不同离心液对猪孤雌激活胚胎的冷冻效果

以猪孤雌激活胚胎为材料，经体外成熟、电激活，选取电激活后3d（6--8cell）胚胎分别放入0．28mol／L的蔗糖离心液或无蔗糖离心液中离心处理后，继续培养5d，取扩张囊胚进行玻璃化冷冻保存。结果显示，在囊胚形成率上，无蔗糖组（19．86％）略高于蔗糖组（18．83％），差异不显著（P〉0．05）；胚胎复苏率上两者差异不显著，但蔗糖组（43．33％）明显好于无蔗糖组（29．63％）；在解冻后胚胎内细胞破损率上，无蔗糖组（20．18％）低于蔗糖组（29．13％），差异不显著（P〉0．05）。因此，离心液中添加蔗糖，对后续囊胚形成无影响，在一定程度上提高了解冻囊胚复苏率，但没有降低内细胞的破损程度。     

兔病毒性出血症、巴氏杆菌病二联灭活苗与二种单苗的免疫比较

对研制的兔出血症、巴氏杆菌二联灭活苗分别与二种单苗进行了免疫力、免疫产生期、免疫持续保护效果、保存期的比较。结果表明：二联灭活苗对兔出血症RHD、巴氏杆菌病（Pm）的保护率分别100％（15／15）,86．7％（13／15）。而二种单苗的免疫效果分别是100％（12／12）和88．8％（8／9）,经统计学检验差异不显著（P〉0．05）。二联苗和单苗对RHD均100％保护,对于Pm二联苗和单苗第7天都能产生保护力,第10天可产生较坚强的免疫效果。疫苗免疫持续6个月后免疫对RHD、Pm的保护率分别为100％（8／8）、83．3％（10／12）,单苗免疫后对RHD、Pm的保护率分别为100％（6／6）,85．7％（12／14）,免疫效果无显著性差异（P〉0．05）。二联苗和二种单苗在4～8℃和室温条件下保存6个月,对兔病毒性出血症的保护率达100％,对巴氏杆菌病也具有良好的免疫效果。二种组分制苗无干扰现象发生。     

脱防冻剂方法对牛体外受精胚胎冷冻后成活率的影响

为了观察脱防冻剂方法对牛体外受精冷冻胚胎在体内、外发育率的影响,应用常规冷冻法在０．７５ｍｏｌ／Ｌ甘油＋０．５ｍｏｌ／Ｌ丙二醇溶液中冷冻受精后７、８ｄ的囊胚,解冻后在０．２５、０．５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖液中二步或在０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖液中三步脱防冻剂的胚胎孵化率（分别为６８．６％、６２．２％、６８．７％）与用ＰＢＳ／ＦＣＳ六步脱防冻剂的差异不显著（７０．４％,Ｐ＞０．０５）,但在０．５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖液中三步脱防冻剂后,孵化率显著降低（４７．６％,Ｐ＜０．０１）。用０．２５ｍｏｌ／Ｌ或０．５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖或海藻糖预先使胚胎脱水后冷冻,解冻后可使胚胎直接在ＰＢＳ中一步脱掉防冻剂,胚胎孵化率（４５．０％～４９．５％）与在０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖液中二步脱防冻剂的相似（５１．５％,Ｐ＞０．０５）。移植试验表明,在０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖液中二步脱防冻剂获得的妊娠率与六步脱防冻剂相似,与在ＰＢＳ中一步脱防冻剂的亦无明显差异,但妊娠率均偏低（２１．４％～３７．５％）。     

不同添加剂对苜蓿青贮品质动态变化的影响

以生长第2年的紫花苜蓿为材料,设计4个试验组,每组分别添加不同水平甲酸（5．0,5．5和6．0mL／kg）、蔗糖（10,20和30g／kg）、发酵汁（1．5,2．0和2．5mL／kg）和不同比例无芒雀麦（25％,33％和50％）,同一水平设3个重复。分别在青贮第2、8、15和45d测定青贮料pH值、氨态氮／总氮（NH3-N／TN）及乳酸产量,以揭示不同添加物不同青贮时间对苜蓿品质动态变化规律的影响。结果表明：在青贮的整个过程,分别添加不同添加物的青贮料pH值呈不同程度下降,NH3-N含量则呈现上升趋势。5．5和6．0mL／kg的甲酸抑制青贮的自然发酵过程,在青贮第2、8、15和45d的乳酸测定值均显著低于对照。20和30g／kg的蔗糖为乳酸茵的生长繁殖创造了良好的条件,青贮各时间点NH3-N／TN较对照显著降低,青贮品质最好。综合分析,蔗糖应是苜蓿青贮的首选添加剂。     

