Protein solutions: concentration by a rapid method

Protein solutions were concentrated, with no evidence of denaturation, by means of membranes formed from the complex interaction product of polyanions and polycations (Diaplex). The technique is considerably more rapid than conventional ultrafiltration with Visking tubing.     

NO3-N的水杨酸比色法快速测定

探讨了水杨酸比色法测定 NO3- N的基本原理与影响因素 ,确定了测定的线性范围 ,并用土壤及水体样品进行了标定。结果表明 ,1水杨酸比色法测定 NO- 3的吸收峰为 4 10～ 4 2 0 nm ,检出极限可达 0 .1mg/L ,比标准的酚二磺酸比色法灵敏 2～ 5倍 ;2水杨酸比色法测定 NO- 3,颜色稳定性强 ,加盖情况下可保存 15 d而无显著变化 ;3改进后的方法适应 p H范围大 (p H>2 ) ,可掩蔽高达 0 .2 m ol/L Cl-及 2 mg/L NO- 2 的干扰。研究认为 ,改进水杨酸比色法测定 NO3- N简便、快速 ,结果准确     

一种利用碱裂解法快速筛选重组子的方法

根据碱裂解法提取质粒DNA的原理,利用碱裂解法快速筛选到重组子,该方法快迅、准确,可应用于基因克隆中的重组菌落快迅检测。     

Xeroderma pigmentosum: a rapid sensitive method for prenatal diagnosis

When normal human cells, capable of repairing ultraviolet-induced lesions in their DNA, are incubated in the thymidine analog 5-bromodeoxyuridine after ultraviolet irradiation, the analog is incorporated into the repaired regions. When such repaired cells are subsequently irradiated with 313-nanometer radiation and placed in alkali, breaks appear in the DNA at sites of incorporation of 5bromodeoxyuridine, inducing a dramatic downward shift in the sedimentation constant of the DNA. Cells from patients with the disease xeroderma pigmentosum, which causes sensitivity to ultraviolet, are incapable or only minimally capable of repair; such cells incorporate little 5-bromodeoxyuridine into their DNA under these conditions and, upon 313-nanometer irradiation and sedimentation in alkali, exhibit only minor shifts in DNA sedimentation constants. When fibroblasts developed from biopsies of normal skin and of skin from patients with xeroderma pigmentosum, as well as cells cultured from midtrimester amniotic fluid, were assayed in this fashion unequivocal differences between normal and xeroderma pigmentosum cells were shown. Xeroderma pigmentosum heterozygotes are clearly distinguishable from homozygous mutants, and results are available 12 hours after irradiation.     

结核分枝杆菌DNA的快速提取试验

在革兰氏阴性杆菌DNA快速提取方法的基础上，结合结核分枝杆菌特点，对结核分枝杆菌DNA的快速提取进行了试验研究，初步建立了一种结核分枝杆菌DNA的快速提取方法。该方法为结核分枝杆菌病分子生物学快速诊断及其基因的克隆提供了技术支持。     

Estimating the number of animals: a rapid method for unidentified individuals

A proposed model yields the density of a mobile population from quick, cursory surveys in which the observer identifies none of the animals. When the spaces on which animals were seen are successively removed, the decline in the counts permits estimation of the average probability of seeing a given animal. The method showed promise in initial trials.     

乙酰胆碱酯酶酶抑制法快速检测农药残留的研究进展

概述了乙酰胆碱酯酶酶抑制法快速检测农药残留技术的研究现状．指出了酶抑制法在使用中存在的问题和发展趋势。     

松材线虫和拟松材线虫的PCR快速检测

利用PCR技术对松材线虫Bursaphelenchus xylophilus与拟松材线虫B．mucronatus的rDNA的ITS1区和5．8S区核甘酸序列扩增．根据松材线虫与拟松材线虫的ITS1序列区别,分别设计出松材线虫和拟松材线虫的特异性引物,实现了单条活的或FG(φ为4％的甲醛)固定的松材线虫和拟松材线虫的快速检测．     

布鲁氏菌病病原快速检测方法的建立

根据编码牛种布鲁氏菌外膜蛋白（OMP-2）基因的核苷酸序列设计1对PCR引物,并对PCR扩增条件进行优化,建立了快速检测布鲁氏菌病病原的PCR方法。特异性检测表明,该引物对牛种、羊种、猪种布鲁氏菌制备的模板DNA均能扩增出193bp目的基因片段,但不能扩增大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠结肠炎耶氏菌（0：9型）的目的基因片段;敏感性检测显示,乳样的检测灵敏度达50cfu／mL、纯化的布鲁氏菌DNA检测灵敏度达1．5pg,可重复性和稳定性十分理想。可见,该布鲁氏菌病病原PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性,能为快速诊断布鲁氏菌病提供技术支撑。     

GPS定位试验及提高定位精度的方法研究

对3种不同的4个GPS接收机进行了定位试验,主要包括单点静态定位试验和动态测量面积的试验.经过一系列的数据分析和处理,分别得到了3种典型的GPS接收机在这2种试验条件下的定位精度及排序,并且采用算术平均值法对最佳测量次数进行了研究,提高了GPS单点静态定位的精度.提出了在数据处理中加入控制点的方法,提高了GPS动态测量面积的定位精度.     

