不同产地当归药材HPLC指纹图谱的建立及2种主成分含量测定

目的:建立不同产地当归药材HPLC指纹图谱,并测定药材及其提取物中2种主成分的含量。方法:以Phenomenex Gemini C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,建立当归药材的HPLC指纹图谱并对药材及其水蒸汽提取物进行含量测定;采用中药指纹图谱相似度评价系统(2012版)对16批样品进行相似度评价分析;通过SPSS 21.0统计软件采用聚类分析(CA)和主成分分析(PCA)对HPLC指纹图谱进行模式识别研究。结果:建立了当归药材指纹图谱,16批不同产地当归药材的相似度均≥0.937;确定共有峰12个,并且药材中主成分阿魏酸含量为0.89～1.71 mg/g,藁本内酯含量为11.77～31.20 mg/g。CA将不同批次当归药材分为5类,反映了甘肃16个不同产区当归药材的质量特征;通过PCA筛选出累计贡献率达到91.093%的4个主成分,得到决定当归药材质量的4个化学成分。结论:建立的HPLC指纹图谱结合含量测定、CA、PCA方法可以客观、全面、有效地用于当归药材的质量评价,为当归配方颗粒的制备提供参考依据。     

滋阴清热降糖丸HPLC指纹图谱的建立及多成分含量测定

建立滋阴清热降糖丸HPLC指纹图谱,并对多种成分进行含量测定。色谱柱为Agilent 5 HC-C₁₈(250.0 mm×4.6 mm, 5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,采用PDA检测器在190～400 nm处进行全波长扫描,提取最大波长色谱图。对10批样品进行HPLC分析,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价”生成指纹图谱,并对样品中多种成分进行含量测定。试验成功建立了滋阴清热降糖丸HPLC指纹图谱,确定共有峰,同时对9种成分进行含量测定,方法学考察符合要求。本研究建立的HPLC指纹图谱和含量测定方法操作简便,测定成分全面,重复性好,可为滋阴清热降糖丸质量标准的修订提供参考。     

藏药婆婆纳HPLC特征图谱的建立与主成分含量测定

建立10批不同产地婆婆纳的特征图谱，对婆婆纳中主要化学成分进行定量研究。采用HPLC建立不同产地婆婆纳的特征图谱，选用Agilent SB色谱柱(4.6 mm×250.0 mm, 5μm),以乙腈∶四氢呋喃(20∶7)-0.1%磷酸水为流动相，梯度洗脱，流速1.0 mL/min,检测波长275 nm,进样量10μL。通过相似度评价、灰色关联度分析、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别式分析(OPLS-DA)对10批婆婆纳的特征图谱进行分析，并通过测定标志性成分含量综合分析婆婆纳药材质量。结果表明，10批婆婆纳HPLC特征图谱具有16个共有峰，共指认出胡黄连苷Ⅱ、木犀草素2个共有峰，其中胡黄连苷Ⅱ的含量范围为0.35%～2.60%。建立的HPLC特征图谱及含量测定方法可科学、有效地对不同产地婆婆纳药材质量进行探究，为婆婆纳药材质量控制方法的建立提供科学支撑。     

HPLC指纹图谱法评价市售僵蚕的品质

为了科学评价僵蚕的品质,建立了僵蚕的高效液相色谱指纹图谱分析方法,并对市售13个批次僵蚕药材的指纹图谱进行比较分析。结果发现这13批僵蚕的HPLC指纹图谱上共有11个明显的色谱峰,通过与标准品比对确定其中4个色谱峰分别为芦丁、紫云英苷、槲皮素和山奈酚; 13个批次僵蚕药材的指纹图谱具有显著差异,仅有5个共有特征峰,而且共有峰峰面积相差较大,相对标准偏差(RSD)分布在43. 31%~90. 62%之间。以共有模式R为基准,对市售僵蚕药材特征指纹图谱进行相似度计算,结果显示13个样品中相似度大于0. 90的有8个样品,相似度在0. 85~0. 90之间的有1个样品,相似度低于0. 85的有4个样品。结果表明,建立的僵蚕HPLC指纹图谱专属性强、稳定性好,能较真实、全面地反映僵蚕的特征;所测市售僵蚕药材品质参差不齐,在化学成分组成和含量上均有显著差异。     