不同青贮添加剂对苜蓿青贮品质的影响

以紫花苜蓿为材料,采用随机区组设计,研究不同添加水平添加剂,甲酸（5．0ml／kg、5．5ml／kg和6．0ml／kg）、蔗糖（10g／ks、20g／kg和30g／ks）、发酵汁PFJ（1．5ml／kg、2．0ml／kg和2．5ml／kg）和不同比例无芒雀麦（25％、33％和50％）混合青贮对青贮pH值、氨态氮（NH3-N）含量及乳酸产量的影响。结果表明：蔗糖（30g／ks）添加效果最好,甲酸（6．0ml／kg）次之,以下依次为混合青贮、直接青贮和PFJ青贮。     

犬细小病毒感染病例分析

对60例犬细小病毒临床病例进行统计与分析。数据显示：犬细小病毒病的成功治愈率为66．7％（40／60）,死亡率为21．7％（13／60）,放弃或预后不清的为11．6％（7／60）;就诊时体温在39℃以上的为40％（24／60）,37℃-39℃为35％（21／60）,37。C以下为30％（2／60）,未测体温为22％（13／60）;15％病例只出现呕吐现象（9／60）,85％都表现剧烈呕吐及腹泻（51／60）,其中出现血便的占35％（18／51）;所有发病犬,未作任何防疫的占58．3％（35／60）,近期防疫过的占41．7％（25／60）,在防疫犬中,44％只防疫一次,66％犬（11／25）约防疫2次-3次;所有发病犬。小于2月龄占16．7％（10／60）,2月龄～5月龄占55％（33／60）,5月龄-12月龄占15％（9／60）,1岁以上犬占5％（3／60）;所有发病犬无明显品种特异性。结果表明,该病具有较高的死亡率,科学防疫、极早诊断和有效治疗是提高本病治疗率的关键。     

摩拉、尼里水牛与本地水牛成胚后的胚胎移植研究

为了在建立稳定的水牛胚胎体外生产技术的同时,开展胚胎移植技术研究,探讨水牛体外胚胎质量、安全性、移植方法以及移植效果。实验采用摩拉（Murrah）、尼里／拉菲（Nili／Rivi简称尼里）水牛冻精与本地水牛卵母细胞进行人工体外受精生产的鲜胚和冻胚,分别以本地母水牛、摩拉和尼里母水牛为受体,进行胚胎移植。结果表明：鲜胚移植受胎率为44．40％（36／81）,平均每头受体移胚1．83次,产下36头犊牛,繁殖率为83．7％（36／43）;冻胚移植受胎率为32．0％（8／25）,平均每头受体移胚1．67次,产犊8头,繁殖率为53．3％（8／15）,犊牛全部成活,其中双胞胎3例,采用人工授精与胚胎移植共生的双胞胎1例。     

切割取样后胚胎的冷冻保存技术的研究

研究了切割取样后小鼠胚胎和牛胚胎冷冻-解冻的技术方法。结果表明：（1）分别以10％甘油、10％乙二醇作为冷冻液以及在以上两种冷冻液中分别添加10％葡聚糖＋0．1mol／L蔗糖作为冷冻液常规方法冷冻切割后的小鼠胚胎，冷冻-解冻后体外培养72h总发育率分别为56．9％（259／455）、81．8％（604／738）、84．8％（540／637）和59．5％（308／518）。（2）取样后胚胎体外短暂培养（0-4h）并不能提高切割取样后小鼠胚胎冷冻-解冻体外培养发育率。（3）切割取样小鼠胚胎在25％甘油＋0．25mol／L蔗糖＋20％的血清为冷冻液，在-100～-110℃左右熏蒸2min快速冷冻后体外培养发育率为73．3％（33／45），切割取样牛胚胎快速冷冻-解冻移植妊娠率为57．1％（4／7）。     

