用单抗介导的交叉ELISA对IBV毒株的分型研究

用针对IBV 3种结构蛋白的一组单抗（C1、C2、C3、J1、J2、J3）和6个不同血清型的IBV标准株（Gray株、Connectic株、Holte株、T株、M41株、Arkavas株）进行交叉ELISA试验，显示了6种不同的反应模式；与同一Mass血清型内M41、H52、H120 3毒株进行交叉ELISA反应显示出相同的反应模式；通过地方分离株和标准株与6株单抗的ELISA反应模式比较可将来自河南、山东、江苏、广东、广西、西川等省22个地方株划分为7个不同的抗原群，其中M41抗原群占10株，其仍是我国当前主要的流行型。根据两株中和单抗C2、J1与22个地方株ELISA反应结果，可将地方株分为三大类群，即与J1反应的M41类群，与C2反应的Y类群和J1、C2均不反应的第三类群，C2和J1两株中和单抗可与85％以上毒株发生反应，可为IBV制苗毒株的选择（M41和Y）提供参考依据，此种分型方法较传统的分型方法简便、快速。     

用灰色关联度法综合评价扁蓿豆生产性能

应用灰色关联度法对来自内蒙古13个地区的20份野生扁蓿豆（Medicago ruthenica）材料在内蒙古呼和浩特市的栽培生产性能进行综合评价,采用株高、生育期、株高生长速度、干鲜比、鲜草产量、干草产量和种子产量等指标建立评价模型,综合评价各材料的栽培生产性能。结果表明,栽培生产性能表现较好的材料有来自锡林郭勒盟灰腾梁的M 4、通辽市的M 8、锡林郭勒盟西苏旗的M 5和通辽市的M 6,而来自包头市达茂旗的M 20、乌兰察布市四子王旗的M 19、锡林浩特市的M 3和赤峰市的M 10栽培生产性能较低。根据各性状指标的权重比较种子产量所占的权重为株高>生育期>株高生长速度>干草产量>鲜草产量>干鲜比。     

RT—PCR和RFLP对我国部分传染性支气管炎病毒分离株分型

用2 对引物分别对4 株传染性支气管炎病毒(IBV)标准毒株(Gray、M41、H120、MA5)和5 株国内地方分离株(KF8、18KF7、QF3、XF7、XF18)进行RT-PCR,结果均获得了与预期大小一致的片段。对此2 种PCR 产物进行了限制性片段长度多态性(RFLP)分析,分别用3 种限制性内切酶(HaeⅢ、HinfⅠ、PvuⅡ)进行酶切,根据不同的酶切图谱将测试的IBV 毒株分为不同的基因型。2 对引物的PCR 产物酶切分型结果基本一致。9 株IBV 毒株分为3 种基因型,即H120、M41、XF7、XF18、MA5 和KF8 属于Ⅰ型,Gray 属于Ⅱ型,QF3、18KF7 属于Ⅲ型     

盐胁迫对野生樱桃幼苗生长的影响及其耐盐性分析

为了扩大樱桃的栽培区域、在沿海大城市周边轻度盐碱地上栽培,试验以野生樱桃砧木实生苗四川樱桃、黑山樱、大青叶为试验材料,通过不同浓度的盐胁迫处理（0、0.2%、0.4%、0.6% NaCl）和植株的各项生长指标测定（株高、茎粗、叶片数和叶面积）,比较了野生樱桃的耐盐性。结果显示：在盐胁迫下,大青叶樱桃相对株高、茎粗、叶片数、叶面积的平均值均最大,黑山樱除相对茎粗平均值外,其余3项生长指标均高于四川樱桃。隶属函数综合分析显示,3种野生樱桃幼苗生长期的耐盐性为：大青叶>黑山樱 >四川樱桃。     

不同覆盖材料对西北地区青贮玉米生长性状及产量的影响北大核心

试验旨在探明不同覆盖材料对西北地区青贮玉米生长性状及产量的影响。在甘肃省中部的永登县中川镇廖家槽进行田间试验,以青贮玉米品种“陇青贮1号”为材料,设置4个处理,分别为普通白色地膜(M1)、黑色地布(M2)、生物降解膜(M3)、液态地膜(M4),测量株高、茎粗、叶面积、花后干物质积累量、果穗产量、果穗率、籽粒含水率、全株含水率、鲜草产量、干草产量。结果显示,成熟期M1玉米的株高较M2、M3、M4分别高0.7%、7.7%、14.2%。M1、M2、M3、M4在拔节期对玉米茎粗、株高具有显著性影响(P<0.05)。成熟期单株叶面积表现为M4>M2>M1>M3。与M2、M3、M4处理相比,M1花后干物质积累量分别高122.2%、68.7%、68.3%,果穗产量分别高26.6%、24.7%、57.8%,鲜草产量分别提高6.5%、9.0%、10.2%,干草产量分别提高20.4%、25.2%、36.9%。果穗率、籽粒含水率表现为M4>M2>M3>M1,全株含水率表现为M4>M3>M2>M1。研究表明,液态地膜不利于西北地区青贮玉米种植。     

