鸭肠炎病毒核衣壳蛋白质互作蛋白质基因荧光定量PCR检测方法的建立

为进一步阐明鸭肠炎病毒(DEV)的致病机理,本试验建立检测鸭肠炎病毒核衣壳蛋白质(NP)的互作蛋白质(PKCI)基因荧光定量PCR方法。针对PKCI基因设计特异性引物,经PCR扩增目的基因构建重组质粒p MD18-T-PKCI,将其作为阳性标准品构建荧光定量PCR标准曲线,并对建立的荧光定量PCR方法进行重复性、特异性和敏感性试验。结果显示:标准曲线的线性关系为Y=-3.31x+42.00,相关系数为-1.00,扩增效率为100%,熔解曲线仅出现单特异峰,对H5亚型、H7亚型和H9亚型禽流感病毒及新城疫病毒、鸭肝炎病毒均未检测到荧光信号。表明本试验建立的方法具有良好的稳定性、特异性和灵敏性。     

石斛叶片蛋白质双向电泳技术体系的建立及优化

以石斛叶片为材料,建立了一套适用于石斛蛋白质组分析的双向电泳体系,探讨了石斛叶片蛋白的提取、蛋白定量以及双向电泳的一些关键技术。结果表明,通过三氯乙酸(TCA)法提取、高压等电聚焦和两步平衡等方法可以获得稳定、清晰的双向电泳图谱,获得了可分辨蛋白质斑点数约613个。     

青枯菌定量检测方法的建立及其在花生中的应用

[目的]建立快速、准确的青枯菌定量检测方法,研究青枯菌与寄主植物的互作.[方法]以青枯菌hrpB为靶基因,利用实时荧光定量PCR(RTQ-PCR)方法建立青枯菌的定量检测方法,并利用该方法检测花生接种青枯菌后细菌数量的变化动态.[结果]以提取的细菌DNA为模板和以青枯菌的全细胞为模板均能对青枯菌准确定量,在未富集细菌的...     

小麦籽粒蛋白质组分含量的动态模拟研究

 【目的】建立小麦籽粒蛋白质组分含量的动态模拟模型,以期为预测小麦籽粒品质状况提供关键技术支持。【方法】通过定量分析不同品种和水氮处理下小麦籽粒蛋白质组分含量的变化过程,构建了小麦籽粒蛋白质组分含量随花后生长度日（GDD）的动态模拟模型。模型采用幂函数方程描述了清蛋白含量随花后GDD的动态变化,对数函数方程描述了醇溶蛋白和谷蛋白含量的变化过程;并以籽粒氮素和水分因子描述了不同水氮状况对小麦籽粒蛋白质组分含量变化的定量影响。同时利用独立的观测资料对所构建的模型进行了检验。【结果】模型对不同温度下灌浆期籽粒清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白含量预测的均方根差分别为0.44%、0.58%、0.53%和0.59%;对成熟期籽粒蛋白质组分含量预测的均方根差分别为0.41%、0.56%、0.75%和0.56%。【结论】模型对不同生长条件下小麦籽粒蛋白质组分含量的变化动态具有较好的预测性,从而为模拟小麦籽粒品质和完善小麦生长模拟系统奠定了基础。     

定量检测瘤胃纤维降解细菌的RT-PCR法

 【目的】建立一种适用于瘤胃主要纤维降解细菌的RT-PCR定量检测方法,通过培养技术监测瘤胃纤维降解细菌在不同环境下的数量变化,为深入研究反刍动物瘤胃发酵机理以及对纤维素资源的有效利用提供技术支持。【方法】分别以Fibrobacter succinogenes、Ruminococcus flavefaciens与Ruminococcus albus 的16SrDNA为靶序列设计相应的引物,建立SYBR GreenⅠRT-PCR定量体系。【结果】本研究所采用的引物及相应的PCR反应体系具有较高的特异性和灵敏度,检测极限可达50拷贝。采用RT-PCR方法检测瘤胃纤维降解细菌的定量结果与传统计数结果具有一致的变化趋势,相关性较高（r2=0.9591,P＜0.05）,表明RT-PCR定量检测方法可以较为准确、迅速的检测绵羊瘤胃纤维降解菌群的数量随环境变化的情况。【结论】本研究所建立的RT-PCR检测方法能够较准确反映瘤胃纤维降解细菌数量的变化。     

利用实时定量PCR对瘤胃甲酸甲烷杆菌定量方法的建立与应用

 【目的】解决传统微生物评价方法存在的弊端，寻找快速、准确、灵敏的瘤胃微生物评价的新方法。【方法】利用实时定量PCR技术，以16S rDNA为靶序列，建立了瘤胃甲酸甲烷杆菌（Methanobacterium formicicum）的分子定量方法。【结果】采用本文所设计的引物、探针以及相应的PCR反应体系，检测极限可达到30拷贝（15个甲酸甲烷杆菌），与传统检测方法相比要更为迅速、灵敏。采用实时定量PCR技术所测得的细菌数量与采用传统的最大或然数记数法所测的细菌数量具有很高的相关性（r=0.957，P<0.01），表明采用实时定量PCR方法能够准确反映瘤胃微生物数量的变化。利用所建立的方法对利鲁杂交肉牛和荷斯坦奶牛瘤胃液中甲酸甲烷杆菌进行了定量检测。结果表明，利鲁杂交肉牛瘤胃液中的甲酸甲烷杆菌浓度是荷斯坦奶牛的5.6倍。【结论】利用实时定量PCR技术建立的瘤胃甲酸甲烷杆菌的分子定量方法能够准确反映瘤胃微生物数量的变化。     

