羊栖菜酵素对小鼠肠道菌群结构和粪便差异代谢物的影响

为探究羊栖菜Sargassum fusiforme酵素对小鼠肠道菌群结构及粪便差异代谢物的影响,每日一次使用剂量为0.2 mL/10 g(体质量)的羊栖菜酵素对体质量为(25±2)g的雄性小鼠连续灌胃45 d后,同时设灌胃相同剂量生理盐水的空白组,收集2组小鼠粪便,采用16S rRNA高通量测序技术对各组小鼠肠道菌群进行分析,同时采用UPLC-TOF-MS代谢组学对小鼠粪便代谢产物进行分析,确定代谢通路,并研究羊栖菜酵素与肠道微生物菌群之间的关系。结果表明:基于Illumina MiSeq平台,与灌胃生理盐水的空白组相比,羊栖菜酵素灌胃组小鼠粪便中乳杆菌属Lactobacillus、双歧杆菌属Bifidobacterium等有益菌丰度升高,拟杆菌属Bacteroides、幽门螺杆菌属Helicobacter等有害菌丰度降低;采用UPLC-TOF-MS代谢组学分析确定了正负离子模式下,有14个与羊栖菜酵素灌胃相关的粪便显著差异代谢物,涉及7个主要相关代谢通路,分别为嘌呤代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,嘧啶代谢,半乳糖代谢,精氨酸和脯氨酸代谢通路,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,精氨酸的生物合成,其中对前5个代谢通路的影响最为显著。研究表明,小鼠肠道中有益菌与致病菌比例在两组之间差异显著,羊栖菜酵素组中有益菌群比例均大于空白组,代谢产物也存在明显差异,羊栖菜酵素对小鼠的肠道菌群多样性具有调节作用。     

低剂量恩诺沙星对SPF小鼠肠道菌群的影响研究

 采用SPF小鼠动物模型研究了低剂量恩诺沙星对肠道菌群细菌数量、细菌耐药性和定植抗力的影响。连续饮水给药（1、10 和100 mg·L-1）48 d后，恩诺沙星对SPF小鼠肠道菌群的主要影响为：10和100 mg·L-1恩诺沙星可抑制部分需氧和兼性厌氧菌的生长（P＜0.05或P＜0.01）；100 mg·L-1恩诺沙星可抑制肠球菌和部分拟杆菌的生长（P＜0.05或P＜0.01）；1、10 和100 mg·L-1恩诺沙星使需氧和兼性厌氧菌对环丙沙星的耐药率增加（P＜0.05或P＜0.01）；100 mg·L-1恩诺沙星使拟杆菌对环丙沙星的耐药率增加；1、10 和100 mg·L-1恩诺沙星可降低部分SPF小鼠肠道菌群的定植抗力，使菌群对外源细菌的屏障作用下降。低剂量恩诺沙星对肠道菌群数量和定植抗力影响不大；恩诺沙星对肠道菌群的主要影响是使需氧和兼性厌氧菌的耐药率增加；中国现行规定的恩诺沙星和环丙沙星的日允许摄入量（ADI）可能也会对人体肠道菌群产生影响，主要为选择出耐药需氧和兼性厌氧菌。     

盐酸林可霉素对小鼠肠道菌群的影响

[目的]研究不同剂量盐酸林可霉素对小鼠肠道菌群的影响,为正确使用盐酸林可霉素提供参考资料。[方法]分别以80和120mg/d剂量的盐酸林可霉素,连续灌胃小鼠5和7 d,分别于停药后第1、3、7、10和15天检测小鼠直肠球菌、杆菌、乳酸菌及双歧杆菌数;[结果]各盐酸林可霉素给药组皆可造成小鼠肠道菌群失调。[结论]低剂量灌胃盐酸林可霉素可用于制备小鼠肠道菌群失调模型,高剂量给药可对小鼠机体造成损害。     

