猪瘟免疫程序及其免疫效果研究

对不同日龄的猪用不同剂量猪瘟兔化弱毒疫苗进行免疫 ,通过正向间接血凝试验进行猪瘟抗体监测。结果表明 ,用 1头份猪瘟弱毒疫苗在配种前 1 5d免疫母猪可保证其仔猪体内母源抗体较高 ;对仔猪首免用 1头份猪瘟疫苗进行超前免疫、在 60日龄用 2头份的猪瘟疫苗进行二免的免疫效果最好 ;阉割等应激反应可降低仔猪的免疫效果     

高致病性蓝耳(JiangXi-1R株)疫苗不同免疫模式对猪瘟疫苗首次免疫的影响

为了探明高致病性蓝耳(JiangXi-1R株)弱毒疫苗免疫是否对猪瘟弱毒疫苗首免产生干扰作用,同时优化猪场现行免疫程序,本试验选取94头仔猪,分为A、B、C、D四组,A组仅在30日龄以2头份/头免疫猪瘟疫苗;B组在30日龄同时免疫猪瘟(2头份/头)和猪蓝耳疫苗(0.5头份/头);C、D组分别在15日龄以0.5头份/头和0.3头份/头免疫猪蓝耳疫苗,30日龄以2头份/头免疫猪瘟疫苗。结果表明,同时免疫高致病性蓝耳(JiangXi-1R株)弱毒苗和猪瘟兔化弱毒疫苗以及两者间隔15d免疫与不进行蓝耳免疫相比,对猪瘟首免抗体的产生没有明显的干扰作用;间隔15d以0.3头份或0.5头份免疫高致病性蓝耳(JiangXi-1R株)弱毒苗,对猪瘟首免抗体水平也没有明显影响。     

新必妥对仔猪体液免疫效果的影响

本试验选取21日龄的健康仔猪12头，随机分为3组，分别肌肉注射猪瘟兔化弱毒疫苗1头份（对照组）、猪瘟兔化弱毒疫苗1头份＋猪脾转移因子0．15mL／kg体重（试验1组）和猪瘟兔化弱毒疫苗1头份＋猪脾转移因子0．25mL／kg体重（试验2组），分别于21、60日龄各免疫1次．以研究猪脾转移因子对仔猪猪瘟兔化弱毒疫苗免疫效果的影响。结果表明．首免后14～35d试验组的免疫效果均显著优于对照组，二免后5～15d试验2组显著优于对照组。另外，选取35日龄的健康仔猪12头，随机分为3组，分别肌肉注射猪蓝耳病弱毒疫苗1头份（对照组）、猪蓝耳病弱毒疫苗1头份＋猪脾转移因子0．15mL／kg体重（试验1组）和猪蓝耳病弱毒疫苗1头份＋猪脾转移因子0．25mL／kg体重（试验2组），以研究猪脾转移因子对仔猪蓝耳病弱毒疫苗免疫效果的影响。结果表明，免疫后14～35d试验组的免疫效果均显著优于对照组，42～60d试验2组显著优于对照组。表明猪脾转移因子对仔猪体液免疫有一定的增强作用。     

猪瘟免疫程序筛选优化研究

猪瘟是目前危害养猪业的主要疾病之一,其主要控制方法是免疫。为了制定科学合理的猪瘟免疫程序,特进行本试验。试验主要采用猪瘟兔化弱毒疫苗于不同日龄、不同剂量对母猪、生长育肥猪进行注射免疫,然后定期采集试验猪血清检测猪瘟抗体水平。结果显示,母猪于产后30d4头份剂量免疫,其抗体水平保持最好,至分娩前2周抗体仍保持在7d以上,其所生仔猪母源抗体log2值4以上持续到40日龄以后;生长育肥猪30日龄4头份剂量首免,60日龄6头份剂量二免。应坚持猪瘟抗体水平监测,依据本场具体情况随时调整猪瘟免疫程序,从而达到控制猪瘟的目的。     

后海穴注射猪瘟兔化弱毒苗的试验研究

利用不同剂量的猪瘟兔化弱毒苗后海穴免疫生长肥育猪600头．用正向间接血凝试验(IHA)检测出抗猪瘟病毒抗体的水平．并与传统方法耳根部注射免疫进行比较。结果显示．后海穴注射2头份猪瘟兔化弱毒苗产生的抗体水平最高，维持时间最长。1头份疫苗后海穴注射效果也比2头份的肌肉注射效果明显。表明后海穴注射疫苗能提前坚强免疫产生的时间．提高疫苗的免疫效应．是提高疫苗保护率的有效免疫途径之一。     