人XIAP基因多克隆抗体的快速制备方法研究

【目的】探索快速制备高品质X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)多克隆抗体的方法,为研究XIAP基因的功能及XIAP蛋白在肿瘤组织中的表达量检测提供参考。【方法】通过RT-PCR方法获得人XIAP基因的CDs区序列,与pET151/D-TOPO载体连接,构建XIAP基因的原核表达载体;考察细胞密度(OD600)、IPTG浓度、诱导温度和诱导时间对XIAP重组蛋白表达量的影响,以确定XIAP重组蛋白的最佳诱导条件,并用Ni-NTA亲和层析柱法纯化XIAP重组蛋白;用纯化的XIAP重组蛋白对2只成年新西兰白兔进行常规免疫后,再对其中1只进行耳静脉注射加强免疫,连续3d,每天免疫1次,用ELISA检测抗体效价,Western blot检测抗体特异性。【结果】①通过RT-PCR方法获得人XIAP基因的CDs区序列,与pET151/D-TOPO载体连接,构建XIAP基因的原核表达载体,测序后,与GenBank中序列的的相似度为97%。②XIAP重组蛋白的最佳诱导条件为:温度30℃,初始诱导细胞密度(OD600)为0.6,IPTG浓度0.5mmol/L,诱导时间4h。在此条件下,XIAP重组蛋白多以包涵体的形式存在于细胞沉淀中。③利用Ni-NTA亲和层析柱法,在pH为5.9和4.5的洗脱液中均可获得质量浓度为600μg/mL的XIAP重组蛋白。④耳静脉连续加强免疫是刺激动物机体快速产生抗体的有效方法(31d)。ELISA和Western blot检测结果表明,耳静脉连续加强免疫产生的XIAP抗体的效价和特异性均明显高于常规免疫所产生的抗体。【结论】耳静脉连续加强免疫能够显著提高XIAP抗体的效价,且能有效缩短多克隆抗体的制备时间。     

鸭疫里默氏杆菌PCR快速检测方法的建立

鸭疫里默氏杆菌病对养鸭业危害严重,传统及常规检测方法均有不足,因此有必要建立起一种更加快速简捷、敏感实用的菌落PCR法。根据GenBank公布的鸭疫里默氏杆菌ATCC株OMPA基因序列,在基因保守区设计特异性引物,直接挑取单菌落作为模板,从分离鉴定的1,2,10,11型15株菌及1,2,10,11型4株参考菌株中均能扩增出大小为670 bp的特异性核酸片段,而对照的大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌的扩增结果均为阴性;将培养菌用TE作10倍梯度稀释,最低检出限量为80个鸭疫里默氏杆菌;建立的菌落PCR与常规PCR法比较,两种方法均能扩增出相同的特异性条带。结果表明,菌落PCR法具有较好的特异性和敏感性,与常规PCR法结果完全一致,且更加快速简捷,在临床应用上具有更好的实用价值。     

微生物显色法快速检测水产品中恩诺沙星残留

针对水产品中恩诺沙星残留,通过筛选药物敏感菌株和显色剂,建立了一种基于显色反应来判断结果的微生物检测方法.以腾黄八叠球菌(Sarcina ureae)为指示菌株,以氯化三苯四氮唑显色为显色剂,阳性样品呈肉眼可辨的红色,阴性样品呈无色,最低检测限可达50 μg/kg.经酶联免疫法(最低检测限可达12 μg/kg,回收率在74.25%～93.38%之间)和高效液相色谱法(最低检测限可达5.0 μg/kg,回收率在78.20%～91.27%之间)验证,该方法准确、可靠.不同于传统的方法,该方法更为快速、便捷、易于结果判定,是对现有检测方法的一种有益的补充和完善,极其适合在生产、销售、流通等非实验室条件下作为初筛方法使用.     

快速、无汞开管测定废水中化学需氧量的研究

采用无汞开管法进行了快速测定化学需氧量(Chemical Oxygen Demand,简称COD)的研究,在硫酸-磷酸为介质、重铬酸钾为氧化剂、硫酸银作催化剂、硝酸银和硫酸铬钾为氯离子掩蔽剂的条件下.将样品在玻璃试管中消化,用一台恒温器加热样品,反应温度160～165 ℃,加热时间只需15 min,消解后剩余的重铬酸盐用滴定法或分光光度法测定.试验结果表明,该法的检测限为10.9 mg/L.测定范围为40～800 mg/L COD,当COD值大约为85 mg/L时,容许氯离子的最高含量为1500 mg/L,由于该法不使用剧毒的汞盐,避免了汞对环境的污染,经测定大批量废水样品,结果令人满意.     

