‘红肉蜜柚’在潮州的引种表现及栽培技术要点

从植物学特性、物候期、生长结果习性、果实性状等方面分析‘红肉蜜柚’在潮州市的引种表现,并介绍其栽培技术要点。     

‘红肉蜜柚’果实汁胞粒化过程中POD同工酶谱分析

【目的】探讨‘红肉蜜柚’果实汁胞粒化过程中过氧化物酶(POD)的同工酶变化及赤霉素对其的影响。【方法】以赤霉素处理和未经赤霉素处理的‘红肉蜜柚’果实的近中柱和远中柱汁胞为材料,统计粒化指数后,采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳方法进行可溶性和离子结合POD同工酶谱测定。【结果】发现‘红肉蜜柚’果实汁胞粒化指数随着果实生长发育呈先平稳后急剧上升的趋势,有无赤霉素处理无明显变化;可溶性POD中存在酸性POD和碱性POD,有无赤霉素处理对近、远中柱POD出现的时期和组分基本没有影响;离子结合POD只存在碱性POD,近中柱POD同工酶谱分离出6条(5条为果实发育后期的特异性谱带)、远中柱POD分离出4条,两者出现的时期和组分差异较大,赤霉素处理使近中柱5条果实发育后期特异性谱带减为3条且时期提前,而赤霉素处理下的远中柱没有检测到谱带。【结论】粒化时期,离子结合POD出现的5个特异性碱性POD可能与汁胞粒化关系密切,赤霉素处理可明显减少POD谱带,但赤霉素对汁胞粒化的影响有待进一步研究。     

‘红肉蜜柚’金华地区引种表现及栽培技术

观察了‘红肉蜜柚’在金华地区的引种表现,发现该品种丰产、优质,果肉为淡红色,不裂果,是一个综合性状优良的新品种,但是易受冻害,适合在金华等类似生态区设施栽培;并总结了包括定植、肥水管理、整形修剪、疏果、病虫害防治以及防裂措施等在内的配套栽培技术。     

‘黄金蜜柚’优质高效栽培技术

‘黄金蜜柚’是柚类优特新品种,值得大力推广种植。本文介绍柚类优特新品种‘黄金蜜柚’的品种特性,繁殖方法,建园定植,幼年树和投产树的肥水管理、树体管理、促花保果、病虫害综合防治等技术,以期为‘黄金蜜柚’生产提供参考。     

‘黄肉蜜柚’优质高产栽培技术

概括介绍‘黄肉蜜柚’的品种特性,从园地选择和定植、树冠管理、控梢修剪、土肥水管理、果实管理、病虫害防治等方面,总结‘黄肉蜜柚’优质高产栽培技术,以期为‘黄肉蜜柚’的快速种植发展提供参考。     

山楂红肉优质新品种‘辐泉红’的选育

‘辐泉红’是用γ射线照射山楂品种‘秤星红’的1年生休眠枝芽诱变选育的山楂新品种。果实扁圆形,平均单果重11.35 g,最大单果重18.50 g;果皮紫红色,果点大、黄褐色,果梗部肉瘤状;果肉厚,紫红色,硬度大,风味酸甜浓郁,营养丰富,品质优良;极耐贮藏,可食率93.5%,可溶性糖含量11.85%,总酸含量2.11%,糖酸比5.61,维生素C含量997.60 mg/kg,总黄酮含量0.474%,蛋白质含量0.75%;在山东省中南部,果实10月中旬成熟;适宜在山东、江苏北部、河北、河南、山西、辽宁等平原及丘陵地区栽培。2010年通过山东省农作物品种审定委员会的审定。     

菠萝蜜新品种——‘红肉菠萝蜜’的选育

‘红肉菠萝蜜’是从泰国菠萝蜜实生树中选育而成,属实生变异类型。该品种具有结果早,结果部位低,一年多次开花,开花量以3—10月为居多,从谢花到果实采收约需110～135 d。果实长椭圆形,平均单果质量10.3 kg;肉厚、干苞、橙红色、肉质爽脆、味清甜有香气,可溶性固形物达18.87%,品质优良,果实成熟后少乳胶,食用方便,是特色的优良品种。     

‘三红蜜柚’的品种特性及主要栽培技术

‘三红蜜柚’是从琯溪蜜柚中芽变单株选育出来的新品种,具有较强的市场竞争力和广阔的发展前景。文章介绍了‘三红蜜柚’的各种性状特征,总结出从果园的建立,到树体各个生长时期管理（包括树体的整形修剪、肥水管理、花果管理、果实套袋及采收的技术要求）以及病虫害的综合防治等一整套栽培管理技术,为产业发展和果农生产提供技术依据。     