不同RID猪瘟兔化弱毒细胞苗免疫效果评价

为了比较不同兔体感染剂量(RID)的猪瘟兔化弱毒细胞苗的免疫效果,试验在市场上随机选取A、B两厂家生产的猪瘟兔化弱毒细胞苗(A厂家原代细胞苗12 000 RID、B厂家传代细胞苗30 000 RID)对四川省内江市某种猪场提供的186头20日龄健康仔猪进行免疫,将186头仔猪随机分为6组,每组31头,分别于20日龄、60日龄使用1,2,4头份三个剂量进行首免及加强免疫,并分别于免疫前(20日龄)、50日龄、100日龄采血分离血清,用猪瘟间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定抗体水平。结果表明:以1头份(30 000 RID)B厂家生产的猪瘟传代细胞苗免疫效果最好,其次是A厂家生产的4头份(48 000 RID)原代细胞苗,而1头份(12 000 RID)免疫效果较差。说明猪瘟兔化弱毒细胞苗RID含量在30 000~60 000 RID时免疫效果较好。     

规模化猪场猪瘟免疫程序优化研究

本研究旨在优化规模化猪场猪瘟免疫程序。选取猪场A、B、C年龄和体重相近、品种相同的新生仔猪分别250头、250头、50头,通过确定首免和二免的时间与免疫剂量,比较原场猪瘟免疫程序,进而优化猪瘟免疫程序。试验结果表明,猪场A、B、C仔猪按照优化的猪瘟免疫程序免疫后,随着日龄的增大,猪瘟抗体合格率相应增长,维持在较高的水平上。首免与二免后,猪场A优化的免疫程序抗体水平极显著(P0.01)高于原场免疫程序;首免后与二免后7 d,猪场B优化的免疫程序猪瘟抗体水平显著(P0.05)高于原场免疫程序,二免后21 d、35 d、49 d,猪场B优化的免疫程序猪瘟抗体水平极显著(P0.01)高于原场免疫程序。确定免疫程序为首免21日龄,免疫剂量为2头份,二免56日龄,免疫剂量为4头份。二次加强免疫后,仔猪猪瘟抗体维持在较高的水平上,合格率高于国家要求的70%以上标准,持续监测发现,猪瘟抗体水平可维持112 d。     

免疫增强剂对猪瘟疫苗免疫效果的影响

为查明免疫增强剂是否能够提高猪瘟疫苗免疫抗体水平,选用猪用转移因子与黄芪多糖注射液直接稀释猪瘟兔化高效细胞弱毒苗的方法进行猪瘟疫苗免疫试验。与对照组相比,猪用转移因子直接稀释猪瘟兔化高效细胞弱毒苗组S/P平均值首免后10 d提高127.27%,差异显著（P＜0.05）;首免后20 d提高156.60%,差异极显著（P＜0.01）;整个试验期提高57.05%。与黄芪多糖注射液直接稀释猪瘟兔化高效细胞弱毒苗组相比,S/P平均值首免后10 d提高131.48%,差异显著（P＜0.05）;首免后20 d提高91.55%,差异显著（P＜0.05）;整个试验期提高31.84%。证明猪用转移因子直接稀释猪瘟疫苗可提高猪瘟疫苗的免疫抗体水平;同时也揭示采用断奶前后首免、60日龄左右二免的猪瘟疫苗免疫程序,仔猪在首免后10～30 d免疫抗体S/P值低,阳性率在60%以下,易感染猪瘟野毒。     

两种不同猪瘟疫苗的免疫效果比较分析

试验随机选取24头30日龄(体重范围为7.5~9.0 kg)健康仔猪,16头健康后备母猪。24头小猪随机分成两组,每组12头;16头母猪随机分成两组,每组8头;各分为试验1组和试验2组。其中仔猪和母猪的试验1组接种猪瘟疫苗A,试验2组接种猪瘟疫苗B。疫苗在0 d进行首免,30 d进行二免。每头接种2 mL。仔猪试验1组和试验2组在首免后第15、30、60天各采血,分离血清,检测猪瘟抗体阻断率。母猪试验1组和试验2组在首免后第30、60天分别采血,分离血清,检测猪瘟抗体阻断率。结果表明,不管仔猪还是母猪,接种的两种猪瘟疫苗A和B的免疫效果差异不显著(P0.05),且从总体上来看,两种猪瘟疫苗免疫60 d后都能使仔猪和后备母猪获得良好的保护力。     

