安徽省奶牛隐孢子虫病流行病学调查

为了查明安徽省奶牛隐孢子虫感染与地理分布情况，选取该省境内4个奶牛场进行了奶牛隐孢子虫感染情况的调查，结果在26头奶牛的粪样中查到了隐孢子虫卵囊，其感染率为5．18％（26／502）。经鉴定，所获虫体为鼠隐孢子虫（Cryptosporidium muris）和小隐孢子虫（Cryptosporidium parvum）。     

合肥市某奶牛场奶牛隐孢子虫病流行病学调查

为查明合肥市某奶牛场奶牛隐孢子虫感染情况,采用饱和白糖溶液漂浮法和金胺酚-改良抗酸染色法对该场325头奶牛的粪样进行了检查。结果表明：饱和白糖溶液漂浮法在103头奶牛的粪样中查到了隐孢子虫卵囊,感染率为31．69％;金胺酚-改良抗酸染色法在88头奶牛的粪样中查到了隐孢子虫卵囊,感染率为27．08％。经鉴定,所获虫体为鼠隐孢子虫Crtptosporidium muris。     

鹌鹑隐孢子虫流行病学调查及动物感染试验

为掌握畜禽隐孢子虫病在河南省的流行动态,作者于2003年用饱和蔗糖溶液漂浮法检查了郑州、焦作2市7个鹌鹑养殖场429份粪便样品,结果有5个鹌鹑场隐孢子虫感染为阳性,根据卵囊形态初步鉴定1种为贝氏隐孢子虫(Cryptosporidium baileyi),另1种为火鸡隐孢子虫(Cryptosporidium meleagridis);总阳性率为14．69％(63／429),其中感染贝氏隐孢子虫的阳性率4．66％(20／429),火鸡隐孢子虫的阳性率为10．02％(43／429),并分别用2种卵囊试验感染鹌鹑和雏鸡研究其致病性,观察了2种隐孢子虫在鹌鹑体内的排卵囊规律,以及火鸡隐孢子虫在免疫抑制雏鸡和非免疫抑制雏鸡体内的排卵囊规律。     

四川红原县牦牛隐孢子虫感染情况分子流行病学调查

为调查红原地区牦牛隐孢子虫感染情况,采用巢式PCR对采自红原县的216头份牦牛粪便进行了检测(其中包括腹泻粪便样本18份)。该地区牦牛隐孢子虫总感染率为14.8%,其中Cryptosporidium bovis 感染率为3.7%,C. ryanae感染率为5.1%, C. andersoni感染率为6.0%, 而腹泻样本并未检出隐孢子虫。以上结果表明,牦牛是隐孢子虫的天然宿主,但该实验中未见隐孢子虫和牦牛腹泻间存在明显相关性,隐孢子虫和牦牛腹泻之间的关系需要后续研究来进一步阐明。     

河南奶牛隐孢子虫病流行病学调查及人工感染试验

对郑州，洛阳，开封３个城市的７个奶牛场，进行了隐孢子虫病流行病学初步调查。发现７个奶牛场均有隐孢子虫感染。平均感染率为４０％，其中０－６月龄的犊牛，６－１２月龄的育成牛，１周岁以上的产奶牛隐孢子虫感染率分别为４６．６７％，４２。１％和３６．１％。犊牛感染率高于育成牛和产奶牛。     

河南猪隐孢子虫病流行病学调查及动物感染试验

为了掌握河南猪隐孢子虫(Cryptosporidium)的感染情况,用饱和糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法调查了郑州、许昌、漯河和禹州等地市6个猪场共417份粪样,并进行了固始品种雏鸡和昆明系小白鼠和长大二元杂交仔猪的动物感染试验.结果表明,根据形态大小初步鉴定为小球隐孢子虫(Cryptosporidium parvum),平均感染率为10.95%,20日龄以前的仔猪未感染,21~40日龄的的仔猪感染率为12.20%,41~60日龄的仔猪感染率为21.19%;猪源隐孢子虫分离株(sucp)不感染5日龄固始品种雏鸡和18日龄正常的昆明系小白鼠,但是能感染免疫抑制小白鼠,对4日龄仔猪有较强的致病性,并且出现严重的拉稀、脱水等症状.组织切片用H.E染色观察结果显示,sucp株寄生在小白鼠的十二指肠、空肠和回肠以及仔猪的盲肠、结肠和直肠.     