农杆菌介导的遗传转化籼稻Kasalath的条件优化

Kasalath是目前用于水稻转基因研究的籼稻模式材料。运用组织培养和农杆菌介导的遗传转化技术,对水稻Kasalath愈伤组织诱导和遗传转化体系进行了优化。结果表明：以Kasalash的幼嫩种子或新鲜的成熟种子为外植体诱导愈伤组织的效果优于贮藏1年的种子;用0.5、1、1.5、2、2.5、3、10、20、30 mg/L的2,4–D诱导愈伤组织,以2.5 mg/L的2,4–D诱导效果最佳;用菌液OD600 nm为0.05、0.1、0.15、0.2、0.3、0.4的农杆菌Ag10和EHA105与愈伤组织共培养介导遗传转化,皆以OD600 nm为0.15的农杆菌溶液效果最好,且EHA105的介导效果比Ag10更佳,其抗性愈伤率可达82.0%;EHA105的介导(共培养)时间以3 d为宜;分化培养前对愈伤组织进行6～8 h快速干燥或48～72 h慢速干燥处理,可以明显提高愈伤组织的再生成苗率,并缩短分化时间;在对愈伤组织侵染处理前的预培养处理和对抗性愈伤进行分化培养前的预分化培养处理对Kasalath的遗传转化效率影响不大,可省略以缩短遗传转化时间。遵循以上优化条件,从愈伤组织诱导至遗传转化获得再生植株全过程的时间只需57～60 d(已报道的遗传转化全过程需70 d以上),遗传转化效率可达到已报道的最高值65%。     

马铃薯卷叶病毒的RT-PCR快速检测

根据马铃薯卷叶病毒的外壳蛋白基因序列,设计合成了一对寡核苷酸引物。从感染马铃薯卷叶病毒(PLRV)的马铃薯叶片中提取出病毒RNA,进行cDNA合成并运用RT-PCR技术进行体外扩增,得到一条长度约627bp的特异PCR扩增产物,与理论设计的外壳蛋白基因大小一致,而对照未得到任何产物。从而建立了快速灵敏的PLRV检测方法,为PLRV的防治及检测提供了有效手段。     

New method for the rapid determination of lathyrogenic agents

Ultraviolet radiation-induced mutants of the soft rot bacterium Pseudomonas marginalis were selected for loss of pathogenicity for lettuce and witloof chicory. The avirulent mutants differed from the parent pathogen in their inability to synthesize pectolytic enzymes in culture or to ferment sodium pectate or sodium polygalacturonate as the sole carbon source in media.     

Prevention of rapid intracellular degradation of ODC by a carboxyl-terminal truncation

Ornithine decarboxylase (ODC) was converted from a protein with a short intracellular half-life in mammalian cells to a stable protein by truncating 37 residues at its carboxyl terminus. Cells expressing wild-type protein lost ODC activity with a half-life of approximately 1 hour. Cells expressing the truncated protein, however, retained full activity for at least 4 hours. Pulse-chase experiments in which immunoprecipitation and gel electrophoresis were used confirmed the stabilizing effect of the truncation. Thus, a carboxyl-terminal domain is responsible for the rapid intracellular degradation of murine ODC.     

临夏州大河家蛋皮核桃离体快繁技术的初步研究

研究了临夏州大河家蛋皮核桃诱导生芽、增殖培养、诱导生根的培养基及配方,结果表明,DKW＋6-BA 1.0 mg/L是适宜的生芽诱导培养基,DKW＋6-BA1mg/L＋IBA 0.001 mg/L是适宜的增殖培养基,1/2DKW＋IBA 5 mg/L＋活性炭1 mg/L＋间苯三酚1 mg/L＋蔗糖30 g/L是较适宜的生根培养基,并为其他核桃组培快繁提供了技术参数。     

应用 RT-PCR 法快速检测马铃薯卷叶病毒

根据马铃薯卷叶病毒的外壳蛋白基因序列,设计合成了一对寡核苷酸引物,从感染ＰＬＲＶ的马铃薯病叶组织中提取出病毒的ＲＮＡ,进行ｃＤＮＡ合成及ＰＣＲ扩增,得到一条长度约６２０ｂｐ的特异ＰＣＲ扩增产物,与理论设计的外壳蛋白基因大小一致。建立了快速灵敏简便的ＰＬＲＶ检测的新方法,其灵敏度要比ＰＬＲＶ的血清学检测方法高１０＾４倍,在基因水平上为ＰＬＲＶ的检测提供了更新手段,并在农业部植物检疫实验所马铃薯病毒检