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗不同免疫程序对细胞因子分泌的影响

为分析仔猪首次免疫猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)弱毒疫苗对血清细胞因子分泌水平的影响,本试验筛选PRRSV抗原与抗体均为阴性的7日龄仔猪40头,平均分为4组,其中试验A、B、C组均为14日龄首次免疫经典弱毒疫苗,试验A组35日龄二免用高致病性灭活疫苗,试验B组35日龄二免用经典弱毒疫苗,试验C组35日龄注射生理盐水,对照组均注射生理盐水。分别于首免后1,2,3周和二免后1,2,3,4,5,6周前腔静脉采血分离血清,采用细胞因子ELISA方法检测IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-10和IL-12细胞免疫水平。结果显示,仔猪14日龄首次免疫弱毒疫苗后能迅速分泌细胞因子,首免3周以内,试验组IFN-γ分泌量均高于对照组,差异极显著(P0.01);试验组TNF-α分泌量高于对照组,差异极显著(P0.01),且试验A组试验B组试验C组,其差异不显著(P0.05);试验组IL-2分泌量高于对照组,试验A组最高,其差异显著(P0.05);试验组IL-10分泌量高于对照组,试验C组最高,其差异显著(P0.05);试验组IL-12分泌量高于对照组,试验A组最高,其差异显著(P0.05)。35日龄二免弱毒疫苗或灭活疫苗3周后,除IFN-γ外,试验A组的TNF-α、IL-2、IL-10和IL-12分泌水平均高于试验B组和试验C组。结果表明,14日龄首免PRRSV弱毒疫苗和35日龄二免PRRSV灭活疫苗的免疫效果优于仅单独2次免疫PRRSV弱毒疫苗或1次免疫PRRSV弱毒疫苗。     

猪圆环病毒2型感染对猪瘟弱毒疫苗接种猪免疫应答的影响

为探索猪圆环病毒2型(PCV2)感染对猪瘟(CSF)弱毒疫苗接种猪免疫应答的影响,将20头28 d断奶仔猪随机分为V-I、I-V、V和C4组,5头·组-1.V-I组在接种CSF弱毒疫苗后2d感染PCV2;I-V组在感染PCV2 后2d接种CSF弱毒疫苗;V组只接种CSF弱毒疫苗;C组为空白对照组.共免疫2次,间隔21 d.免疫后定期检测血清CSFV特异性抗体水平、外周血淋巴细胞(PBLC)增殖活性和PBLC中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10 mRNA的表达水平.结果显示:在CSF弱毒疫苗免疫前或免疫后感染PCV2,均会导致CSFV抗体水平低下,血清抗体阳转率下降,PBLC增殖活性降低.初次免疫后,V-I与I-V组的PBLC内IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10 mRNA的表达量严重不足,其中V-I组的表达量最低.加强免疫后V-I与I-V组的PBLC内IFN-γ与IL-10的表达失衡,IL-2和IL-4的表达缺乏,其中I-V组的细胞因子表达失衡和缺乏更严重.上述研究表明,CSF弱毒疫苗免疫前或免疫后感染PCV2均会影响机体的体液和细胞免疫应答水平,导致PBLC内细胞因子的表达严重抑制和紊乱.     

PRRSV-VR2332减毒活疫苗不影响猪瘟疫苗和猪圆环病毒2型灭活疫苗诱导的抗体产生

本研究拟评估仔猪接种猪繁殖与呼吸综合征减毒活疫苗对猪圆环病毒病疫苗、猪瘟疫苗免疫的干扰情况,并分析不同免疫方式对仔猪生长性能的影响,以期为探究PRRSV减毒活疫苗与PCV2、CSF疫苗的联合免疫提供数据参考。本研究先以100头仔猪为研究对象,将其随机分为A、B、C、D 4组。其中A组仔猪免疫PRRSV减毒活疫苗7 d后免疫PCV2疫苗;B组仔猪同期分点注射PRRSV减毒活疫苗和PCV2疫苗;C组仔猪仅免疫PCV2疫苗;D组仔猪仅免疫PRRSV减毒活疫苗。另外再筛选100头仔猪,随机分为E、F、G、H 4组。E组仔猪于免疫PRRSV减毒活疫苗12 d后免疫CSF疫苗;F组仔猪同期分点注射PRRSV减毒活疫苗和CSF疫苗;G组仔猪仅免疫CSF疫苗;H组仔猪仅免疫PRRSV减毒活疫苗。免疫4周后,测定仔猪血清中相关抗体水平。同时,称量免疫前后各组仔猪的体重,计算不同免疫方案仔猪的平均日增重。结果表明：A~D组中, A组和B组仔猪在免疫4周后均产生了较高水平的PRRSV及PCV2抗体,且A组抗体水平略高于B组。C组仔猪仅产生了PCV2抗体,D组仔猪产生了较高水平的PRRSV抗体。E~H 4组中,E组和F组仔猪均产生了较高水平的PRRSV及CSFV抗体。G组仔猪仅产生了高水平的CSFV抗体,H组仔猪仅产生了高水平的PRRSV抗体。A、B、C、D 4组中B组仔猪的平均日增重最高;而E、F、G、H 4组中E组仔猪的平均日增重显著高于其他3组。PRRSV减毒活疫苗与PCV2疫苗或CSF疫苗同期分点免疫、免疫PRRSV减毒活疫苗一段时间后再免疫PCV2或CSF疫苗均能诱导仔猪产生高水平的抗体;在体液免疫方面,PRRSV减毒活疫苗免疫与否均未对另外二种疫苗表现出明显的干扰作用。在仔猪28日龄时同期分点免疫PRRSV减毒活疫苗与PCV2疫苗,12 d后再免疫CSF疫苗的免疫方案不仅能诱导仔猪产生高水平抗体,还可以使仔猪具备较高的平均日增重。     