115份高羊茅种质资源农艺性状特征分析

对不同地理来源的115份高羊茅种质资源的株高、穗长、叶枕距、每穗小穗数、主穗分枝数、单株穗数、穗重等7个农艺性状进行了主成分和聚类分析。结果表明:前3个主成分代表了115份高羊茅种质7个农艺性状的82.82%的信息,且对3个主成分作用较大的性状主要有穗长、单株穗数、主穗分枝数。应用系统聚类分析,将115份高羊茅种质分为5个类群,其中,第Ⅱ类群又可分为3个亚类群,其中Ⅰ-Ⅱ亚类群和Ⅳ类群的每穗小穗数和穗重较大,综合表现较好。同时,地理距离和农艺性状间未存在严格的一致性。     

2011年河南省猪流行性腹泻病毒流行株的遗传进化分析

2011年前后,猪流行性腹泻(PED)在河南省爆发流行.为探明该病再次流行的原因,本研究对2011年收集的7份来自河南省不同地区PED病毒(PEDV)流行病毒株M基因进行RT-PCR扩增、克隆、测序及分析.序列分析显示,7株PEDV河南流行株M基因部分核苷酸及氨基酸发生变异,不同于以往参考病毒株.基于M基因的遗传进化分析显示,PEDV河南流行株和参考株可以分为3个群(G1、G2、G3),7株PEDV河南流行株均属于第3群,与2010年中国BJ2010株、2007年韩国PFF188株及2008年泰国08RB03株亲缘关系密切,而与欧洲病毒株(CV777、Br1/87)、1995年和2004年泰国株(M_NIAH1795_04、M_NIAH2013_95)及2006年中国LZC株亲缘关系较远.结果表明,2011年在中国河南省及其它地区流行的PEDV是一个新的基因型,可能起源于韩国和泰国.     

种植密度对饲用甜高粱生产性能及青贮效果的影响

为优化饲用甜高粱种植密度,探索其高产栽培及加工技术,本试验设饲用甜高粱6 667株/666.7m²(行距50 cm、株距20 cm,用M1表示)和13 334株/666.7m²(行距50 cm、株距10 cm,用M2表示)2种种植密度,观察生育期、农艺性状、产量等生产性能指标,并对比分析青贮饲料的感官指标、营养品质等指标。结果表明：种植密度对饲用甜高粱生育期影响不大;从农艺性状来看,M1植株高、叶片多,但两者的茎粗和叶片没有明显差异,M2叶片比M1宽;M1干草产量比M2高,M2鲜草产量比M1高;M1的青贮感官评定总得分是81分,M2得分为92分,两者都属于优等青贮饲料;M1青贮原料和青贮后的营养品质均优于M2;M1干物质采食及相对饲喂价值比M2高。说明,M1密度条件下,饲用甜高粱的生产性能及青贮效果均优于M2。     

马耳它布氏杆菌bp26基因缺失株的构建及鉴定

为了建立马耳他布氏杆菌M5-90株弱毒疫苗株与野生株的鉴别诊断,本研究以bp26基因作为重组靶位点,以M5-90为亲本,利用bp26基因ORF外侧序列作为同源序列,将卡那霉素抗性基因(Kan')整合到细菌基因组中,双交叉重组阳性菌株,经SDS-PAGE和western blot试验表明迁移率约为29 ku的BP26蛋白在亲本菌中表达并可被鼠抗BP26高免血清识别,而突变株M5-90-26反应结果为阴性,表明BP26蛋白在突变疫苗株M5-90-26中未表达.M5-90-26具备从血清学角度区分M5-90-26免疫与野生型布氏杆菌感染,对布氏杆菌病防制、监测及净化具有重要的意义.     

20份穗花韭种质资源表型数量性状的遗传多样性分析

为探求日喀则地区穗花韭种质资源的遗传多样性，本研究对收集到的20份穗花韭(Milula spicata Prain)种质的17个表型数量性状进行了变异分析、主成分分析和聚类分析。结果表明：20份种质居群内和居群间均有较大的遗传变异和丰富的遗传多样性。除叶片数、地上茎粗、花穗粗的变异系数在30%以内外，地下茎长、花葶粗、根系长、地下茎粗、根系数量、叶宽、叶长、花穗长的变异系数在30%～50%，花葶高、株高、地上地下生物量的变异系数高于50%。主成分分析共提取到4个主成分，累计贡献率86.31%，第1主成分与地上生物量有关，第2，3，4主成分与地下生物量有关。聚类分析将材料分为2个类群，第2类群表型优于第1类群，与主成分分析综合得分排序结论一致。本研究可为穗花韭种质资源的收集和筛选提供理论依据。     

Phenotypic and genotypic characterization of Mannheimia (Pasteurella) haemolytica-like strains isolated from diseased animals in Denmark.

