1.00 mg/kg BA组脾脏抑制羟自由基能力、0.25和1.00 mg/kg BA组脾脏POD活性均显著或极显著的升高(P0.05或P0.01),0.50和1.00 mg/kg BA组胸腺T-AOC、抑制羟自由基能力和POD的活性均显著或极显著升高(P0.05或P0.01)。2)与NC组相比,Dex组脾脏和胸腺ASK1、JNK和P38 mRNA表达量均极显著升高(P0.01);与Dex组相比,0.50和1.00 mg/kg BA组脾脏和胸腺ASK1、JNK和P38mRNA表达量均显著或极显著下降(P0.05或P0.01)。3)与NC组相比,Dex组脾脏JNK和P38蛋白的表达量极显著升高(P0.01);与Dex组相比,0.50 mg/kg BA组脾脏ASK1蛋白的表达量显著降低(P0.05),0.25、0.50和1.00 mg/kg BA组脾脏JNK和P38蛋白的表达量显著或极显著降低(P0.05或P0.01)。由此可见,BA预处理后,增强了Dex应激小鼠肝脏、脾脏和胸腺的T-AOC、抑制羟自由基能力和POD活性,降低了Dex应激小鼠脾脏和胸腺MAPK信号通路中ASK1、JNK和P38 mRNA表达量以及脾脏ASK1、JNK和P38蛋白的表达量。BA对Dex造成的氧化损伤具有预防性的保护作用,并且这种保护作用与JNK-P38 M APK信号通路相关。     

叶酸添加水平对肉仔鸡肝脏中脂肪代谢相关基因表达和甲基化的影响

本试验旨在考察叶酸添加水平对肉仔鸡血清中脂蛋白脂肪酶(LPL)和脂肪酸合成酶(FAS)活性、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)含量以及肝脏中脂肪代谢相关基因表达和甲基化的影响。选择1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡300只,随机分成3组,每组5个重复,每个重复20只。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮中添加5和10 mg/kg叶酸的试验饲粮。试验期为42 d。结果显示:1)与对照组相比,饲粮中添加10 mg/kg叶酸显著降低了21日龄肉仔鸡血清中LPL活性(P<0.05);饲粮中添加5和10 mg/kg叶酸极显著降低了42日龄肉仔鸡血清中LPL活性(P<0.01),极显著提高了21和42日龄肉仔鸡血清中PPARγ含量(P<0.01),极显著降低了21和42日龄肉仔鸡血清中FAS活性(P<0.01)。2)实时荧光定量PCR结果发现,饲粮中添加5和10 mg/kg叶酸均未显著影响42日龄肉仔鸡肝脏中LPL和PPARγ基因的相对表达量(P>0.05),但均显著降低了FAS基因的相对表达量(P <0.05)。3)甲基化分析显示,饲粮中添加5和10 mg/kg叶酸均未显著影响42日龄肉仔鸡肝脏中LPL和PPARγ基因的甲基化比率(P>0.05),但饲粮中添加5 mg/kg叶酸极显著提高了42日龄肉仔鸡肝脏中FAS基因的甲基化比率(P<0.01)。由此得出,饲粮中添加5和10 mg/kg叶酸极显著降低了42日龄肉仔鸡血清中LPL和FAS的活性,极显著增加了PPARγ的含量,显著降低了肝脏中FAS基因的表达;此外,饲粮中添加5 mg/kg叶酸还极显著提高了42日龄肉仔鸡肝脏中FAS基因的甲基化水平。     