河南省畜禽隐孢子虫病流行病学调查

作者对河南省郑州市开封市及信阳地区牛群、鸭群和鸡群的隐孢子虫病流行情况进行了流行病学调查结果表明:郑州市郊奶牛隐孢子虫感染的平均感染率为40%,随着牛的年龄增大,感染率有呈下降的趋势。经鉴定,郑州市郊奶牛场的隐孢子虫为小鼠隐孢子虫。郑州市开封市及信阳地区家鸭的群体隐孢子虫感染率为69.57%,1～8月龄感染率(87.5%)明显高于8月龄以上鸭的感染率(60%).阳性鸭群粪中卵囊数均较少.郑州市郊8个猪场的粪样中有7个猪场粪样呈阳性.粪样的平均阳性率为17.7%,郑州猪场的隐孢子虫亦为小鼠隐孢子虫.郑州地区12个鸡扬中没有发现隐孢子虫感染。     

绵羊源十二指肠贾第虫和隐孢子虫的分子鉴定

为了解河南省安阳市绵羊源贾第虫和隐孢子虫的分子特性,对基于卢戈氏碘液染色法和饱和蔗糖溶液漂浮法检查获得的16份绵羊源贾第虫和3份隐孢子虫分离株分别进行DNA提取,并基于16S rRNA基因位点和18S rRNA基因位点进行巢式PCR扩增,获得阳性扩增产物,再进行测序鉴定和系统发育进化分析。结果显示,PCR成功扩增绵羊源贾第虫和隐孢子虫的特异性基因位点。基于对上述2种肠道原虫特异性基因位点的分子序列分析,将贾第虫鉴定为十二指肠贾第虫集聚体E(93.75%,15/16)和集聚体A(6.25%,1/16);将隐孢子虫鉴定为泛在隐孢子虫（66.67%,2/3）和猪隐孢子虫（33.33%,1/3）。     

安氏隐孢子虫ITS-1基因PCR检测方法的建立

[目的]建立针对安氏隐孢子虫的PCR快速检测方法,为安氏隐孢子虫的检测和分子流行病学调查提供技术支撑.[方法]根据GenBank中安氏隐孢子虫的ITS-1基因序列设计1对特异性引物,建立基于ITS-1基因的PCR方法,并通过特异性试验、敏感性试验、临床检测以及与经典巢式PCR检测方法进行比较等,验证其可行性.[结果]基于ITS-1基因的PCR检测方法能扩增出安氏隐孢子虫的特异条带,而对猪源隐孢子虫、贝氏隐孢子虫、微小隐孢子虫、牛泰勒氏虫、牛巴贝斯虫、伊氏锥虫、食道口线虫的扩增结果均为阴性;将测序结果进行BLAST比对,发现其与GenBank中安氏隐孢子虫的同源性均在99%以上.敏感性最低可检测每克牛粪中5个卵囊;用于检测广西不同地区的1613份牛粪样品时,与经典巢式PCR检测方法相比,发现两者的阳性检出率均为11.72%,且吻合率达100%.[结论]安氏隐孢子虫ITS-i基因PCR检测方法具有快速、敏感、特异的特点,适用于安氏隐孢子虫的检测和分子流行病学调查分析.     

上海地区实验用兔线粒体DNA-RFLP分析

提取3个品种实验用兔肝组织中的线粒体DNA,并用ApaI等21种限制性内切酶进行消化。分析上海地区实验用兔mtDNA的多态性。酶切产物经琼脂糖凝胶电泳检测,共检出8种不同的限制性单倍型,少数个体出现的差异,可能来源于几个位点发生偶然突变,但不同兔群的限制性无规律性。结果表明上海地区实验用兔群体mtDNA的遗传多样性贫乏,遗传结构单一,提示所研究的兔种可能有共同祖先,或人工饲养繁殖出现血缘杂交现象。     

茶淀红麦耐盐基因的RFLP分子标记

以农家耐盐小麦品种“茶淀红麦”与盐敏感品种“中国春”为对象配制杂交组合,获得９８株分离群体,利用ＢＳＡ方法构建小麦耐盐和盐反应敏感基因池,利用ＲＦＬ探针标记茶淀红素的耐盐基因。结果表明小麦７个同源群１４个长短臂上的８０个ＲＦＬＰ标记中仅有５Ａ染色体长臂上的Ｐｓｒ９０６表现多态性,在３２株Ｆ２群体表现共分离。     

水稻生育期的分子标记和数量性状位点分析

水稻生育期(从播种到抽穗的天数)是影响水稻生长和品种布局的一个重要因素,它既受品种的遗传特性控制又受光、温、水、肥等生长条件的影响.为选育适用于一定生态环境和耕作制度的水稻品种,生育期是一个需要经常改良的性状.     

长春封闭群日本大耳白兔部分血液生物学参数

为建立长春封闭群日本大耳白兔的生物学数据库,对20只(10♀+10♂)亲代长春封闭群日本大耳白兔及20只(10♀+10♂)自繁F代日本大耳白兔采用Sysmex KX-21N型会自动血球计数仪和美国产Lx-20型全自动血液生化分析仪测定了RBC、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT、MPV、WBC、W-SCR、W-LCR10项血液有形成分和血红蛋白,以及AST、ALT、ALP、TP、ALB、BUN、D-BIL、Grea、TG、CHOL10项生化参数,并对其进行对比分析.长春封闭群亲代与F代日本大耳白兔部分血液和生化参数差异显著,且F代的某些指标均优于亲代日本大耳白兔.试验结果充实了长春封闭群日本大耳白兔的生物学数据库并为日本大耳白兔作为实验动物开展科学研究提供理论依据.     