新疆红肉苹果转录因子MsMYBIO基因的克隆、序列分析及原核表达

目的：克隆新疆红肉苹果[Malus sieversii f．neiclzwet-zkyana（Dieck）Langenf]MYB10转录因子基因,进行序列分析和原核表达研究,为进一步探索红色发育机理及选育新的栽培红肉苹果奠定理论基础。     

红肉蜜柚CgCYP86A8L基因克隆与表达分析

从红肉蜜柚(Citrus grandis)果实汁胞中分离CYP86A8L基因全长cDNA,对其序列进行分析,并应用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测不同发育阶段果实中CgCYP86A8L基因的转录水平。结果表明：红肉蜜柚CgCYP86A8L cDNA全长1 623 bp,编码541个氨基酸,与甜橙CYP86A22L序列的相似度达99%;其编码的氨基酸序列C端包含保守的血红素结构域;随着果实发育,CgCYP86A8L基因在汁胞中的表达急剧下降。推测,CgCYP86A8L基因可能在红肉蜜柚果实发育早期中起到十分重要的作用。     

‘库尔勒香梨’脱萼组与宿萼组样品差异表达基因的筛选

【目的】系统研究‘库尔勒香梨’脱萼组和宿萼组花器官的转录组表达情况,筛选2者之间的差异表达基因,为进一步阐明‘库尔勒香梨’萼片脱落与宿存分子机理奠定基础。【方法】采用Illumina高通量测序技术对‘库尔勒香梨’脱萼组和宿萼组代表样品进行测序,利用生物信息学方法筛选2者的差异表达基因和进行功能基因预测。【结果】Trinity法拼接后得到48 894条unigenes序列,从中选取了2组样品中共表达和单独表达的SPL转录因子进行了功能探究,发现3条unigenes可能与萼片发育有关。筛选的差异表达基因获得了Gene Ontology和KEGG数据库的注释,涉及植物激素信号转导、光合代谢、苯丙氨酸代谢、芳香族化合物合成、细胞发育等与萼片发育相关过程。【结论】筛出了2组样品的差异表达基因,获得了与萼片发育相关的基因及其对应的功能注释,为今后进一步研究‘库尔勒香梨’萼片脱落与宿存分子机理奠定了良好基础。     

‘黄冠’梨类甜蛋白编码基因PbPR5的克隆及其表达特性分析

【目的】分离和克隆类甜蛋白基因Pb PR5,了解其在‘黄冠’梨不同组织、不同发育阶段以及受到非生物胁迫和植物生长调节剂处理时的表达情况。【方法】以‘黄冠’梨(Pyrus bretschneideri‘Huangguan’)组培苗为试验材料,从水杨酸(salicylic acid,SA)处理的c DNA文库中克隆获得该基因全编码区序列,命名为Pb PR5,对其进行生物信息学分析,并研究该基因在盐、聚乙二醇(EG6000)、SA和乙烯(ETH)处理后的表达情况;以12 a生‘黄冠’梨的叶片和果实为材料,探究该基因在叶片和果实不同发育阶段的表达模式。【结果】Pb PR5的c DNA序列长度为741 bp,编码224个氨基酸残基;该基因的基因组DNA序列长度为813 bp,包含1个内含子。生物信息学分析表明,Pb PR5蛋白与其他植物PR5基因编码的氨基酸序列相似性较高。实时荧光定量PCR分析表明:Pb PR5基因在‘黄冠’梨组培苗的根,茎,叶中均能表达,其中根部的表达量高于茎和叶;盐和干旱胁迫诱导了该基因表达,根和茎中的表达高峰均出现在处理后6 h,叶在盐胁迫后24 h和干旱后12 h出现表达高峰;SA和乙烯也诱导了该基因在叶片中的表达。在不同发育阶段的叶片中,老叶表达量最高,成熟叶次之,幼叶中不表达;在不同发育阶段的果实中,成熟果实中表达量最高,幼果期和膨大期果实表达量较低。【结论】Pb PR5基因在‘黄冠’梨各组织中非组成型表达,并且在‘黄冠’梨抵御生物和非生物胁迫过程中可能具有重要的生物学功能。     

