牦牛血抗氧化低聚肽肽段的鉴定及抗氧化活性研究

采用LC-MS/MS法检测分子量＜5 kDa的牦牛血抗氧化低聚肽的肽段组成及其序列,根据其氨基酸组成、肽段序列、活性位点以及分子量筛选出可能具有较好抗氧化活性的肽段7条,采用6种不同的体外抗氧化活性测定方法评价其抗氧化活性。结果表明,RRHPYFYAPELL、TLPDTEKQIKKQ、VLKDLKELVFYYLIMAKGGIVRS、EKKFWGKYLYEIARRHPYFYAPE、GPTQEFKKR、KFWGKYLYEIAR RHPYFYAPE、VSRSLGKVGTR这7条肽段均具有较好的体外抗氧化活性;其中,RRHPYFYAPELL在 ·OH清除力、ABTS+·清除力、DPPH·清除力、总抗氧化力、脂质过氧化抑制能力上均表现最好,GPTQEFKKR在还原力上表现最好。这与不同体外抗氧化活性检测方法中Leu、His、Tyr、Phe、Lys、Gln和 Pro残基对抗氧化活性的影响不同有关。此外,与本研究前期试验制备的分子量＜1 kDa的牦牛血抗氧化低聚肽比较,GPTQEFKKR、RRHPYFYAPELL在6个抗氧化指标上均无显著差异,表现出良好的体外抗氧化活性。     

蓝莓花色苷提取工艺及其抗氧化性研究

以蓝莓为原料,采用溶剂萃取法提取蓝莓花色苷,通过单因素和正交试验确定其最佳提取工艺条件。并以VC为对照,研究花色苷清除超氧阴离子自由基(O2-·)、DPPH自由基、羟自由基(·OH)和抗油脂氧化、还原力等抗氧化活性。结果表明,溶剂法提取蓝莓花色苷的最佳工艺条件为:提取溶剂80%乙醇,液料比15∶1(m L·g-1),p H 3,温度40℃,提取70 min,蓝莓花色苷的色价最高。蓝莓花色苷具有很好的抗氧化性,其抗氧化能力随浓度的增大而提高,花色苷对油脂的抗氧化能力比VC的效果稍好;花色苷的还原力低于同浓度的VC,VC的还原力是花色苷的1.7倍;0.1%和0.5%的花色苷对·OH的清除率高于相同浓度的VC,但是0.2%~0.4%浓度的VC比相同浓度花色苷的效果稍好;相同浓度下,VC对O2-·的清除能力明显好于花色苷,是花色苷的1.54倍;蓝莓花色苷对DPPH自由基的清除效果好于同浓度的VC,是VC的1.07倍。     

大鲵活性肽与低分子量透明质酸组合物抗氧化活性研究

在pH值为6的条件下,等量的大鲵活性肽与低分子量透明质酸在溶液中形成了组合物。该组合物的红外光谱呈现出独特的吸收峰,显微镜观察到大鲵活性肽与低分子量透明质酸组合物表现出自然交联形成的结构。在相同浓度下,大鲵活性肽与低分子量透明质酸组合物的清除DPPH·的能力与大鲵活性肽清除DPPH·的能力相当,大鲵活性肽与低分子量透明质酸组合物的清除ABTS~+·的能力显著高于大鲵活性肽清除ABTS~+·的能力。因此,在大鲵活性肽与低分子量透明质酸组合物中,大鲵活性肽利用了低分子量透明质酸的有三级网状结构,发挥了更好的抗氧化活性。     

不同加工辅料对玉米肽（<1 kDa）抗氧化性的影响

玉米肽为玉米蛋白经酶解后获得的多种小肽的混合物,具有抗氧化、促进酒精代谢等多种生物活性,是当前国际食品界热门的功能因子,已被广泛地应用在食品工业中。但一直以来,研究人员多集中于对玉米肽的工艺制备和功能研究等方面,对于玉米肽活性保护的研究仍处于初探阶段。以玉米肽清除ABTS自由基活性变化为指标,探究不同水质、稳定剂、食用酸和静置时间对其抗氧化活性稳定性的影响,以期为玉米肽产品开发,为最大限度发挥玉米肽的抗氧化活性提供理论依据。结果表明,水质不同,玉米肽溶液的抗氧化活性呈现出较大的差异:去离子水纯净水矿泉水。稳定剂海藻酸钠、CMC、黄原胶、明胶的添加,均会降低玉米肽ABTS自由基清除率,且清除活性随着稳定剂用量的增加而显著下降,其中海藻酸钠(0.1%)对玉米肽的抗氧化活性影响最小,玉米肽ABTS自由基清除率为90%。酸味剂苹果酸、柠檬酸的添加降低了玉米肽ABTS自由基清除活性,且呈剂量效应关系,在相同剂量下,柠檬酸(0.6%)对ABTS自由基清除活性破坏力最强,可降至72%。     