分子标记在丛枝菌根研究中的应用

 作为一类具有重要生态学意义的微生物类群,丛枝菌根（Arbuscular mycorrhizal,AM）真菌在自然生态系统中的功能已经成为当前生态学研究的热点问题之一,其中,AM真菌的分类鉴定是菌根学研究的重要组成部分。鉴于经典的菌根真菌鉴定技术的局限性,本文围绕以PCR为基础的分子生物学技术,探究RAPD、RFLP、SSCP、AFLP等在AM真菌分类鉴定、亲缘关系分析、多态性测定以及群落结构组成等方面的应用及其取得的成果,并对不同分子生物学技术之间的优缺点进行对比。在此基础上,对利用分子标记技术开展AM真菌研究的前景进行展望。     

几种分子生物学方法在真菌中的应用

真菌在地球上分布广泛并与人类的生活密切相关,因此长期以来,真菌学家都在为探寻它在自然界中的分类地位及阐明它的系统进化关系、谱系发生历史而努力,使人类能最大限度地利用其为自身服务.但由于真菌形态构造和繁殖方式较原核生物复杂、多样,与高等植物相比形态结构则又简单,因此其分类既不同于原核生物也不与高等植物相似.     

长春地区大豆田节肢动物群落时序动态研究

长春地区大豆田节肢动物群落系统调查结果表明:群落具有很高的物种丰富度,物种数多达220种,分别隶属于2纲、15目、110科。其中天敌103种、害虫66种、中性昆虫51种。运用有序样本最优分割法和主成分分析等方法对群落时间格局进行了研究。最优分割将大豆田节肢动物群落的发展历程分为3个阶段:发展期、鼎盛期和衰退期,结合群落多样性和物种丰富度等群落特征值对最优分割结果进行了解释。主成分分析的结果证实各亚群在节肢动物群落发展的不同时期发挥不同作用,中性昆虫与害虫之间存在明显的时间上的互补,而天敌对害虫有明显的跟随现象,各类群在维持群落稳定方面均发挥重要作用。     

分子标记技术及其在牧草中的应用

介绍了 4 种主要的分子标记技术(AFLP、RFLP、RAPD、SSR)的原理方法,比较各自的特点.并简单综述上述 4 种分子标记技术及其在牧草中的应用,指出存在的问题,为今后的研究学习提供参考.     

2014~2015年黑龙江牡丹江地区犬博卡病毒的分子流行病学调查

为了调查黑龙江牡丹江地区犬博卡病毒流行情况,在2014年5月至2015年4月,在黑龙江牡丹江地区采集40份腹泻犬的粪便拭子样品,利用PCR扩增方法进行鉴定和混合感染检测,进一步做进化树进行分析。检测结果显示,在40份样品中,8份样品为CBoV阳性（20%,8/40）;在8份CBoV阳性样品中,与CPV-2、CCoV、CaKV混合感染率分别为37.3%（3/8）、25%（2/8）、25%（2/8）。序列分析表明,8个CBoV毒株的NS1片段在核苷酸水平的同源性为94.2%~100%,在氨基酸水平的同源性为91.7%~100%。进化树分析显示,与韩国、美国、德国和中国香港的CBoV毒株相比,8个中国CBoV毒株表现出遗传多样性。研究揭示了黑龙江牡丹江地区流行的CBoV毒株显示出遗传多样性以及与其他肠道病毒的混合感染情况。     

4个绵羊品种褪黑激素受体1a基因第二外显子PCR-RFLP分析

采用2种限制性内切核酸酶MnlI和只Rsu I，对常年发情的小尾寒羊和湖羊以及季节性发情的多赛特羊和萨福克羊共146只绵羊褪黑激素受体1a(MTNRlA)基因外显子2的824bp扩增产物进行PCR-RFLP分析。结果表明：1)MTNRlA基因外显子2的605位碱基处表现出MnlI酶切多态性。小尾寒羊、萨福克羊和湖羊只出现2种基因型：AB(303bp，236bp／67bp)、1313(236bp／67bp，236bp／67bp)：多赛特羊出现3种基因型：AA(303bp，303bp)、AB(303bp，236bp／67bp)、BB(236bp／67bp，236bp／67bp)。2)MTNR1A基因外显子2的604位碱基处表现出只Rsa I酶切多态性。4个绵羊品种都出现3种基因型：AA(290bp，290bp)、AB(290bp，267bp／23bp)、BB(267bp／23bp，267bp／23bp)。X^2适合性检验结果表明，小尾寒羊和多赛特羊MTNRlA基因第二外显子在M22ZI酶切位点没有达到Hardy-Weinberg平衡状态(0．01＜P＜0．05)，萨福克羊和湖羊MTNRlA基因第二外显子在RsaI酶切位点已经达到Hardy—Weinberg平衡状态(P＞0．05)；4个绵羊品种MTNRlA基因第二外显子在只Rsa I酶切位点都已经达到Hardy-Weinberg平衡状态(P＞0．05)。