藏药刺柏HPLC指纹图谱及穗花杉双黄酮含量测定

试验旨在建立藏药刺柏的HPLC指纹图谱,运用2种统计方法分析不同产区的刺柏药材质量差异。采用HPLC-DAD技术,色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18色谱柱,以乙腈为流动相A,0.1%磷酸为流动相B,梯度洗脱,建立刺柏药材的指纹图谱并对指标性成分进行测定含量。对6批不同藏药刺柏进行相似度评价,并运用聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)对HPLC指纹图谱进行分类分析。结果表明,刺柏药材HPLC指纹图谱共有峰16个,对14号峰进行指认为穗花杉双黄酮;6批刺柏药材的相似度均0.90;CA将不同产地刺柏药材分为3类,反映了6个不同产区刺柏药材的质量特征;PCA结果显示前4个主成分的累积贡献率达到96.13%,6个化学成分代表刺柏药材质量。说明建立的HPLC指纹图谱结合含量测定、CA、PCA方法可有效控制刺柏的质量,为药材质量控制提供科学依据。     

不同产地与不同生产方式的丹参药材质量相似性评价研究

本研究旨在明确不同产地、不同生产方式丹参药材的质量相似性,建立丹参药材主成分特征图谱以及色差指纹图谱,形成快速、科学的立体质量评价方法,并为丹参临床使用及不同地域药材生产提供数据参考。运用HPLC建立丹参药材指纹特征图谱质量分析方法,通过中药指纹图谱相似度评价系统和ModuleLab Chroman软件对丹参药材质量进行相似性评价及计量分析;采用主成分分析（PCA）、K最近邻法（KNN）等算法及可视化方法对样品丹参药材的色度值总体分布情况进行分析。结果显示,不同产地丹参药材共有11个共有峰,合成特征图谱相似度范围为0.894～0.999,表明不同产地样品化学成分差异较小,各产地丹参药材具有较好的相似度,但根据成分PCA得分载荷图与聚类分析显示,主成分贡献率为85.93%,其中丹酚酸B成分有较高的贡献率,说明丹酚酸B是造成不同产地差异的主要物质;主成分测定显示不同产地与不同生产方式的丹参药材总丹参酮类成分也具有较大差异,总丹参酮含量为1.358～7.515 mg/g,丹酚酸B含量为4.574～112.670 mg/g;药材颜色差异分析结果表明,不同产区丹参药材颜色具有显著差异,特别是广西...     

构树叶的HPLC特征图谱及多成分含量测定

试验旨在建立构树叶HPLC特征图谱，同时测定8个成分的含量。采用Thermo Scientific Syncronis C₁₈柱，乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相，检测波长330 nm。借助中药色谱指纹图谱相似度系统评价16批构树叶相似度，外标法测定8个成分含量，结合聚类分析和主成分分析评价不同批次构树叶品质和一致性。结果显示，16批构树叶特征图谱相似度较高，相似度在0.814～0.992。试验得到18个共有峰，并测定了芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、荭草苷、牡荆苷、异牡荆素、野黄芩苷、新绿原酸、隐绿原酸、绿原酸等8个成分的含量。主成分分析将16批样品聚为3类，样品分类趋势明显，聚类分析与主成分分析结果一致。研究表明，试验建立的方法简便、可靠，可同时测定构树叶中8个成分含量；8个成分能够体现构树叶整体分类信息，可将其作为构树叶特征成分。     