Trehalose-negative strains of the Pasteurella haemolytica complex have recently been transferred to a new genus, Mannheimia. This genus presently consists of five named species: M. haemolytica, M. glucosida, M. granulomatis, M. ruminalis and M. varigena. The purpose of this study was to investigate the occurrence of these species and lesions associated with these isolates in Denmark. In all 106 M. haemolytica-like strains isolated from pathological material from cattle, sheep, pigs and hares submitted to the Danish Veterinary Laboratory between 1994 and 1998 were investigated. Phenotypic characterization and ribotyping were used for identification in addition to sequencing of the 16S rRNA genes for selected strains. The species allocation was determined by comparison to results from a previous polyphasic taxonomic study. Seventy-one percent of the strains belonged to M. haemolytica, 18% to M. varigena and 8% to unnamed groups within the genus Mannheimia. Single isolates identified as M. glucosida and P. trehalosi, respectively, were detected. Two isolates belonged to M. granulomatis. Forty-three percent of the strains belonged to serotype 1, 41% were untypeable, while the rest belonged to serotypes 2, 7, 9, and 16. The present investigation also showed that a simplified phenotypic characterization using Diatabs Diagnostic Tablets (Rosco, Denmark) represents a useful method for obtaining a quick and reliable species identification. Finally, the investigation confirmed that serotyping does not represent a reliable method for species identification. The heterogeneity of species associated with bovine "pasteurellosis" should be considered in future studies to improve our understanding of the pathogenesis of pneumonic disease.     

Mycobacterial infection of pigs in Croatia

During a five-year period (2000 to 2004) 74,342 pigs were tested by the intradermal tuberculin test in Croatia. Of them, 248 (0.33%) pigs were positive and 91 (0.12%) were found to be suspicious in 7 out of the 13 farms included in the study. Gross pathological changes characteristic of tuberculosis were observed in tuberculin-positive and/or suspicious swine. Mycobacterium was isolated from the lymph nodes of 183 out of 234 swine (78.2%). For better epidemiological understanding, isolates were typed by conventional methods, PCR and hybridisation. The results show that most of the isolates belonged to the Mycobacterium avium complex (175 isolates, 95.7%). Other isolates belonged to M. fortuitum (6 isolates, 3.3%), M. chelonae (1 isolate, 0.5%), and M. peregrinum (1 isolate, 0.5%). Isolated strains of the M. avium complex were identified as M a. avium (37 isolates, 21.1%) and M. a. hominissuis (138 isolates, 78.9%).     

牛瘤胃微生物的分离鉴定与生化特性分析

【目的】通过对瘤胃液中分离所得的菌株进行研究,为益生菌制剂的制备提供基础数据。【方法】采集10头健康荷斯坦奶牛的瘤胃液,通过涂布、特性培养、纯化等步骤获得单一菌株,提取细菌DNA,进行16S rDNA的PCR扩增。通过16S rDNA基因测序鉴定后进行序列比对并构建系统发育树,确定菌株种类。对不同种类的细菌进行0～48 h的培养测定其生长特性,并进行耐酸碱和耐胆盐试验。【结果】通过涂布分离菌株得到20株分离菌,经PCR扩增后测序发现20株菌属于7种不同的菌,大致确定L7为解淀粉芽孢杆菌、K7为枯草芽孢杆菌、S7为嗜麦芽窄食单胞菌、C2为地衣芽孢杆菌、M7为马链球菌、F7为弗氏酸柠檬杆菌、T7为吉氏库特菌。通过生长曲线可以看出,7株菌分别在24～36 h达到最快生长期。M7和K7对酸有较强的耐受性,而S7、C2和F7对酸性较为敏感,C2对碱的耐受性最强,而T7对胆盐的耐受性最强,S7对胆盐最不耐受。【结论】本研究从瘤胃中分离得到的7个菌株对酸碱和胆盐具有不同程度的耐受性,以及最适生长周期。     

