日本血吸虫童虫液氮冷冻保藏期的研究

日本血吸虫童虫经２４ｈ到２年冻藏后，其活力和感染率与冻藏时间长短不相关，与冻存培养液的ｐＨ相关，最佳ｐＨ为７。冻藏５０ｄ传至Ｆ４，冻藏２年传至Ｆ１。童虫及其子代在终宿主小鼠和中间宿主钉螺体内的移行、生长、发育、繁殖、传代、性别比率及对终宿主的致病力，同相应对照组无明显差异，由此证明日本血吸虫童虫可用液氮冻藏长期保种。     

日本血吸虫7d童虫cDNA文库构建及免疫筛选

为了从7 d童虫cDNA文库筛选出童虫发育阶段特异性表达抗原基因。本研究首先构建了日本血吸虫7 d童虫cDNA文库,其次再采用日本吸血虫感染血清进行筛选。结果显示:建立的文库插入片段为0.5~3.0 kb,文库重组率为98%,初始文库滴度为2.4×10~6 pfu/mL,扩增后滴度为1.6×10~9 pfu/mL,利用感染日本血吸虫10 d和42 d的小鼠血清免疫筛选该文库,初筛和复筛后获得17条有效EST序列,其编码7个基因,分别为复制蛋白(2 ESTs)、肝再生增强因子(3 ESTs)、血小板活化因子(6 ESTs)、钙调理蛋白基因(3 EST)、丝束蛋白(1 ESTs)、核糖体RNA(1 EST)和还原型辅酶脱氢酶基因(1 EST)。该研究结果对今后探讨血吸虫的生长发育机制及筛选血吸虫早期诊断抗原具有重要意义。     

日本血吸虫冻融童虫苗和提纯抗原苗对水牛的免疫保护试验

应用日本血吸虫两种抗原疫苗免疫水牛的减虫率、肝组织虫卵的减少率和攻击前及解剖前的平均增重分别为：日本血吸虫冻融苗（Ｆ／Ｔ苗）组为６４．８％ 、８１．８％ 和２８．５ｋｇ、５５．３ｋｇ;日本血吸虫提纯抗原苗天然谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ｎＧＳＴ 苗）组为３３．１９％ 、７９．７％ 和３７．８ｋｇ、６３．７ｋｇ     

苏云金芽胞杆菌晶体毒素对体外培养的日本血吸虫童虫的作用

将感染日本血吸虫的钉螺常规逸蚴，经注射器推压机械断尾获得的童虫，加入内含１０％兔血清的ＲＰＭＩ－１６４０培养液后，置于单克隆培养板内，以苏云金芽胞杆菌（菌株ＹＢＴ－１９５５）制得的伴胞晶体毒素，以不同的浓度加入以上各孔中于３７℃，５％ＣＯ２培养箱内培养。培养１２ｈ后发现童虫活动力减弱，有些已经死亡；２４ｈ后，随着加入伴胞晶体毒素浓度的增加，童虫死亡率也相应增加，呈正相关（ｒ＝０．８９７）。经毒素蛋白含量为４０ｍｇ／Ｌ处理的童虫，２４ｈ后死亡率为１００％，ＬＤ５０为１５．９５μｇ（１ｍＬ）。     

日本血吸虫病核酸疫苗的研究

核酸疫苗能同时诱发体液免疫和细胞免疫 ,具有众多传统疫苗无法比拟的优点 ,并且佐剂的应用能增强核酸疫苗的免疫效果。抗日本血吸虫核酸疫苗的研究在实验动物和牛、羊等大家畜上取得一定进展 ,混和或多价疫苗是未来核酸疫苗的发展方向     

家鸭具有作为血吸虫转运宿主的可能性

为研究日本血吸虫(Shistosomia japonicum)卵通过家鸭消化系统后的孵化能力,将人工感染血吸虫尾蚴45 d的小鼠剖杀,取肝脏和小肠制成匀浆,并进行虫卵计数,将带有虫卵的肝脏及小肠匀浆液分别灌喂家鸭,观测不同时间收集鸭粪的毛蚴孵出情况。结果显示,经过家鸭体内2 h后,粪便中孵化率达到峰值,相对孵化率分别为0.61%和4.066%;7 h后,没有虫卵能孵化出毛蚴。同一批次的虫卵所孵化的毛蚴中,大约经过4 h后其孵化率达到峰值。结果表明,日本血吸虫虫卵通过家鸭消化系统后仍有部分依然保持孵化能力,家鸭具有可能作为血吸虫的转运宿主,拥有传播血吸虫有效虫卵的能力。     

东方田鼠重复感染日本血吸虫试验研究初步

本试验以1000条日本血吸虫尾蚴同时攻击感染东方田鼠洞庭湖种群和东方田鼠宁夏指名亚种进行重复感染对比试验，并在攻击后不同天数分别同时解剖相数目的两种群东方田鼠，收集其体内不同时段，不同部位的日本血吸虫童虫，比较结果证实东方田鼠对日本血吸虫具有天然的抗性，其抗性是可遗传的，不以东方田鼠的地域分布不同、生活环境的差异或传代数目的变化而有所不同，与获得必免疫无关。     