应激大鼠视上核一氧化氮阳性神经元的变化及其针刺的影响

目的:观察应激致血压升高大鼠视上核一氧化氮合酶阳性神经元的变化及针刺足三里的影响,以探讨应激升压和针刺降压的中枢机制.方法:SD雄性大鼠,随机分为空白对照组、应激组和针刺组,每组30只.选用刺激脉冲随机变动的足底电击结合噪声刺激建立应激动物模型,对针刺组大鼠行疏密两种波针刺足三里.观察和比较各组大鼠下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性细胞的形态、分布并进行计数.结果:应激降低大鼠视上核一氧化氮阳性神经元数量,视上核内一氧化氮合酶阳性细胞数在针刺组明显高于应激组(P＜0.05).结论:应激使大鼠血压升高,视上核一氧化氮阳性神经元数量减少,针刺可能通过增加应激大鼠视上核一氧化氮阳性神经元数量而产生降压作用.     

小麦淀粉合成酶基因实时荧光定量PCR检测方法的建立及其应用

利用荧光定量PCR技术,对小麦淀粉合成酶基因(AGPase1、GBSSI、SSSIII、SBEI)进行了定量检测,分别建立了这4种淀粉合成酶基因和内参基因18s的Ct值与模板量之间的标准曲线和线性回归方程。运用所建立的方法对小麦籽粒4种淀粉合成酶基因在灌浆期间的表达变化情况进行了定量分析。     

石油产品的输出计量装置

石油产品的输出计量装置的核心是一个包括流量计在内的定量系统。文中介绍了定量系统主要设备的型号、特性及使用范围;五种油品输出计量控制装置的结构及使用范围;以及油品输出计量装置的四种检验方法。 作者对定量机构中的定量计选型,认为电子式定量计的功能优越于其它型号定量计,其特点是可以在控制室内密集型安装,便于远传集中控制和显示,并能提供二段控制信号。关于计量装置的检验无论采用何种方法,都应考虑到正在使用的流量计精度与校正时精度的一致性,会随着环境变化和时间的变化而有所差异。同时建议建立管理机构、各项管理制度及制订油品计量法规。     

鹅生长激素受体基因荧光定量PCR检测方法的建立

根据GenBank中鹅生长激素受体(GHR)基因序列设计合成了引物和探针,对荧光定量PCR的方法进行了方法学的评估,建立了TaqmanMGB荧光定量RT-PCR检测方法。结果表明,由pMD-18T-GHR所构建的标准曲线线性关系良好,建立的GHR基因荧光定量PCR检测方法灵敏度高、特异性强(可以检测出低于10个拷贝/μl的样品),准确可靠。籽鹅和莱茵鹅GHRmRNA出壳到90日龄生长过程中肝脏中的表达量不同,30日龄不同组织的表达量各有变化特点。     

泛在知识环境下高校图书馆学科服务创新研究

泛在知识环境下高校图书馆学科服务的理念、内容和模式都出现了一系列新变化。在对全新的服务理念和服务内容进行分析的基础上,提出图书馆应该建立与此相适应的团队协作、互动协同新模式。     

海拔对盐源烤烟主要化学成分及中性致香物质含量的影响

以云烟87为材料,在盐源4个不同海拔烟区（1 600、1 800、2 000、2 400 m）进行烤烟大田栽培,研究了四川凉山烟区海拔对烤烟主要化学成分及中性致香物质的影响。结果表明,烟区海拔对烤烟主要化学成分及中性致香物质有明显影响,随海拔的升高,烟叶烟碱、总氮、苯丙氨酸类降解产物、棕色化反应产物、西柏烷类降解产物、中性致香物质总量等先升高后下降,其中烟碱、总氮、苯丙氨酸类降解产物、棕色化反应产物、中性致香物质总量的峰值出现在海拔2 000 m烟区,西柏烷类降解产物峰值出现在海拔1 800 m烟区;烟叶还原糖、总糖先下降后升高,最低点出现在海拔2 000 m烟区。     

施灰田及所产蔬菜的镉汞砷铬铅和铝含量变化及影响评价

蔬菜地田间施用粉煤灰试验结果表明 ,粉煤灰中镉、汞、砷、铬及铅5种元素的含量均较对照田的高 ,但施灰田所产蔬菜中这5种元素的含量均低于国家关于食品、蔬菜的卫生标准限值。粉煤灰中的铝含量虽比对照田的高 ,但由于粉煤灰偏碱性 ,使得土壤中的铝不易被植物吸收 ,故施粉煤灰不会产生铝的危害     