溶葡萄球菌素对小鼠肠道菌群结构的影响

【目的】研究溶葡萄球菌素对小鼠肠道菌群结构的影响,为溶葡萄球菌素的食用安全性评估提供参考。【方法】将24只7周龄ICR小鼠随机分为3个试验组和对照组,3个试验组分别提供溶葡萄球菌素含量为1 μg/mL（低剂量）、5 μg/mL（中剂量）和15 μg/mL（高剂量）的饮水10 mL/(只·d),于饮用第0(饮用前),1,3,7,14,21天以及停饮第3,7,14天采集小鼠新鲜粪便样品,采用PCRDGGE技术检测小鼠肠道菌群结构变化。【结果】DGGE图谱显示,各组小鼠试验前后不同时间肠道内的优势菌种相似;经UPGMA聚类分析,与对照组相比,低、中剂量溶葡萄球菌素对小鼠肠道菌群结构影响较小,高剂量溶葡萄球菌素对小鼠肠道菌群结构影响较大;差异性分析结果显示,试验组饮用各阶段带谱与试验前的相似性与对照组相应阶段的相似性差异均不显著（P＞0.05）,溶葡萄球菌素低、中和高剂量组在停饮后第7天带谱与饮用前的相似性分别达到了70.8%,66.9%和63.8%;对图谱中主要条带进行测序和比对分析,结果表明,高剂量溶葡萄球菌素对小鼠肠道中Lactobacillus taiwanensis和1株不可培养细菌有促进作用。【结论】溶葡萄球菌素对小鼠肠道菌群结构的改变具有浓度依赖性,且停饮后小鼠肠道菌群结构有一定程度的恢复。     

川秋葵微粉体外降血脂作用及对小鼠肠道菌群的影响

研究川秋葵微粉体外降血脂的能力及其对小鼠肠道菌群的影响。小鼠肠道菌群试验中,将小鼠随机分为4组灌胃6周,即对照组(等体积的生理盐水[10 mL/(kg·d)]、川秋葵微粉低剂量组[450 mg/(kg·d)]、川秋葵微粉中剂量组[900 mg/(kg·d)]、川秋葵微粉高剂量组[1 800 mg/(kg·d)]),采用16S rDNA高通量测序技术分析小鼠肠道菌群的组成及其变化。体外降血脂试验中,研究不同质量浓度的川秋葵微粉对体外胆固醇、牛磺胆酸钠、甘氨胆酸钠的吸附能力。结果显示,川秋葵微粉各剂量组的小鼠肠道菌群组成的相似度较高,中剂量组的盲肠内容物菌群的OTUs数量最高,说明中剂量组小鼠盲肠菌群的特异性高;低剂量组的结肠内容物菌群的OTUs数量最高,说明低剂量组小鼠结肠菌群的特异性高;此外,秋葵微粉能提高小鼠肠道中的益生菌比例,降低有害菌比例。通过体外胆固醇吸附试验以及体外胆酸盐吸附试验,初步证实秋葵微粉具有良好的吸附胆固醇、牛磺胆酸钠以及甘氨胆酸钠的能力,且呈明显的剂量效应关系,随着质量浓度的增加其吸附量逐渐上升;秋葵微粉对牛磺胆酸钠的吸附量较甘氨胆酸钠的吸附量多,即秋葵微粉与牛磺胆酸钠的结合能力更强。结果表明,川秋葵微粉具有体外降血脂的能力,且对小鼠肠道内环境健康具有改善调节作用,低剂量更具有实际应用价值。     

双歧杆菌对脾虚小鼠肠道菌群的影响

使昆明小白鼠致脾虚,用双歧杆菌纯制剂治疗后,检测结肠内容物和粪便的肠杆菌、肠球菌、双歧杆菌和乳酸杆菌数量的变化,并结肠进行组织学检查。结果显示:小鼠脾虚后肠杆菌、肠球菌数量明显增多(P<0.05),双歧杆菌、乳酸杆菌数量大量减少(P<0.01);用双歧杆菌纯制剂治疗6d～12d后,肠杆菌、肠球菌数量减少(P<0.05),双歧杆菌、乳酸杆菌大量增多(P<0.01);治疗组结肠组织学观察显示,肠壁肌层厚度增加,杯状细胞数量增多,肠黏膜微绒毛排列紊乱显著改善。     