蓝刺头药材总黄酮的高效液相色谱指纹图谱研究

本实验旨在通过建立蓝刺头总黄酮的高效液相色谱指纹图谱，为评价蓝刺头药材的质量提供依据。色谱柱为Apollo C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm），流动相为甲醇-1%甲酸（梯度洗脱），流速为1.0 mL/min，检测波长为331 nm，柱温为30℃，进样量为40μL。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012A版）、SPSS 22.0统计学软件和SIMCA-P12.0软件对10批蓝刺头所含总黄酮的色谱数据进行化学计量学分析。结果表明：建立的蓝刺头总黄酮的指纹图谱共有模式，共标定了10个共有峰，其中8号峰为芹菜苷峰；10批药材相似度较好，主成分分析和聚类分析均将10批药材分为3类；结合偏最小二乘回归分析得到引起蓝刺头药材批次间总黄酮成分差异的4个色谱峰。综上，所建立的高效液相色谱指纹图谱方法结果准确、稳定，可为蓝刺头药材的质量控制提供依据。     

不同产地甘草的HPLC指纹图谱研究

目的:研究甘草的高效液相色谱指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。方法:利用HPLC方法,梯度洗脱。色谱条件为:Kromasil C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流速0.8 m L/min,柱温30℃,流动相A为乙腈,流动相B为(pH值3)磷酸溶液,流动相A梯度洗脱(10%~90%乙腈),分析时间为65 min。结果:HPLC指纹图谱分析显示,21个不同批次和产地的甘草样品在276 nm处共获得包括甘草苷(5号峰)在内的10个共有峰,相似度分析结果均在0.99以上。方法学考察表明,精密度、稳定性、重现性均良好。结论:甘草的指纹图谱特征性及专属性强,可用于全面控制甘草的质量,确保每批产品的均一性。     

基于HPLC特征图谱结合化学计量学方法评价不同产地角倍和肚倍的质量

目的：采用高效液相色谱法（HPLC）测定对不同来源五倍子两种形态肚倍和角倍进行HPLC特征指纹图谱研究,并通过聚类分析和主成分分析深入研究五倍子药材不同形态中有效成分差异,为五倍子的质量控制及评价提供参考。方法：采用HPLC梯度洗脱法对肚倍和角倍样品进行测定,并记录色谱图,按《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012 版）》对色谱图进行匹配生成肚倍和角倍的特征图谱,进行相似度分析。采用化学计量学软件origin 2018对肚倍和角倍进行聚类分析、主成分分析（PCA）研究。结果：分别建立了肚倍和角倍的 HPLC 特征指纹图谱共有模式,标识了没食子酸、没食子酸甲酯、1,2,3,6-四-O-没食子酰葡萄糖、1,2,3,4,6-五-O-没食子酰葡萄糖4个特征峰。角倍与肚倍相似度低,可通过聚类分析、主成分分析将其分为 2 大类从两者的HPLC特征指纹图谱相比,肚倍比角倍多了5个峰,保留时间为20.3 min、26.0min、27.6min、54.6min、75.9min,同时少了49.1 min相对位置的保留峰。结论：通过分析不同产地的五倍子角倍和肚倍中特征性化学成分,表明肚倍的有效成分多于角倍。利用相似度研究、聚类分析技术及主成分分析,可有效区分二者,为五倍子药材质量综合评价和利用提供参考。     

白头翁汤剂的HPLC指纹图谱研究

为了研究70%乙醇提取白头翁汤剂的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,进一步验证提取工艺的稳定性,为其质量控制提供依据,为后续成分分析及表征奠定试验基础,试验采用8倍处方量70%乙醇,回流1.5 h,提取2次;采用HPLC法,检测波长为205 nm,以小檗碱(15号峰)为参照峰,测定10批白头翁汤的色谱图。共标定了16个共有峰,10批白头翁汤与对照指纹图谱的相似度均大于0.98,通过对照品指认了5个共有峰。结果表明:建立的白头翁汤剂的HPLC指纹图谱方法稳定、可行。说明该方法可用于70%乙醇提取白头翁汤剂的质量控制。     