永泰芙蓉李营养成分及抗氧化活性研究

以永泰芙蓉李为原料,分析芙蓉李的营养成分和功能性成分,包括维生素、矿物质、氨基酸总糖、总酸等各项指标以及总酚、总黄酮等活性成分,并对芙蓉李原汁的抗氧化活性进行研究。结果表明,永泰芙蓉李中VC,VE的含量分别为207.43 mg/mL,16 mg/kg;芙蓉李中钾的含量为1 900 mg/kg,钙、镁次之,且含有少量的铁、硼、铬等矿物质;非必需氨基酸含量达到20.55 mg/100 g;必需氨基酸总量达到11.9 mg/100 g,天冬氨酸和谷氨酸含量较高;总酚、总黄酮分别为1 010,5 300 mg/mL。芙蓉李原汁具有良好的抗氧化活性,羟自由基清除能力为7 845.43 U/mL;总抗氧化能力为96.69 U/mL;在稀释5倍～350倍的质量浓度范围内,芙蓉李原汁对DPPH自由基的清除率最高可达到96.63%。与一定浓度的VC相比,芙蓉李原汁表现出较强的抗氧化性能。     

蚕蛹蛋白抗氧化肽的制备及其纯化

以DPPH自由基清除率为指标,采用正交试验,优化Alcalase酶解蚕蛹蛋白制备抗氧化肽的工艺条件;采用超滤、DEAE-52纤维素柱层析,以及Sephadex G-50柱层析分离纯化蚕蛹蛋白抗氧化肽。试验结果表明,酶解液制备蚕蛹蛋白抗氧化肽的最优工艺条件为:酶解温度30℃,pH值7.5,时间20min,底物质量分数3%,加酶量3.5%。Mr≤5ku时,组分有很强的体外抗氧化活性,从Mr≤5ku组分中获得了5个抗氧化肽组分,它们的体外抗氧化活性大小依次为:组分Ⅱ>组分Ⅲ>组分Ⅰ>组分Ⅴ>组分Ⅳ。     

红花籽抗氧化肽的分离纯化及抗氧化活性研究

对红花籽抗氧化肽进行分离纯化,通过凝胶过滤层析得到3个组分,分别以清除DPPH自由基、羟自由基、超氧自由基和还原力为指标,研究红花籽抗氧化粗肽及其3个组分的抗氧化活性,其中第3个洗脱峰的抗氧化活性最高。抗氧化试验结果表明,纯化后的红花籽抗氧化肽质量浓度为3 mg/mL时,对自由基具有很强的清除作用,DPPH自由基清除率、超氧自由基清除率和羟自由基清除率分别为57.86%,67.48%和60.15%。     

成熟度和贮期对仙人掌浆果(Myrtillocactus geometrizans)酚类物质、VC、甜菜碱和抗氧化物质的影响

研究了不同成熟度与贮期对仙人掌浆果果实的颜色、总酚、甜菜碱和VC含量的影响,同时研究了这些抗氧化物质对果实总抗氧化力(TEAC)和氧自由基吸收能力(ORAC)的影响。酚采用高效液相色谱法——二极管阵列检测器(HPLC-DAD)测定。结果表明,经过贮藏后熟的果实,其颜色与成熟和过熟的果实颜色类似,而总酚和VC含量则分别下降了82.4%和68.5%,与此相反,β-花青苷含量上升了51.8%;甜菜碱的抗氧化作用在TEAC和ORAC中分别占58.4%和43.4%;没食子酸和槲皮黄酮是主要的单酚物质。这些抗氧化物质在果实中的含量和抗氧化活性可以很好地保持浆果果实的品质。     