屎肠球菌细胞外囊泡对小鼠生长性能、肠道形态和粪便菌群的影响

【目的】探究屎肠球菌细胞外囊泡（Enterococcus faecium extracellular vesicles,Efm-EV）对小鼠生长 性能、免疫、肠道形态和粪便菌群的影响,为屎肠球菌作为微生物饲料添加剂在动物生产中的推广应用提供理论依 据。【方法】将 20 只雄性 C57BL/6 小鼠随机分为对照组和试验组,每组 10 个重复,每个重复 1 只小鼠。试验期为 5 d,试验组小鼠每隔 1 d 灌胃含有 500 μg 的 Efm-EV 悬液,每只灌胃 150 μL;对照组小鼠灌胃等量 PBS 溶液。记 录小鼠每天的采食量、试验开始和结束时的体重,计算小鼠的平均日增重、平均日采食量、料重比 。【结果】与 PBS 处理相比,Efm-EV 处理小鼠的终末体重 、平均日增重、平均日采食量、料重比没有显著变化。Efm-EV 处理 小鼠的血清 IgA 和 IgG 水平与 PBS 处理小鼠相比显著下降（P ＜ 0.05）,而小鼠血清 IL-10 水平显著提升（P ＜ 0.05）, TNF-α 无显著变化。与 PBS 处理相比,Efm-EV 处理小鼠十二指肠绒隐比显著提高（P ＜ 0.05）,而小鼠十二指肠 绒毛高度、隐窝深度,空肠和回肠的绒毛高度、隐窝深度、绒隐比无明显变化。灌胃 Efm-EV 处理小鼠粪便菌群在 门水平上提高了厚壁菌门（Firmicutes）的细菌数量,降低了拟杆菌门（Bacteroidetes）的细菌数量;在科水平上提 高了毛螺菌科（Lachnospiraceae）的丰度,降低了 Muribaculaceae 科的丰度;在属水平上显著提高了小鼠瘤胃球菌 科 UCG009 （Ruminococcaceae UCG 009）的丰度（P ＜ 0.05）。【结论】灌胃 Efm-EV 能够提高小鼠机体的抗炎水 平,改善小鼠十二指肠形态结构,提高瘤胃球菌科 UCG009 的相对丰度。     

饮水添加氯化钙对高脂日粮饲喂小鼠脂肪沉积和肠道菌群的影响

【目的】研究饮水添加氯化钙对高脂日粮饲喂小鼠脂肪沉积和肠道菌群的影响,为提高动物胴体品质和人体健康提供理论依据。【方法】选用27只4周龄C57BL雄性小鼠,分为高脂日粮组和高脂日粮+饮水添加氯化钙组,试验期13周。每周测定小鼠体质量,试验末测定小鼠体脂含量,试验结束后采集小鼠皮下脂肪、附睾脂肪并称质量。于试验后期10～12周采集小鼠粪便进行16S rRNA高通量测序,并分析对菌群的影响。【结果】饮水添加氯化钙显著降低了小鼠体质量、体脂含量、皮下脂肪指数和附睾脂肪指数,与高脂组相比分别降低了12.85%、32.69%、26.65%和18.60%。饮水添加氯化钙提高了小鼠粪便样中的菌群多样性和菌群丰度。在门水平下,饮水添加氯化钙对拟杆菌门Bacteroidetes、厚壁菌门Firmicutes、变形菌门Proteobacteria、脱铁杆菌门Deferribacteres、放线菌门Actinobacteria、软壁菌门Tenericutes的丰度无明显影响。在纲水平下,与高脂组相比,饮水添加氯化钙显著降低了丹毒丝菌纲Erysipelotrichia和放线菌纲Actinobacteria的相对丰度,并且显著提高了梭菌纲Clostridia的相对丰度。【结论】饮水添加氯化钙能够降低高脂日粮饲喂小鼠的体质量和体脂含量,这可能与饮水添加氯化钙提高了小鼠粪便菌群多样性和特定菌群丰度有关。     

青贮玉米秸秆对鹅氮代谢和肠道菌群的影响

为研究鹅对青贮玉米秸秆的利用效果,试验选用24月龄五龙鹅30只,随机分成5组,每组分为6个重复。各试验组日粮添加的青贮玉米秸秆比例依次为24.4%、34.6%、42.6%、49.1%、53.6%。采用全收粪法,测定N的沉积量、净蛋白利用率(NPU)、氨态氮(NH3-N)浓度和氨基酸(AA)消化率,同时检测粪便中微生物数量变化,以初步探讨日粮中不同青贮玉米秸秆比例对CP、AA代谢及肠道微生物菌群的影响。结果表明,在ME和CP等摄入量一致的条件下,随着秸秆添加比例的不断增加,N的沉积量、净蛋白利用率(NPU)显著升高(P<0.05);粪中各组氨态氮(NH3-N)浓度呈下降趋势;甘氨酸表观消化率偏低但组间差异极显著(P<0.01),其他氨基酸表观消化率(AAAD)均较高(77.30%～93.10%),组间差异显著(P<0.05)(丙氨酸和脯氨酸除外);青贮秸秆添加量在24.40%～49.10%时,肠道中双歧杆菌、乳酸杆菌数量均随秸杆添加水平的升高而增多,且第4组与其他各组间差异显著(P<0.05);大肠杆菌数量总体呈下降趋势。由此可见,鹅能较好地利用青贮玉米秸秆中的粗蛋白,同时青贮玉米秸秆对鹅肠道微生物菌群有一定改善作用。     