白僵蚕高效液相色谱指纹图谱的研究

建立白僵蚕甲醇提取物高效液相色谱指纹图谱,可较完整地反应白僵蚕内在化学信息,全面评价白僵蚕的质量。采用梯度洗脱高效液相色谱法对获取的指纹图谱数据进行相似度分析,建立了白僵蚕的指纹图谱。以主要的7个共有峰的相对保留时间和相对峰面积作为白僵蚕指纹图谱的相关技术参数,对10份白僵蚕样品测定得出的7个主要共有峰的相对保留时间重现性好,相对峰面积有明显差别。白僵蚕高效液相色谱指纹图谱可用于评价白僵蚕的质量。     

饲用植物蒲公英水提物HPLC特征图谱研究及聚类和主成分分析

研究旨在运用高效液相色谱法（HPLC）建立饲用植物蒲公英水提物的特征图谱，并用聚类分析和主成分分析对蒲公英水提物进行质量评价。采用Sunfire C18色谱柱，以乙腈-0.1%磷酸水为流动相，流速为0.8 m L/min，进样量10μL，柱温35℃，检测波长329 nm，将22批蒲公英水提物色图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件（2012年版）中，选取分离度、峰型较好的8个峰为特征峰，得到蒲公英水提物特征图谱，并进行相似度评价、聚类分析和主成分分析。结果表明：试验建立的蒲公英水提物HPLC特征图谱共确定了8个特征峰，指认了单咖啡酰酒石酸、绿原酸、咖啡酸和菊苣酸4个色谱峰，相似度结果为0.869～0.999，说明22批蒲公英水提物质量相对稳定；当欧氏距离为4时，聚类分析将22批不同产地的蒲公英分成3类，S6一类，S4一类，其余批次为一类；主成分分析中单咖啡酰酒石酸和菊苣酸具有最大的贡献度。通过相似度评价、聚类分析和主成分分析与特征图谱相结合，可为蒲公英水提物质量评价提供参考。     

乌腺金丝桃HPLC指纹图谱初步研究

为了建立乌腺金丝桃高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,试验采用HPLC法,将样品经甲醇超声提取,选用shim-pack VP-ODS C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);柱温40℃;流动相为甲醇和6 mmol/L磷酸氢二钠(磷酸调至p H值为6.5),梯度洗脱;分段用260 nm、324 nm、408 nm、588 nm检测;流速为0.6 m L/min的系统条件下进行研究。结果表明:此种检测方法的稳定性和重复性均符合要求;通过随机对10批药材样品的监测分析,建立了乌腺金丝桃中药材的HPLC指纹图谱,共标定了24个共有指纹峰。说明所用方法稳定、可靠、重复性好,可为乌腺金丝桃中药材的质量控制提供参考。     

基于HPLC指纹图谱及化学计量学对土茯苓饮片质量的评价

通过指纹图谱联合多元统计分析,确定可鉴别土茯苓饮片质量的指标成分。高效液相色谱法(HPLC)被用于15批土茯苓饮片指纹图谱的建立,并采用聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)筛选15批土茯苓饮片的差异性指标成分。结果显示,15批土茯苓样品指纹图谱具有9个共有峰,各批样品与对照图谱的相似度均在0.919以上,指纹图谱方法重复性良好;HCA结果表明15批土茯苓样品可被分成3类;PCA结果表明3个主成分能够较好地反映15批土茯苓样品的主要信息;OPLS-DA处理中变量重要性投影(VIP)筛选出的差异性指标成分依VIP值大小分别为色谱峰9号、2号、8号、1号、3号。当前市售土茯苓饮片质量不均,需划分质量等级;土茯苓饮片质控标准有待完善,需进行进一步研究。     