不同厂家猪瘟疫苗免疫效果比对试验

为准确掌握汉中市规模猪场使用量最大的两种猪瘟疫苗在实际应用中的免疫效果,在规模猪场选择4窝体质健康、体重接近的仔猪,随机分成4组,每组10头,分别接种猪瘟脾淋苗和细胞苗,采用IHA方法检测免疫接种前后抗体效价。结果显示,用标准剂量免疫后,2种疫苗都不能对猪群产生保护作用,用2头份剂量在仔猪30日龄首免,首免后28d加强免疫,2种疫苗都能对猪群产生很好的保护作用,能满足预防猪瘟疫病的需要,同时猪瘟脾淋苗免疫后刺激机体产生抗体的速度快,可用于紧急免疫接种。广大养殖户可以根据实际情况,科学合理选择使用猪瘟疫苗。     

无针注射器接种猪瘟活疫苗对猪免疫效果评价

为了评定无针注射器接种猪瘟活疫苗的免疫效果,将300头非免仔猪随机分为6个组,其中3组用无针注射器分别免疫1头份、1/2头份剂量的瘟倍安以及1头份剂量的STTM猪瘟活疫苗,剩下的3组将无针注射器替换成传统的有针注射器进行免疫。30日龄进行首次免疫,55日龄进行二次免疫,免疫后一周内观察猪有无不良反应。首免后第14天、二免后第25天分别采血、分离血清,ELISA试剂盒检测CSFV抗体,计算每组猪抗体阻断率及免疫合格率,统计分析各组之间的差异。实验结果显示,无针注射器与有针注射器接种疫苗均未对猪精神状态、采食、运动造成影响,无针注射器接种部位炎症发生率也低于有针注射器;无针注射器免疫组抗体滴度明显高于有针注射器接种组,即使疫苗使用剂量减半也能达到很好的免疫效果。     

仔猪大肠杆菌病K88-K99-987P-F41四价亚单位疫苗的研制Ⅳ.疫苗生产与免疫效力试验

选用4株带有K88、K99、987P、F41粘附素抗原的产肠毒素性大肠杆菌,分别接种于BBL、Minca、Slanetz和Minca培养基进行培养,将培养物加热提取粘附素抗原后,加入油佐剂制成四价亚单位疫苗。经成品检验合格后分别免疫小鼠和怀孕母猪,同时监测怀孕母猪抗体。最后1次免疫后15 d,分别用同源ETEC确定的攻毒剂量攻击。结果显示,经2次免疫后,K88、K99、987P、F41对小鼠的免疫保护率与1次免疫没有显著差异(P>0.05);对仔猪,1次免疫跟2次免疫均可显著地降低腹泻指数(P<0.05),2次免疫与1次免疫没有显著差异(P>0.05)。怀孕母猪免疫1周后(产前23 d)抗体开始上升,第2周(产前16 d)达到高峰。2次免疫后抗体迅速回升,第4周(产前2 d)达到最高峰,产后2 d抗体大幅度下跌,几近免疫前水平。二免母猪所产仔猪发病率明显低于一免母猪(P<0.05)。攻毒保护试验和抗体消长规律的结果表明,制备的仔猪大肠杆菌病K88-K99-987P-F41四价亚单位疫苗具有良好的免疫原性,能有效预防仔猪大肠杆菌病的发生。     

The influence of maternal immunity on the efficacy of a classical swine fever vaccine against classical swine fever virus,genogroup 2.2, infection