盐度对羊栖菜(Sargassum fusiforme)幼体光合特性的影响

以羊栖菜(Sargassum fusiforme)幼体为实验材料,设置不同海水盐度(15‰、20‰、29‰、45‰),对羊栖菜幼体进行梯度胁迫处理,探讨不同盐度胁迫对羊栖菜幼体光合作用的影响。结果表明,在盐胁迫条件下,羊栖菜的光合作用会受到明显影响。在盐度20‰条件下,羊栖菜幼体光合作用受到的抑制作用较弱,羊栖菜幼体对低盐度海水有一定的耐受性。海水盐度过低(15‰)时,羊栖菜光合作用受到明显抑制。高盐(45‰)条件下,羊栖菜幼体受到损伤,羊栖菜幼体光合作用和无机碳利用受到显著抑制。短时间(1～12 h)处理,羊栖菜光合作用受到的影响较小,各盐度处理的羊栖菜幼体色素含量、最大相对电子传递速率(rETR_max)、最大光化学量子产量(F_v/F_m)出现先降低后升高的趋势。长时间(240 h)处理,盐度过低(15‰)或过高(45‰)均会抑制羊栖菜幼体的光合作用,其rETR_max、光能利用效率(α)、最大净光合作用速率(P_nmax)、最大光合固碳速率(v_max)均显著...     

羊栖菜褐藻多酚对S_（180）荷瘤小鼠抗肿瘤作用的实验研究

目的观察羊栖菜褐藻多酚的体内抗肿瘤作用。方法建立S180肉瘤荷瘤小鼠模型,随机分为空白组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组12只。低、中、高剂量组小鼠每日给予62.5、125、250 mg/kg羊栖菜褐藻多酚灌胃,空白组每日予蒸馏水灌胃,连续8 d。第9天处死小鼠,观察肿瘤生长情况、胸腺指数、脾脏指数、T淋巴细胞增殖反应、NK细胞活性及血清超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）变化。结果不同剂量羊栖菜褐藻多酚均使胸腺指数升高（P〈0.01）。中、高剂量组的肿瘤质量比空白组明显降低,并提高小鼠淋巴细胞增殖反应和NK细胞杀伤活性（P〈0.05）。高剂量组SOD、GSH-Px水平明显升高,而MDA含量显著下降（P〈0.05）。结论羊栖菜褐藻多酚具有明显抗肿瘤作用,其机制可能是通过提高免疫和抗氧化能力。     

不同提取方法对马尾藻多糖含量的影响

[目的]比较不同提取方法对马尾藻多糖提取效果的影响。[方法]分别采用水提醇沉、梯度醇提和101果汁澄清剂提取马尾藻多糖,经纯化后用苯酚-硫酸法测定提取液中有效成分多糖含量。[结果]101果汁澄清剂法提取的马尾藻多糖含量和纯度均优于其他2种方法,精制马尾藻多糖的含量为6.55%,红外光谱确认为较纯的多糖结构。[结论]101果汁澄清剂法提取马尾藻多糖的方法为最优,稳定且可行性高。     

发酵乳对肥胖小鼠肝脂代谢和肠道菌群的影响

为分析发酵乳对肥胖小鼠肝脂代谢和肠道菌群的影响,本研究将60只C57BL/6小鼠随机分为5组：正常对照组（CON）、模型组（MD）、易善复组（YG）、低浓度发酵乳干预组（LFG）和高浓度发酵乳干预组（HFG）。肥胖模型造模成功后进行为期6周的灌胃,试验结束测量小鼠的空腹体重和身长,计算LEE’S指数,采血检测生化指标,采集肝脏组织观察病理变化;采集小鼠盲肠内容物进行肠道菌群测序。结果表明：1）与CON相比,MD小鼠体重、LEE’S指数、ALT和AST均极显著提升（P<0.01）,表明肥胖模型建立成功。2）与MD相比,发酵乳干预组小鼠体重、LEE’S指数、ALT和TC均极显著下降（P<0.01）,其中AST和TG显著下降（P<0.05）,同时发酵乳和易善复组小鼠肝组织脂肪变性有明显好转,基本没有明显的脂肪空泡。表明发酵乳可以抑制肥胖小鼠体重的增加,改善肥胖小鼠的肝脂代谢功能。3）与MD相比干预组小鼠肠道菌群的多样性水平有一定程度的恢复,尤其是厚壁菌门和拟杆菌门。表明发酵乳对于小鼠肠道菌群多样性的恢复有一定的作用。综上,本研究阐明了发酵乳对肥胖小鼠肝脂代谢和肠道菌群的影响,为功能型发酵乳的开发提供理论依据。     