水葫芦与甜玉米秸秆混合半干青贮的研究

本试验设3种比例的混合青贮，即水葫芦（Eichhornia crassipes）∶甜玉米（Zea mays）秸秆按鲜质量比为9∶1、8∶2和7∶3（W9M1、W8M2和W7M3）混合，并在每种混合比例中设无添加（CK）、添加2 mL/kg绿汁发酵液（FGJ）、添加3 mL/kg蚁酸（FA）和添加3 mL/kg四蚁酸铵（FOR）4个处理，探讨混合比例和添加剂对水葫芦与甜玉米秸秆混合半干青贮发酵品质的影响。每个处理3次重复，常温下贮存60 d，开封后评定其青贮品质。结果表明，3种添加剂均能显著（P<0.05）提高不同混合比例材料的青贮品质，另外W9M1的干物质回收率显著（P<0.05）高于W8M2和W7M3，CK和FGJ处理中，W7M3的可溶性碳水化合物极显著（P<0.01）高于W8M2和W9M1。3种混合比例中，W9M1的青贮效果最佳；3种添加剂对改善水葫芦与甜玉米秸秆混合青贮品质均有极显著效果，蚁酸的添加对营养物质的保留效果显著。     

湖南省猪链球菌的分离与鉴定

从病猪脏器病料中通过细菌培养、生化试验分离鉴定出了121株猪链球菌.经PCR技术鉴定马链球菌兽疫亚种28株,占23.1%,猪链球菌24株,占19.8% ,其中猪链球菌2型4株,占3.3%,猪链球菌9型2株,占1.7%,猪链球菌1型和7型都没检测到,证实省内除了猪链球菌2型外,也存在其他血清型的猪链球菌.     

桑树根际解磷细菌的分离鉴定及解磷能力测定

桑树根际解磷细菌能够改善桑树营养,促进根系生长。利用选择性培养基,从桑树根际分离获得32个具有解磷能力的细菌分离物,经rep-PCR基因指纹分析得到19株解磷细菌。经解磷能力测定,PYP2、PYP4、PYP6、FYP2菌株具有较强的解有机磷能力,FWP7、PWP4菌株具有较强的解无机磷能力,FWP1、FWP9、FWP11、PYP6和PWP1菌株的解有机磷和无机磷能力均较强。利用菌落形态特征观察及16S rDNA碱基序列测定和同源性分析,对具有较高解磷能力的菌株进行了鉴定:FWP1、FWP11、PYP2、PYP6、FYP2菌株为假单胞菌属(Pseudomonas sp.),FWP9和PWP1菌株为贪噬菌属(Variovorax sp.),FWP7、PWP4菌株为根瘤菌属(Rhizobium sp.)。     

鸡传染性支气管炎病毒基因型与血清型相关性初步研究

为研究鸡传染性支气管炎病毒(IBV)基因型与血清型之间的相关性,本研究以国内不同地区的17株IBV分离株、2株疫苗株(M41、W93)和1株强毒株(X株)为研究对象,经RT-PCR扩增获得20株IBV的S1基因并进行测序.将其分别与GenBank中的20株国内外参考IBV株的S1基因进行序列比较,绘制S1基因系统进化树...     

Serotypes of Rhodococcus equi isolated from horses, immunocompromised human patients and soil in Hungary

Two hundred and twelve Rhodococcus equi strains were isolated from soil, nasal and rectal swabs of horses and immunocompromised human patients in Hungary and serotyped using Prescott's serotyping system. One hundred and forty-seven strains (69.3%) belonged to serotype 1, 22 strains (10.4%) to serotype 2, 6 strains (2.8%) to serotype 3 and 1 strain (0.5%) to serotype 4. Serotypes 5, 6 and 7 were not found and 36 strains (17%) could not be typed. Serotype 1 (72%) was the type most commonly isolated from clinical samples of foals or from the soil of horse facilities. Six out of 8 R. equi strains from humans belonged to serotype 2, and two human strains were untypable. The data show that the prevalence of R. equi serotypes varies in different geographic areas of the country.     

北京鸭传染性窦炎的调查研究Ⅱ、病原学与人工感染试验

本实验从40只患传染性窦炎的病鸭眶下窦中(其中4只未作病毒分离)分离到16株血凝性病毒,经血凝抑制试验(HI)及神经氨酸酶抑制试验(NI)鉴定,均为A型流感病毒(H_(11)-N_9);又分离到18株霉形体中,除2株未定种外,其余16株经生长抑制试验和间接表面免疫荧光试验鉴定均为鸭霉形体(Mycoplasma anatis)。同时分离到31株大肠杆菌,O抗原分属O_(15)、O_(70)、O_(138)三个血清型。将A型流感病毒(H_(11)N_9)、鸭霉形体和大肠杆菌(O_((?))和O_(138))分别经眶下窦接种1日龄雏鸭,并接种灭菌生理盐水作对照。结果,鸭霉形体的感染成功地复制出自然病例,表明鸭霉形体是鸭传染性窦炎的病原体。