In Thailand, where vaccination is routinely employed, there has been an increased incidence of chronic classical swine fever (CSF) outbreaks during the past decade. The major causative virus has been identified to be the moderate virulence, classical swine fever virus (CSFV) of the genogroup 2.2. An investigation was made into the efficacy of a CSF vaccine against this genogroup 2.2 challenge. Five-week-old pigs, grouped by their level of passive antibody titer were immunized with lapinized Chinese-strain CSF vaccine and challenged with CSFV genogroup 2.2, 13 days after vaccination. The group containing passive titers of lower than 64 at the time of immunization, had significantly higher number of CSFV-specific IFN-gamma secreting cells and was completely protected against the challenge. Interestingly, both cellular and antibody responses were inhibited in the pigs with the higher passive titer. Furthermore, following challenge, CSFV could be isolated from 50% of the pigs in this group. It was demonstrated that the CSF vaccine could induce complete protection in pigs, provided that the maternal derived titer at the time of vaccination was lower than 64. The result implied that an increase in CSFV outbreaks might be due to the inappropriate timing of vaccination as well as the nature of the CSFV genogroup 2.2.     

猪瘟免疫程序的研究

采用HRP—SPA—ELISA方法,在同一猪场相同的饲养条件下,对5种常用猪瘟免疫程序免疫后不同时间的猪瘟免疫抗体水平进行了研究.结果表明:超前免疫,1月龄1次免疫,2月龄1次免疫和1月龄、2月龄2次免疫猪均有良好的免疫应答,90日龄检测80倍稀释血清的ELISA OD值均在0.30以上(0.31～0.48),120～240日龄血清ELISA抗体一直保持在较高水乎(OD值0.42～0.66);而超前、2月龄2次免疫猪的免疫应答明显低于前4种免疫程序,120日龄时的ELISA OD值仅为0.25,此后上升也较缓慢,至240日龄时才达0.43.根据本研究结果,综合过去的报道,建议在“猪瘟控制地区”采用1月龄1次免疫或2月龄1次免疫,在“猪瘟未控制地区”采用1月龄1次免疫或超前免疫.     

不同免疫方式对仔猪免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪口蹄疫三种疫苗抗体水平的影响

采用不同的免疫方式,对38头36~38日龄健康仔猪进行高致病性猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪口蹄疫3种疫苗进行免疫,分别于免疫前（0 d）和免疫后15、30、45、60、90 d采血进行这3种疫病抗体检测。结果发现效果最好的方法是先免疫猪瘟和口蹄疫疫苗14 d后再免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征疫苗;其次是猪瘟疫苗和高致病性猪繁殖与呼吸综合征疫苗分别释稀后混合为1针,口蹄疫疫苗另作1针同时分点注射;免疫效果最差的是高致病性猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪口蹄疫3种疫苗同时分3点注射。     

不同剂量的猪瘟活疫苗单次免疫效果评价及疫苗存留试验

用1 200 RID、6 000 RID和24 000 RID 3种不同剂量的猪瘟活疫苗单次免疫9头30日龄的断奶仔猪,检测试验猪的抗体消长和疫苗毒核酸在猪体内的存留时间,并用6头猪进行攻毒保护试验.结果表明:不同免疫剂量的试验猪其抗体水平的动态变化没有显著差异,免疫后21 d试验猪的猪瘟抗体均成阳性,63 d后至578 d猪瘟抗体阻断率仍然高于85％,应用荧光定量RT-PCR技术检测,猪瘟疫苗毒核酸在猪血液和扁桃体中的检出时间分别达28 d和42 d;免疫后370 d进行猪瘟强毒攻击后,免疫猪没有出现明显的临床症状,存活且不带毒.本研究证实,没有其他疫病和母源抗体的仔猪单次接种合理剂量的猪瘟活疫苗就能产生坚强的保护力,提出加强种猪场各种病原监测,淘汰病原阳性种猪,净化种猪群对提高猪瘟疫苗免疫效果,最终控制猪瘟具有重要意义.     

规模化猪场仔猪口蹄疫免疫程序的制定

本试验通过研究免疫状况良好的母猪群所产仔猪母源抗体的获得方式,仔猪体内母源抗体的持续时间,仔猪不同免疫程序的免疫效果,发现初生仔猪遵守被动免疫传递规律,仔猪体内的口蹄疫抗体水平也有自己的消长规律:哺乳后3～7d抗体水平达到最高,35日龄后开始下降,63日龄左右抗体保护率已经低于60%。所以,仔猪口蹄疫疫苗首次免疫的时间应定在35日龄,49日龄还需加强一次;疫苗的剂量:首免为1头份(2mL),加强时为2头份(3mL)。