纳米化红景天多糖对猪精液冷冻效果的影响

在冷冻稀释液中分别添加分数为1％、5％、10％、15％、20％的纳米化红景天多糖（Nonomaterialsrhodiolasa—chalinensispolysaccaride,NRSP）溶液,以添加6mg／L红景天多糖（Rhodiolasachalinensispolysaccaride,RSP）为对照组,不添加RSP为空白组,检测其对猪冷冻精子活力、顶体完整率、质膜完整率等生理结构指标,以及精子抗氧化能力的影响。结果表明,添加体积分数为15％NRSP组的精子活力（0．69）、顶体完整率（51．42％）、质膜完整率（25．95％）均高于其他组,并显著高于空白组（P〈0．05）。此外添加15％NRSP组的解冻后直线运动精子百分比（46．33％）要显著高于其他各组（P〈0．05）;添加6mg／LRSP组丙二醛（MDA）浓度最低（10．83±0．39）／2mol／L,并且显著低于空白组（31．85土1．36）μmol／L,（P〈0．05）,但与15％的NRSP组（11．60±0．42）μmol／L无显著差异（P〉0．05）。添加20％的RNSP组超氧化物歧化酶（SOD）活力最高（343．05-＋-19．64）μ／mgprot,显著高于其他添加组（P〈0．05）。精子活力、顶体完整率、质膜完整率之间存在显著的正相关关系（P〈0．05）,而精子活力和顶体完整性与MDA浓度呈显著负相关（P〈0．05）,与SOD活力呈显著正相关（P〈0．05）,质膜完整率与两者含量相关性不显著（P〉0．05）。     

高产奶牛性控雌性冻胚规模化移植试验

从美国引进高产奶牛性控雌性胚胎，在农村条件下，选择自然发情的黄牛作受体，移植合格受体牛648头。结果显示，自然发情黄牛924头中，经直肠检查合格受体牛648头，使用合格率为70．13％（648／924）；氯前列烯醇同期处理476头，使用合格率为36．13％（172／476），差异极显著（P〈0．01）。80～100d怀孕检查，自然发情移植成功率41．98％（272／648），同期发情移植成功率40．12％（69／172），差异不显著（P〉0．05）。自然发情黄牛不同黄体级别的移植成功率分别为：A级44．09％（41／93），B级42．43％（199／469），C级37．21％（32／86），差异不显著（P〉0．05）。单胚移植580头，移植成功率42．41％（242／580），双胚移植68头，移植成功率44．12％（30／68），差异不显著（P〉0．05）。正常胚胎单枚移植541头，移植成功率42．51％（230／541），裸胚单枚移植39头，移植成功率30．77％（12／39），裸胚比正常胚移植成功率低11．74％。怀孕牛已出生犊牛83头。其中母犊79头．公犊4头，母犊占95．18％，与自然发情的性比例（50％）相比较，差异极显著（P〈0．01）。     

添加剂对苜蓿草渣青贮饲料品质的影响

为了研究不同添加剂对苜蓿草渣青贮饲料品质的影响,分别设置对照组、蔗糖(2%、3%、3.5%)、玉米粉(5%、7.5%、10%)、甲酸(0.2%、0.3%、0.4%)、乳酸菌(2.5g/t)、乳酸菌+蔗糖(2.5 g/t+2%、2.5 g/t+3%、2.5g/t+3.5%)、乳酸菌+玉米粉(2.5 g/t+5%、2.5 g/t+7.5%、2.5 g/t+10%)17个处理组,调制草渣青贮饲料。结果表明:草渣直接青贮饲料发酵品质较差;蔗糖、玉米粉和甲酸可以改善青贮饲料的发酵品质;单独添加乳酸菌不能提高青贮饲料品质;乳酸菌分别与蔗糖和玉米粉混合使用,与二者单独添加相比较,其青贮饲料的发酵品质和营养成分同样也未得到改善。     

蛋黄中抗嗜水气单胞菌IgY的提取和纯化

通过对蛋黄中抗嗜水气单胞菌IgY的提取,分别进行了两种粗提方法(水稀释法、Pectin法)和纯化方法(硫酸铵法、PEG6000法)的比较。结果显示,当蛋黄液经pH5.0蒸馏水10倍稀释粗提后,上清液中脂肪和IgY残余率分别为32.69%和68.34%,效果较好。采用12%(w/v)PEG6000、33%(v/v)饱和硫酸铵纯化IgY,其免疫活性残余率分别为63.5%和64.1%。SDS-PAGE显示,水稀释法和Pectin法提取的上清液中杂蛋白减少,硫酸铵和PEG6000纯化后的上清液中几乎无其他杂带。研究表明,水稀释法和Pectin法提取IgY具有简便、高效和无污染的特点,硫酸铵和PEG6000适合纯化IgY。     

Evaluation of urine sucrose concentration for detection of gastric ulcers in horses