费菜总黄酮的抗氧化活性研究

以抗坏血酸（VC）和叔丁基羟基茴香醚（BHA）做阳性对照,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（DPPH·）、羟自由基（OH·）、超氧阴离子自由基（O2-·）、还原力、总抗氧化能力、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐（ABTS）阳离子自由基和脂质过氧化抑制能力体外抗氧化活性模型,评价费菜总黄酮的抗氧化活性。结果表明,费菜总黄酮的抗氧化活性随着黄酮浓度的增加呈上升趋势。在高浓度时,费菜总黄酮的DPPH·清除率、OH·清除率及亚铁还原能力试验（FRAP）值均显著大于BHA;当费菜总黄酮浓度高于54.8 μg·mL-1时,对DPPH·的清除率极显著大于VC;当浓度为48.6～68.0 μg·mL-1,OH·清除率与VC差异不大。此外,其他抗氧化指标在测定范围内活性均显著小于VC。费菜总黄酮具有较强的抗氧化活性,可作为健康食品原料开发及利用。     

鹅掌楸抗氧化物质提取及其特性的研究

为了研究鹅掌楸的抗氧化活性,为开发有应用前景的天然抗氧化剂奠定基础,以亚油酸过氧化抑制率为参照,通过单因素试验和正交试验研究了鹅掌楸抗氧化物质的最优提取条件,以及pH值和热处理对其抗氧化活性的影响,并探讨了鹅掌楸抗氧化物质对油脂抗氧化的作用。结果表明,鹅掌楸抗氧化物质提取的最佳条件为：乙醇体积分数为75%,料液比1:12,提取时间5 min,微波功率210 W。热处理对其抗氧化能力的影响较大,pH值的影响不显著;鹅掌楸提取物对猪油的抗氧化作用明显,且随着鹅掌楸提取物浓度的增大,其抑制猪油生成氢过氧化物的能力增强。VE和柠檬酸对鹅掌楸提取物的抗氧化作用有协同作用,协同增效的强弱顺序为：柠檬酸>VE,而VC没有明显的协同增效作用。     

酶解油菜蜂花粉抑制超氧阴离子自由基的研究

【研究目的】探讨油菜蜂花粉中水溶性有效组分的抗氧化能力及其在黄嘌呤氧化酶体系中抑制O2-.的机理。【方法】采用酶解技术和膜分离技术提取分离油菜蜂花粉中水溶性抗氧化有效组分,用黄嘌呤氧化酶体系测定酶解物的不同相对分子质量级分淬灭超氧阴离子自由基(O2-.)的能力。【结果】实验结果表明,经酶解和超滤后得到的相对分子质量大于1000的组分抑制O2-.的效果非常显著【结论】酶解和膜分离技术是提高花粉抗氧化功效成分含量的有效途径。     

鳗鱼加工副产物制备抗氧化肽酶解条件的优化

采用响应面方法,对鳗鱼加工副产物制备抗氧化肽的酶解条件进行优化。结果表明,酶与底物蛋白比例伍,）、酶解温度（如）和酶解时间（墨）与酶解产物抗氧化活性（Y,以酶解液还原力评价）之间满足回归方程：Y=-2．77＋0．26X1＋0．0971X2＋0．32X3-0．00127X1X2-0．0153XiX3＋0．000658X2X3-0．0194X11^2-0．0931X22-0．049X,2;该三个因素对酶解产物的还原力均有显著影响（P〈0．05）,其影响力的大小依次为：X1〉X3〉X2;X1与X2和X1与五的交互作用对酶解产物的还原力也有显著影响（P〈0．05）;过度酶解可导致酶解液还原力的降低：鳗鱼加工副产物制备抗氧化肽的最优酶解条件为：酶与底物蛋白比例为3．84％．50．6℃温度下酶解3h。经6次验证试验．酶解产物的还原力与预测值无显著差异,酶解产物清除DPPH自由基的EC50值为O．32mg／mL。     

鱿鱼内脏制备功能性短肽的初步研究

为了选取水解鱿鱼内脏效果较优的蛋白酶,并对鱿鱼内脏的水解液进行分析,测定水解液的分子量分布范围,并对洗脱液的DPPH自由基清除能力进行分析。试验选取碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、动物蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶对鱿鱼内脏进行水解,通过测定水解液的总氮含量、氨基态氮含量,比较各水解液的水解度、氮收率以及水解得率。经大孔树脂对胰蛋白酶水解液进行水、20%、60%、80%甲醇-水梯度洗脱,经液相质谱(LC-MS)进行分析。结果发现水解液短肽分子量范围在100~2400,其中以60%梯度洗脱的水解液分子量分布范围较为集中,且以分子量在200左右的化合物为主,对各洗脱梯度水解液的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力分析可知60%梯度洗脱水解液DPPH清除能力为40.21%。胰蛋白酶为水解鱿鱼内脏较优的蛋白酶,且60%甲醇-水为最优洗脱浓度。     