‘苹果梨’果实着色过程中PyCHI和PyF3H的克隆与表达分析

【目的】克隆‘苹果梨’(Pyrus bretschneideri Rehd.‘Pingguoli’)Py CHI和Py F3H的全长c DNA序列,检测其在果实着色过程中的表达特性及其与花青苷积累的关系。【方法】以‘苹果梨’套袋后去袋处理的果实和未套袋的果实(CK)为试材,采用同源克隆技术克隆Py CHI和Py F3H的全长c DNA序列并进行生物信息预测分析;利用实时荧光定量PCR技术检测Py CHI和Py F3H在去袋处理与未套袋处理的不同着色时期的果实中的表达特性。【结果】Py CHI和Py F3H的全长c DNA分别为702 bp和1095 bp,分别编码233和364个氨基酸。同源性分析显示,其与沙梨、西洋梨等蔷薇科梨属植物相应基因的同源性均超过95%,相应氨基酸序列相似性均达到85%。实时荧光定量PCR分析显示,套袋果实去袋见光后Py CHI和Py F3H表达量均迅速上升,随后Py CHI表达量虽然略有下降,但在整个果实着色过程中Py CHI和Py F3H的表达量一直维持在较高水平,均显著高于对照,且与果实花青苷含量的变化规律基本一致。【结论】获得‘苹果梨’PyCHI和Py F3H的全长c DNA序列,其表达水平与果实花青苷积累关系密切,表明其在调控‘苹果梨’果实着色过程中起重要作用。     

‘库尔勒香梨’PsPL基因的克隆与表达分析

【目的】分离和克隆‘库尔勒香梨’(Pyrus sinkiangensis Yu)果胶裂解酶(pectate lyase,PL)基因Ps PL,了解其在香梨果实不同时期转录水平上的表达差异,为香梨果实成熟软化机制研究提供理论依据。【方法】以‘库尔勒香梨’果肉组织为试验材料,通过RT-PCR和RACE技术得到Ps PL c DNA全长序列,并利用生物信息学方法对其进行分析和功能预测。运用实时荧光定量(q RT-PCR)技术,分析Ps PL基因在香梨果实生长发育后期及货架期的表达特性和差异。【结果】Ps PL基因c DNA全长序列为1 245 bp,Gen Bank收录号为KJ547669,该基因共编码414个氨基酸,属于果胶裂解酶家族基因,与其他植物PL基因编码的氨基酸序列有较高的同源性,与苹果同源性最高,达到97%;Ps PL在不同时期香梨果实中的表达差异很大,在生长发育后期表达量很低,盛花后150 d表达量最高。【结论】同源克隆了‘库尔勒香梨’Ps PL基因,可能在该梨果实软化过程中起到作用。     

外源赤霉素诱导‘藤稔’葡萄果实差异表达基因的cDNA-RAPD分析

【目的】为鉴定葡萄果实赤霉素诱导响应基因,【方法】应用cDNA-RAPD技术,以鲜食葡萄品种‘藤稔’为研究对象,对赤霉素处理后果实发育过程中基因表达进行了mRNA指纹分析。【结果】通过16条随机引物的筛选,共分离得到61个差异表达的转录衍生片段(TDF),其中增强表达或赤霉素诱导下特异性表达TDF42条,抑制表达19条。对其中18个TDF进行了克隆、测序和序列分析发现,17个TDF与NCBI已有序列同源,其中10个为已知功能基因,另有1个TDF无同源序列。对选取的6个TDF进行半定量RT-PCR验证,结果表明3个基因片段在处理条件下均特异表达或上调表达,另外3个基因片段在处理条件下均未见表达或下调表达,这与cDNA-RAPD表达谱结果相一致。【结论】利用cDNA-RAPD技术成功分离了部分受赤霉素诱导的差异表达基因。     

蜜柚泛素蛋白连接酶RING-H2 finger基因的克隆与表达分析

 在26S泛素蛋白酶体途径介导的蛋白质降解过程中,RING finger蛋白是一类特殊的泛素蛋白连接酶,参与植物多个生长发育及逆境胁迫响应过程。为探明柚RING finger家族成员的序列特征及表达模式,从红肉蜜柚和琯溪蜜柚果实汁胞中分离出两个RING finger基因cDNA片段（CgRHF1和CgRHF2）,采用实时荧光定量PCR研究其在不同组织及果实发育不同时期的表达模式。结果表明,两个基因均属于RING-H2 finger家族成员,且红肉蜜柚与琯溪蜜柚的两个CgRHF之间碱基序列均无差异;除根组织外,CgRHF1表达水平较CgRHF2高,且在红肉蜜柚茎、叶和花中的表达水平显著高于琯溪蜜柚;CgRHF2在组织及果实发育过程表达水平均较低,但在果实成熟采摘阶段急剧上升。CgRHF1与CgRHF2表达模式的差异暗示这两个基因在柚组织及果实发育进程中行使不同的生物学功能,而非功能互补基因。     