2种穴位治疗技术在兽医临床上的应用

针灸疗法是一种起源于我国的传统治疗技术,并广泛应用于各种动物疾病的治疗上,具有治疗范围广泛、疗效迅速、安全、节省药品、携带方便、便于推广等特点。根据多年的教学和临床经验,将兽医临床上常用的穴位注射疗法和放血疗法的相关内容进行了综述,以期更好地发扬和使用针灸治疗技术。     

长沙酸沉降现状研究

根据近几年降水监测数据,分析了长沙酸雨污染状况。结果表明,长沙市酸雨危害较为严重,降水酸度有明显的季节性变化;降水中主要阴离子是SO4和NO3,SO4含量较高,但是NO3含量逐年上升,致酸作用明显应该受到重视;长沙酸雨有加重的趋势。     

根癌农杆菌感染对甘薯外植体生理生化特性的影响

 【目的】研究根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）菌株N9-1侵染甘薯外植体后其生理生化特性的变化规律。【方法】用根癌农杆菌菌株N9-1侵染甘薯品种“新大紫”的茎段、叶片和叶柄为外植体,分别在共培养0、1、3、5 d后取样,测定根癌农杆菌感染甘薯外植体后的生理生化特性变化。【结果】根癌农杆菌感染甘薯茎段、叶片和叶柄外植体后,可溶性蛋白质含量随共培养天数的增加而逐渐下降。在感染初期,由于逆境的出现,消耗了外植体内大量的POD和SOD,从而使其POD活性和SOD活性下降。感染后期由于植物抗病机制的作用使POD和SOD活性升高。感染后的甘薯外植体中的内源ABA和GA3含量均表现为先增加后减少的变化趋势,但内源iPAs的含量变化趋势却正相反。在甘薯茎段处于最佳感受态区段时（3 d左右）,POD活性增高减缓,SOD活性、内源GA3和iPAs含量处于相对低值阶段,内源ABA含量处于高值区。【结论】与其它逆境条件下表现出的变化趋势一致,根癌农杆菌感染甘薯外植体后可溶性蛋白质含量降低,POD和SOD酶活性升高,内源GA3含量增加,这些生理生化指标的变化可以反映甘薯外植体对根癌农杆菌侵染的感受状况。     

神经肽与针刺调整作用的可能关系

当前,对神经肽(neuropeptides)的研究进展十分迅速。应用免疫学方法,神经肽在神经系统中的分布已经能够准确定位,不论中枢或外周神经中均含有肽能神经成份,它已经成为机体正常生理活动的一个新的调节或控制系统。不少学者在论证神经肽的递质作用时,还认为神经肽可以作为神经调制物质(neuromodulator),它能修饰神经元对其它递质的反应。因此,神经肽对机体功能活动的影响是广泛而深刻的。不少针刺穴位所产生的效应与某些神经肽的生理功能十分相似,本文综述有关资料,说明神经肽中的内源性鸦片样物质(OLS),特别是脑啡肽和内啡肽参与针刺镇痛过程。同时,根据现有的有关实验报道和资料,有迹象表明神经肽与针刺对机体的调整作用可能存在着一定的联系。本文就现有资料对其相关性进行了初步分析,提出密切注意神经肽研究的进展,并将神经肽研究和对针刺疗法作用原理的探讨结合起来,以期有助于针刺机理或针刺的部分作用机制的阐明,促进针刺疗法的进一步发展的观点。     

虚拟仪器在钢筋混凝土实验教学平台中的实现与应用

介绍仿真实验平台系统的设计原则,采用虚拟仪器开发钢筋混凝土教学实验仿真系统,阐述仿真系统的内容、功能。初步实践应用证明本系统具有良好的实验教学效果。     

水葫芦生长对水质的影响规律研究

[目的]探讨水葫芦生长对水质的影响规律。[方法]对一水葫芦分布密度和盖度较高的河流选取3个点进行跟踪调查研究,分出苗期、生长初期、生长盛期、生长后期、枯死期以及沉淀期,对水体中水温、透明度、pH、溶解氧、总氮含量以及总磷含量进行定点检测。[结果]5～9月是水葫芦生长旺盛期,随着其生命活动的加强,水体透明度逐渐增加,溶解氧含量有所增加;同时,水体中总氮、总磷含量明显下降;10～12月,当水葫芦生物量扩大到一定程度时,水质逐渐恶化,透明度又明显降低,水中溶解氧减少;同时总氮、总磷含量增加,水体呈富营养化。[结论]水葫芦在不同生长时期对水质的影响不同,在生长盛期对水质有一定的净化作用,在生长后期和枯死期又会引起水质恶化。     

试用指数法对草地质量进行综合评价

试用指数法对草地质量进行综合评价摘要:这是一种定量分析评价的方法,因此,在评价过程中可以减少人的主观因素的影响,使评价工作更科学和切合实际. 草地质量综合评价的因素很多,而且量纲不同,没有可比性。为了解决这个矛盾,需将以性状特征表示的评价因子数量化,使各评价因子之间的不同计量单元无量纲化,具有可比性,然后再进行指数运算,评定出草地评价单元的综合质量等级来。