花生蛋白酶解规律及酶解产物抗氧化活性的研究

以花生蛋白为原料,利用碱性蛋白酶酶解,研究了花生蛋白的酶解规律,同时研究了酶解产物在抗氧化能力、羟自由基(HO.)的清除能力和亚油酸自氧化法测定3种体系的抗氧化特性。结果表明,花生蛋白酶解过程中水解度随时间的变化表现为快速增加和平稳阶段,酶解产物在3种体系中都表现出较强的抗氧化能力。     

酪蛋白结构及其酶解特性研究进展

酪蛋白是牛奶中的主要蛋白成分,因其酶解产物中可分离出多种生物活性肽而广受关注。综述了酪蛋白的结构及其酶解特性的研究进展。酪蛋白由α_(s1)-酪蛋白、α_(s2)-酪蛋白、β-酪蛋白与κ-酪蛋白4种组分组成,在溶液中以胶团形式存在,其稳定性除与κ-酪蛋白有关外,还受到外界环境的影响,然而对于酪蛋白胶团内部结构的推断仍存在争议。此外,全酪蛋白及其组分的酶解特性也得到了较深的研究,包括推断酶解反应历程、酶解产物分子量分布变化、蛋白结构功能特性的变化及生物活性肽段序列的确定等。     

酶解金枪鱼头蛋白制备羟基自由基清除物的研究

用5种蛋白酶(木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、typsin、pepsin以及Alcalase 2.4L)分别酶解金枪鱼头蛋白,以羟基自由基清除率为指标,筛选出羟基自由基清除力最强的是Alcalase 2.4L的酶解液,通过响应面试验优化Alcalase2.4L最佳酶解条件为:酶解时间340 min,酶解温度54℃,加酶量0.38%,该条件下酶解液的羟基自由基清除率最佳,为63.67%。     

哈蟆油蛋白多肽的透皮作用研究

比较酶解前后哈蟆油蛋白多肽的相对分子质量、黏度和透皮情况。采用胃蛋白酶-碱性蛋白酶双酶法制备哈蟆油蛋白多肽,应用旋转粘度计测定酶解过程中黏度变化;以离体小鼠的皮肤为透皮屏障,应用透皮吸收仪测定不同透皮时间透皮液中蛋白多肽的透皮率和分子量分布。双酶法制备的哈蟆蛋白多肽黏度从5278.85 mPa·s(1.0 g/100 mL)降到12.56 mPa·s(7.0 g/100 mL),分子质量1147 kDa蛋白质从75.36%降到8.83%,透皮率从4.50%增加到9.14%。透皮36 h时,透皮液中主要为分子质量小于1 kDa哈蟆油蛋白多肽约占62%,其次是分子质量2.46 kDa的蛋白多肽占13.34%。双酶法制备的哈蟆油蛋白多肽分子量低、水溶性好,易于透过皮肤吸收。     

大麦醇溶蛋白及其酶解产物的抗氧化活性研究

为了探寻出大麦蛋白中最具抗氧化活性的片段,对大麦醇溶蛋白粗提物及其酶解产物的抗氧化活性进行研究。从大麦面粉中提取大麦醇溶蛋白,对其粗提物进行凝胶层析法分离纯化,并模拟人体消化道系统酶解得到不同组分的酶解产物,采用FTC法及FARP法对酶解前后及不同组分酶解产物的抗氧化活性进行比较。结果显示,大麦醇溶蛋白酶解产物的抗氧化活性显著高于其未经酶解的粗提物,酶解产物中C-大麦醇溶蛋白的活性显著高于其他组分。可见,大麦醇溶蛋白是一种优良的天然抗氧化剂,并且经消化酶解会大大提高其抗氧化活性。     

超声辅助酶解茶渣蛋白制备抗氧化活性肽

利用食源蛋白制备具有抗氧化能力的天然活性肽是当前的研究热点。为了优化超声辅助酶解茶渣蛋白制备抗氧化活性肽工艺,本研究以茶渣为原料,以酶解液DPPH清除率为指标,在单因素逐级优化基础上,选定酶解pH值、温度、时间、加酶量进行4因素3水平正交试验设计和分析。结果表明,碱性蛋白酶较好,在p H值为7.5、温度50℃、时间20 min、加酶量为400 U/g、超声功率为105 W的优化条件下酶解,酶解液对DPPH清除率达为85.36%,比对照活性提高了为31.87%。可见,在本试验条件下低功率超声能有效提高碱性蛋白酶酶解茶渣蛋白效率,增加抗氧化活性肽得率,为开辟茶渣高值化利用的新途径提供实验依据。