红肉苹果‘119-06’在甘肃张家川的表现及优质丰产栽培技术

2016年从北京引进红肉苹果‘119-06’在甘肃省张家川县龙山镇马河村栽植。‘119-06’主干和多年生枝树皮红褐色,木质部淡红色,新梢紫红色。花冠深粉红色,柱头及花药均为淡粉红色,萼筒暗紫色。平均单果重203g,果实圆锥形,果形指数0.86。果实从坐果到成熟一直为红色,幼果紫红色,成熟时呈鲜红色。果肉玫瑰红色,肉质细,致密,切开后不易氧化变色,果汁红色,前期汁液少、松脆,成熟后汁多、硬脆,风味浓酸浓甜,可溶性固形物含量15.3%,可滴定酸含量0.6%。‘119-06’抗寒、抗旱、耐瘠薄、抗病,在甘肃省张家川县表现正常。     

‘冬枣’FT同源基因克隆及表达分析

【目的】克隆‘冬枣’(Ziziphus jujuba Mill.‘Dongzao’)FT基因,预测其功能,明确该基因在‘冬枣’不同组织器官和发育时期的表达模式。【方法】以‘冬枣’为试材,分离克隆‘冬枣’FT同源基因全长序列,命名为Zj FT,运用生物信息学软件对该基因序列进行生物信息学分析;利用QRT-PCR探究了‘冬枣’FT基因在不同组织以及叶片全生育期的表达模式。【结果】‘冬枣’FT基因编码区为525 bp,共编码了174个氨基酸;理论PI是9.68,分子质量为18.112 ku;系统进化树分析表明,该氨基酸序列与苹果Md FT基因亲缘关系最近,其次为黑杨Pn FT、荔枝Lc FT、葡萄Vv FT,属于PEBP家族;Zj FT各个氨基酸残基对应的二级结构有α-螺旋(32.7%)、延伸链(23.9%)、β-折叠(8.18%)和无规则卷曲(35.22%),3D结构中有2个α-螺旋和5个β-折叠;Zj FT在枣树不同生长阶段的各个器官中都有所表达,在果实中表达量最高。【结论】从‘冬枣’中成功克隆FT基因,Gen Bank登录号为KR872844,该基因与其他植物的FT蛋白具有高度的保守性;FT基因在枣生殖器官中的表达量高于营养器官,在果实中表达量最高,其次为花;该基因在全年叶片不同月份的表达量随月份降低,呈现逐月下降的趋势。     

采后‘琯溪蜜柚’果实柠檬酸合成酶基因的克隆与表达分析

为研究柠檬酸合成酶基因与‘琯溪蜜柚’果实"返酸"的关系,以不同贮藏期‘琯溪蜜柚’果实汁胞为材料,克隆了1个柠檬酸合成酶基因,将其命名为CmCS,其含有1 416 bp开放阅读框,编码具有471个氨基酸的蛋白。生物信息学分析表明,CmCS推导的氨基酸序列与甜橙、川桑等植物的相似度皆大于90%,为稳定的亲水蛋白,亚细胞定位预测其定位于线粒体。结果表明,‘琯溪蜜柚’贮藏期间伴随着有机酸含量逐渐增加,CmCS基因表达量整体先升高后降低,推测其对‘琯溪蜜柚’果实采后有机酸代谢具有一定调控作用。     

套袋对‘三红蜜柚’果实着色的影响

【目的】‘三红蜜柚’[Citrus maxima(Brum.)Merr.‘Sanhongmiyou’]的海绵层和果肉红色,外果皮橙黄色,经套袋后也呈现紫红色,但套袋对外果皮呈色的作用机制尚不清楚。因此,本研究通过分析不同套袋对外果皮色素积累的影响,筛选出最适套袋方案,指导生产,也为今后进一步研究果面色泽形成机理提供研究基础。【方法】以’三红蜜柚’果实为试材,分别选用3种不同的果袋对果实进行套袋,以不套袋作为对照,测定果实在发育期间的外果皮色泽参数、叶绿素和类胡萝卜素含量,使用超高效液相色谱法测定外果皮番茄红素、β-胡萝卜素和玉米黄素的含量。【结果】3种套袋处理的果皮亮度值L*、红绿色度值a*、黄蓝色度值b*和色泽饱和度在果实发育过程中均呈上升趋势,显著高于对照组;在3种套袋处理间,L*值无显著差异,处理A和处理B的果实比处理C的果实更早退绿,更早着色。相比较于对照组,套袋处理能够显著提高成熟果实果皮的番茄红素含量,不同处理间的果皮番茄红素含量差异显著,其中,处理A的果皮番茄红素含量最高,达44.54 mg·kg^-1。在果实发育过程中,套袋处理果实的果皮β-胡萝卜素、玉米黄素、叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的含量均呈下降趋势,显著低于对照组。【结论】套袋显著降低‘三红蜜柚’果实的果皮叶绿素含量,促使果皮提前退绿;双层和三层果袋显著提高成熟期果实的果皮番茄红素含量,增加果皮的红色成分,有效提高‘三红蜜柚’果实的果面着色效果。