C型钠肽预处理对绵羊卵母细胞体外成熟及相关基因表达的影响

本实验旨在研究C型钠肽(CNP)预处理对绵羊卵母细胞体外成熟(IVM)及相关基因(Dnmt1、Zar1、Mater、HAS2、PTX3和PTGS2)表达的影响。以体外成熟24 h为对照组,研究CNP预处理组(200nmol/L CNP预处理4 h然后体外成熟24 h)中卵母细胞经孤雌激活(PA)后的发育情况,并通过RT-q PCR检测CNP预处理对成熟相关基因表达的影响。结果表明:200 nmol/L CNP可在4 h内有效抑制卵母细胞减数分裂进程。CNP预处理组中孤雌胚胎囊胚率显著高于对照组(P0.05);绵羊卵母细胞成熟培养前,CNP预处理组中卵丘细胞扩展相关基因HAS2、PTGS2和PTX3表达量较对照组极显著上调(P0.01);CNP预处理组中母源基因Dnmt1、Zar1和Mater表达量与对照组均无显著差异(P0.05)。绵羊卵母细胞成熟培养后,CNP预处理组中PTX3表达量极显著高于对照组(P0.01),而CNP预处理组中HAS2表达量较对照组极显著下调(P0.01);CNP预处理组中母源基因Dnmt1、Zar1和Mater表达量均显著高于对照组(P0.05)。综上表明,CNP预处理可影响绵羊卵丘细胞扩展相关基因HAS2、PTGS2、PTX3和母源基因Dnmt1、Zar1、Mater的表达,并提高绵羊卵母细胞成熟质量及早期胚胎发育能力。     

半胱胺螯合锌在营养限制型发育迟缓猪中的应用研究

试验旨在研究饲粮中添加半胱胺螯合锌(Zn-CS)对营养限制型发育迟缓猪生长性能、生理生化指标、免疫机能及养分消化率的影响。试验选用50头体重(6.26±0.97)kg大白营养限制型发育迟缓猪,随机分为5组,每组5个重复,每个重复2头猪,对照组饲喂基础饲粮,试验组是在基础饲粮中分别添加32、40、48、56 mg/kg Zn-CS,试验期28 d。结果表明:156 mg/kg组极显著提高营养限制型发育迟缓猪的平均日增重(P0.01),48、56 mg/kg组显著降低料肉比(P0.05),添加Zn-CS极显著降低腹泻率(P0.01);256 mg/kg组极显著提高血液生长激素、T3和T4水平(P0.01),48、56 mg/kg组极显著降低生长抑素水平(P0.01);356 mg/kg组能极显著提高Ig A和血清总蛋白水平(P0.01),显著提高血液Ig G水平(P0.05);448、56 mg/kg组均能显著提高干物质、粗蛋白及粗脂肪的表观消化率(P0.05);5添加Zn-CS显著降低粪中大肠杆菌数(P0.05)。综上所述,饲粮中添加适量Zn-CS,可有效提高营养限制型发育迟缓猪的生长性能,降低腹泻率,增强免疫机能,提高养分消化率和改善肠道微生物平衡,Zn-CS较适宜添加量为56 mg/kg。     

单宁酸对北京鸭生长性能、屠宰性能、抗氧化指标和免疫器官指数的影响

为探讨日粮中添加单宁酸对北京鸭屠宰性能、抗氧化指标和免疫器官指数的影响,选取1 200只1日龄体重相近的Z型北京鸭,随机分为4组,每组5个重复,每个重复60只鸭,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮的基础上分别添加100 mg/kg、200 mg/kg、300 mg/kg的单宁酸,试验期38 d。结果显示:(1)饲粮中添加单宁酸可显著降低北京鸭料重比(P0.05),而对平均出栏重、平均日增重和平均日采食量无显著影响(P0.05);(2)饲粮中添加单宁酸对北京鸭屠宰性能无显著影响(P0.05);(3)200 mg/kg、300 mg/kg组血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性极显著提高(P0.01),200 mg/kg组血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性极显著提高(P0.01),各试验组血清丙二醛(MDA)含量与对照组差异不显著(P0.05);(4)100 mg/kg、200 mg/kg组肝脏GSH-Px活性极显著提高(P0.01),所有试验组肝脏T-SOD活性显著提高(P0.05),肝脏MDA含量与对照组差异不显著(P0.05);(5)300 mg/kg组胸腺指数(P0.05)和脾脏指数显著提高(P0.01),所有试验组法氏囊指数与对照组差异不显著(P0.05)。研究表明,单宁酸能提高北京鸭生长性能和抗氧化能力,促进免疫器官发育,且不会对北京鸭屠宰性能产生不良影响。