OBJECTIVE: To evaluate the use of sucrose permeability testing to detect ulcers in the gastric squamous mucosa of horses. ANIMALS: 13 adult horses ranging from 5 to 19 years of age. PROCEDURE: Following induction of gastric ulcers by intermittent feed deprivation, horses underwent sucrose permeability testing (administration of sucrose by nasogastric intubation followed by collection of urine at 2 and 4 hours after intubation) and gastric endoscopy. Squamous ulcers were assigned a severity score (range, 0 to 3) by use of an established scoring system. Horses were subsequently administered omeprazole for 21 days, and sucrose testing and endoscopy were repeated. Pair-wise comparisons of urine sucrose concentration were made between horses with induced ulcers before and after omeprazole treatment. Urine sucrose concentrations also were compared on the basis of ulcer severity score. RESULTS: Urine sucrose concentrations and ulcer severity scores were significantly higher in horses with induced ulcers before omeprazole treatment than after treatment. Urine sucrose concentrations were significantly higher for horses with ulcer severity scores > 1. Use of a cut-point value of 0.7 mg/mL revealed that the apparent sensitivity and specificity of sucrose permeability testing to detect ulcers with severity scores > 1 was 83% and 90%, respectively. Results were similar after adjusting sucrose concentrations for urine osmolality. CONCLUSIONS AND CLINICAL RELEVANCE: Urine sucrose concentration appears to be a reliable but imperfect indicator of gastric squamous ulcers in horses. Sucrose permeability testing may provide a simple, noninvasive test to detect and monitor gastric ulcers in horses.     

Comparison of methods to detect gastrointestinal parasites in llamas and alpacas

OBJECTIVE: To compare relative sensitivity and overall yields of various methods of fecal examination for gastrointestinal parasites in llamas and alpacas. DESIGN: Prospective study. SAMPLE POPULATION: Fecal samples from 42 alpacas and 62 llamas. PROCEDURES: Fecal samples were analyzed via direct smear, a modified McMaster technique with sucrose solution or saturated saline (approx 36% NaCl) solution, and a centrifugation-flotation procedure. McMaster flotation chambers were examined 15 and 60 minutes after loading. Centrifugation-flotation samples were examined after 10 and 60 minutes of flotation. The proportions of samples with positive results and concentrations of parasites were compared among methods. RESULTS: The centrifugation-flotation technique yielded more positive results than other methods for all parasites except small coccidia. Longer flotation time increased the proportion of positive results and parasite concentrations for all parasites except Nematodirus spp. Longer time in the McMaster chamber made little difference. By use of the modified McMaster technique, sucrose solution yielded more positive results for Trichuris spp, Eimeria macusaniensis, and strongyles, whereas saline solution yielded more positive results for Nematodirus spp and small coccidia. The saline solution McMaster test yielded more positive results for small coccidia than did most other methods, and the sucrose McMaster technique yielded more positive results for Trichuris spp. CONCLUSIONS AND CLINICAL RELEVANCE: The centrifugation-flotation technique appeared to offer clear advantages in detecting infection with E macusaniensis, Trichuris spp, Nematodirus spp, and capillarids. The saline McMaster technique appeared to offer an advantage in detecting small coccidia.     

草地早熟禾叶片脂肪酸对秋季低温的响应

为了探索冷季型草坪草的耐冷机制,以气相色谱-质谱（GC-MS）对秋季草地早熟禾叶片脂肪酸进行测定,并与盛夏时作对比。利用NIST97.L质谱库共检索出27种脂肪酸,以棕榈酸和硬脂酸为主的饱和脂肪酸有13种,约占总数的17%;以亚麻酸、亚油酸和棕榈油酸为主的不饱和脂肪酸有14种,约占83%。此外,肉豆蔻酸、棕榈酸、油酸等12种脂肪酸始终存在,占98.2%～99.2%,是质膜的主要组分。随气温降低,脂肪酸种类和含量都发生了改变。盛夏有反丁烯二酸和十四炔酸,而入秋后出现了苯甲酸、月桂酸、癸酸等12种脂肪酸,但含量甚微;此外,二烯脂肪酸下降,三烯脂肪酸增加。研究结果表明,草地早熟禾叶片质膜含有较高的不饱和脂肪酸,具有较强的耐冷性;为了抵御秋季冷凉气温,其脂肪酸不饱和度进一步增加更是提高了对冷害的抗性。     

O、A、Asia 1型口蹄疫病毒胶体金定量检测免疫层析方法的建立

旨在建立口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)抗原血清型的快速分型和定量的检测方法,利用双抗体夹心法,将口蹄疫病毒的兔抗及豚鼠抗体作为标记胶体金与NC膜检测带的原料,分别制备出检测O、A、Asia 1血清型的3种层析试纸卡。通过对标定的抗原标准品146S检测,拟合出定量标准曲线。免疫层析方法的质量验证通过特异性、敏感性、重复性及与蔗糖密度梯度法(sucrose density gradient, SDG)的相关性进行评价。结果显示:建立的快速定量检测方法,3种血清型口蹄疫病毒间无交叉反应,同时与其他非口蹄疫病毒,如塞内卡病毒A型(SVA)、猪水疱病病毒(SVDV)、猪水疱性口炎病毒(VSV)无非特异反应;敏感性研究,对O、A、Asia 1型病毒的最低检出量分别为0.567、0.693、0.219μg·mL^-1,拟合的3条标准曲线的线性相关系数R~2>0.97,新建立方法与蔗糖密度梯度法检测结果的相关系数均>0.9, 3种层析试纸卡的变异系数均小于10%。综上表明,建立的口蹄疫O、A、Asia1型病毒胶体金免疫层析定量检测试纸卡方法,可以用于口蹄疫病毒抗原快速鉴别、血清分型与146S定量检测。     