羊栖菜提取物对食用菌竞争性杂菌生长的抑制作用

采用生长速率法和孢子萌发法对羊栖菜提取物的抗真菌活性进行了筛选,结果表明：Rf 0．47（10g&#183;kg^-1、1g&#183;kg^-1）和Rf0．81（100g&#183;kg^-1、1g&#183;kg^-1）对圆弧青霉菌丝生长抑制率分别为35％、50％和85％、25％,羊栖菜乙醚提取物乙酸乙酯相的薄层分离带Rf0．30（100g&#183;kg^-1）对绿色木霉及黑曲霉抑制率分别为75．67％、83．46％。相关系数分析显示：不同浓度的3个处理组存在极显著的正相关。双因素方差分析表明：分离带和浓度两因素对绿色木霉、圆弧青霉、黑曲霉菌丝生长抑制率的影响极显著。在3种质量浓度下,羊栖菜乙醇Rf0．47、Rf0．81、羊栖菜乙醚Rf0．00对圆弧青霉孢子萌发以及羊栖菜乙醇乙酸乙酯相、羊栖菜乙醚乙酸乙酯相、羊栖菜乙醚Rf0．30对黑曲霉孢子萌发均有显著的抑制作用。     

大型海藻羊栖菜对新月筒柱藻生长抑制作用研究

研究了羊栖菜藻体、干粉及乙醇提取物对新月筒柱藻生长的影响。结果显示:羊栖菜藻体、干粉和乙醇提取物皆可明显抑制新月筒柱藻的生长,羊栖菜粉末及乙醇提取物对新月筒柱藻的生长的抑制作用表现出较强的浓度-效应关系。72 h时,新月筒柱藻生长抑制率与羊栖菜干粉初始浓度间的关系可表达为y=-0.3801x2+1.1636x,新月筒柱藻生长抑制率与羊栖菜乙醇提取物初始浓度间的关系可表达为y=-0.1445x2+1.4279x。羊栖菜粉末浓度达到1.6 g/L时,新月筒柱藻在3 d内全部死亡;乙醇提取物浓度达0.8 g/L时,藻细胞在2 d内全部死亡。由于乙醇提取物溶液的浓度是以提取前干粉质量表示,因此同等质量的羊栖菜粉末经过乙醇提取后其对新月筒柱藻生长的抑制作用明显高于未经提取的羊栖菜粉末。在1.6 g/L的羊栖菜乙醇提取物作用下数小时后,新月筒柱藻细胞核破裂,并逐渐向两端分散,至24 h时,细胞膜模糊,界限不清,细胞严重萎缩并逐渐碎裂解体。研究亮点:本研究发现大型海藻羊栖菜对冷水性赤潮藻新月筒柱藻的生长具有克生作用,羊栖菜乙醇提取物能明显抑制新月筒柱藻的生长,并对其作用机理进行了初步探讨,为赤潮的生物防治提供理论基础,丰富了海洋化学生态学的研究内容。     

羊栖菜乙醇提取物的抗氧化活性

用体积分数70%的乙醇浸提羊栖菜(Sargassum fusiforme)得到粗提物,将粗提物溶于去离子水再依次用有机溶剂萃取,得到氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和萃取后剩余物,测定粗提物和各萃取物的总多酚含量、维生素C和维生素E含量以及还原力。结果表明,正丁醇萃取物中的总多酚和维生素E含量较高,正丁醇萃取物和乙酸乙酯萃取物具有较强的还原力。     

马氏珠母贝代谢产物对羊栖菜生长的影响

通过马氏珠母贝与羊栖菜的混养实验,测定了贝释放的氮磷含量及羊栖菜对贝释放氮磷的吸收量,比较了实验组（有贝）、模拟组（无贝）与对照组之间羊栖菜的生长差异,并进一步阐述了羊栖菜对马氏珠母贝代谢产物的吸收速率与去除效率。结果表明：实验组中,马氏珠母贝释放的氮以及羊栖菜吸收的氮均以NH4＋-N为主;对4种代谢产物NH;-N,NO3-N,NO2-N,PO4＾3＋-P,马氏珠母贝的释放比例为27：21：1：18,而羊栖菜的吸收比例为17：12：1：2．6。方差分析结果表明,实验组与模拟组相比,藻对氮磷的吸收速率具有明显的促进作用（P〈0．05）;各组间生长情况的Duncan’s多重比较表明,各组羊栖菜13增质量与13增长值均存在显著性差异（P〈0．05）,大小顺序为：实验组〉对照组C〉模拟组〉对照组A〉对照组B。这表明马氏珠母贝的代谢产物能够促进羊栖菜生长。