中药常山高效液相色谱检测方法的建立

建立常山药材的HPLC指纹图谱测定方法,为建立常山药材的质量标准提供依据。方法:采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.03%H3PO4(20∶80);p H值:5.0~6.5;流速:1.0m L/min;检测波长:265 nm;柱温:25℃;进样量:10μL;采用以上条件进行线性关系考察、精密度试验、重复性试验、稳定性试验和加样回收率试验,并测定了3批样品中常山乙素的含量。结果:通过对常山药材HPLC指纹图谱结果进行分析,得出常山乙素标准品在0.5~50μg/m L范围内线性关系良好,相关系数为0.999 8,精密度试验、重复性试验和稳定性试验的RSD值均小于2.0%,符合《中国兽药典》的相关规定。结论:中药常山的高效液相色谱检测方法所得图谱清晰,特征直观,所建立的HPLC指纹图谱可作为评价常山药材质量的参考。     

鱼腥草芩蓝口服液指纹图谱研究

以鱼腥草芩蓝口服液为研究对象,摸索不同流动相、溶剂、柱温、流速条件下的色谱图,通过中药指纹图谱相似度软件评价系统,计算相似度等相关参数,最终确定一个HPLC指纹图谱条件：Thermo C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以甲醇（A）-1 %磷酸水溶液（B）为流动相梯度洗脱,柱温25 ℃,体积流量1.0 mL·min-1,检测波长为240 nm。本研究建立的方法可靠,简便易行,为全面控制鱼腥草芩蓝口服液的质量提供科学依据。     

不同产地蜂胶HPLC指纹图谱测定及真伪判定

对不同产地来源的62个蜂胶样品用Venusil MP C184．6mm×250mm,5μm为色谱柱,甲醇：0．4％H3PO4=60：40为流动相,在360nm波长下进行了HPLC的指纹图谱测定。将蜂胶HPLC指纹图谱分为六个区域,提出了以第四区的1号峰、2号峰、5号峰为蜂胶鉴别的主要依据,结合六个区域的指纹图谱进行真伪鉴别。采用本文研究的方法,进行了长期的蜂胶真伪判定实践,证明该方法具有可操作性强、准确度高的特点。     

双标线性校正结合PDA辅助色谱峰定性用于印度獐牙菜指纹图谱分析

目的 建立印度獐牙菜指纹图谱,探讨和验证双标线性校正法结合PDA辅助法用于色谱峰定性的可行性。方法 采用HPLC建立印度獐牙菜指纹图谱,使用相似度分析和二维聚类分析进行质量评价,并使用双标线性校正结合PDA辅助法进行色谱峰定性。结果 10批次印度獐牙菜药材选定10个色谱峰作为指纹图谱的共有峰,经化学计量学评价,可对其质量进行初步评价;双标线性校正法预测保留时间的精度优于相对保留时间法;双标线性校正法结合PDA辅助法可更好的对色谱峰进行定性。结论 与相对保留时间法相比,双标线性校正法预测保留时间的准确度更高,色谱柱的适用范围更广。双标线性校正结合PDA对色谱法进行辅助定性可扩大双标线性校正的使用范围。     

十堰地区连翘叶HPLC指纹图谱的建立及抗氧化抑菌谱效关系研究

试验旨在通过研究十堰地区不同产地连翘叶HPLC指纹图谱与抗氧化、抑菌活性之间的谱效关系，初步确定其抗氧化、抑菌活性物质基础，为其质量控制方法研究提供参考。试验构建十堰地区十个不同产地的连翘叶HPLC指纹图谱，运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）确定共有峰。2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸自由基（ABTS+）清除法测定抗氧化活性，牛津杯法测定连翘叶水提物对金黄色葡萄球菌的抑菌活性；灰色关联度和主成分分析法相结合阐明指纹图谱中多成分和药效数据之间的谱效关系。结果显示，连翘叶水提物的指纹图谱确定了13个共有峰，灰色关联度法计算出12个共有峰与抗氧化和抑菌效果的关联度均大于0.6，主成分分析构建的主成分综合评分结果也与实际药理活性结果相符。研究表明，十堰地区连翘叶具备开发潜力，其中以化龙堰和青石村产地的质量最优。连翘叶的抗氧化和抑菌活性为多组分协同作用的结果，特征成分连翘酯苷A、连翘苷、芦丁为强关联药效基础物质，连翘叶水提物整体活性与这些特征成分含量呈正相关。