东方田鼠抗日本血吸虫抗体水平检测与分析

东方田鼠具有抗日本血吸虫病的特性，观察东方田鼠感染日本血吸虫尾蚴后的特异性抗体水平变化，可为阐明其抗病机制提供依据。本试验用间接ELISA方法检测东方田鼠抗成虫可溶性抗原（SWAP）和几种日本血吸虫基因重组抗原（Sj28-GST、LHD-SjTP1、C-SjParamyosion）的特异性抗体水平动态变化，并检测东方田鼠感染日本血吸虫尾蚴前、后的IgG3亚类特异性抗体水平。结果东方田鼠在攻击日本血吸虫尾蚴后，抗SWAP的特异性抗体水平有所升高，而抗几体基因重组抗原的特异性抗体水平低，没有显著变化。东方田鼠正常血清中抗SWAP和IgG3亚类抗体的OD值是牛血清白蛋白（BSA）对照的31倍。结果表明，在东方田鼠血清中有较高水平的SWAP的IgG3亚类抗体，值得进一步深入探讨。     

日本血吸虫蛋白质组学研究

蛋白质组学是研究一种细胞、组织或完整生物体在特定时空上全部蛋白质及其存在方式的学科。近年来,应用蛋白质组学技术开展了日本血吸虫尾蚴、童虫、成虫蛋白质组,成虫性别差异和排泄分泌物蛋白质组,体被蛋白质组,与药物和诊断相关的蛋白质组等多方面的研究,增加了人们对日本血吸虫的生长发育、免疫逃避等机制的了解,为发掘血吸虫病疫苗、诊断和药物靶点提供了新的线索。     

单克隆抗体对日本血吸虫尾蚴钻穿小鼠皮肤能力的影响

用抗日本血吸虫单克隆抗体,在室温下与血吸虫尾蚴作用90分钟。将尾蚴分别经腹部皮肤和腹腔注射感染昆明系小鼠,4周后剖杀集虫。实验结果表明。经单克隆抗体(McAb)处理后,腹腔注射组的载虫数明显高于腹部皮肤感染组(P<0.01)。从而说明,高特异性的单克隆抗体处理能够影响尾蚴钻穿小鼠腹部皮肤的能力。     

中国大陆日本血吸虫同工酶谱的研究

本文报告应用酶泳技术检测中国大陆云南、四川、湖北、湖南、江西、江苏、安徽七地自然隔离群日本血吸虫的ＬＤＨ、ＭＤＨ、ＭＥ、６ＰＧ、６ＧＰ、ＧＩ１、ＩＤＨ、ＰＧＩ、ＡＤＫ、ＨＥＸ和ＥＳＴ１１种同工酶酶谱情况。其中七地自然隔离群日本血吸虫的ＭＤＨ、ＭＥ、６ＰＧ、Ｇ６Ｐ、ＧＤ１、ＩＤＨ、ＰＧＩ、ＡＤＫ及ＨＥＸ９种同工酶图谱相同，说明我国大陆七地自然隔离群日本血吸虫结构基本相同，其亲缘关系密切。在ＬＤＨ说明     

日本血吸虫还原性辅酶I(SjNADH)基因的克隆表达及其免疫保护效果分析

为了评估日本血吸虫还原性辅酶I(SjNADH)在小鼠体内诱导的免疫保护效果,应用PCR获得SjNADH基因片段,其开放阅读框为474 bp,编码157个氨基酸,并在大肠杆菌中成功表达,纯化得到该重组蛋白。Western blot结果显示,SjNADH在日本血吸虫童虫和成虫中的表达量稳定,SjNADH融合蛋白也能被免疫血清识别,具有较好的免疫原性。应用重组蛋白免疫小鼠能诱导产生较高的特异性抗体水平,并诱导了20.13%的减虫率和23.06%的肝脏减卵率。结果表明,获得的SjNADH重组蛋白在小鼠体内诱导产生了部分免疫保护,有作为血吸虫疫苗候选抗原分子的潜力。     

日本血吸虫子胞蚴群体侵占钉螺肝脏的动态的研究

本文首次报告应用计算机扫描及测量面积软件观察和定量分析感染日本血吸虫的钉螺组织学切片，从而描述子胞蚴群体侵犯钉螺肝脏的动态。自感染后４０天至１８０天内，子胞蚴群体呈现增长－稳定－再增长－再稳定的过程。血吸虫与钉螺的寄生关系体现了两者既斗争又相适应的动态平衡。单个毛蚴感染钉螺，其寄生侵占指数即寄生虫占阳性肝脏总面积的百分比阈值（Ｐ／ＰＤＧＧＣＴ％）可达６９．６％。