糖类对苜蓿叶蛋白中SOD的冻干保护作用

研究海藻糖(0.1%,0.2%,0.3%)、蔗糖(0.1%,0.2%,0.3%)、乳糖(0.1%,0.2%,0.3%)和蔗糖+乳糖(0.1%+0.2%,0.15%+0.15%,0.2%+0.1%)对苜蓿叶蛋白中超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响及苜蓿(Medicago sativaL.)叶蛋白的化学成分,探讨适合的冻干保护剂。结果表明:糖类冻干保护剂在一定浓度范围内对苜蓿叶蛋白中SOD活性具有保护作用,其中海藻糖处理(0.1%、0.2%和0.3%)、0.1%和0.2%乳糖处理、混合糖处理SOD活性保存率均显著高于对照(P<0.05),其中0.3%海藻糖处理和1:1比例的蔗糖和乳糖组合处理保护效果最好;0.3%蔗糖和0.3%乳糖处理对SOD未起到保护作用。苜蓿叶蛋白中富含蛋白质,而且各种氨基酸种类齐全,组成比例较为平衡,其中赖氨酸含量比较丰富。     

猪乙型脑炎乳胶凝集试验与血凝抑制试验方法的比较

用血凝抑制试验 (HI)和乳胶凝集试验 (LAT)两种方法检测乙型脑炎弱毒疫苗免疫猪血清 ,结果均呈阳性反应。用LAT对来自 12个猪场的 94份猪血清进行了乙型脑炎病毒 (JEV)抗体检测 ,并与HI进行了对比 ,两种方法检测结果阳性符合率和总符合率分别为 90 .3% (5 6 /6 2 )和 88.3% (83/94 ) ,两种方法检测结果差异不显著 (p >0 .0 5 )。对来自无乙型脑炎的 12头健康猪血清进行检测 ,两种方法检测结果均为阴性。结果表明 ,用LAT与HI检测乙型脑炎结果符合 ,前者更为简便和实用。     

广东省部分地区马肠道寄生虫感染情况调查

【目的】调查广东省内部分地区马匹寄生虫感染情况,探索区域内马匹寄生虫感染优势虫种、感染情况和耐药情况,为区域内马肠道寄生虫病的防治提供参考。【方法】采用饱和食盐溶液漂浮法和饱和蔗糖溶液漂浮法对广东省内7个城市24个马术俱乐部375份新鲜马粪样品进行处理,光学显微镜下观察虫卵/卵囊的形态结构特征并进行分类,并根据麦氏计数法计算每克粪便中虫卵/卵囊数（EPG）,统计感染率和感染强度。对EPG＞500的阳性样本进行粪便虫卵减少量计数试验（FECRT）,以评估各马术俱乐部流行寄生虫耐药情况。提取5份＜1岁幼驹的粪便样本DNA,利用巢式PCR检测样品是否存在隐孢子虫感染。【结果】375份样品中有120份样品呈寄生虫虫卵/卵囊阳性,总感染率为32.00%。共检出4种肠道寄生虫,分别为圆线虫、马副蛔虫、类圆线虫和马蛲虫,总感染率分别为30.40%、3.70%、0.80%和0.30%。1~4岁马匹感染率显著高于其他年龄段（P＜0.05）,但不同性别马匹寄生虫感染情况无显著差异（P＞0.05）。受调查马匹感染强度以低排卵（EPG＜200）为主,占马匹总数83.47%。FECRT结果显示,样本所在马术俱乐部常用驱虫药（主要成分为伊维菌素、阿苯达唑）有效,未见耐药现象。5份＜1岁幼驹的粪便样本隐孢子虫巢式PCR检测均为阴性。【结论】广东省部分地区马术俱乐部道寄生虫防控情况总体良好,区域内各马术俱乐部寄生虫防控效果存在差异,建议区域内各马术俱乐部加强马肠道寄生虫监测工作,依据本场监测情况合理用药,避免场内流行寄生虫对所用驱虫药物产生耐药性。